转化生长因子β及Smad7在原发性肾小球疾病中的作用

以往研究显示转化生长因子β（TGF-β）是肾脏纤维化发生、发展中的重要因子。TGF-β结合并激活其受体后，其信号传递由受体后信号分子Smad蛋白来进行。Smad7是TGF-β功能特有的内源性抑制因子，可阻抗TGF-β的信号转导，对其表达的调控可能成为阻断肾小球TGF-β效应的具有生理学基础的诱人策略。据此，我们试图从体内体外两方面进行TGF-β1及其信号转导分子Smad7转导机制的研究，为开展对肾小球疾病动物模型的基因治疗提供理论和实验依据。     

TGF-β诱导人肝癌细胞系凋亡信号转导机理的研究

目的探讨转化生长因子β1（TGF-β1）诱导人肝癌细胞系凋亡及其与β53基因及Smad4的关系。方法选用3种含有不同β53基因状态的人肝癌细胞系，均分为TGF-β1诱导组（实验组）和对照组；应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术（TUNEL）对TGF-β1诱导的肝癌细胞的凋亡进行定量检测；另外，应用Lipofectamine 2000把含有Smad4结合元件和荧光素酶基因的TGF—β1可诱导的荧光素酶报告质粒对细胞进行转染，再经TGF-β1作用，分别检测其相对荧光素酶活性。结果在应用TUNEL检测的3个细胞系中，TGF—β1能诱导HepG2细胞（野生型β53）凋亡，其细胞凋亡率实验组明显高于对照组（P〈0．05）；而Huh-7（突变型β53）和Hep3B细胞（缺失型β53）凋亡细胞较少，其细胞凋亡率实验组与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。荧光素酶检测提示，HepG2细胞的Smad4表达活性实验组明显高于对照组（P〈0．05）；而Huh-7和HepB细胞的Smad4表达较低，实验组与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Hep2细胞系比Huh-7和HepB细胞系更易发生TGF-β1诱导的凋亡．Smad4是TGF-β1信号转导途径的主要调控因子之一。     

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ激动剂心肌保护作用机制的研究进展

背景过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator-activated receptors,PPARs）主要参与和能量代谢及炎症反应相关的基因转录。其1亚型除作为治疗2型糖尿病的降糖靶点外,在心肌缺血／再灌注损伤（myocardial ischemia／reperfusion injury,MI／RI）中也具有关键作用,是减轻MI／RI、维持心脏功能的重要因子。目的探究过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（peroxisome proliferator-activatedreceptor-γ,PPAR-γ）激动剂在MI／RI中心肌保护作用的相关机制。内容从PPAR-γ及其激动剂和相关实验研究等方面进行综述,PPAR-y激动剂能够通过依赖和不依赖PPAR-γ两条途径减少心肌梗死面积,改善心脏功能,发挥减轻MI／RI的作用,其中涉及抗炎、抗氧化、抗凋亡等多种重要保护机制。趋向深入研究PPAR激动剂减轻MI／RI的具体机制可为临床提供新的心肌保护策略。     

核转录因子PPARγ与骨质疏松

过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)是一个转录因子,属于核受体超家族成员之一,参与调节细胞的分化、增殖及凋亡,其亚型PPARγ2是调控脂肪细胞分化的关键因子并对骨髓间充质干细胞的分化方向起重要调节作用。研究表明,PPARγ2的高表达以及其配体的应用可使骨髓腔中的成骨细胞减少进而可能引起骨质疏松。因此,对PPARγ调控骨髓间充质干细胞分化方向的作用和机制的研究,可能为骨质疏松的防治提供新的思路和方法。     

肾脏系膜细胞在慢性肾脏病进展中的作用

系膜细胞是肾脏主要的固有细胞之一，在高血脂、高血糖、高凝状态、局部肾素-血管紧张素系统（RAS）激活等因素作用下由成熟／静止表型向增殖／分泌表型转化，并分泌转化生长因子-β（TGF-β）、血小板源性生长因子（PDGF）、肿瘤坏死因子仅（TNF-β）、结缔组织生长因子（CTGF）等多种重要的细胞因子，加剧了细胞过度增殖或肥大，同时细胞生长周期失控又引起系膜细胞凋亡过度或不足；另外，系膜细胞优势表达基因megsin表达增强，促进了系膜基质合成。以上均参与了肾小球硬化过程，在慢性肾脏病进展中起重要作用。     

白细胞介素1β对肾小管上皮细胞过氧化物酶体增殖蛋白激活性受体γ及辅调节因子表达的影响

目的 探讨白细胞介素1β（IL-1β）介导的炎性反应中过氧化物酶体增殖蛋白激活性受体γ（PPARγ）及其辅调节因子的表达变化,分析其相互作用机制。 方法 体外培养人肾小管上皮细胞（HK-2）,应用IL-1β作用于HK-2细胞,收集细胞总mRNA、胞核蛋白和细胞培养上清液。应用实时定量PCR、Western印迹法、ELISA法、凝胶电泳迁移率实验（EMSA）法分别从mRNA水平、蛋白质水平、DNA结合活性水平检测PPARγ及其辅调节因子（包括辅激活因子和辅抑制因子）和单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的表达变化。 结果 不同浓度的IL-1β（0~20 μg/L）刺激24 h后,PPARγ、辅激活因子SRC-1、SRC-2和PGC-1 mRNA表达水平均呈总体下调趋势（P < 0.05）,同时辅抑制因子NCoR呈显著上调趋势（P < 0.05）。以10 μg/L作为IL-1β最佳刺激浓度,SRC-2和PGC-1的mRNA水平在刺激1 h后就分别显著下调了57％（P < 0.01）和48％（P < 0.01）;SRC-1的mRNA水平在刺激2 h后显著下调了43％（P < 0.05）,而PPARγ在刺激4 h时下调了55％（P < 0.01）;NCoR在刺激8 h后出现显著上调（为对照组的2.17倍,P < 0.05）,之后又缓慢下降,至24 h仍高于对照组,但差异无统计学意义。Western印迹结果显示,PPARγ的蛋白表达在IL-1β（10 μg/L）刺激4 h后出现显著下降。ELISA结果显示MCP-1的分泌水平呈持续增高,8 h后达到最高值[（160.56 ± 2.8） ng/L,P < 0.01],至24 h仍为（50.82± 1.25） ng/L（P < 0.01）。EMSA结果显示PPARγ的DNA结合活性呈总体减弱趋势,至24 h达到最低值,而NF-κB的DNA结合活性均呈总体增强趋势,至24 h达到高峰。 结论 在肾脏炎性反应进程中,IL-1β诱导的NF-κB炎性通路激活可引起PPARγ及辅激活因子的表达下调,MCP-1和辅抑制因子的表达上调。不仅PPARγ,其辅调节因子也积极参与肾脏炎性反应。     

TGF-β1/Smad3信号转导通路与创伤后瘢痕形成

目的对近年TGF-β1/Smad3信号转导通路与创伤后瘢痕形成的相关研究作一综述。方法广泛查阅国内外近年有关TGF-β1/Smad3信号转导通路及与创伤后瘢痕形成的文献,并进行综述。结果 TGF-β1是纤维化疾病的重要影响因子,通过TGF-β1/Smad3信号通路转导产生其生物学效应。该途径受多种因子调控并在细胞及分子水平与其他信号通路串话。该途径参与创伤后早期炎性反应、创面愈合及后期病理性瘢痕的形成。在分子水平干预转导途径的各个环节,可以影响纤维化及细胞外基质沉着的进程。结论 TGF-β1/Smad3信号转导途径是影响创伤后瘢痕形成及细胞外基质沉着的重要途径。对该途径进行深入研究,可为临床促进创面的愈合及病理性瘢痕的防治奠定理论基础。     

MG132对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞Smad泛素化调节因子2和Smad7的影响

近来发现在肾纤维化模型（UUO）中Smad泛素化调节因子2（Smad ubiquitin regulatory factor2，Smurf2）表达增强，Smad7蛋白表达明显降低，Smurf2能通过泛素蛋白酶体途径增加Smad7降解。Smad7是TGF-β信号转导途径中的主要抑制性调控蛋白，因此阻断Smurf2的表达，有可能会起到抗纤维化的作用。MG132是一种有效、可逆的醛基肽类特异性蛋白酶体抑制剂，能阻断泛素蛋白酶体通路。我们主要研究MG132对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞（HKC）表达Smurf2、Smad7及Ⅳ型胶原的影响，为肾纤维化的防治寻找新的靶点。     

TGF-β/Smad信号通路及其在肾纤维化中的作用

转化生长因子-β（transforming growth factor—β,TGF—β）是介导肾小球硬化和肾间质纤维化关键的细胞因子，其作用包括趋化和活化炎性细胞，介导肾小管上皮细胞向间充质细胞转分化，以及刺激细胞外基质蛋白的合成及降低基质金属蛋白酶的活性和／或增加蛋白酶抑制剂的合成来促进细胞外基质的沉积。smad蛋白是TGF—β受体的胞内激酶底物，介导了TGF—β的胞内信号转导。Smad7是负反馈调节TGF—β功能的细胞分泌因子，其过度表达可能改变R—Smads和I—Smads对TGF—β诱导纤维化的应答或阻断的病理生理平衡。深入研究Smads介导的TGF—β胞内信号转导，将有助于对肾脏纤维化发病机制的理解，为探索新的治疗途径、开发临床新药提供理论依据。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α在急性肾损伤中的研究进展

过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)是调控线粒体生发和功能的主要调节因子,亦是维持线粒体稳态的枢纽,它参与多种疾病的发生发展。肾小管线粒体功能障碍是急性肾损伤（AKI）发病的重要机制,PGC-1α与AKI的发生发展关系密切。该文主要对PGC-1α的分子特征及生理功能,PGC-1α、缺血再灌注、肾毒性与AKI的关系进行综述。     

PPARγ激动剂对成人正常皮肤成纤维细胞转分化的作用

目的：观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导成纤维细胞转分化的影响,探讨其抗瘢痕纤维化的潜在作用。方法：体外培养成人正常皮肤成纤维细胞,利用免疫荧光细胞化学法观察、分析PPARγ配体15-脱氧前列腺素J2（15d-PGJ2）及其激动剂曲格列酮对TGF-β1诱导的α平滑肌动蛋白（α-SMA）表达的影响,利用Western blot、实时荧光RT-PCR技术检测PPARγ激动剂对TGF-β1诱导的α-SMA蛋白及mRNA水平的影响。结果：TGF-β1能显著增加成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞;与TGF-β1诱导组相比,10μM曲格列酮、15d-PGJ2预处理组的α-SMA表达量显著减少（P〈0.01）,抑制效应分别为31%、57%;预处理组的α-SMA mRNA水平显著下降（P〈0.01）。结论：PPARγ激动剂能抑制TGF-β1诱导的成人正常皮肤成纤维细胞的转分化的效应,具有抗皮肤瘢痕化、挛缩的潜在作用。     

PAI-1在瘢痕疙瘩发病及治疗中的作用

瘢痕疙瘩（keloid）是由于皮肤创伤后在伤口愈合过程中成纤维细胞的过度增殖和细胞外基质（extracellularmatrixc,ECM）在伤口区域过度沉积而形成的疾病。瘢痕疙瘩皮损通常超过伤口边缘,一般不会自行消退,而且在切除后容易复发,皮损可触痛、疼痛、瘙痒,蟹足样向外伸展。瘢痕疙瘩的发病机制仍然不明确,但国内外学者普遍认为其机制与纤溶酶原激活物抑制剂（PlasminogenActivatorInhibitor1,PAl-1）、TGF-S／Smad信号转导通路密切相关。本文主要介绍PAI-1与瘢痕疙瘩关系的研究进展。     

肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化与肾间质纤维化

肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化（EMT）在肾间质纤维化进程中发挥重要作用。多种细胞因子和信号转导途径参与调节EMT，其中TGF-B1／Smad信号通路发挥核心作用。肝细胞生长因子（HGF）及骨形成蛋白-7（BMP-7）可抑制EMT，减轻肾间质纤维化。激活素可能参与了EMT的进程。     

15-脱氧-△12,14-前列腺素J2对胃癌细胞生长的抑制作用

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）的配体15-脱氧-△^12，14-前列腺素J2（15d-PGJ2）对人胃癌MGC803细胞生长的影响。方法 逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）及Survivin mRNA表达，Western blot检测PPART、Survivin蛋白的表达。噻唑蓝（MTT）比色法及流式细胞术检测增殖、凋亡。Hoechst33342染色观察凋亡的形态学变化。结果 PPARγ mRNA和蛋白在MGC803细胞均表达，15d-PGJ2（5、10、20、30和40μmol／L）抑制MGC803细胞增殖和诱导其凋亡，增殖抑制率和凋亡率随浓度的增加和时间的延长而升高。MGC803细胞Survivin mRNA和蛋白表达随15d-PGJ2作用浓度的升高而降低。结论 15d-PGJ2可能通过诱导凋亡抑制人胃癌MGC803细胞的生长，Survivin mRNA和蛋白表达变化在此过程中起重要作用，提示15d-PGJ2可能对治疗胃癌有效。     

Smad信号通路在糖尿病肾病的作用

糖尿病肾病（DN）是糖尿病最严重和最常见的慢性并发症之一,是终末期。肾衰竭的主要原因之一,发病机制目前尚不清楚。转化生长因子-β（TGF—β）在DN发病中的作用不容忽视。Smad蛋白是目前所知TGF—β受体的胞内激酶底物,介导了TGF-8的胞内信号转导。本文就Smad信号通路在DN发病中的作用及研究进展作一综述。     

TGF-β1及其信号转导蛋白Smad 2/3在去卵巢大鼠骨组织中的表达及意义

目的观察转化生长因子β1（TGF-β1）及其信号转导蛋白Smad 2/3在去卵巢大鼠骨组织中的表达及意义.方法手术切除大鼠双侧卵巢.术后13周,取离体胫骨测量组织学参数髓腔面积百分率（%Ma.Ar）、骨小梁厚度（Tb.Th）,用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）检测大鼠骨组织TGF-β1 mRNA的表达,用免疫组化法检测Smad 2/3蛋白在骨组织中的定位,用Western blot杂交法检测骨组织TGF-β1、Smad 2/3蛋白表达.结果与对照组（Sham组）比较,模型大鼠（OVX组）骨组织Tb.Th缩小,%Ma.Ar明显增大,差异有显著性（P＜0.01）;OVX组TGF-β1的mRNA、蛋白及Smad 2/3蛋白表达水平显著降低（P＜0.01）,Smad 2/3蛋白广泛表达于骨组织干骺端,主要表达于骨基质表面及骨小梁周围的成骨细胞.结论TGF-βl及其信号转导蛋白Smad 2/3可能在绝经后骨质疏松症中起重要调节作用.     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂抗转化生长因子-β促器官纤维化作用的研究进展

目的 总结过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂抗转化生长因子-(βTGF-β)促器官纤维化作用的研究进展.方法 复习有关PPARγ激动剂抗TGF-β促器官纤维化作用的文献并进行综述.结果 TGF-β是一种主要的促纤维化细胞因子,能促进多种器官的纤维化进程,而PPARγ激动剂则可以有效地阻断TGF-β的信号传导,从而发挥抗器官纤维化的作用.结论 研究PPARγ激动剂主要通过阻断TGF-β信号传导来实现抗器官纤维化的机理,有助于PPARγ激动剂在临床上的推广运用,为治疗器官纤维化疾病提供一种新途径.     

PPAR-γ受体与急性肺损伤

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)作为一种核转录因子，能与其特异性配体结合，在转录水平上调控多种基因表达。研究证实PPAR-γ通过抑制NF-κB、AP-1和STATs等炎症信号转导途径，发挥抗炎作用。现就PPAR-γ的分子结构、活性调节、抗炎作用机制以及PPAR-γ配体对急性肺损伤的保护作用作一综述。     

罗格列酮对阿霉素肾病大鼠肾脏保护作用的研究

目的探讨过氧化物酶体增殖激活受体-γ激动剂-罗格列酮（RSG）对阿霉素（ADR）肾病大鼠肾脏的保护作用。方法通过一次性静脉注射盐酸阿霉素6mg／kg,制备肾病综合征模型大鼠。30只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组和罗格列酮治疗组（治疗组）。实验周期4周。免疫组化方法检测肾皮质过氧化物酶体增殖激活受体-γ（PPARγ）、转化生长因子（TCF-β1）的表达;检测血清生化指标及24h尿蛋白定量。结果模型组出现高脂血症、低蛋白血症及大量蛋白尿;治疗组血清总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）及24h尿蛋白水平与模型组相比,差异有统计学意义;肾组织病理损害明显减轻,PPARγ表达上调,TGF-β1表达下调。结论RSG对ADR肾病大鼠的肾脏有保护作用,其机制可能是通过上调PPARγ,下调TGF-β1发挥作用。     

转化生长因子β受体工及Smad4蛋白在肾癌中的表达及意义

目的：探讨转化生长因子β受体I（TGF-βRI）及Smad4在肾透明细胞癌（RCCC）及癌旁组织中的蛋白表达情况及临床意义。方法：采用免疫组织化学P—V法分别检测58例RCCC组织、36例癌旁组织中TGF—βRI和Smad4蛋白表达情况,并分析其表达水平与RCCC临床病理特征的关系。结果：①TGF—βRI蛋白在RC—CC、癌旁组织的阳性表达率分别为51．7％、80．6％,差异有统计学意义（P〈0．05）;Smad4蛋白在RCCC、癌旁组织的阳性表达率分别为56．9％、86．1％,差异有统计学意义（P〈0．05）。②TGF-βRI和Smad4蛋白在RCCC组织中的表达均与性别、年龄无关（P〉0．05）,而与肿瘤病理分级及临床分期相关（P〈0．05）。③TGF-βRI和Smad4蛋白表达呈正相关。结论：①TGF-βRI、Smad4在RCCC中的表达降低,提示TGF-βRI、Smad4的表达缺失可能参与了RCCC的发生、发展。②TGF—βRI与Smad4之间存在正相关,说明这两种因子在TGF—β信号通路中相互作用,共同参与了RCCC的发生、发展及转移。