粉防己碱松弛离体新西兰白兔阴茎海绵体作用的研究

目的 :探讨粉防己碱 (Tet)对离体新西兰白兔阴茎海绵体的松弛作用。　方法 :采用离体新西兰白兔阴茎海绵体肌条张力记录法 ,观察Tet对氯化钾 (KCl)和去氧肾上腺素 (PE)诱导收缩的阴茎海绵体肌条的松弛作用 ;L 硝基精氨酸 (L NNA)和亚甲蓝处理后 ,Tet对PE诱导收缩的阴茎海绵体肌条松弛的作用。　结果 :10 μmol/L及3 0 μmol/L的Tet使KCl诱导的最大收缩反应分别降低为 ( 73 .0± 3 .8) %和 ( 41.5± 3 .4) % ,降低程度与Tet的浓度呈正比 (P <0 .0 1)。Tet对 10 μmol/LPE诱导的肌条收缩具有浓度依赖性松弛作用 ,1、10、3 0、10 0 μmol/L的Tet对PE诱导的阴茎海绵体肌条收缩的松弛效应分别为 ( 6.0± 1.4) %、( 2 1.3± 2 .2 ) %、( 47.4± 3 .3 ) %和 ( 68.1±3 .6) % (P <0 .0 1) ;而L NNA及亚甲蓝对Tet的松弛作用没有影响 (P >0 .0 5 )。　结论 :Tet能浓度依耐性地松弛离体新西兰白兔阴茎海绵体 ,其作用机制可能是通过阻滞钙通道 ,而与一氧化氮 环鸟苷酸 (NO cGMP)通路无关     

高脂及糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体中eNOS和ET-1蛋白表达的研究

目的探讨高脂及糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和内皮素-1(ET-1)蛋白表达的变化及其可能的机制。方法 58只SPF级雄性SD大鼠随机分成3组:(1)对照组(n=14),普通饲料喂养;(2)高脂组(n=15),高脂饲料喂养24周后在原饲料配方中加入含0.2%硫氧嘧啶继续喂养;(3)糖尿病组(n=29),高脂饲料喂养24周后腹腔注射20mg/kg STZ;于实验开始后36周末,检测大鼠血糖、血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、胰岛素水平;成模后用阿朴吗啡诱导并观察大鼠阴茎勃起功能变化;采用Western blot检测大鼠阴茎海绵体组织eNOS和ET-1蛋白表达。结果血糖、胰岛素、血脂检测结果显示成功建立了高脂和糖尿病模型。与对照组相比,高脂及糖尿病组大鼠勃起功能明显下降,eNOS蛋白表达显著降低,而ET-1显著升高(P0.05);与高脂组相比,糖尿病组eNOS与ET-1表达进一步失衡,且阴茎勃起功能障碍较高脂组加重。结论糖尿病和高脂血症导致勃起功能障碍的发病机制可能与阴茎海绵体组织内eNOS和ET-1表达失衡密切相关。     

HHcy ED大鼠血浆内Hcy的含量对阴茎海绵体CO/HO-2影响的研究

目的:研究高同型半胱氨酸血症(HHcy)勃起功能障碍大鼠体内一氧化碳/血红素加氧酶2(CO/HO-2)体系的变化。方法:雄性4周龄Wistar大鼠40只,体重280～310 g,正常喂养1周后,随机分为正常对照组(A组,10只),余30只给予3%蛋氨酸饲料4周后,测定尾静脉血Hcy,将Hcy>16.0μmol/L的大鼠确定为HHcy,由此确定造模成功。将模型组随机均分为B组(HHcy大鼠模型组,继续给予3%蛋氨酸饲料喂养),C组(HHcy盐酸甜菜碱治疗组,每天继续给予3%蛋氨酸饲料喂养,下午定时给予60 mg/kg甜菜碱,0.3 ml生理盐水溶液灌胃)和D组[每日给与锌卟啉IX腹腔内注射45μmol/(kg.d)],4周后处死大鼠提取标本血检测Hcy含量、阴茎海绵体中Hcy的含量及阴茎组织CO测定。分别于4周和8周2个时间点进行阿朴吗啡实验。结果:比较4组大鼠血浆Hcy浓度、阴茎勃起次数、阴茎海绵体组织CO浓度及阴茎组织血管中HO-2阳性细胞数量的检测结果,与A组[(12.55±0.82)μmol/L、(1.88±0.05)次、(10.55±1.73)μmol/L、6 059±1 257]比较,B组[(25.01±0.94)μmol/L、(0.70±0.05)次、(9.51±1.52)μmol/L、2 595±514]血浆中Hcy水平显著上升(P<0.05),阴茎勃起次数、CO的含量与HO-2阳性细胞均下降(P<0.05或P<0.01),并且Hcy与阴茎勃起次数呈负相关性(P<0.01);C组[(14.37±0.47)μmol/L、(1.18±0.08)次、(10.36±1.56)μmol/L、6 295±1 156]与B组比较,阴茎海绵体内Hcy含量下降,而CO与HO-2含量明显升高,阴茎勃起次数明显升高,有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:阴茎海绵体中的CO含量及阴茎海绵体HO-2表达减低可能是导致HHcy大鼠勃起功能障碍的原因之一。甜菜碱降低血浆Hcy浓度,增加阴茎海绵体中CO含量,是治疗HHcy勃起功能障碍的机制之一。     

高含量胆固醇诱导动脉粥样硬化性阴茎勃起功能障碍动物模型的建立及机制探讨

目的 :采用高含量胆固醇建立动脉粥样硬化性阴茎勃起功能障碍 (ED)动物模型并探讨其诱发ED机制。　方法 :30只雄性新西兰大白兔 ,随机分为 2组 :普通饲料 (ND)组 1 0只 ,喂以普通饲料 ;高胆固醇组 2 0只 ,喂以含 1 .5 %胆固醇的饲料。处理 1 2周后观测血脂水平、升主动脉斑块和阴茎勃起情况 ,测定阴部内动脉内膜 /中膜厚度比值 ,以及RT PCR法检测阴部内动脉中血管细胞粘附分子 (VCAM 1 )mRNA表达水平。　结果 :实验过程中共有 5只新西兰大白兔死亡 ,高胆固醇组 3只 ,对照组 2只。喂饲含 1 .5 %胆固醇饲料的新西兰大白兔 1 2周后均出现高脂血症 ,其中 9只发生典型的动脉粥样硬化 (为ATH组 ) ,动脉粥样硬化诱导成功率为 5 2 .9%。ATH组和HCH组 (喂饲高胆固醇但未发生典型动脉粥样硬化者 )TC、TG、AI均显著高于ND组 (P <0 .0 1 )。ATH和HCH组新西兰大白兔阴茎勃起率及阴茎勃起次数均明显降低 ,其中尤以ATH组降低更显著 (P <0 .0 1 )。ATH组阴部内动脉内膜 /中膜厚度比值和VCAM 1mRNA表达水平显著高于HCH和ND组 (P <0 .0 1 )。　结论 :采用高含量胆固醇喂饲新西兰大白兔建立ED动物模型较为简便、可行可靠。高胆固醇血症可能通过VCAM 1损害动脉内皮细胞功能 ,造成动脉内膜增厚、管腔狭窄等所致的阴茎供血不足     

阴茎海绵体内注射川芎嗪对兔阴茎勃起效应的影响

目的 观察阴茎海绵体内注射川芎嗪对兔阴茎勃起效应的影响.方法 12只成年雄性新西兰大白兔,静脉麻醉后游离一侧颈总动脉和阴茎海绵体,颈总动脉插管与电生理记录仪连接监测平均动脉压(MBp),阴茎海绵体内置入25 G针头与电生理记录仪连接用于测定阴茎海绵体内压(ICP).通过在兔阴茎海绵体内注射不同剂量(0.5～5.0 mg/kg)川芎嗪和等体积生理盐水,分别记录ICP变化(ICP)、阴茎膨胀持续时间(DT)和MBp的变化.结果 阴茎海绵体内分别注射不同剂量的川芎嗪(0.5、1.0、2.0、5.0 mg/kg),ICP分别由基线增加至(19.1±3.7)、(24.8±2.1)、(30.2±4.8)、(39.7±6.1)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa), ICP为6.5～25.8 mm Hg,最大ICP为(25.8±5.9)mm Hg,DT为(8.5±2.8)～(22.9±7.3)min.阴茎海绵体内注射川芎嗪呈剂最依赖性提高ICP(P<0.05),对MBp没有显著影响(P>0.05).结论 川芎嗪呈剂量-效应依赖性地增强兔阴茎勃起效应.     

电刺激阴茎背神经和海绵体内注射药物诱导大鼠阴茎海绵体内压反应

目的:评价阴茎海绵体内压(ICP)监测在电刺激阴茎背神经和海绵体内注射罂粟碱诱导大鼠阴茎勃起反应中的应用。方法:选取性成熟雄性SD大鼠8只,20%氨基甲酸己酯(1000mg/kg)腹腔注射麻醉下,暴露阴茎并解剖阴茎背神经(DN),将充满肝素盐水并连接于压力传感器的25G针头插入一侧海绵体,取另一30G头皮针插入对侧海绵体,分别用于测定ICP和注射血管活性药物。分别以电刺激海绵体神经(刺激参数:电压4V,波幅0.5ms,频率16Hz,持续20s)和海绵体内注射罂粟碱(0.4mg)诱发阴茎勃起,采用SMUPPC型生物信号处理系统记录ICP变化。结果:麻醉大鼠的ICP基线水平为(12.3±3.1)mmHg(1mmHg=0.133kPa),DN电刺激后约30～60sICP明显升高[(36.4±2.3)mmHg,P<0.05],电刺激结束后缓慢下降至基线水平。海绵体内注射罂粟碱后5～8min可诱发ICP明显升高[(28.4±6.1)mmHg,P<0.05]。结论:监测电刺激大鼠DN及海绵体内药物注射诱发的ICP,为阴茎勃起这一复杂神经血管活动的动物模型在体实验研究提供了一种客观准确的科学工具,对于进一步研究阴茎勃起生理和勃起功能障碍的发病机制,评价治疗勃起功能障碍新疗法的疗效等具有重要意义。     

6种中药提取物对离体新西兰白兔阴茎海绵体的松弛作用

目的:比较6种中药提取物(甲基莲心碱、粉防己碱、葛根素、灯盏花乙素、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1)松弛离体新西兰白兔阴茎海绵体的作用。方法:采用离体新西兰白兔阴茎海绵体肌条张力记录法,观察6种中药提取物对去氧肾上腺素(PE)诱导收缩的阴茎海绵体肌条的松弛作用。结果:在(10-8~10-3)mol/L,甲基莲心碱、粉防己碱、葛根素和灯盏花乙素对PE诱导收缩的肌条具有浓度依赖性松弛作用,其IC50分别为4.60×10-6、3.73×10-5、8.03×10-4和3.33×10-3mol/L。而人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1对PE诱导收缩的肌条松弛作用较弱,终浓度为10-3mol/L时,仅分别松弛(16.32±13.36)%和(11.21±7.59)%。结论:6种中药提取物对离体新西兰白兔阴茎海绵体的松弛作用,甲基莲心碱最强。     

美蓝抑制侧脑室注射催产素诱发阴茎勃起的实验研究

为阐明阴茎勃起的中枢性机制 ,对 2 0例雄兔进行实验研究显示 :兔基础阴茎海绵体压 (2 .5± 1.8)mmHg ,经侧脑室内注射催产素 5 μg及 10 μg ,可诱发周期性有节律的阴茎海绵体内压升高 ,最高阴茎海绵体平均压分别为 (4 .5± 3.5 )mmHg及 (31± 10 )mmHg。海绵体注射美蓝可抑制催产素的中枢勃起效应 ,间接表明NO仍是阴茎勃起机制中的最重要的神经递质     

高脂对兔阴茎海绵体平滑肌细胞含量及结构的影响

目的 观察高脂诱导血管性ED家兔阴茎海绵体平滑肌细胞(smooth muscle cell, SMC)含量变化以及海绵体组织超微结构的改变情况.方法 8只性成熟雄性新西兰家兔随机分两组,每组各4只.对照组喂以正常饮食,模型组采用高脂、高胆固醇饮食结合球囊导管扩张双侧髂内动脉法建立血管性ED模型.第8周时切取阴茎海绵体组织,HE及特殊染色处理后在光镜、透射电镜下观察,计算机辅助彩色图像分析平滑肌及胶原构成百分比.RT-PCR法研究Caspase-3 mRNA的表达情况,免疫荧光法检测Caspase-3活性.结果 计算机分析表明模型组海绵体SMC含量较对照组明显减少(22.66±10.97)% vs (46.72±7.30)%,P<0.01.光镜和电镜下所见两组阴茎海绵体组织的超微结构呈显著差异.主要表现为模型组白膜结构改变,海绵体SMC明显减少,胶原成分增多.内皮细胞及SMC内存在脂质囊泡,线粒体、内质网等细胞器出现损伤,SMC凋亡小体明显增多.模型组的Caspase-3 mRNA.表达和活性值均显著高于对照组mRNA:(0.77+0.01) vs (0.68±0.01),P<0.01;活性值:(0.04±0.00) vs (0.02±0.00),P<0.05.结论 高脂、高胆固醇饮食可严重影响阴茎海绵体组织结构,主要表现为海绵体组织中SMC成分减少、胶原增加,使阴茎海绵体发生纤维化,这可能是高脂导致ED的重要原因之一.     

血管性勃起功能障碍动物模型的建立

目的探索建立血管性勃起功能障碍(ED)动物模型。方法雄性新西兰大白兔给予胆固醇及高脂饮食,同时用球囊导管损伤双侧髂内动脉内皮。测定术后4周、8周血脂并观察阴茎勃起情况、交配情况,同时用阴茎海绵体注射盐酸罂粟碱、阴茎血管双核素检查、髂内动脉数字减影造影(DSA)等方法研究勃起功能。结果与对照组相比,术后4周、8周模型组动物出现明显高脂血症,勃起程度明显下降,交配实验的各项观察指标均显著降低(P＜0.01),动脉造影显示双侧髂内动脉管腔直径明显缩小,双核素检查动脉显像指数(PIA)及静脉显像指数(PIV)明显降低,但第4周的模型组与对照组PIV结果没有统计学差异(P＞0.05)。结论高脂、高胆固醇饮食同时用球囊导管扩张动物髂内动脉,可以加速模型的形成,从而用于血管性ED的进一步研究。