衢州市2000-2009年肠出血性大肠埃希菌O157∶H7监测

目的了解浙江省衢州市肠出血性大肠埃希菌O157∶H7人的感染、食品污染以及动物和媒介昆虫带菌情况。方法在流行季节采集腹泻患者、动物粪便以及各类食品、苍蝇等样本,MEC肉汤增菌后,用特异性免疫磁珠集菌,以科玛嘉显色平板分离,纯化的菌株进行生化鉴定、血清分型及毒力基因检测。结果 2000-2009年,共检测样本12 292份,检出EHEC O157∶H7 19株,总检出率为0.15%。其中4种宿主动物粪便样本中检出18株,检出率分别为羊2.14%、牛1.29%、猪0.45%、鸭0.19%;食品中从生猪肉中检出1株,检出率0.17%;腹泻患者和苍蝇样本中均未检出。经毒力基因检测,其中16株stx2+hly+eaeA阳性,1株hly+eaeA阳性,其余2株不带毒力基因,带毒率89.47%。结论浙江省衢州市部分动物中产毒的EHEC O157∶H7带菌率较高,表明该地区存在暴发或流行的潜在危险,应加强综合监测。     

河南省新发传染病EHEC O157:H7监测研究

[目的]了解河南省肠出血性大肠杆菌(EHEC)感染性腹泻的发病情况、宿主带菌状况、食品污染程度及志贺毒素(stx)基因型,为制订有效的防治对策提供依据。[方法]采集河南省监测点腹泻病人、家畜、家禽粪便,水和肉食品等标本分离EHEC菌株,应用分子生物学技术检测分析菌株rfbO157、rfbO111、hlyA、eaeA、stx2和stx1等毒力基因和突变基因。[结果](1)从腹泻病人、家畜、家禽、食品、水、蜣螂和苍蝇中均分离出EHEC菌株共275株,总分离率7.88%;其中O157︰H7菌株为232株(84.36%),携带stx2基因EHECO157︰H7菌株88株(37.93%);非O157︰H7菌株43株(15.64%)。(2)宿主动物中羊带菌率最高(6.96%),是河南省EHEC最主要宿主动物;多重PCR检测出8种不同毒力基因组合型,主要为rfbO157 、hlyA 、eaeA 、stx2 组合。stx2变种毒素GK探针检测出3种毒素变种杂交带型,其中stx2原毒素 stx2vha型占7.4%,stx2vha型的占72.2%,未知新杂交带型占20.4%。(3)EHECO157︰H7菌株可分为9个PFGE型,自羊、牛、鸡和蜣螂和腹泻病患者中分离的携带stx2vha菌株同属一个PFGE型。(4)144株不携带志贺毒素的O157菌株中发现O157︰H38、O157︰H42和O157︰Hund(未确定型)新菌株。[结论]河南省家禽、家畜中普遍携带EHECO157︰H7大肠杆菌,羊是最主要的宿主动物;EHECO157︰H7为我省优势菌型,其毒素基因型为stx2-eaeA-hlyA并以stx2vha亚型为主。EHEC在外环境中污染严重并可在人与人、动物与人之间传播,家畜、家禽携带stx2 EHECO157︰H7率的高低与EHEC人群感染发病呈相关关系。     

武汉市大肠埃希菌O157:H7监测分析

肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157：H7是一种新型的致病性菌，能引起人类出血性腹泻和溶血性尿毒综合征。为了掌握武汉市肠出血性大肠埃希菌O157：H7在宿主动物、腹泻病人及食品中的带菌和菌株毒力基因情况，本文于2003年进行了肠出血性大肠埃希菌O157：H7宿主动物带菌情况调查。并在腹泻及肾衰患者中进行病原检索和食品监测。现将调查结果报道如下。     

江苏省1999年大肠埃希菌O157∶H7宿主动物带菌情况调查

目的　了解江苏省不同地区大肠埃希菌O15 7∶H7宿主动物带菌情况及其毒力基因阳性率。方法　在不同流行强度的地区分别设立监测点 ,采集猪、鸡、羊、牛等家畜家禽粪便标本 ,用免疫磁珠法进行病原菌分离培养 ,并用多重引物聚合酶链反应进行毒力基因分析。结果　 6个监测点共采集猪、鸡、羊、牛等家畜家禽粪便标本 176 7份 ,共检出大肠埃希菌O15 7∶H7170株 ,总带菌率为 9.6 2 %。其中 ,以牛、羊带菌率较高 ,分别为 19.0 5 %和 12 .0 1%。对 85株菌进行SLT1、SLT2、eaeA和hly 4种毒力基因的检测 ,5 6 .4 7%的菌株毒力基因阳性 ,且以同时带有SLT2、eaeA和hly 3种毒力基因最为常见 ,占带毒菌株的 79.17%。结论　宿主动物带菌率与当地疾病流行强度有关 ,即有确诊病人的地区宿主动物带菌率及菌株毒力基因阳性率最高 ,其次为仅有零星病例的地区 ,而无相关病例的地区最低。提示加强宿主动物大肠埃希菌O15 7∶H7监测 ,对疫情的分析和疫情预测具有重要意义     

江苏省1999年大肠埃希菌O157：H7宿主动物带菌情况调查

目的 了解江苏省不同地区大肠埃希菌O157：H7宿主动物带菌情况及其毒力基因阳性率。方法 在不同流行强度的地区分别设立监测点，采集猪、鸡，羊，牛等家畜家禽粪便标本，用免疫磁珠法进行病原菌分离培养，并用多重引物聚合酶链反应进行毒力基因分析。结果 6个监测点共采集猪、鸡、羊、牛等家禽粪便标本1767份，共检出大肠埃希菌O157：H7170株，总带菌率为9.62%。其中，以牛、羊带菌率较高，分别为19.05%和12.01%。对85株菌进行SLT1、SLT2、eaeA和hly4种毒力基因的检测，56.47%的菌株毒力基因阳性，且以同时带有SLT2、eaeA和hly3种毒力基因最为常见，占带毒菌株的79.17%。结论 宿 主动物带菌率与当地疾病流行强度有关，即有确诊病人的地区宿主动物带菌率及菌株毒力基因阳性率最高，其次为仅有零星病例的地区，而无相关病例的地区最低，提示加强宿主动物大朦胧怕埃希菌O157：H7监测，对疫情的分析和疫情预测具有重要意义。     

浙江省肠出血性大肠杆菌O_(157)∶H_7动物宿主带菌情况调查

目的了解浙江省肠出血性大肠杆菌O157∶H7在动物宿主中的带菌情况。方法采集浙江省2006-2008年监测点的动物粪便进行病原菌培养和毒力基因及耐药性检测。结果共采集动物粪便3915份,检出肠出血性大肠杆菌O157∶H7阳性20份,带菌率为0.51%,其中以羊和牛的带菌率最高,分别为1.46%和1.43%,散养动物带菌率高于圈养动物(χ2=5.771,P=0.016)。阳性菌株stx2、hly和eaeA3种毒力基因均呈阳性,stxl均呈阴性。对红霉素和利福平耐药,耐药率达90%以上,对其他受试抗生素敏感。结论浙江省动物宿主有一定的带菌率,且菌株具有毒力基因,散养动物的带菌率高于圈养动物,应进一步加强监测,防止O157∶H7引起人群的爆发流行。     

2000～2005年海盐县肠出血性O157:H7大肠埃希菌监测

目的：了解海盐县肠出血性O157：H7大肠埃希菌的分布及流行情况。方法：采取肠道门诊病人肛拭样和动物宿主粪便，采用免疫磁珠分离和大肠杆菌O157特异性单克隆抗体胶体金快速诊断技术以及特定培养基分离鉴定技术检测O157：H7大肠埃希菌。结果：从1例腹泻患者的大便中检了了1株O157：H7大肠埃希菌，不产生类志贺毒素；从动物粪便中检出7株O157大肠埃希菌。结论：海盐地区人群中感染率较低，且为非产毒株；猪、鸡是我地区O157：H7大肠埃希菌的主要贮存宿主动物。     

2012-2020年江苏省东台市大肠埃希菌O157:H7监测结果

目的 了解东台市肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7在不同来源标本(腹泻患者、食品、家畜、昆虫)中的分布情况，为EHEC O157:H7的防控提供科学依据。方法 采集东台市四个乡镇腹泻病人及动物的粪便、生熟肉制品和苍蝇进行病原菌分离培养、鉴定、毒力基因检测。结果 2012-2020年共采集各类标本6 129份，检出74株EHEC O157:H7，检出率为1.21%。其中四种动物粪便中共检出71株，牛羊猪鸡分别为35、27、7、2株，腹泻病人共检出3株，检出率分别为4.86%、3.66%、0.96%、0.27%、0.13%，牛羊带菌率最高。各年份检出率差异有统计学意义(χ²=120.013,P<0.01)。经毒力基因检测，stx2⁺eae A⁺hly⁺31株，eae A⁺hly⁺41株，另2株不带任何毒力基因，带毒率97.30%。四种毒力基因检出率差异有统计学意义(P<0.01)。结论 肠出血性大肠埃希菌O157:H7在东台市不同宿主动物...     

河南豫东地区产志贺样毒素E.coli O157:H7感染病例的流行病学调查研究

[目的]探讨河南省局部地区腹泻病人感染及携带大肠杆菌O157：H7的情况，观察带菌时间及预后。[方法]采用流行病学监测方法发现病人，通过病人粪便mEC肉汤增菌14h、胶体金免疫卡筛选、免疫磁珠法集菌、CHROMAGAR—O157：H7显色培养基分离、rfbO157、rfbO111、hlyA、stx1、stx2、eaeA引物PCR扩增方法进行毒力因子测定等方法，观察、研究感染病人的发病和预后。[结果]从1303份腹泻病人中共分离出的38株O157：H7菌株，检出率2．9％，PCR rfbO157扩增均为阳性。其中2株具有stx2、hlyA和eaeA毒力基因，36株为O157：H7不产毒株。[结论]我省首次从病人中分离出O157：H7产毒株，病人发病后可于第3～8d内检出病原体。     

岳麓区大肠埃希菌O157∶H7宿主动物带菌情况初步调查

目的 初步调查湖南省长沙市岳麓地区不同乡镇大肠埃希菌O157∶H7宿主动物带菌情况,为制定防治措施提供科学依据.方法 于2010年11月采集长沙市岳麓区境内散养的鸡、鸭、猪、牛等家畜家禽粪便标本33份,按国标常规培养法检测大肠埃希菌O157∶H7,并对数据进行统计分析.结果 33份标本中共检出阳性标本4份,总阳性率为12.1％ (4/33),其中散养的鸡的粪便中大肠埃希菌O157∶H7阳性检出率为13.6％ (3/22);在4份散养的鸭子粪便中,检出1份阳性.结论 长沙市岳麓地区已存在大肠埃希菌O157∶ H7感染,应引起足够重视.     

安阳市首次分离到产毒O157:H7菌株的PCR鉴定

目的:鉴定从生羊肉中分离到的大肠杆菌O157:H7菌株的毒性基因和rfbO157、flicH7特异性基因。方法:PCR技术同时检测大肠杆菌O157:H7的四种毒性基因和rfbO157、flicH7特异性基因。结果:可疑菌株含有鞭毛H7基因(fli-cH7),志贺毒素2(stx2)基因,溶血素基因(hlyA),肠上皮细胞纤毛清除素基因(eaeA)和O157:H7特异性基因(rfbO157),但不含有志贺毒素1(stx1)基因。结论:菌株为产志贺毒素大肠杆菌O157:H7血清型。     

福建省O157：H7大肠杆菌毒力及特征基因的初步研究

目的 对福建省分离的80株E.coli O157：H7菌株进行毒力及特征基因的检测分析。方法 应用聚合酶链反应（PCR），以志贺毒素基因（stx)，粘附抹平因子基因（eaeA)，溶血素基因（hlyA)，O157抗原编码基因(rfbO157)和H7抗原编码基因（fliCH7)为靶基因进行检测。结果 福建省分离的O157：H7菌株毒力基因携带率为6．25％（5／80）。菌株毒力基因图谱为stx eaeA hlyA和eaeA hlyA。rfb O157基因阳性与O157血清型符合率为100％。结论 福建省分离的O157：H7菌株毒力基因携带率（6．25％）低于江苏省疾病高发地区（85．7％，P＜0．05）。     

首次从病人中分离到产毒O157:H7菌株的多重PCR鉴定

目的 鉴定从病人粪便中分离到的大肠杆菌O157：H7菌株的毒素基因和rfbO157特异性基因。方法 多重PCR技术同时检测大肠杆菌O157：H7的四种毒素基因和O157特异性基因。结果 可疑菌株含有志贺氏毒素2（stx2)基因，溶血素基因（hlyA)，肠上皮细胞纤毛清除素基因（eaeA)和O157：H7特异性基因（rfbO157)，但不含有志贺氏毒素1（stx1)基因。结论 菌株为产志贺氏毒素大肠杆菌O157：H7血清型。     

分子生物学方法鉴定由自毙鼠分离的细菌

目的 对1株由自毙鼠分离的细菌（X175菌株）进行属、种及型的鉴定。方法 ①采用16S rDNA对X175菌株进行种属鉴定;②应用荧光PCR检测X175菌株是否存在致泻性大肠埃希菌常见毒素基因（stx1/stx2/eae、lt/st、aggR/ipaH）及大肠埃希菌O104、H4基因;③应用PCR检测X175菌株是否存在肠出血性大肠埃希菌（EHEC）O104∶H4的9个毒力基因。结果 ①经16S rDNA鉴定,X175菌株与大肠埃希菌埃希菌属的一些菌株相似度达99%,进化树显示X175菌株与大肠埃希菌O104∶H4菌株的亲缘关系较近;②大肠埃希菌O104基因和ipaH基因检测结果均为阳性,stx1/stx2/eae、lt/st、aggR、志贺菌/沙门菌、H4等基因检测结果均为阴性;③肠出血性大肠埃希菌O104∶H4九个毒力因子检测结果均为阴性。结论 X175菌株为大肠埃希菌O104弱毒型菌株,H抗原和其他一些特性还需进一步研究。     

12株疑似O157:H7大肠菌PCR鉴定研究

目的:对12株疑似O157:H7大肠菌采用PCR法进行鉴定。方法:利用单一PCR和多重聚合酶链反应(mPCR)检测不同来源菌株志贺样毒素(stx1和stx2)、溶血素(hly)、粘附抹平因子(eaeA)、β-葡糖醛酸糖苷酶(u idA)、O157抗原编码(rfbE)、H7鞭毛抗原编码(fliC)基因。结果:4株大肠菌rfbE和fliC基因检测为阳性,确认为EHEC O157:H7,其中1株菌株扩增出全部毒力基因,另3株菌株扩增出除stx1外其它全部毒力基因;2株大肠菌rfbE基因检测阳性,确认为O157:H7-大肠菌;其它均为非O157:H7其它大肠菌。结论:PCR技术的应用能对可疑O157:H7大肠菌进行有效鉴定与分析,应成为今后病原学鉴定的主要技术手段。     

应用多重引物PCR技术检测O157∶H7毒力基因

目的 对江苏省６个不同地区不同宿主动物中分离的Ｏ１５７：Ｈ７菌株进行毒力基因的检测分析。方法 应用肠出血性大肠杆菌（ＥＨＥＣ）的多重引物聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法,以志贺祥毒素（ＳＬＴ２和ＳＬＴ１）基因、“粘附抹平”因子ｅａｅＡ基因和溶血素（ｈｌｙ）基因为靶基因进行检测。结果 江苏省分离的Ｏ１５７：Ｈ７菌株毒力基因携带率为５６．５％,不同地区的分离株携带率有所不同,个别地区高达９０％以上,有的地区     

Comparison between human and animal isolates of Shiga toxin-producing Escherichia coli O157 from Australia

There is very little human disease associated with enterohaemorrhagic Escherichia coli O157 in Australia even though these organisms are present in the animal population. A group of Australian isolates of E. coli O157:H7 and O157:H- from human and animal sources were tested for the presence of virulence markers and compared by XbaI DNA macrorestriction analysis using pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Each of 102 isolates tested contained the gene eae which encodes the E. coli attaching and effacing factor and all but one carried the enterohaemolysin gene, ehxA, found on the EHEC plasmid. The most common Shiga toxin gene carried was stx2c, either alone (16%) or in combination with stx1 (74%) or stx2 (3%). PFGE grouped the isolates based on H serotype and some clusters were source specific. Australian E. coli O157:H7 and H- isolates from human, animal and meat sources carry all the virulence markers associated with EHEC disease in humans therefore other factors must be responsible for the low rates of human infection in Australia.     

A long-term study on the prevalence of shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) on four German cattle farms

The occurrence of Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) was studied on four cattle farms. STEC were detected in 29-82% of the cattle. STEC with additional EHEC markers were detected on all farms. The occurrence of the complete virulence marker pattern (stx1 and/or stx2, eae, EHEC(hlyA), katP, espP) was correlated with the presence of known STEC serotypes. STEC O26:H11 and O165:H25 with the complete pattern of virulence markers were the most prevalent. STEC O157 (H7/H-) STEC O103:H2 and STEC O145:H- were found sporadically. Five clonal subgroups of the STEC O26:H11 isolates were identified by pulsed-field gel electrophoresis. STEC O26:H11 were present in three groups of cattle. This serotype was detected in a single group over the entire fattening period. Most STEC O26:H11 with the complete pattern of potential virulence markers were found in clinically healthy cattle. These animals may represent a risk factor for farmers and consumers.