激光辅助孵化在冻融胚胎移植中的应用探讨

目的探讨冻融胚胎移植（FET）周期应用激光辅助孵化（AH）的效果。方法回顾分析2012年6月～12月我生殖中心FET资料,常规采用玻璃化冷冻卵裂期胚胎,复苏后对于透明带异常或年龄≥35岁或种植失败≥1次或胚胎质量差患者选择性应用激光辅助孵化处理（激光削薄透明带长度为30～40μm,深度为透明带外2／3）。结果FET198个周期,总临床妊娠率53．54％,AH共155个周期,冷冻胚胎复苏率92．06％,平均移植胚胎2．54±0．70个,临床妊娠率为51．61％,种植率25．64％,流产率15．0％,多胎率23．75％,无单卵双胎发生。结论选择性对玻璃化冻融卵裂期胚胎实施激光辅助孵化可获得满意的FET临床妊娠率。     

卵泡液中生化溶质分析及在IVF-ET研究中的应用

目的　针对种植妊娠率低的问题 ,对卵细胞在体内“生存环境”进行研究分析。为卵细胞的“体外培养”创造最适生长条件 ,提高种植妊娠率。方法　应用美国Bakerman -CX5全自动生化分析仪 ,检测卵泡液中 2 3项生化溶质及pH值。结果　卵泡液中生化溶质 2 3项 ,其中 18项与血液接近 (P >0 5 ) ,总胆固醇、甘油三脂、总蛋白、白蛋白、球蛋白低于血液 ,pH值范围在 7 1～ 8 0之间。结论　本组进行卵细胞“微环境”的多项研究 ,从它的理化特征及其生化成分等的大量数据 ,为胚胎移植前培养创造理想的仿生环境条件 ,从而提高了成功率。同时为今后卵泡液基础研究提供了本底数据 ,为IVF -ET的深入研究增加了新的手段。     

不同促排卵方案在高龄不孕患者IVF-ET中的临床应用

目的对比不同促排卵方案在年龄≥40岁不孕女性体外受精/卵母细胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)助孕中的临床疗效。方法回顾性分析2010年1月至2013年8月于我院生殖中心以促性腺激素释放激素激动剂(Gn RH-a)长方案、Gn RH-a短方案和促性腺激素释放激素拮抗剂(Gn RH-ant)方案促排卵行IVF/ICSI助孕的40岁及以上患者334例,比较各组的IVF结局。结果三组患者的一般情况、HCG日激素水平、受精率、优质胚胎率、周期取消率和临床妊娠率差异均无统计学意义(P0.05);长方案组获卵数、促性腺激素(gonadotropin,Gn)使用天数和总量显著高于其他两组,差异有统计学意义(P0.05)。结论高龄不孕患者应用长方案获卵数更高,Gn用量也较大;短方案临床结局较差;拮抗剂方案Gn用量较小但具有较好的临床结局,对于高龄患者可优先考虑。     

短效达必佳两种剂量在超促排卵中的应用

目的寻求一种在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)超排卵方案中既能使垂体降调节又不至于过度抑制卵巢功能的短效达必佳有效剂量.方法接受促超排卵长方案的149例患者,随机分为两组: A组73例,黄体中期予达必佳0.1mg,皮下注射7d后该为0.1mg,qod;B组76例,达必佳0.1mg,皮下注射,qod,至HCG日,比较促排卵治疗效果.结果B组取卵数明显大于A组(11.25±4.12:8.79±3.10),P＜0.05.Gn用量及用药时间、hCG注射日雌二醇(E2)水平、受精率、卵裂率、优质胚胎数、种植率、移植数、妊娠率等均无统计学差异(P＞0.05).二组均无内源性LH峰出现.结论减量达必佳能获得与常规剂量达必佳相同的治疗结果、且能提高取卵数及减少费用.     

口服避孕药在IVF-ET短方案促排卵中的作用

目的观察口服避孕药（OCP）在体外受精-胚胎移植（IVF-ET）短方案促排卵中的作用。方法对因输卵管因素或男方因素行IVF-ET的不孕患者共112例,均采用短方案促排卵,其中实验组59例,于促排卵前给予OCP口服1个月;对照组53例,促排卵前不给予OCP预处理,常规月经第3天促排卵。比较两组患者自然月经周期D3天和COH周期月经D3天的基础卵泡及内分泌情况;比较两组Gn使用天数、Cn总量、HCG日LH、E2、P水平;比较两组取卵日成熟卵泡情况、获卵数、受精率、卵裂率、可用胚胎数、优质胚胎数、周期取消率、临床妊娠率的差异。结果①两组患者的年龄、不孕年限、自然月经周期基础FSH、LH、E2比较无显著性差异（均P〉0.05）;两组患者COH周期月经D3天FSH、LH、E2水平及HCG日LH、E2、P水平比较无显著性差异（均P〉0.05）;②COH周期月经D3天有〉5mm卵泡的患者数,实验组较对照组明显减少（P〈0.05）,实验组卵泡发育同步性好,卵泡大小相对较均匀;③平均Gn天数及用量实验组较对照组多（P〈0.05）;④周期取消率实验组较对照组低（P〈0.05）;⑤取卵日≥15mm成熟卵泡数、获卵数、可移植胚胎数、临床妊娠率实验组较对照组高（P〈0.05）;⑥两组受精率、卵裂率、优质胚胎数等差异无显著性（均P〉0.05）。结论在IVF-ET短方案中,在GnRH-a＋Gn促排卵前用OCP预处理,能调整月经周期,使卵泡发育同步性增加,能获得比较好的促排卵效果,取卵日成熟卵泡数及获得的卵子数均较多,周期取消率降低,临床妊娠率能够得到适当的提高。但OCP预处理后可能抑制了早期内源性FSH的上升,对卵巢的抑制加重,使小卵泡发育缓慢而用药时间延长。     

人胚胎透明带与辅助孵化的研究进展

透明带(zona pellucida,ZP)是包绕在卵母细胞和着床前胚胎外的一层糖蛋白基质,由卵母细胞和颗粒细胞共同分泌,在受精和早期胚胎发育过程中起着重要的作用。辅助孵出(assisted hatching,AH)是帮助体外培养的胚胎从透明带中孵出的技术。体外受精?胚胎移植(IVF-ET)中种植率低一直是困扰人们的一个问题。有研究发现,胚胎从透明带中孵出困难是影响种植率的一个重要因素。本文就近几年透明带与辅助孵化的研究进展情况作一综述。     

辅助生殖技术取卵手术镇痛方法研究进展

随着不孕症发病率的增加和体外受精一胚胎移植技术的不断成熟,通过IVF—ET技术成功妊娠的病人日益增多,经阴道穿刺取卵术作为IVF—ET过程中重要的一环,同时也是病人承受痛苦最大的一环。如何在取卵术中减轻病人痛苦,减少副反应的发生,是医务工作者的职责。目前,国内应用较多的有哌替啶肌肉注射、静脉麻醉、宫颈麻醉、针刺穴位镇痛等方法,都取得了一定的效果,现将取卵手术镇痛方法综述。     

自然周期体外受精-胚胎移植在辅助生殖技术中的应用

目的探讨自然周期体外受精-胚胎移植（Natural-cycle in vitro fertilization and embryo transfer,NC-IVF-ET）在卵巢低反应患者中的应用价值。方法回顾性分析2006年1月至2009年3月在我中心行NC-IVF-ET助孕的42例卵巢低反应患者共65个取卵周期的临床资料。结果65个周期获卵33枚,获卵率为50.77%,正常受精率为63.64%,优质胚胎率为45.45%,移植15个周期,移植周期临床妊娠率为20%。根据患者年龄≤35岁、36-40岁、〉40岁分为3组,3组的获卵率没有明显差异（分别为48.15%、47.83%和60%,P〉0.05）,优胚率随着年龄的增加而下降（53.85%、45.45%、33.33%）,但没有统计学差异（P〉0.05）;并且三组中,仅≤35岁组有3例获得临床妊娠。根据取卵前是否使用人绒毛膜促性腺激素（HCG）分为使用HCG组及未使用HCG组,两组的获卵率、受精率和优胚率没有统计学差异（分别为44.44%vs51.79%;100%vs58.62%;50%vs44.83%;P〉0.05）。结论自然周期体外受精-胚胎移植（NC-IVF-ET）较适用于年龄较低的卵巢低反应患者     

两种短效达必佳方案在控制超排卵中的疗效比较

目的比较两种短效达必佳方案在控制超排卵中的治疗效果。方法回顾性分析2004年1月~2005年12月在本生殖中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)黄体中期长方案者130例,将启动日(月经第2~3d)促黄体生成素(LH)<2 IU/L者分为A、B两组,A组患者自启动日起停止使用达必佳,使用促性腺激素(Gn)促排卵,B组患者继续使用达必佳至绒毛膜促性腺激素(HCG)注射日,其余同A组,比较两组的治疗效果。结果A组的促性腺激素(Gn)用量明显少于B组(28.25±6.33支vs 30.86±7.44支,P<0.05);Gn使用时间、HCG注射日的血P、E2、LH水平及获卵率、受精率、卵裂率、妊娠率两组间均无显著性差异。两组均无内源性LH峰出现。结论对启动日LH<2 IU/L的患者给予停止达必佳的使用,可抑制内源性LH峰的出现,并能减少Gn用量及治疗费用。     

鹿胎膏在辅助生殖技术中的应用研究

目的通过鹿胎膏在辅助生殖技术超促排卵过程中的应用研究,确定其在助孕治疗中的作用机制和应用价值。方法采用前瞻性随机对照的方法,将鹿胎膏作为一种辅助用药,在体外受精（IVF／ICSI）和宫腔内人工授精（IUI）的常规超促排卵方案基础上应用,并与单纯常规方案组比较,将达菲林（GnRHa）（先灵）、果纳芬（rFSH）（雪兰诺）、尿促性素（HMG）（丽珠）的用量;HCG目的血雌二醇（E2）值、子宫内膜厚度、获卵数、受精率、优质胚胎率、移植日血孕酮（P）值、临床妊娠率、着床率;克罗米芬（CC）用量、成熟卵泡数及孕早期流产率等指标进行对照和统计学处理。结果在体外受精时,辅助应用鹿胎膏组的孕早期流产率明显低于未用鹿胎膏组,两组间差异有统计学意义（P〈0．05）。IUI时加用鹿胎膏组孕早期流产率的绝对值较低,但无统计学意义。其他项目两组间差异无统计学意义。结论研究结果说明,鹿胎膏在不孕症治疗中的作用环节主要是在维持妊娠过程。该结果提示我们,如果将鹿胎膏应用于复发性早孕期流产病人,可能具有一定的疗效。     

IVF—ET周期中第三天移植胚胎的原核期形态学研究

目的为选择更有发育潜能的胚胎,对第三天移植周期中种植成功并分娩的胚胎与未种植的胚胎从原核期形态学方面进行比较。方法选择2006年1～12月在我所接受IVF-ET助孕的433个周期进行回顾分析,分为1组（植入组）,85个周期;2组（未植入组）,348个周期。比较两组所有移植胚胎中不同原核期评分的分布和胚胎发育情况。结果1.1组168个胚胎,2组719个胚胎,两组原核分布百分比相比较无统计学差异（P〉0.05）。2.第二天原核评分为Z1的胚胎中,1组碎片量明显小于2组（P〈0.05）;评分为Z2的胚胎中,1组比2组胚胎评级更好（P〈0.05）。3.第三天原核评分为Z2的胚胎中,1组比2组第三天细胞数更多、胚胎评级更好（P〈0.05）;原核评分为Z3的胚胎中,1组比2组细胞数更多（P〈0.05）。结论目前的原核评分系统并不能很好地预测胚胎的种植潜能,以卵裂期评分为主结合原核评分的胚胎选择方法在目前是适宜的。     

早期卵裂作为胚胎质量预测指标对体外授精结局的影响

目的探讨早期卵裂是否可作为评估胚胎质量、胚胎种植率、临床妊娠率的预测指标。方法对2006年1月～2006年12月的471对夫妇，480个周期随机分A组和B组（对照组）。A组：262个周期，即从授精25～27h后观察2PN受精卵是否出现早期卵裂，同时第二天、第三天观察胚胎质量并进行分级；B组：218个周期，第二天、第三天观察胚胎质量并进行分级，但授精25—27h后不观察2PN受精卵是否出现卵裂。同时根据移植胚胎中含有出现早期卵裂的个数分为四组A，（三个移植胚胎均出现早期卵裂），A2（移植胚胎含两个出现早期卵裂），A1（移植胚胎一个出现早期卵裂），A0（移植胚胎无出现早期卵裂）。比较四组胚胎种植率。结果A组种植率和临床妊娠率均高于未观察早期卵裂B组，但统计学分析无显著意义；A3、A2、A1、A0组间胚胎种植率分别为30．9％、26．1％、21．2％、11．2％，有显著性差异（P〈0．001）。结论（1）第2，3天胚胎形态学分级依然可作为评定胚胎质量的参数。（2）早期卵裂是可作为预测高种植率胚胎的指标之一。     

中山地区应用体外受精技术治疗不育症的初步报告

目的：初步报告中山市应用体外受精技术（IVF）治疗不育症的效果。方法：28对不育夫妇的男方在精液常规检查的基础上,进行精子形态学和顶体状态分析。28例受术妇女采用Buserelin/FSH/HCG黄体期长方案控制超排卵,并根据不孕病因、患者年龄及卵巢基础FSH／LH比值指导控制性超排卵用药,比较周期取卵率、受精率、卵裂率及临床妊娠率。结果：基础FSH／LH比值正常反应组问收卵率高于低反应组（P＜0．05）。取卵291个,平均每周期取卵9．6个;受精率81．8％;卵裂率79．8％。9例临床妊娠,5例生化妊娠,妊娠率32％。结论：IVF技术是治疗不育症的有效手段,本文只做丈夫精子IVF,其正常精子形态率和顶体完整率对预测受精有指导意义,根据基础FSH／LH比值判断卵巢储备功能及指导超排卵用药,可避免过大、过少剂量对患者的不利影响。     

116例非优质胚胎冻融的临床分析

目的探讨非优质胚胎在体外受精-胚胎移植中的冷冻价值。方法回顾性分析116例非优质胚胎冷冻移植周期。根据结局分为妊娠组与非妊娠组,比较两组中不同发育速度,均匀度以及碎片比例的胚胎所占比例。结果妊娠组中,卵裂球大小严重不均和碎片比例〉20%的胚胎比例显著低于非妊娠组,碎片0-20%的胚胎比例则显著高于非妊娠组。卵裂球大小均匀或明显不均,以及不同发育速度的胚胎比例,二者并无显著差异。结论选择性冷冻非优质胚胎,有助于提高体外受精-胚胎移植的累积妊娠率,改善临床治疗结局。     

HCG注射日和胚胎移植日血清雌二醇及孕酮与IVF/ICSI结局的关系

目的 探讨hCG注射日血清雌二醇(hCG-E2)和胚胎移植日血清雌二醇(ET-E2)、孕酮(P)及他们之间的比值与IVF/ICSI结局的关系.方法 对182个采用促性腺激素激动剂/促卵泡生成素或(和)人绝经期促性腺激素/绒毛膜促性腺激素(GnRH-a/FSH/HMG/hCG)长方案超促排卵的体外受精(IVF)和单精子胞浆内注射(ICSI)的周期,在hCG注射日和胚胎移植日采用化学发光免疫法测定E2和P.结果 (1)hCG-E2波动在8000～20000pmol/l时,妊娠率最高(46.8%),与E2<8000pmol/l和>20000pmol/l两组相比均有统计学差异(P<0.05).(2)移植日E2下降的水平越大.即hCG-E2/ET-E2越大,妊娠率越低.(3)ET日P/E2越高临床妊娠率越低,但排除E2的影响后,比值无意义.结论 hCG注射日和ET日E2及其比值对IVF/ICSI的结局可能有预测价值.     

168个周期体外受精-胚胎移植的结果与分析

目的 :探讨不育夫妇接受体外受精 胚胎移植 (IVF ET)治疗后妊娠结局及并发症产生的相关因素。方法 :对 16 8个周期的常规体外受精 胚胎移植 (IVF ET)或卵母细胞浆内单精子注射 (ICSI)的临床资料进行回顾性分析。结果 :16 8个完成周期者 ,共妊娠 5 9例 ,妊娠率为 35 .12 % ,其中IVF 92个周期 ,妊娠 35例 ,妊娠率为 38% ,ICSI 76个周期 ,妊娠 2 4例 ,妊娠率为 31.5 7%。妊娠率随着年龄的增加而降低 ,不同年龄组妊娠率差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。多胎妊娠、流产和异位妊娠的发生率分别为 2 8.81%、13.35 %和 5 .0 8% ;卵巢过度刺激综合征 (OHSS)发生率为 10 .76 % ( 8/16 8)。结论 :输卵管阻塞或精液明显异常所致的不育夫妇应尽早接受常规IVF或ICSI治疗 ;应进一步提高辅助生育技术 ,使IVF和ICSI成为某些不育症的一种常规的治疗手段     

Maternal and neonatal outcomes in dichorionic twin pregnancies following IVF treatment: a hospital-based comparative study

Aim: To compare maternal, and neonatal outcomes in IVF/ICSI and spontaneously conceived dichorionic twin pregnancy. Method: We collected data regarding dichorionic twin pregnancies following in vitro fertilization/ intracytoplasmic sperm injection (IVF/ICSI, n=162) with the transfer of fresh embryos as well as data regarding spontaneously conceived pregnancies (n=213) delivered after 28 weeks of gestation at the Department of Obstetrics and Gynecology, Renmin Hospital in Wuhan in the years of 2010-2013. We then compared maternal and neonatal outcomes between IVF/ICSI and spontaneous dichorionic twin pregnancies, with a subgroup analysis separating traditional IVF from ICSI pregnancies. Odds ratios (OR) for associations between IVF/ICSI and pregnancy outcomes were adjusted for maternal factors. Results: The mean maternal age and the percentage of primiparous women were significantly higher in the IVF/ICSI group. Multivariate analysis revealed that maternal outcomes were comparable in both groups with/without adjustment for maternal age and parity. However, IVF/ICSI twins were less likely to have birth weight discordance than those spontaneously conceived (unadjusted OR=0.526, 95% CI 0.297-0.932; adjusted OR=0.486, 95% CI 0.255-0.856). In subgroup analyses, these associations were confirmed in the IVF (adjusted OR=0.496, 95% CI 0.265-0.926), but not in the ICSI group (adjusted OR=0.500, 95% CI 0.139-1.807). Conclusion: IVF/ICSI treatment was not a risk factor for adverse maternal neonatal outcomes, but the risk for birth weight discordance is lower among IVF/ICSI twins.     

多囊卵巢综合征不孕患者体外受精与胚胎移植治疗结果分析

目的 分析多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者行体外受精与胚胎移植(IVF-ET)治疗的结果.方法 回顾性分析本中心同期完成IVF-ET的PCOS组74周期和盆腔卵管因素对照组657周期,比较两组治疗周期患者的促性腺激素(Gn)的使用总量和天数、获卵数、正常受精率、卵裂率、移植胚胎数、可利用胚胎率、种植率、基础血清性激素及超排卵中血清性激素水平以及妊娠和分娩结局.结果 基础血清激素中PCOS组促卵泡素(FSH)低于对照组[(5.74±1.74)U/L比(6.63±1.95)U/L];黄体生成素(LH)[(7.68±4.84)U/L比(4.76±2.61)U/L]、LH/FSH(1.38±0.88比0.75±0.42)、总睾酮(T)[(2.07±1.0)nmol/L比(1.54±0.60)nmol/L]高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);基础血催乳素(PRL)、雌二醇(E2)、Gn启动日FSH、LH、E2以及注射绒毛膜促性腺激素日LH、E2、孕酮差异无统计学意义(P>0.05).两组使用Gn的总量与天数、获卵数、正常受精率、卵裂率、平均移植胚胎数及可利用胚胎率差异无统计学意义(P>0.05);PCOS组的妊娠丢失率高于对照组(50%比20%),分娩率(46%比80%)及每周期的活产率(16%比30%)低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组生化妊娠率、临床妊娠率、种植率、多胎妊娠率、异位妊娠率及早产率差异无统计学意义(P>0.05).结论 IVF-ET是治疗PCOS不孕症的有效方法,但妊娠丢失率显著增高,应探讨其发生机制及更有效的方法改善妊娠结局.     

A comparative ultrastructural study of in vivo versus in vitro fertilization of bovine oocytes

Summary Heifers were superovulated by PMSG or FSH, and oestrus was induced by prostaglandin. One group of animals was ovariectomized 19–26 h after the LH peak, the content of preovulatory follicles aspirated, and the oocytes processed for in vitro fertilization. Another group was inseminated and ova were collected from the oviducts for study of in vivo fertilization. All ova were examined ultrastructurally. The developmental rate following in vitro fertilization was delayed compared to fertilization in vivo. A high proportion of the in vitro fertilized ova showed polyspermic penetration of the zona pellucida, and supernumerary spermatozoa were found in the ooplasm of some ova. In vivo fertilization was associated with release and subsequent dispersal of the cortical granule content in the perivitelline space. In contrast to this the released granule content of the in vitro fertilized ova remained undispersed close to the oolemma. This feature may account for the high incidence of polyspermic penetration of the zona pellucida. In addition, the study provided an ultrastructural visualization of the initial contact between the equatorial segment of the spermatozoon and the microvilli of the oocyte, and the subsequent internalization of the sperm head.     

体外受精过程中激素水平与临床妊娠的相关性研究

目的研究体外受精促超排卵过程中激素水平的变化，探讨激素水平与临床妊娠的相关性。方法476个IVF—ET及ICSI周期，应用单因素和多因素Logistic回归分析，研究患者的基础FSH、LH、E2、P，启动日LH、E2、P，HCG注射日LH、E，、P与临床妊娠的相关性。结果：单因素Logistic回归分析：基础激素水平、启动日激素水平和HCG日E2与临床妊娠未见明显相关性，HCG日LH、P与临床妊娠明显相关。多因素Logistic回归分析：HCG日LH、P与临床妊娠明显相关（P分别：0．020、0．020，Exp（B）分别为1．147、0．766），回归方程为Logit（P）=-0．502＋0．138。（HCG日LH）-0．266。（HCG日P）。结论HCG注射日LH,P与临床妊娠具有明显相关性，LH水平过低或P水平过高对临床妊娠不利。建议当HCG日P水平过高时，可以考虑取消新鲜胚胎移植，择期行冷冻胚胎移植。