微小残留病的实验诊断

微小残留病的实验诊断江西省赛湖农场医院（江西瑞昌３３２２０３）李浩烽综述江西省儿童医院李宗浩审校微小残留病（ＭｉｎｉｍａｌＲｅｓｉｄｕａｌＤｉｓｅａｓｅ，ＭＲＤ）是指白血病或肿瘤经强烈化疗或骨髓移植（ＢＭＴ）后已无临床症状，一般常规细胞形态学，遗传学...     

用于检测残留白血病细胞的基因标志

用于检测残留白血病细胞的基因标志四川省卫生管理干部学院（成都６１００４１）陶元鋆残留白血病细胞或称白血病微小残留病（ＭＲＤ），是指白血病经化疗或骨髓移植后达完全缓解（ＣＲ），骨髓中原始细胞已≤５％，但仍在体内残留的用传统方法检测不到的微量白血病细胞（...     

Wilms瘤基因WT1表达与急性白血病微小残留病的检测

近年来发现急性髓性白血病（ＡＭＬ）有Ｗｉｌｍｓ瘤抑制基因ＷＴ１的异常表达，且表达水平与预后呈负相关，提示其可作为一种新的白血病标志。为探讨ＷＴ１能否作为急性白血病微小残留病（ｍｉｎｉｍａｌ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｄｉｓｅａｓｅ，ＭＲＤ）的标志，我们采用巢式逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）测定了ＷＴ１基因的灵敏度，并与肿瘤特异性标志基因进行比较。所有样本ＲＮＡ的质量均用内对照ｃ－ａｂｌ基因证实。以两轮     

急淋白血病中基因重排,缺失与突变及其用PCR检测时的引物设计

白血病复发根源是微小残留病，近年来ＰＣＲ技术已用地白血病微小残留病的检测这是目前最为敏感的检测方法，本文综述了急性淋巴细胞白血清中可作为肿瘤特异性基因标志的染色体异常和基因突变，以及微小残留病ＰＣＲ检测时扩增引物的设计方法。     

半巢式PCR检测淋巴细胞白血病微小残留病

半巢式ＰＣＲ检测淋巴细胞白血病微小残留病徐兵，周淑芸，孙竞免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排可作为Ｂ－淋巴细胞白血病的克隆标志，一次ＰＣＲ方法检测ＩｇＨ重排敏感性可达１０￣（－４）～１０￣（－５）水平，我们采用更灵敏的半巢式多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测了...     

用聚合酶链反应检测急性非淋巴细胞白血病微量残留细胞

目的：探讨用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测急性非淋巴细胞白血病微小残留病的意义。方法：利用ＰＣＲ扩增降钙素（ＣＴ）基因５′端第４个甲基化位点附近的ＤＮＡ序列，所有样本ＤＮＡ在做ＰＣＲ前用过量的限制性内切酶消化，检测２５例初治或复发的急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ），１０例完全缓解期患者。细胞系ＨＬ－６０作阳性对照，正常对照组１０例。结果：２５例ＡＮＬＬ中，１７例阳性（６４％），１０例缓解期骨髓标本，４例可检测到残留的白血病克隆，有１例在复发前２个月出现持续的残留白血病克隆。结论：用ＰＣＲ方法检测ＣＴ基因甲基化是非常有潜力的检测ＡＮＬＬＭＲＤ的方法，对预测复发有重要临床意义。     

双温PCR法检测淋巴细胞白血病微小残留病

免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）重排可作为Ｂ淋巴系肿瘤的基因标志，应用ＰＣＲ方法检测此重排可进行淋巴细胞白血病微小残留病（ＭＲＤ）的研究。我们通过基因释放剂提取ＤＮＡ及双温ＰＣＲ循环，建立一种快速可靠ＰＣＲ方法检测３８例淋巴细胞白血病ＩｇＨ重排基因，２８／３８（７３．７％）阳性，敏感度为１０￣（－４）～１０￣（－５）水平。此方法简便、快捷且成本低，更适于临床检测实际需要。     

定量PCR方法检测儿童ALL微小残留病

为深入研究儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）微小残留病（ＭＲＤ）的生物学特性及病程中ＭＲＤ的动力学变化，有必要对体内ＭＲＤ水平进行定量。本文拟就国外近年来定量ＰＣＲ方法检测儿童ＡＬＬ ＭＲＤ的研究进展作一简介，主要对各种方法的原理，特点及定量ＭＲＤ检测的临床意义予以综述。     

定量不对称PCR－SSCP检测携带N－ras基因点突变的微量残留白血病细胞

定量不对称ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测携带Ｎ－ｒａｓ基因点突变的微量残留白血病细胞蔡辉国，陈佩贞，张立冬，马双，王立，杨天楹我们采用多聚酶链反应－单链ＤＮＡ构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析检测携带Ｎ－ｒａｓ基因点突变的微量残留白血病细胞（ＭＲＬＣ），其灵敏...     

用降钙素基因甲基化做白血病恶性克隆增殖的标志

微小残留病的检测是当今白血病研究领域受人关注的问题之一。检测残留病的关键是寻找肿瘤标志。降钙素基因高度甲基化为急性白血病，特别是急性髓细胞白血病的ＭＲＤ提供了一新的基因标志，对研究白血病，骨髓增生异常综合征的发生发展，可能具有较大意义。     

用聚合酶链反应检测急性非淋巴细胞白血病微量残留细胞

目的：探讨用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测急性非淋巴细胞白血病微小残留病的意义。方法：利用ＰＣＲ扩增降钙素（ＣＴ）基因５＇端第４个甲基化位点附近的ＤＮＡ序列，所有样本ＤＮＡ在做ＰＣＲ前用过量的限制性内切酶消化，检测２５例初治或复发的急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ），１０例完全缓解期患者。细胞系ＨＬ－６０作阳性对照，正常对照组１０例。结果：２５例ＡＮＬＬ中，１７例阳性（６４％），１０例缓解期骨髓标本，４     

多表位BCR—ABL融合基因的合成,克隆及表达研究

慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的免疫治疗是清除白血病微小残留病并最终根治ＣＭＬ的方向之一，包含ＢＣＲ－ＡＢＬ融合区的多肽具有良好的免疫原性，在体内、外可诱发ＢＣＲ－ＡＢＬ特异的Ｔ细胞克隆。以ＢＣＲ－ＡＢＬ融合肽瘤苗激发特异性Ｔ细胞应答ＣＭＬ免疫治疗有希望成为根治ＣＭＬ残留白血病的有效手段。本实验通过基因工程技术，设计一个２８０ｂｐ的融合抗原基因片段，包含ＨＬＡ－Ａ２，ＨＬＡ－Ａ３，ＨＬＡ－ＤＲ１１等３     

CD13^＋CD7^＋白血病微小残留病水平与患者生存时间的关系

目的：利用流式细胞术研究具有CD13^ CD17^ 免疫表型白血开门见山的微小残留病（MRD）水平与患者生存时间的关系。方法：选择表达CD13^ CD7^ 独特免疫表型白血病，以CD13^ CD7^ 免疫表型作为此类白血病细胞的特异标志，利用经特殊优化处理过的多参数流工本细胞系统动态监测该免疫表型的白血病细胞数量，应用SPSS软件的生存分析白血病微小残留病水平与患者中位生存时间的关系。结果：（1）18例CD13^ CD7^ 双表型白血病患者的免疫表型稳定表达，而非白血病患者骨髓细胞中无CD13^ CD7^ 免疫表型细胞存在；（2）根据MRD水平分为3组，A组3例MRD水平低于10^-4，中位生存时间３４.50个月；Ｂ组５例ＭＲＤ在１０^-3-10^-4之间，中位生存时间21.25个月；C组10例CD13^ CD7^ 白敌国开门见山细胞大于10^-3者，中位生存时间为11个月；（3）3组间中位生存时间差异具有显著意义（P=0.001)，A组长于B组（P=0.0245)，显著长于C组（P=0.0109)。B组显著长于C组（P=0.021)。结论：白血病微小残留病状态是决定白血开门见山患者生存时间的作用因素。     

PCR检测白血病微小残留病的发展近况和临床评价

ＰＣＲ用于白血病残留病检测时常利用的靶基因有：染色体平衡易位产生的融合基因及其转录产物、抗原受体基因重排和癌基因。已发现用ＰＣＲ检测残留病,对t（９;２２）＾＋ 、t（１５、１７）＾＋、t（１２;２１）＾＋、t（４;１１）＾＋、ＩgＨ/ＴＣＲ重排＾＋白血病具有明确预后和诊断意义,而对t（８;２１）＾＋、t（１;１９）＾＋、inv （１６）＾＋白血病及以ＷＴ１基因为靶基因的残留病检测,包括多重ＰＣＲ、实时定量Ｒ     

中期荧光原位杂交在急性早幼粒细胞白血病诊断和微小残？…

为研究中期荧光原位杂交（Ｍ－ＦＩＳＨ）在急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）诊断及其微小残留病（ＭＲＤ）检测中的价值，应用１７号全染色体彩涂探针对１０例初诊时按细胞形态学诊断为急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）的未治疗患（初治ＡＰＬ５例，复发ＡＰＬ３例，ＡＭＬ－Ｍ１和ＡＭＬ－Ｍ５各１例）和１０例治疗后获完全缓解（ＣＲ）的ＡＰＬ患作耻Ｍ－ＦＩＳＨ检测，并与常规细胞遗传学和逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）结     

急性B淋巴细胞白血病抗原异常表达与微小残留病检测（附17例报告）

多参数流式细胞术（FCM）免疫表型分析已成为白血病分型诊断的重要工具。近年来主张用CD45／SSC双参数散点图设门的方法进行多色分析，容易将恶性克隆细胞与正常细胞群相区别，使白血病分型更为准确，并可用于微小残留病的检测。作应用FCM对70例初诊为急性B淋巴细胞性白血病（B—ALL）患进行免疫分型，发现多种抗原异常表达，并试用不同的抗体组合对其中18例缓解后的患进行微小残留病（MRD）的追踪检测。报告如下。     

应用荧光定量PCR检测急性白血病微小残留病的临床意义

对于完全缓解的白血病患者,体内存在的微小残留病（MRD）是复发的主要根源？本实验是通过双链DNA结合SYBR GreenI的实时PCR方法应用免疫球蛋白重链（IgH）和T细胞受体（TCR）基因重排作为ALL微小残留病的检测靶基因,实验证明：MRD可以     

Flt3／FL在急性白血病中的表达及其临床意义

急性白血病（AL）患者5年生存率较低，因为大多数常由于复发而死亡。目前认为微小残留病（MRD）是白血病治疗缓解后复发的最重要的原因。因此，研究一些特征性的分子标志物作为残留病变检测，以便在疾病的早期预测复发，及早加以治疗干预有重要意义。但目前尚缺乏合适的的MRD的检测指标。     

造血干细胞移植自体造血干细胞移植微小残留病净化

造血干细胞移植（ＨＳＣＴ）是当今治疗白血病和某些实体瘤的最主要和最有效的手段，甚至是治愈的唯一方法。但是，ＨＳＣＴ后仍有相当一部分病人复发，复发的根源与微小残留病（ＭＲＤ）有关。因此，ＨＳＣＴ中的ＭＲＤ治疗是影响疗效的关键，包括ＡＨＳＣＴ（自体）和ＡｌｌｏＨＳＣＴ（异体）。ＡＨＳＣＴ与ＡｌｌｏＨＳＣＴ相比较其复发率高，原因有二：一是移植物中含有ＭＲＤ，二是缺乏ＡｌｌｏＨＳＣＴ具有的移植物抗瘤（白血病）效应（ＧＶＬ）。针对这两个原因，目前解决的主要手段包括：对移植物进行体外净化；移植后应用免…     

小儿急性淋巴细胞白血病微量残留病T细胞受体δ基因重排的PCR检测

白血病是造血系统的恶性肿瘤,其中急性淋巴细胞白血病(ＡＬＬ)是儿童最常见的白血病。患儿经初治后,体内仍有少量的残留白血病细胞(108-1010)称微量残留病(ｍｉｎｉｍａｌｒｅｓｉｄｕａｌｄｉｓｅａｓｅ,ＭＲＤ)。这是白血病复发的主要根源,大多数出现于复发期的肿瘤细胞,且与初诊时的肿瘤细胞来源同一克隆。目前普遍认为提高白血病治愈率的关键之一是要彻底地根除ＭＲＤ,但ＭＲＤ用一般形态学检测很难发现。应用聚合酶链反应(ＰＣＲ)技术检测急性淋巴细胞性白血病Ｔ细胞受体(ＴＣＲ)克隆性基因重排的研究已有不少报道[1,2]。ＴＣＲ由四条…