人参皂甙对老龄大鼠下丘脑超微结构改变的影响

本实验在电镜下观察了老龄大鼠下丘脑弓状核（ＡｒｃｕａｔｅＮｕｃｌｅｕｓ，ＡＲＮ），视上核（ＳｕｐｒａｏｐｔｉｃＮｕｃｌｅｕｓ，ＳＯＮ），室旁核（ＰａｒａｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒＮｕｃｌｅｕｓ，ＰＶＮ）的改变及人参皂甙对其的影响。结果表明：老龄大鼠ＡＲＮ，ＰＶＮ，ＳＯＮ神经元脂褐素面积比青年组增多１０倍（Ｐ＜０．０１），而给药组脂褐素面积比老龄组减少５０％（Ｐ＜０．０１）．老龄组变性线粒体在ＡＲＮ、ＳＯＮ、ＰＶＮ分别为２７．２％、２８．９％、２９％；而给药组则分别为６．８％、７．２％、８．１％。同时还发现老龄组神经元内有各种细胞器变性及膜性结构的存在，而给药组这些改变都明显比老龄组有所减轻。实验证明人参皂甙确实能明显地延缓神经细胞衰老，并提示它具有稳定神经细胞生物膜系统的作用。     

大鼠嗅球成鞘细胞的分离、培养与鉴定

目的：探讨大鼠嗅球成鞘细胞（Olfactory cnsheating cells,OECs）分离与培养的方法。方法：无菌条件下嗅球置于少量人工脑脊液中，用眼科镊子直接将嗅球撕烂、挤压，得片状组织块，胰酶消化，吹打，细胞悬液进行培养。结果：本方法分离、培养的OECs具有双极或多极突起，且突起十分细长，神经生长因子受体和胶质纤维酸性蛋白免疫组化呈阳性。结论：该方法简便易行，为深入研究OECs神经生物学特性、阐明促进中枢神经元轴突生长的作用机制打下基础。     

川芎嗪对大鼠癫痫放电神经元超微结构的影响

目的：研究川芎嗪(TMP)对大鼠癫痫放电时其大脑神经元超微结构的变化。方法：通过青霉素致癫大鼠模型，采用BL-410生物机能实验系统记录腹腔注射不同剂量川芎嗪对双侧大脑皮层癫痫放电，观察川芎嗪对癫痫放电频率的影响，并用透射电镜观察大脑皮层神经元超微结构的变化。结果：川芎嗪可使大鼠癫痫放电频率减慢，并且随着频率的减慢，大脑皮层神经元超微结构形态也恢复正常。结论：川芎嗪能明显押制大鼠癫痫放电，并使神经元内的细胞器结构恢复正常。     

新生大鼠嗅球嗅鞘细胞的纯化方法研究

目的 探讨新生大鼠嗅球嗅鞘细胞（OECs）的体外培养和纯化方法，为研究脊髓损伤后神经再生获得丰富OECs来源奠定基础。方法 用原代培养的方法分离、培养新生大鼠嗅球OECs，比较p75抗体吸附、阿糖胞苷抑制、差速贴壁三种方法的纯化效果，根据GFAP免疫细胞化学染色结果统计所得OECs的纯度，同时在相差显微镜下对不同培养时期的OECs的形态进行观察。结果 体外培养的新生大鼠嗅球OECs主要为双极或三级细胞，其突起细长。未经纯化的OECs则成纤维细胞生长迅速而占优势，三种纯化方法均能使接种14d后的OECs纯度均值大于75％。p75抗体吸附法和阿糖胞苷抑制法的纯化率均值略高于差速贴壁法。结论 新生大鼠嗅球OECS的原代培养中细胞纯化是必要的；在脊髓损伤再生研究中，较之p75抗体吸附法和阿糖胞苷抑制法，差速贴壁法是一种简单、经济、实用的OECs纯化方法。     

单宁酸-氯化铁媒染法显示大鼠嗅球微血管构筑

目的：光镜下观察大鼠嗅球微血管构筑及其形态结构。方法：应用单宁酸—氯化铁媒染法(TA—Fe法)显示嗅球微血管。结果：嗅球内微动脉系呈树状分支，大致分为三层血管网；毛细血管网的网眼形状、大小不一；第一层和第六层血管较稀疏，中间四层血管密度高。结论：TA—Fe法可清晰地显示嗅球微血管，神经元集中的部位血管亦密集。     

衰老大鼠嗅球神经细胞线粒体的改变与嗅觉障碍的关系初探

目的：探讨衰老大鼠嗅球内神经细胞线粒体的改变与嗅觉障碍的关系。方法：选用年老大鼠和年轻大鼠灌流固定,取嗅球,制备超薄切片电镜下对比观察。结果：衰老大鼠神经元的嗅球在分层上无明显改变,其嗅球线粒体超微结构发生了变化,线粒体嵴断裂分解成细粒状,形成了电子密度较高的固缩小本或同心圆形的髓鞘样小体。结论：嗅球线粒体超微结构改变可能是导致年老大鼠嗅觉障碍的原因之一。     

乳鼠嗅球及皮层神经元的原代培养和Netrin-4 受体在神经元定位的初步研究

目的培养原代嗅球及皮层神经元细胞,研究神经轴突生长诱向因子(Netrin-4)受体在神经元细胞中的定位.方法改良Koh法分离、培养出生12 h内Wistar乳鼠的嗅球及皮层神经元,采用免疫细胞化学方法鉴定其纯度.碱性磷酸酶(AP)标记的Netrin-4融合蛋白与原代培养第7 d的神经元孵育,以亲和细胞化学法检测Netrin-4受体在神经元的定位.结果原代培养第7 d的嗅球及皮层神经元胞体饱满,突起长并交织成网状;免疫细胞化学染色见神经丝蛋白(neurofilament)在神经元胞体及突起中表达;嗅球及皮层神经元的细胞膜上均有Netrin-4受体表达.结论建立起高效、稳定的原代神经元培养方法并应用于神经突起生长诱向因子受体的定位研究.     

慢性鼻炎大鼠嗅黏膜的病理及超微结构变化

目的研究慢性鼻炎大鼠嗅黏膜超微结构变化。方法用透射电子显微镜对慢性鼻炎组和对照组大鼠的嗅黏膜进行形态学观察。结果慢性鼻炎组大鼠部分嗅黏膜上皮中支持细胞核呈现椭圆形,其内染色质团块状凝聚、边集,胞质密度下降;嗅细胞表面的纤毛减少、脱落,脱落的纤毛分散于细胞间;细胞表面的微绒毛减少或消失,部分细胞核膜缺损,表现出细胞凋亡的形态学改变;细胞间有炎症细胞浸润;基底膜裸露,细胞排列紊乱。结论慢性鼻炎大鼠嗅黏膜可出现由表及里的超微结构变化。     

大鼠嗅黏膜和嗅球嗅鞘细胞体外分离培养比较

目的:比较大鼠嗅黏膜(olfactory mucosa,OM)和嗅球(olfactory bulb,OB)的嗅鞘细胞(olfactory ensheathingcells,OECs)在体外分离培养中增殖和分化以及生物学特性的差异。方法:取SD大鼠OM和OB用差速贴壁法在体外分离培养OECs,扫描电镜观察两组OECs的形态,并用S-100和p75NGFR免疫荧光抗体双标记检测两组OECs在体外增殖和分化的情况。结果:扫描电镜观察到OM OECs以双极样为主;OB OECs有双极样、三极样和扁圆形3种形态,其中以双极样为主。免疫荧光双标结果显示:OM和OB组均有较多的S-100和p75NGFR双标阳性细胞,OM OECs胞体多为梭形,突起细长;OB OECs的形态多样,有双极样、三极样和扁圆形,胞体呈长梭形、圆形或三角形。两组OECs胞体面积和细胞周长相比较差异均无统计学意义。结论:OM OECs与OB OECs一样都能在体外分离培养与增殖。OM OECs与OB OECs分化成熟后的细胞无明显差异。     

大鼠嗅球发育过程中的凋亡与增殖

目的:探讨大鼠嗅球发育过程中细胞凋亡和增殖的变化规律.方法:胚胎14 d,新生1 d (postnatal day, P1),P20及成年大鼠各10只,取嗅球以40 g/L多聚甲醛固定,石蜡包埋,连续切片. 采用TUNEL和免疫荧光染色方法检测大鼠嗅球中凋亡细胞和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)免疫反应阳性细胞的分布. 结果: 在胚胎14 d和P1大鼠嗅球中,凋亡细胞广泛分布而PCNA免疫反应阳性细胞主要分布在室管膜周围区域,凋亡细胞和PCNA免疫反应阳性细胞在P20和成年大鼠嗅球中主要分布在小球层和颗粒细胞层. 嗅球中的凋亡细胞和增殖细胞随龄逐渐减少,差异有显著性意义.结论:大鼠从胚胎到成体嗅球细胞凋亡和增殖逐渐减少.     

大鼠嗅球的部分传入纤维联系──WGA－HRP和HRP法研究

采用ＷＧＡ－ＨＲＰ和ＨＲＰ法对１４只大鼠脑内某些结构向嗅球的投射进行逆行追踪。结果表明，蓝斑、梨状皮质、皮质杏仁核、肉侧杏仁核及嗅结节内侧部发出较多的纤维投射到嗅球；中缝背核、中央灰质腹外侧部及中缝正中核有少量细胞发出纤维到嗅球；偶见中间线形核和尾侧线形核有很少量的细胞发出纤维投射到嗅球。     

大鼠嗅球的部分传入纤维联系──WGA－HRP和HRP法研究

采用ＷＧＡ－ＨＲＰ和ＨＲＰ法对１４只大鼠脑内某些结构向嗅球的投射进行逆行追踪。结果表明，蓝斑、梨状皮质、皮质杏仁核、肉侧杏仁核及嗅结节内侧部发出较多的纤维投射到嗅球；中缝背核、中央灰质腹外侧部及中缝正中核有少量细胞发出纤维到嗅球；偶见中间线形核和尾侧线形核有很少量的细胞发出纤维投射到嗅球。     

大鼠嗅球的纤维联系

应用HRP(辣根过氧化物酶)法对大鼠嗅球的纤维联系进行了研究。结果表明:嗅球纤维不仅投射至基底嗅区,还至下丘脑外侧区、视前区和内梨状核。此外,还有更广泛的脑区发出纤维直接终止于嗅球。这些区域涉及前脑,间脑和脑干,其中某些核团与嗅球有往返的纤维联系,构成反馈环路。为解释由嗅刺激引起的一系列行为、情绪和内脏反射提供了形态学基础,也阐明了边缘系统-中脑环路与嗅球的密切关系。     

脑组织创伤后神经元及神经胶质细胞的超微结构变化

目的：观察创伤脑组织神经元和神经胶质细胞超微结构改变，间接了解脑组织受损后恢复情况。方法：常规电镜样品包埋，选区，超薄切片，透射电镜观察。结果：多数神经元核不规则，核膜断续，核仁常伯位；线粒体肿胀、嵴断裂，粗面内质网扩张；糖原增多；神经胶质细胞核异染色质增多；线粒体空泡化，胶质丝密集成束，或排列成旋涡状。结论：损伤1小时之内的脑组织细胞有恢复的可能。     

大白鼠嗅球传入纤维联系的实验性研究：辣根过氧化物酶逆行标记法

用辣根过氧化物酶(HRP)逆行标记技术,探索大白鼠嗅球传入纤维的起源.直视下将HRP注入大鼠一侧嗅球后,可在嗅前核、梨状皮质、屏状核、视前大细胞核、斜角带核、伏隔核、中缝背核和中央上核内观察到HRP逆行标记细胞.     

不同剂量组RU486对大鼠内分泌腺亚显微结构的影响*

目的：电镜下观察不同时间、不同超剂量组RU486对大鼠内分泌腺细胞亚显微结构影响，从形态学方面探索RU486避孕机制。方法：给大鼠灌服不同剂量RU486，于不同时间取垂体、甲状腺、肾上腺、电镜制样、观察。结果：实验各组垂体促性腺激素细胞、促肾上腺皮质激素细胞粗面内质网（RER）、线粒体（Mi)、高尔基体（Go)均减少，溶酶体（Ly) 略增多，分泌颗粒变化不明显；肾上腺糖皮质激素细胞Ly增多增大，巨噬细胞中出现巨大残余体，随用药时间延长，上述三种细胞超微病理改变有加重趋势。垂体和肾上腺其它细胞、甲状腺细胞亚微结构与对照组无明显差别。结论：无论用药时间长短，剂量大小，RU486均可以影响促性腺激素细胞、促肾上腺皮质激素细胞和糖皮质激素细胞的细胞器正常代谢及分泌功能。     

毒素清对肺炎双球菌肺炎老龄大鼠急性反应相蛋白的作用

目的 :从急性反应相蛋白 (AP)方面研究毒素清对肺炎老龄大鼠组织损伤的防护机制 ,为其防治老龄肺炎提供依据。方法 :老龄大鼠 (2 0～ 2 2月龄 )分为正常组、模型组、毒素清高剂量组、毒素清低剂量组织和头孢氨苄组。以肺脏病理和外周白细胞数量改变做对照 ,观察血清C -反应蛋白 (CRP)和铜蓝蛋白 (CP)含量。结果 :模型组血清CRP和CP含量高于正常组。毒素清高剂量组和头孢氨苄组血清CRP与CP含量低于模型组 ,毒素清低剂量组和模型组CRP与CP含量无明显差异。结论 :肺炎双球菌肺炎老龄大鼠肺组织损伤的病理机制与CRP和CP有关。毒素清能有效降低CRP和CP含量以保护肺组织以免损伤。     

大鼠脊髓T3节段全横断后损伤节段神经元超微结构的观察

目的：观察大鼠脊髓T3节段全横断后损伤节段神经元超微结构的变化。方法：48只大鼠随机分为假手术组和脊髓T3完全横断损伤1d组、2d组、7d组、14d组、21d组,每组8只。各组大鼠BBB运动功能评分后取损伤节段脊髓,透射电镜观察脊髓神经元超微结构的变化。结果：脊髓损伤（SCI）各组大鼠的BBB评分明显低于假手术组（P ＜0.01）;随着损伤时间的延长,SCI各组大鼠的BBB评分逐渐升高（P ＜0.01）。电镜下观察,大鼠脊髓神经元在损伤后2d病理变化最为严重,表现为神经元明显肿胀,线粒体等细胞器严重受损,核固缩,染色质凝集;损伤后7d时,脊髓神经元的病理变化有所减轻;损伤后21d,脊髓神经元的病理变化明显减轻,甚至接近正常。结论：大鼠脊髓损伤后2d脊髓神经元的病理变化最为严重,后逐渐减轻。