鼻咽癌细胞增殖活性与放射敏感性相关关系的研究

目的:探讨鼻咽癌细胞增殖活性指标有丝分裂指数(mitotic index,MI)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear anti—gen,PCNA)、p53蛋白、DNA含量和癌细胞核形态参数与放射敏感性的关系。方法:收集51例放疗前鼻咽癌组织标本,HE染色作病理组织学诊断和MI计数;免疫组化法检测PCNA和p53蛋白表达情况;Feulgen染色和图像分析法检测鼻咽癌DNA含量和细胞核的形态定量参数。结果:51例鼻咽癌组织中,完全消退组MI高于残留组(P＜0．05);PCNA和p53蛋白表达阳性音分别有50例(98．0%)和46例(90．2%),高表达者分别有16例(31．4%)和22例(43．1%);PCNA和p53蛋白的阳性表达水平越高,则鼻咽癌对放射治疗越敏感,放疗后鼻咽局部癌肿完全消退率越高(P＜0．05);PCNA和p53蛋白同时高表达者比单一指标高表达者,对其放射敏感性更高(P＜0．05);鼻咽癌完全消退组DI、DNA异倍体细胞所占百分率、细胞核形态参数面积、周长和直径均比残留组高。结论:MI、PCNA、p53蛋白、DNA含量和癌细胞核形态参数是反映鼻咽癌放射敏感性和预测其近期疗效的重要指标。     

DNA含量和癌细胞核形态参数与鼻咽癌放射敏感性的关系

目的:探讨鼻咽癌细胞DNA含量和癌细胞核形态参数与放射敏感性的关系.方法:收集51例放疗前鼻咽癌组织标本,Feulgen染色和图像分析法检测鼻咽癌DNA含量和细胞核的形态定量参数.结果:51例鼻咽癌组织中,完全消退组DNA指数、DNA异倍体细胞所占百分率、细胞核形态参数面积、周长和直径均比残留组高.结论:DNA含量和癌细胞核形态参数是反映鼻咽癌放射敏感性和预测其近期疗效的重要指标.     

细胞凋亡与肿瘤放射敏感性

长期以来，随着放射诱导细胞凋亡的深入研究，人们希望能从放射诱导细胞凋亡这一现象，为恶性肿瘤的临床放疗提供一个预测及评估指标，可以通过人体肿瘤细胞凋亡水平的检测来预测肿瘤的放射敏感性，为患者选择最佳的放疗方案。本文就细胞凋亡与放射敏感性的关系作一综述。     

增殖细胞核抗原表达与鼻咽癌放射敏感性关系的研究

[目的]探讨增殖细胞核抗原(PCNA)的表达与鼻咽癌(NPC)放射敏感性的关系.[方法]采用PCNA抗体进行ABC法免疫组化染色.检测108例患者初行放疗前鼻咽癌组织中PCNA表达情况,显微镜下计数阳性细胞,计算增殖指数(PI),并将所有病例按照PI值的高低以25%为界划分两组;高PCNA表达者(HPI)>25%,低P...     

小干扰RNA对鼻咽癌CNE-2细胞Bcl-2基因的放射增敏研究

目的:探讨Bcl-2基因的特异性小干扰RNA(siRNA)对鼻咽癌细胞的辐射增敏作用.方法:构建Bcl-2基因的特异性siRNA的真核表达载体,并借助脂质体将其转入鼻咽癌CNE-2细胞.荧光显微镜观察转染效率;流式细胞仪检测Bcl-2蛋白在鼻咽癌细胞的表达,并检测CNE-2细胞的凋亡率;流式细胞仪检测Bcl-2基因的特异性siRNA真核表达载体联合X射线照射后CNE-2细胞的凋亡率.结果:流式细胞仪检测结果显示:转染组明显降低了Bcl-2蛋白在CNE-2细胞的表达,且转染组的细胞凋亡率明显增加.转染联合X射线照射后细胞凋亡率也明显增加,且明显高于阴性对照+X射线组和单纯X线照射组.结论:siRNA可以有效干扰鼻咽癌CNE-2细胞内Bcl-2基因的表达,可明显增强鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性.     

阿司匹林增强鼻咽癌细胞放射敏感性的研究

目的:观察阿司匹林(ASA)对鼻咽癌SUNE细胞系放射敏感性的影响,并探讨其可能机制。方法:用MTT法检测ASA对SUNE细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化,免疫荧光技术及流式细胞仪检测核转录因子-κB(NF-κB)的表达情况。结果:ASA在2、4、8Gy三种不同剂量的放射增敏比分别为0.329±0.052、0.404±0.067、0.615±0.033。ASA+照射组的凋亡率[(59.600±1.200)%]较单纯照射组[(39.800±1.124)%]明显增加(P<0.01)。免疫荧光技术及流式细胞仪显示照射后胞核内NF-κB表达增加,而这种增加可被ΑSΑ抑制。结论:ASA可提高鼻咽癌细胞对放射线的敏感性,其机制可能是通过阻止NF-κB的核内转移,继而抑制NF-κB的激活,从而增加放射线诱导的鼻咽癌细胞凋亡。     

鼻咽癌放射敏感性自杀基因载体的构建

[目的]拟构建一个新型的具有放射敏感性和肿瘤特异性的鼻咽癌基因治疗载体,利用其双重协同杀伤作用以提高特异杀伤肿瘤效应.[方法]采用PCR方法扩增早期生长反应因子1（Egr-1）启动子、胞嘧啶脱胺酶（CD）自杀基因、人端粒酶亚基（hTERT）启动子、凋亡抑制因子存活素（Survivin）反义寡核苷酸链;通过酶切连接分别构建成pcDNA3.1-Egr-CD（简写为pEC）、pcDNA3.1-hTERT-Survivin（简写为pTS）、pcDNA3.1- Egr-CD- hTERT-Survivin（简写为pEC-TS） 真核表达载体.[结果]酶切证实pEC、pTS、pEC-TS真核表达载体构建成功.[结论]通过成功构建这一新型载体有可能为鼻咽癌基因治疗提供科学依据和技术支持,为鼻咽癌综合治疗开拓一条新的途径.     

不同辐射敏感性鼻咽癌细胞株间G2期阻滞的比较

目的:探讨鼻咽癌细胞株(CNE1、CNE2)间不同辐射敏感性与其G2期阻滞的关系.方法:采用流式细胞仪检测不同剂量X线及照射后不同时间点CNE1、CNE2细胞G2期细胞比例的变化.结果:2 Gy或5 Gy X线照射后,CNE1,辐射相对抗拒株,在1、4、8、24 h时间点,检测到明显G2期阻滞,且有时间剂量效应(P<0.05);CNE2,辐射相对敏感株,照射后24 h内G2期细胞比例升高不明显,与CNEI有显著意义(P<0.05),CNE2在48 h点才开始出现G2期阻滞.同时,CNE1、CNE2均未见明显细胞凋亡(P>0.05).结论:电离辐射后发生的G2期阻滞的不同可能是鼻咽癌细胞株(CNE1、CNE2)间内在的辐射敏感性的差异原因之一.     

ICAM-1、Bcl-2在鼻咽癌中的表达及意义

【目的】探讨细胞间粘附分子 1(ICAM 1)和细胞凋亡抑制基因Bcl 2在鼻咽癌组织中的表达及意义。【方法】应用免疫组化S P法 ,对 37例鼻咽低分化鳞癌和 30例鼻咽慢性炎性黏膜活检组织进行ICAM 1、Bcl 2表达蛋白产物检测。【结果】①ICAM 1在鼻咽癌组织阳性表达率 6 7.6 % ,明显高于鼻咽慢性炎性黏膜组织 6 .7% (P <0 .0 1)。②Bcl 2在鼻咽癌组织阳性表达率 83.8% ,明显高于鼻咽慢性炎性黏膜组织 10 .0 %(P<0 .0 1)。③ICAM 1、Bcl 2在鼻咽癌中的表达呈正相关。【结论】ICAM 1、Bcl 2在鼻咽癌组织中表达可能在鼻咽癌细胞的凋亡、侵袭和转移过程中起重要作用 ,两者同时高表达可能协同促进鼻咽癌的侵袭和转移。     

凋亡基因Bcl-2在口腔鳞状细胞癌中的表达

目的 检测淋巴细胞凋亡基因Bcl-2表达范围,并判断其与临床病理因素及预后的关系.方法 采用免疫组化法分析24例口腔鳞状细胞癌(OSCC)内的Bcl-2免疫表达.结果 有49%的细胞有Bcl-2免疫表达,并且该蛋白染色于胞浆.在Bcl-2免疫表达与临床病理因素及预后之间未能确认到具有统计学意义的关系.结论 尽管Bcl-2免疫表达的研究可能有助于更好地分析和判断OSCC的顸后,但本研究结果却提示这个因子不能提供任何关于肿瘤生物学行为的进一步信息.     

Bcl-2和Bax的表达与乳腺癌转移及预后的关系

目的　探讨Bcl 2和Bax基因在乳腺癌中的表达及与乳腺癌淋巴结转移、预后的关系。方法　应用SP免疫组化染色方法 ,检测 4 0例乳腺癌组织中Bcl 2、Bax的表达情况。结果　无淋巴结转移组Bcl 2阳性表达率与淋巴结转移组有显著差异 (P <0 .0 5 ) ,10年以上存活组Bcl 2阳性表达率与 10年以下存活组有显著差异 (P <0 .0 1)。无淋巴结转移组Bax阳性表达率与淋巴结转移组有显著差异 (P <0 .0 5 ) ,10年以上存活组Bax阳性表达率与 10年以下存活组有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论　Bcl 2和Bax表达与乳腺癌淋巴结转移、预后关系密切 ,Bcl 2提示高表达、Bax低表达的乳腺癌患者有低的转移率及好的预后。     

Fas、Bcl—2在肾癌中表达的研究

目的：检测Fas,Bcl-2在肾癌中的表达,分析其在肾癌发生发展中的作用。方法：采用免疫组化法,结果：1．肾癌Fas比正常肾组织阳性表达率低,Bcl-2比正常肾组织高（P＜0．05）,2．Fas,Bcl-2表达在肾癌的细胞学分类,病理分级,临床分期无显著性差异（P＞0．05）,3．肾癌Fas表达与Bcl-2负相关（P＜0．05,r=-0.322),4.单因素生存分析Fas,Bcl-2表达及肾癌的各细胞学分类生存率无差异（P＞0．05）,肾癌病理分级G1＋G2组比G3＋G4组生存率高（P＜0．05）,临床分期S1＋S2组比S3＋S4组高（P＜0．05）,Cox回归多因素生存分析只发现肾癌病理分级能单儿作为反映肾癌预后因素的指标（P＜0．05）。结论：Fas,Bcl-2在肾癌的发生中并不能单独起主导作用。不能独立作为反映肾癌预后的指标,它们可能只是参与肾癌发生多种因素之一。     

苦参碱对人肺癌SPC-A-1细胞Bcl-2、Fas表达的影响

目的了解苦参碱（matrine）作用人肺癌细胞株SPC-A-1后其相关凋亡基因Fas、Bcl-2的变化。方法不同浓度苦参碱作用于体外培养人肺癌细胞株SPC-A-1,流式细胞术检测其凋亡相关基因Bcl-2、Fas蛋白表达的改变。结果不同浓度的苦参碱处理人肺癌SPC-A-1细胞后,流式细胞仪检测随着苦参碱浓度的升高,Bcl-2的表达量减少、Fas的表达量增加且呈剂量效应（P〈0．05）。结论苦参碱诱导人肺癌细胞株SPC-A-1细胞凋亡,其机制可能与降低Bcl-2、升高Fas等活性有关。     

姜黄素对喉癌Hep-2细胞增殖及Bcl-2、Bax基因表达的影响

目的探索姜黄素对喉癌细胞增殖的作用以及对细胞Bcl-2和Bax基因表达的影响。方法 Hep-2细胞暴露于含姜黄素(3-25μM)的培养基中,分别培养24h及48h,用MTT法检测对细胞增殖的影响;用RT-PCR法检测Bcl-2和Bax的mRNA表达水平。结果 MTT显示,姜黄素使Hep-2细胞增殖明显降低,并呈时间-剂量依赖性;RT-PCR结果显示,姜黄素使Bcl-2的mRNA表达水平降低,而使Bax的mRNA表达水平升高,并呈剂量和时间依赖性。结论姜黄素对人喉癌Hep-2细胞增殖具有显著的抑制作用。其作用机制可能与其下调Bcl-2基因表达水平及上调Bax基因表达水平,从而诱导细胞凋亡有关。     

热疗联合阿霉素对K562/AO2细胞株凋亡及Bcl-2表达的影响

目的：观察热疗联合阿霉素对耐药慢性髓系白血病细胞株K562／AO2的体外增殖抑制作用、凋亡及Bcl-2表达的影响。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT法）确定阿霉素的工作浓度，以该浓度进行化疗或与热疗联合治疗，分别选择温度40，41和42℃，体外作用于K562／AO2。采用MTT法检测对肿瘤细胞增殖的抑制作用；流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2表达。观察热疗联合阿霉素的抗肿瘤效果。结果：作用48h后IC50为53μg／ml，以此为实验的工作浓度。单纯热疗60min对K562／AO2细胞有抑制作用（P〈0．01），并随温度增高而增强；单纯化疗对K562／AO2细胞也有抑制作用；各热化疗组对K562／AO2均有明显的抑制作用（P〈0．01），随着温度的增高而增强。流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2的表达，热疗组、化疗组及热化疗组的细胞凋亡率均较对照组显著升高，各组之间差异有统计学意义（P〈0．01）；Bcl-2蛋白的表达下降，各组之间的差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：热疗联合阿霉素能增强对K562／AO2细胞的体外抑制作用，提高肿瘤细胞的凋亡率，下调Bcl-2蛋白的表达。     

米非司酮作用下Bcl-2及Fas在子宫腺肌病异位病灶中的表达

目的探讨米非司酮作用下,子宫腺肌病患者肌层异位病灶中,细胞凋亡因子Bcl-2及Fas的表达变化。以及在增生期及分泌期,异位病灶中细胞凋亡因子Bcl-2及Fas是否呈周期性变化。方法 2003年1月-2009年1月在长春市中心医院妇产科,经临床确诊为子宫肌腺病,要求手术治疗的180例患者。将其随机分成两组,实验组给予米非司酮口服后手术治疗,应用免疫组化法检测肌层异位病灶中Bcl-2、Fas基因的表达变化。结果实验组和对照组中,增生期与分泌期相比较,Bcl-2及Fas均呈持续性表达且无周期性变化。而实验组与对照组相比较,增生期和分泌期,Bcl-2表达均明显下降,而Fas表达明显上升。结论 （1）米非司酮可以降低子宫腺肌病异位病灶中的细胞凋亡抑制因子Bcl-2的阳性表达率,同时提高细胞凋亡促进因子Fas的阳性表达率,从而导致异位病灶中的细胞凋亡增强。（2）子宫腺肌病异位病灶中,增生期与分泌期,Bcl-2基因和Fas基因的表达呈持续性且无周期性变化,可能导致病灶中的部分细胞免于凋亡,使细胞凋亡率明显下降,而成为子宫腺肌病的发病机制之一。     

Rubratoxin B 诱导人绒癌细胞株凋亡及Bcl-2 mRNA 表达的研究

目的:定量分析rubratoxin B(RB)在体外诱导人绒癌细胞株(BeWo)发生凋亡,并探讨其与抑制凋亡基因Bcl-2mRNA表达的关系。方法:利用MTT、HE染色、annexinV-FITC/PI流式细胞技术定性及定量分析经RB处理后BeWo细胞活细胞及凋亡细胞的变化情况;利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测抑制凋亡基因Bcl-2与RB诱导的BeWo细胞凋亡的关系。结果:RB诱导BeWo细胞凋亡的数量与药物浓度及用药时间明显相关。RT-PCR结果显示Bcl-2mRNA的表达随着凋亡细胞的增加而减少。结论:RB能够诱导BeWo细胞发生凋亡,Bcl-2mRNA表达的下调是RB诱导BeWo细胞凋亡的重要机制。     

食管癌的危险因素与Bcl-2 P^53的相关性研究

目的研究Bcl-2、P53与食管癌危险因素之间的相关关系,从分子水平对食管癌病因进行初步探讨.方法采用流行病学病例对照研究和免疫组化方法,研究分析食管癌危险因素Bcl-2、P53基因表达情况. 结果社会文化、生活水平较低,长期大量饮酒和营养缺乏是台州地区食管癌发生的主要危险因素并与Bcl-2、P53阳性表达存在明显相关性. 结论社会生活水平较低,长期大量饮酒、营养缺乏是台州地区食管癌主要的危险因素,Bcl-2、P53在食管癌发生中起重要作用.     

凋亡抑制基因Bcl—2在前列腺中的表达

目的 了解前列腺组织中Bcl-2蛋白的表达。方法采用免疫组化技术，检测11例胎儿、27例成人和60例增生前列腺中Bcl-2蛋白的表达。结果胎儿前列腺Bcl-2蛋白的表达于全部胚芽上皮细胞；成人前列腺Bcl-2蛋白的表达主要定位于腺上皮基底细胞，分泌细胞偶见阳性表达；增生前列腺Bcl-2阳性表达主要定位于腺上皮基底细胞，分泌细胞也见不同程度阳性表达；增生前列腺基底细胞、分泌细胞Bcl-2阳性表达均高于正常前列腺，差异有显著性；正常前列腺与增生前列腺上皮基底细胞Bcl-2阳性表达均高于分泌上皮细胞，差异有显著性。结论基底细胞层可能为成人前列腺的干细胞层，参与前列腺的生长与增殖；Bcl-2基因蛋白可能在调节前列腺上皮的凋亡中具有重要作用；Bcl-2基因蛋白在前列腺基底细胞增生中起主要作用，而在分泌细胞中不占主要地位。