重组人促血小板生成素对人肝细胞株L02增殖的影响

目的探究重组人促血小板生成素（rhTPO）对健康人肝细胞株L02的影响。 方法以健康人肝细胞株L02为研究对象,通过不同剂量rhTPO[对照组（0 U rhTPO）、低剂量组（150 U rhTPO）及高剂量组（750 U rhTPO）]处理L02细胞,观察各组L02细胞的存活率。采用Western-blotting检测各组细胞[A组（0 U rhTPO）、B组（15 U rhTPO）、C组（150 U rhTPO）及D组（1 500 U rhTPO）]的细胞外信号调节激酶（ERK）及其磷酸化产物（p-ERK）蛋白的表达水平,并采用荧光定量PCR检测ERK信使RNA（mRNA）表达水平。 结果各组L02细胞存活率的比较,差异有统计学意义（F = 8.843,P = 0.016）。进一步两两比较发现,低剂量组及高剂量组的存活率均显著高于对照组[（107.9 ± 4.0）%、（112.0± 1.6）%、（100.0 ± 2.5）%],且高剂量组细胞的存活率更高（P均< 0.05）。各组L02细胞间ERK蛋白及ERK mRNA表达水平的比较,差异均无统计学意义（F = 1.140,P = 0.392;F = 0.437,P = 0.733）,而各组L02细胞间p-ERK蛋白表达水平的比较差异有统计学意义（F = 31.400,P < 0.001）,且B组、C组及D组细胞的p-ERK蛋白表达水平均显著高于A组细胞（P均< 0.05）,而B组、C组及D组细胞p-ERK蛋白表达水平两两比较,差异均无统计学意义（P均> 0.05）。 结论rhTPO可通过激活ERK促进L02细胞数量增殖。     

重组人血小板生成素对急性髓系白血病细胞株增殖及凋亡的影响

目的:探索重组人血小板生成素(rhTPO)对急性髓系白血病(AML)细胞株增殖和凋亡的影响.方法:采用CCK-8法检测AML细胞株(Kasumi-1、Skno-1、HEL、HL-60、THP-1)经不同浓度rhTPO(0、50、100 ng/ml)作用不同时间(24、48、72 h)后的细胞增殖率;Annexin V/...     

重组人血小板生成素对人红白血病HEL细胞增殖的影响

为了进一步阐明血小板生成素(thrombopoietin,Tpo)的生物学作用,我们研究了rhTpo(recombinant human Tpo)对人红白血病(human erythroleukemia,HEL)细胞增殖的影响。采用血浆凝块集落培养法和5-溴-2’-脱氧尿核苷(5-BrdU)掺入HEL细胞DNA-ELISA法。培养基中加入rhTpo,HEL细胞集落数量和吸光度值明显高于未加rhTPo对照组。当rhTPo浓度为10,50,100,200ng/ml时,实验组集落数分别是对照组集落数的1.5,2.07,2.34,2.46倍;实验组A值分别是对照组A值的1.28,1.84,2.25,2.31倍。研究结果表明,rhTpo促进HEL细胞增殖和DNA合成。     

重组人血小板生成素对体外培养基质细胞的影响

本研究观察rhTPO有无促进骨髓纤维化的作用。用改良Dexter培养法进行体外不同浓度rhTPO作用下的基质细胞培养，在培养的不同时间用MTT法检测细胞增殖活性，用光学显微镜和扫描电子显微镜观察细胞形态变化，用细胞化学方法观察细胞ALP、PAS、AS—DNCE及纤维染色的变化，用免疫组织化学方法检测纤维连接蛋白，及层黏蛋白和Ⅳ型胶原的变化，用流式细胞术检测细胞表面抗原。结果表明：rhTPO可刺激基质细胞增殖，且随浓度增加而增高；细胞增殖活性随浓度增加而增强，但不随作用时间延长而增加；培养第3天，各组细胞明显贴壁，细胞呈椭圆形，第7天可见散在分布的梭形细胞，第12—14天，细胞排列呈一定的方向性，似漩涡状，细胞为长梭形，70％-80％的瓶底被细胞覆盖。第16—18天细胞覆盖达90％以上，细胞形态均为螺旋状排列的长梭形，类似成纤维细胞形态，瑞氏-姬姆萨染色显微镜下观察主要为成纤维细胞，还有极小部分巨噬细胞，内皮细胞和脂肪细胞，对照组与实验组之间无明显差异。培养14—42天的贴壁细胞，PAS显示为阳性，ALP染色和氯醋酸AS—D萘酚酯酶染色显示为弱阳性，对照组与实验组之间无明显差异；用Masson氏三色和Gomori染色法染色，胶原纤维和网状纤维显示均为阴性；纤维连接蛋白，层黏蛋白和Ⅳ型胶原染色在对照组与实验纽均显示为阳性，但实验组阳性均似稍强，这种阳性并没有随着培养时间的延长而增强；在扫描电镜下观察到随着培养时间延长，细胞表面的绒毛、纤维从无到有，细胞从单层到多层，并逐渐出现新生成的纤维细胞，但对照组与实验各组之间未见明显差异；rhTPO对CD34、CD45、CD105、CD106、CD166的表达无明显影响。结论：rhTPO不影响基质细胞的组织化学特性，纤维染色和扫描电镜观察也未发现有促进纤?     

重组人血小板生成素对凝血酶诱导血小板凋亡的调节作用

目的 探讨重组人血小板生成素（rhTPO）对凝血酶（TMB）诱导的血小板凋亡的调节机制。方法 常规制备洗涤血小板,分组如下：Normal组、TMB组、rhTPO（低、中、高）剂量组。检测各组血小板中线粒体的完整性、细胞凋亡率以及ROS的含量,检测Opa1、Bcl-xl、Mfn2、Fis-1、Drp-1、Cyt-c和Bak的表达。结果 与Normal组相比,TMD组、rhTPO（低、中、高）组中血小板中完整线粒体的比例及Opa1、Bcl-xl、Mfn2的mRNA和蛋白的表达明显降低,细胞的凋亡率和ROS的含量及Fis-1、Drp-1、Cyt-c和Bak的m RNA和蛋白的表达明显升高,rhTPO（低、中、高）剂量组能明显逆转这些趋势,并且具有明显的剂量依赖性,差异均具有统计意义（P <0.05）。结论 rhTPO能明显抑制TMD诱导的血小板的细胞凋亡,这可能与抑制ROS的富集,改善线粒体功能有关。     

普鲁卡因联合高温对CFU－L、CFU－GM、CFU－F和CFU－Blast的影响

普鲁卡因联合高温对ＣＦＵ－Ｌ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｆ和ＣＦＵ－Ｂｌａｓｔ的影响沈树红，林宝爵，张日，夏学鸣高温联合普鲁卡因可以体外净化白血病骨髓。为了更有效地去除残留白血病细胞，我们观察了不同条件下粒－单核细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）、原始细胞...     

重组人血小板生成素治疗脓毒症血小板减少症

目的 评价重组人血小板生成素(recombinant human thromobopoietin,rhTPO)对脓毒症相关血小板减少症的疗效和安全性.方法 前瞻、对照方法观察2009年1月至2009年11月入住天津市第一中心医院ICU的脓毒症并发生血小板减少的患者,外周血血小板计数≤40×109 L-1且主治及以上医师认为有必要升高血小板治疗的脓毒症患者为研究对象,排除恶性肿瘤、6个月内接受过免疫调节剂治疗、年龄＜14岁或＞75岁、心肺复苏后、入院24 h内转出或死亡者及终末期肝或肾功能衰竭者.将入选43例患者根据"不平衡指数最小的分配原则"随机分为特比奥(rhTPO)组(21例)和静脉注射用人免疫球蛋白(Intravenous Immunoglobulin,IVIG)组(22例),rhTPO组在综合治疗的基础上加用特比奥300 U·kg-1·d-1,2～8 d,IVIG组则在综合治疗的基础上加用静脉注射用人免疫球蛋白400 mg·kg-1·d-1,连用5 d.观察比较两组患者治疗后第1,2,3,5,7天外周静脉血血小板计数以及凝血指标、肝肾功能、出血及血制品输注情况、ICU住院时间、治疗费用等指标,随访并比较28 d病死率等预后情况.两组间参数的比较采用独立样本t检验,计数资料进行χ2检验.结果 rhTPO组治疗后血小板恢复最高值明显高于IVIG组(t=2.21,P=0.032);rhTPO组血小板最低值和最高值的差值明显大于IVIG组(t=7.40,P＜0.001).治疗前两组血小板计数差异无统计学意义(t=0.458,P＞0.05),用药第2天、第3天rhTPO组血小板计数升高明显高于IVIG组(t=2.166和t=2.132,P=0.036和P=0.041),两组存活病例用药第3天rhTPO组血小板计数明显高于IVIG组(t=2.28,P=0.032),两组出血发生率差异无统计学意义(χ2=0.720,P＞0.05),但rhTPO组血小板及血浆输注量明显少于IVIG组(t=2.038和t=2.252,P=0.048和P=0.030).两组ICU住院时间及病死率差异无统计学意义(t=0.91和χ2=0.264,P＞0.05),但rhTPO组用药平均消费显著低于IVIG组(t=16.93,P＜0.001).所有病死病例治疗前血小板计数显著低于存活组(t=3.448,P=0.001).rhTPO组无一例发生不良反应.结论 重组人血小板生成素可促进脓毒症相关血小板减少症血小板计数的恢复,减少患者血制品输注量,降低医疗费用且安全可靠.

Abstract：

Objective To evaluate the efficacy and safety of rhTPO (recombinant human thromobopoietin) employed for the treatment of sepsis-associated thrombocytopenia. Method There were 47 patients with sepsis-associaiod thrombocytopcnia eligible for the prospective, randomized (random number) and controlled clinical study from January 2009 to November 2009 in ICU of the Tianjin First center Hospital. According to the principle of minimum distribution imbalance index, these patients were randomly divided into the rhTPO group (n = 21) and the IVIG (intravenous immunoglobulin) control group (n = 22). In the rhTPO group, rhTPO was given subcutaneously to patients in a dose of 300 U/kg/d for 2 ～ 8 d, and in the IVIG control group, IVIG was used instead of rhTPO in a dose of 400 mg/kg/d for 5 days. Laboratory tests included blood routine examination, hepatic function, kidney function, coagulation function. The amount of blood products used, bleeding events, the days of ICU and hospital stay, total therapy cost and 28-day mortality were compared between two groups. Results The maximal platelet count in the rhTPO group was significantly higer than that in the contral group (t = 2.21, P =0.032). The mean value of difference between minimal and maximal platelet counts in the rhTPO group was much higher than that in the control group (t =7.40, P ＜0. 001). The average platelet count was no statistical difference between two groups before treatment (t =0. 458, P ＞ 0.05), but the average platelet counts in the rhTPO group were significantly higer than those in the contral group on the second and third day after treatment(t = 2. 166 and t = 2. 132, P =0. 036 and P =0.041. There were no statistical differences in incidence of bleeding, length of ICU stay and mortality between two groups (χ2 =0.720, t =0.91 and χ2 =0.264, P ＞0.05) , but the amounts of plasma and platelet transfusion were significantly less in the rhTPO group than those in the control group (t = 2.038 and t =2.252, P=0.048 and P=0.030) and the medical cost was cut down significantly in rhTPO group (t = 16.93, P ＜ 0.001). There was no adverse reaction occurred during period of observation. Conclusions The rhTPO can significantly increase platelet count, and decrease the amount of blood transfused and the medical cost. The administration of rhTPO is safe and efficient for the treatment of sepsis-associated thrombocytopenia.     

重组人红细胞生成素治疗慢性肾衰贫血对血小板的影响

重组人红细胞生成素治疗慢性肾衰贫血对血小板的影响石惠敏我们观察了重组人红细胞生成素（ｒｈＥｐｏ）治疗终末期肾衰贫血患者对血小板的影响，报告如下。病例和方法１病例选择随机选取３０例慢性肾衰贫血患者，男１８例，女１２例，平均年龄４９±１５岁。血液透析时间...     

重组人红细胞生成素治疗肾性贫血及对血小板参数的影响

目的 观察重组人红细胞生成素(益比奥，rHuEP0)治疗肾性贫血疗效及对血小板参数的影响。方法 15例慢性肾功能不全尿毒症期患，用益比奥治疗24周，观察治疗前后血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)计数、血小板(PLT)计数、血小板平均体积(MPV)及血小板乎均分布宽度(PDW)变化。结果 益比奥治疗后，Hb、RBC计数、MPV显升高。PLT、PDW无显变化。结论 益比奥治疗肾性贫血疗效好，并显增加MPV，改善尿毒症患生存质量。     

重组人红细胞生成素治疗肾性贫血及对血小板参数的影响

目的观察重组人红细胞生成素(益比奥,rHuEPO)治疗肾性贫血疗效及对血小板参数的影响。方法15例慢性肾功能不全尿毒症期患者,用益比奥治疗24周,观察治疗前后血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)计数、血小板(PLT)计数、血小板平均体积(MPV)及血小板平均分布宽度(PDW)变化。结果益比奥治疗后,Hb、RBC计数、MPV显著升高。PLT、PDW无显著变化。结论益比奥治疗肾性贫血疗效好,并显著增加MPV,改善尿毒症患者生存质量。     

重组人血小板生成素治疗化疗相关性血小板减少的研究

目的 观察重组人血小板生成素（rhTPO）治疗肺癌患者化疗所致血小板减少的疗效和不良反应.方法 采用病例自身对照研究,对第一个周期（对照组）化疗后血小板（PLT）≤50×109/L的18例肺癌患者,在下一周期（治疗组）所有患者接受5次rhTPO 15,000u皮下注射（SC）,三次化疗前（第-3、-2、-1天）,两次化疗后（第1、8天）,两个周期化疗方案均为吉西他滨1.0g/m2第1、8天＋顺铂75m/m2第1天,监测两研究组血小板计数变化及毒副反应.结果 在化疗后3、6、9、12、15、18、21天,治疗组平均血小板计数均高于对照组,治疗组和对照组化疗后血小板最低时间分别出现在第15天和第12天,最低值分别为（56±13.0）×109/L和（33.8±14.0）×109/L,两组差异有统计学意义.对照组有4例患者输注血小板,而治疗组无一例.无明显不良反应发生.结论 通过合理的rhTP0使用方法（三次化疗前,两次化疗后）可以明显地降低化疗相关性血小板减少的发生,无明显不良反应.     

重组人血小板生成素治疗急性白血病化疗后血小板减少

急性白血病患者化疗后,常伴有严重的血小板减少,防治棘手.长期以来,血小板输注一直是严重血小板减少的标准治疗方法,疗效肯定.但血小板保存时间短,来源紧张,并可发生输血反应等,限制了其临床应用.     

单克隆抗体HIP_2对人CFU－GM及CFU－AML体外作用的研究

刺激型抗人血小板单克隆抗体──ＨＩＰ_２在体外有刺激人造血祖细胞集落形成的作用。本研究结果显示：ＨＩＰ_２对正常人和急性髓系白血病（ＡＭＬ）初诊及缓解患者的粒单系造血祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）集落产率有明显刺激作用，而对ＡＭＬ祖细胞（ＣＦＵ－ＡＭＬ）集落产率无明显刺激作用，为临床ＡＭＬ患者在化疗抑制期及骨髓移植造血抑制期用该抗体加速造血恢复提供了实验依据。     

重组人促血小板生成素对化疗后血小板减少症的临床疗效

目的:探讨重组人促血小板生成素治疗急性白血病化疗后血小板减少症的临床效果。方法:选取2013年1月~2017年1月我院收治的经化疗后造成血小板减少的急性白血病患者94例为研究对象,随机分为对照组和观察组各47例。观察组给予重组人促血小板生成素(rhTPO)治疗,对照组给予重组人白介素-11(rhIL-11)治疗。比较两组临床疗效及不良反应发生情况。结果:两组治疗前血小板计数比较无显著性差异(P0.05);治疗后观察组血小板计数明显优于对照组(P0.05);观察组血小板计数50×10~9/L的持续时间、升高至75×10~9/L及100×10~9/L所需时间均明显短于对照组(P0.05);观察组患者不良反应发生率明显低于对照组(P0.05)。结论:重组人促血小板生成素治疗急性白血病化疗后血小板减少症效果显著,可明显改善患者血小板减少,且安全性较高,值得临床推广应用。     

重组人血小板生成素治疗免疫性血小板减少症的临床观察

免疫性血小板减少症（immune thrombocytopenia, ITP）是一种自身免疫性疾病,首选激素治疗,激素无效采用二线治疗方案,如硫唑嘌呤、达那唑、长春新碱、重组人血小板生成素、切脾等。重组人血小板生成素（recombinant human thrombopoietin,rhTPO）是特异性造血调控因子,具有刺激巨核系祖细胞增殖与分化,促进巨核细胞成熟的活性,可增加血小板的生成。作者对国产注射用rhTPO治疗ITP患者血小板减少的有效性和安全性进行了评估。报道如下。     

不同浓度重组人促红细胞生成素对神经干细胞体外培养增殖的影响

背景：重组人促红细胞生成素是一种糖蛋白,近年的研究表明其对神经细胞的许多功能活动均具有调节作用。目的：观察不同浓度重组人促红细胞生成素对神经干细胞体外培养增殖的影响。方法：提取新生SD大鼠神经干细胞,用含不同浓度（5,50,500U/mL）重组人促红细胞生成素和20μg/L碱性成纤维细胞生长因子的无血清培养基进行培养,以不含重组人促红细胞生成素无血清培养基为对照组。细胞培养7d后计算神经干细胞克隆形成率,培养10d后计数NSE和GFAP免疫阳性细胞数。结果与结论：添加重组人促红细胞生成素组细胞增殖较快,最终神经球的数量多于对照组,以50U/mL重组人促红细胞生成素组作用显著;50U/mL重组人促红细胞生成素组的生长速度显著快于对照组。50U/mL重组人促红细胞生成素组中NSE和GFAP免疫阳性细胞明显多于对照组（P〈0.01）。结果表明重组人促红细胞生成素对神经干细胞体外培养增殖有促进作用,尤以适中浓度（50U/mL）作用更加明显。     

不同浓度重组人促红细胞生成素对神经干细胞体外培养增殖的影响

背景:重组人促红细胞生成素是一种糖蛋白,近年的研究表明其对神经细胞的许多功能活动均具有调节作用.目的:观察不同浓度重组人促红细胞生成素对神经干细胞体外培养增殖的影响.方法:提取新生SD大鼠神经干细胞,用含不同浓度(5,50,500 U/mL)重组人促红细胞生成素和20 μg/L碱性成纤维细胞生长因子的无血清培养基进行培养,以不含重组人促红细胞生成素无血清培养基为对照组.细胞培养7 d后计算神经干细胞克隆形成率,培养10 d后计数NSE和GFAP免疫阳性细胞数.结果与结论:添加重组人促红细胞生成素组细胞增殖较快,最终神经球的数量多于对照组,以50 U/mL重组人促红细胞生成素组作用显著;50 U/mL重组人促红细胞生成素组的生长速度显著快于对照组.50 U/mL重组人促红细胞生成素组中NSE和GFAP免疫阳性细胞明显多于对照组(P<0.01).结果表明重组人促红细胞生成素对神经干细胞体外培养增殖有促进作用,尤以适中浓度(50 U/mL) 作用更加明显.