适量X线照射促进脊髓损伤神经再生作用

脊髓损伤（SCI）造成患者瘫痪、神经功能缺失、致残,对个人、家庭、社会都造成极大困扰。当今尚无SCI的有效治疗方法,这一直是世界性的医学难题。近年来,发现适量X线照射能促进SCI后神经再生和运动功能恢复将可能成为SCI的一种新的治疗方法。现就其医学基础、作用机制、具体实施方案及疗效的实验研究进展,结合相关文献作一综述。     

改良钳夹型脊髓损伤大鼠模型的建立及神经功能评价简

目的：建立一种稳定可靠、操作简单的不完全性脊髓损伤动物模型,并对其神经功能进行初步评价。方法将50只SD大鼠随机分为模型组、假手术组。采用改良钳夹法建立大鼠脊髓损伤模型,观察不同时间点大鼠行为学运动功能（BBB）评分、脊髓组织形态变化及损伤段脊髓的细胞凋亡因子半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）阳性细胞表达的情况。结果模型组大鼠各时间点BBB评分均明显低于假手术组（P＜0.05）,假手术组各时间点大鼠脊髓组织中Caspase-3阳性细胞表达明显低于模型组（P＜0.05）。结论成功制备了稳定可靠、操作简单的不完全性脊髓损伤动物模型。     

大鼠脊髓星形胶质细胞体外划痕损伤模型的建立

星形胶质细胞(astrocytes，Ast)培养和损伤模型是体外研究中枢神经系统损伤修复的基础和热点之一。长期以来，人们对大脑皮层及其他部位的Ast在中枢神经系统损伤修复中的功能做了较多的研究，而对脊髓的Ast有关研究较少。笔者采用机械划痕的方法，制备有效的脊髓Ast体外损伤模型，以便对脊髓Ast在损伤后的基因表达变化作进一步全面分析。     

脊髓损伤的动物模型及相关影像病理的实验研究

脊髓损伤的动物模型及相关影像病理的实验研究王绍武唐开综述吴恩惠审校脊髓损伤（ｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｉｎｊｕｒｙ，ＳＣＩ）是比较常见且严重的创伤，其病理演变机制十分复杂，至今还不十分清楚。由于无法依靠临床开展系统的病理学研究，通过建立动物模型进行实验研究...     

大鼠脊髓创伤后脊髓组织中3种内源性阿片肽含量的动态变化及意义

应用放射免疫分析技术测定了实验性大鼠脊髓创伤各段脊髓组织中３种不同内源性阿片肽含量的动态变化。结果表明：强啡肽随损伤程度的加重进行升高，ＤｙｎＡ含量变化局限于损伤胸段及领近腰段脊髓，且呈时间依赖型变化。     

低温预处理对大鼠脊髓内牵拉后脊髓神经细胞凋亡及神经功能的影响

目的 探讨局部低温预处理对大鼠脊髓内牵拉型脊髓损伤病理形态学改变、神经细胞凋亡和神经功能的影响。方法 将80只4个月龄SD大鼠随机分为低温预处理组（A组）和对照组（B组），建立大鼠脊髓内牵拉型脊髓损伤模型，于损伤后2，4，8，24，48，72h和7d评估脊髓损伤后大鼠运动功能，用HE染色观察损伤脊髓组织病理变化，原位末端标记（TUNEL）法标记凋亡细胞。结果 HE染色镜检显示A组脊髓组织病理学改变明显轻于B组。A、B两组运动功能评分和神经细胞凋亡指数比较，差异有统计学意义（P〈0．05或0．01）。结论 低温预处理可明显减轻大鼠脊髓内牵拉型脊髓损伤早期病理形态学损伤，抑制细胞凋亡，有助于神经功能的恢复。     

人神经干细胞移植对脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响

目的:探讨人神经干细胞(hNSCs)移植对脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响及可能机制。方法:取2～3个月流产胎儿海马区组织,体外培养神经干细胞;采用通用型脊髓打击器将24只成年SD大鼠制成脊髓损伤模型,伤后第8天随机分为移植组和对照组,于损伤中心分别注入CM-DiI标记的hNSCs悬液和DMEM/F12培养液。分别于hNSCs移植后当天及1、2、3、4、6、8周采用Basso,Beattie,Bresnahan(BBB)行为功能评定量表评估大鼠后肢运动功能恢复情况。移植后第4、8周取损伤部位脊髓,行病理切片,免疫组化方法观察移植细胞的存活和迁移,并检测损伤脊髓处胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元核心抗原(NeuN)、2,3-环核苷酸磷酸二酯酶(CNPase)、神经巢蛋白(Nestin)等抗原的表达。结果:移植组后肢运动功能评分随时间延长而逐渐升高,移植1周时后肢运动功能有所改善,与对照组无明显差异(6.4±0.99 vs 6.0±0.93,P>0.05);移植4周时后肢运动功能比1周时有明显恢复,BBB评分明显高于对照组(9.7±1.04 vs 7.4±0.95,P<0.05);移植的hNSCs可在损伤脊髓处长时间存活(至少8周),并分化为神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞。结论:人神经干细胞可在损伤脊髓处向神经元和神经胶质细胞分化,并能促进脊髓损伤大鼠后肢运动功能的部分恢复。     

经后路减压对大鼠脊髓背侧压迫损伤的治疗作用

笔者采用固定在椎板上的螺丝旋入椎管一定深度的方法来制造脊髓压迫损伤模型，造模后2周行减压术，联合运用神经功能评分、斜板试验和皮层体感诱发电位（cortical somatosensory evoked potentials，CSEP）评估治疗效果。     

大鼠脊髓打击伤模型的建立及病理观察

目的 观察改良大鼠脊髓打击伤模型的病理变化,评价该模型的稳定性、重复性和一致性. 方法 应用改良重物坠落打击装置建立大鼠脊髓中、重度损伤模型,通过BBB评分、神经电生理监测、免疫组化及光电镜技术观察脊髓损伤(SCI)后两组大鼠功能及病理变化特点,以评价本实验模型的重复性及与损伤程度相关的一致性. 结果 脊髓损伤后两组大鼠的后肢运动功能均有不同程度恢复,运动和感觉诱发电位提示神经信号传导功能亦逐渐恢复,但中度损伤大鼠恢复明显较重度损伤大鼠好,组织病理及免疫组化观察显示脊髓损伤后有胶质瘢痕及囊腔形成,但重度损伤组的组织损伤程度较中度组重,且残留正常组织较少,电镜下观察显示脊髓损伤后损伤部位可见明显出血、水肿,中性粒细胞浸润,胶质细胞染色质边集.脊髓损伤后2周可见线粒体空泡化,轴突变性,周围水肿.脊髓损伤后8周可见髓鞘变性,胶原原纤维沉积. 结论 本实验模型能将不同打击力度造成的损伤区分开,且和行为学、神经电生理、病理学等结果吻合,说明此模型具有良好的稳定性、重复性和一致性.胶质瘢痕及囊腔的形成是脊髓损伤的标志性病理变化,GFAP或Vimentin染色可作为判断其界限的标志性分子.     

X线照射对实验性癫痫大鼠脑皮层氨基酸递质含量的影响

目的 探讨癫痫大鼠放射治疗的作用机制与时间、合理剂量。方法 利用慢性点燃癫痫大鼠进行24、12、6、0Gy的X线照射，用氨基酸分析仪测定不同照射剂量癫痫大鼠及照射后1h、24h、1周时癫痫大鼠额叶皮层内的主要兴奋性与抑制性氨基酸递质含量变化。结果 X线放射治疗后发生变化的氨基酸递质主要是G1u与GABA，与对照组(0Gy)比较，12Gy、24Gy组Glu含量降低，GABA含量升高，Glu／GABA值降低；照射后1h、24h、1周后GABA含量升高，Glu／GABA值降低，其中以24h比值下降最为明显。结论 放射治疗癫痫的机制主要是GABA与Glu递质发生快速而持续的变化；癫痫大鼠接受12Gy的放射治疗较为合理。     

高压氧对脊髓损伤大鼠脊髓组织内源性阿片肽含量的影响

为探讨高压氧（HBO）治疗脊髓损伤（SCI）的机制,复制SCI模型,观察HBO对SCI大鼠脊髓组织中内源性阿片肽（β－EP及Dyn A）含量的影响。结果显示,损伤后大鼠脊髓组织中Dyn A和β－EP含量均明显升高;0．25MPa HBO治疗后Dyn A及β－EP含量均下降,以Dyn A为著。提示内源性阿片肽参与了SCI的继发性损伤机制,且以Dyn A的作用为主;HBO可抑制SCI后内源性阿片肽的释放,恢复脊髓组织的功能。     

高压氧对脊髓损伤大鼠脊髓组织中兴奋性氨基酸的影响

通过复制脊髓损伤（SCD模型,用常氧,高压氧（HBO）,氮氧混合气,激素等分别处理各组大鼠后,取脊髓组织测兴奋性氨基酸（EAA,包括天冬氨酸Asp及谷氨酸Glu)含量,以探讨HBO治疗SCI的机制。结果显示,损伤后,大鼠脊髓组织中EAA（Glu)含量明显升高,经不同处理后,除氮氧混合气组外,Glu含量均有所下降,以0.25MPa HBO组和0.25MPa HOB 激素组下降最明显,与损伤组比较有显著性差异（P＜0．01）,与正常对照组比较则无显著性差异;0.25MPa HBO组与0.1MPa HBO组比较及0.25MPaHBO激素组与激素组比较,均有显著性差异（P＜0．01）。提示HBO能通过减少组织中的EAA减轻SCI后的继发性损伤,恢复脊髓组织的功能,其中以0 .25MPa HBO和0.25MPa HBO并用激素治疗效果较佳。     

不同剂量软X射线照射对大鼠伤口愈合影响规律的研究

目的 研究软X射线局部照射对创伤愈合的影响规律。方法 采用大体观察、组织病理学、免疫组化（胶原染色）和图像分析等方法，动态观察不同剂量软X线局部照射后大鼠伤口愈合的过程。结果 0．50、1．01、1．96、3．26、4．00、5．21Gy组照射侧的创面愈合时间比对照侧分别延长了1．6、4．2、5．4、6．6、8．2、9．4d，7．0及10．0Gy组则创面不愈（＞40d)。各组的已愈创面百分率在3－9d之间的变化幅度均比对照侧小，随着照射剂量的增大，变化的幅度亦减小，表明创面愈合速度减慢。照射后伤口组织胶原的合成降低，排列紊乱，肉芽组织的结构不规则。结论 局部软X线照射后，大鼠伤口愈合延迟，在0．50－5．21Gy之间延迟时间随照射剂量的增大而延长。     

爆破性减压复合脊髓损伤对大鼠脊髓微循环的影响

目的 研究爆破性减压复合脊髓损伤对大鼠脊髓微循环的影响.方法 健康雄性SD大鼠32只,随机分为对照组、单纯脊髓挫伤组、单纯爆破减压组和爆破性减压复合脊髓挫伤组,每组8只.在伤前、伤后即刻、30、60、90 min5个时间段观察脊髓伤区及周围微循环情况,伤后6周取各组伤段脊髓,纵轴冰冻切片,HE染色,光学显微镜观察保存,借助计算机软件估算出脊髓剩余体积.结果 与对照组相比,单纯脊髓损伤组、单纯爆破减压组和爆破性减压复合脊髓挫伤组评分统计差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05),且爆破性减压复合脊髓挫伤组损伤较重.脊髓组织病理分析表明,病变持续性加重,伤后6周爆破性减压复合脊髓挫伤组平均剩余脊髓体积百分比仅为66％.结论 爆破性减压可明显加重损伤脊髓微循环障碍,且有持续继发性病变加重作用,提示爆破性减压可能进一步损害脊髓,损伤大鼠的神经功能.     

不同压力高压氧治疗对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响

目的 观察不同压力的高压氧(HBO)对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后细胞凋亡的影响,探讨HBO治疗SCI的最佳压力.方法 90只SD大鼠采用Allen's打击法造成SCI后随机分为5组:对照组(A组)、0.15 MPa HBO组(B组)、0.20 MPa HBO组(C组)、0.22 MPa HBO组(D组)和0.25 MPa HBO组(E组).损伤后第3、7、14天分别对5组大鼠进行取材,采用Tunel法检测凋亡细胞,光镜下观察,并对结果进行统计学分析;神经功能评价采用开放场地实验评估大鼠后腿运动功能(BBB评分).结果 与A组比较,HBO各压力组在3个时间点凋亡的细胞数有所减少,神经功能有所改善,且差异有统计学意义(P＜0.05).与B组比较,C、D和E组凋亡的细胞数有所减少,BBB评分改善,且差异有统计学意义(P＜0.05).与C组比较,E组于第3和第7天的差异有统计学意义(P＜0.05);第14天的差异无统计学意义(P＞O.05).结论 HBO能抑制SCI后细胞的凋亡,其作用在一定范围内与压力的升高相关.

Abstract：

Objective To study the effects of HBO at different pressures on apoptosis following spinal cord injury in rats and also to investigate ideal pressure value of hyperbaric oxygen(HBO) on spinal cord injury (SCI). Methods The SCI model was established with Allen's weight dropping by using 90 SD rats. Then, the animals were randomly divided into 5 groups following SCI: the control group ( group A); the HBO treatment group at 0. 15 Mpa (group B); the HBO treatment group at 0. 20MPa (group C); the HBO treatment group at 0. 22 Mpa ( group D); the HBO treatment group at 0.25 Mpa ( group E). Segments of injured spinal cord were collected from the animals of the 5 groups for studies on the 3rd, 7th, and 14th days after injury. The apoptosis cells were labeled with Tunel and the neurologic function of the spinal cord was assessed in the open field ( the BBB score ). Results The number of Tunel - positive cells decreased considerably and the BBB score improved significantly in all the animals of the HBO groups when compared with those of group A ( P ＜ 0. 05 ). Same results were found when the group C, group D and group E were compared with group B, with statistical significance( P ＜0. 05). The number of Tunel-positive cells were decreased considerably and the BBB score improved significantly on 3rd and 7th days in group E, when compared with those of group C( P ＜ 0. 05 ), with statistical significance( P ＜ 0. 05 ). However, no statistical significance could be noted on the 14th day (P ＜0.05). Conclusions HBO could inhibit apoptosis in rats following spinal cord injury, which might be correlated with the increase of pressure within a certain range.     

大鼠脊髓半切块状缺损模型的建立及科学性评估

目的建立脊髓损伤的半切模型,为科学评价移植物治疗脊髓损伤提供模型。方法通过自行研制的脊髓半切切割刀,半切大鼠腰膨大,形成相同大小的块状缺损,建立半切块状缺损模型,通过BBB评分、运动诱发电位及体感诱发电位检测来综合评价模型的科学性和稳定性。结果该模型可形成相同大小的块状缺损,伤侧后肢术后1天BBB运动功能评分为(0.50±0.53)分,术后84天为(3.63±0.74)分;术后28天伤侧N1波峰潜时MEP为(30.25±3.04)m s、皮层感觉诱发电位(SEP)为(24.03±3.64)m s,较正常组均有显著延长。结论该脊髓块状缺损模型具可靠性和稳定性,适用于评价移植物治疗脊髓损伤。     

高压氧对脊髓损伤大鼠脊髓组织中超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性的影响

通过复制大鼠脊髓损伤（SCD）模型,探讨高血压（HBO）治疗对脊髓组织中氧化物歧化酶（SOD）及过氧化氢酶（CAT）活性的影响。结果显示,损伤后,脊髓组织中SOD及CAT活性明显下降,0.25Mpa HBO及0.25MPaHBO 激素治疗后SOD及CAT活性明显恢复。提示HBO可提高脊髓组织中的抗氧化酶活性,阻止或减轻自由基的损伤,恢复脊髓组织的功能。     

三七总皂甙对大鼠脊髓损伤后fos阳性神经元表达的影响

目的 探讨脊髓继发性损伤的病理生理机制及三七总皂甙(PNS)防治该病的作用机制。方法 以Wistar大鼠65只为研究对象。分为空白组、假手术组、溶媒对照组和PNS组,各实验组按2、6、12、24 h相点观察Allen’s脊髓损伤模型100 g·cm致伤脊髓。各组在相应时相点取脊髓组织,采取免疫细胞化学方法观察脊髓组织fos阳性神经元的表达变化。结果 脊髓fos阳性神经元表达:溶媒对照组>PNS组>假手术组>空白组。结论 c-fos参与了脊髓继发性损伤过程,PNS可能通过抑制脊髓组织神经元c-fos原癌基因的表达而起保护作用。