脂肪组织工程研究进展

组织工程为临床疑难问题的解决提供了新的思路，而工程化脂肪组织具有组织重建与填充作用，广泛应用于外科领域。本就脂肪组织工程涉及的前脂肪细胞生长分化、分子调控、聚合物支架及细胞外基质、微环境等方面进行综述。     

骨诱导性磷酸钙陶瓷支架在脂肪组织中构建体内组织工程骨

背景：作为体内组织工程骨的构建场所,非骨组织的选择至关重要。早期研究大多选用肌肉作为异位骨移植物的构建区域,但其位置较深,可利用面积小、手术操作复杂,不利于临床推广。 目的：采用体内骨组织工程的方法,探索骨诱导性磷酸钙陶瓷支架在不同非骨组织中构建骨移植物的可行性。 方法：选取家犬的背部肌肉组织和脂肪组织为构建区,分别植入骨诱导性磷酸钙陶瓷支架以构建体内组织工程骨移植物。于移植后4,8,12,16周取样进行单光子计算机断层扫描及组织学检测,观察其构建过程,比较各个观测时间内,不同构建区的骨移植物中新骨组织的形成情况,评价不同非骨构建区域对体内骨组织骨移植物形成的影响。 结果与结论：骨诱导性磷酸钙陶瓷支架在肌肉组织和脂肪两处非骨组织中均可形成体内组织工程骨移植物,在构建初期,肌肉组中新骨形成的时间比脂肪组早,骨量也较多,但随着构建时间的延长,两组的新生骨量差异逐渐减小。提示,应用体内骨组织工程的方法在肌肉和脂肪组织均可构建出具有生命活性的自体骨移植物。与肌肉组织比较,脂肪组织面积宽广,位置浅表,因此在脂肪组织中构建体内组织工程骨移植物更有临床应用前景。     

脂肪组织工程的研究现状和未来应用前景展望

软组织缺失是整形外科关注的焦点问题之一,传统软组织重建方法存在供皮区缺损、植入物移动和吸收以及产生异物反应。近年干细胞被认为可能是一种新颖的治疗方法,脂肪干细胞(adipose-derived Stem Cells,ADSCs)是存在于脂肪组织内的一种多能干细胞,具有多向分化潜能,且数量充足、获取方便,它们在临床前试验治疗的研究和临床实验方面已有良好的记录。本文主要从ADSCs获取、ADSCs的分离和扩增、生物材料和ADSCs、生长因子在脂肪组织工程应用以及脂肪组织工程策略等研究进展做一综述,这也是脂肪组织工程研究中不可缺少的重要环节。     

间充质干细胞在组织工程气管中的研究进展

组织工程学通过细胞或组织重建,修复缺损组织并保留其生物功能,成为气管替代治疗的新途径.种子细胞、生长因子及气管支架材料是组织工程气管的三大要素,学者们一直在寻求理想的种子细胞.间充质干细胞(MSCs)是一种具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞,广泛分布于骨髓、脐带、脂肪组织、心肌组织、大脑、肌肉和皮肤等,可向骨、软骨、脂肪、神经等多种细胞定向分化.MSCs具有增殖能力强、分化范围广、免疫调节等功能特点,能够修复损伤的组织,有望成为应用于组织工程气管的理想种子细胞.旨在对MSCs在组织工程气管中的应用作一综述.     

脂肪干细胞在骨软骨组织工程中的研究进展

近年来,随着医学相关学科的迅猛发展,组织工程技术已经取得了很大的成就,但种子细胞一直是困扰人们的焦点问题.脂肪干细胞(ADSCs)体外扩增迅速,稳定性好,无免疫排斥反应,具有多向分化潜能,可以向脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞、内皮细胞、肌细胞和神经细胞等不同胚层来源的细胞分化,并且脂肪组织具有取材方便、对人体创伤小、可大量获得等优点,因而ADSCs有望成为一种理想的组织工程种子细胞.旨在介绍ADSCs在骨软骨组织工程中的研究进展.     

脂肪干细胞与自体富血小板血浆载体复合物体内构建血管化组织工程脂肪

背景：血运重建机制是组织工程化脂肪组织成功构建的决定性因素。 目的：观察脂肪干细胞与自体富血小板血浆和纤维蛋白胶载体复合物在体内构建血管化组织工程脂肪的可行性。 方法：从健康成年人吸脂术后的脂肪组织中分离脂肪干细胞并行原代及传代培养,将第3代经BrdU标记的脂肪干细胞向脂肪细胞定向诱导2周后,制成浓度为5×1010 L-1细胞悬液。由0.5 mL细胞悬液、100 μL富血小板血浆工作液或DMEM培养基与0.5 mL纤维蛋白胶组成实验组和对照组移植物,分别植入裸鼠背部皮下。 结果与结论：植入后8周取材：①实验组可见血管明显增生并长入材料,呈轻度纤维包裹;对照组有少量血管长入材料中,也有轻度纤维包裹现象。实验组新生组织湿质量大于对照组(P < 0.01)。②苏木精-伊红染色均可见移植物中有新生脂肪组织形成和不同程度的微血管长入;实验组微血管数多于对照组(P < 0.01)。③新生组织免疫荧光染色示,两组新生脂肪细胞的胞核及部分微血管内皮细胞的胞核呈现绿色荧光。说明脂肪干细胞与自体富血小板血浆和纤维蛋白胶载体复合物在体内可构建血管化组织工程脂肪,脂肪干细胞与自体富血小板血浆共同参与新生脂肪组织的血管化过程,自体富血小板血浆能促进组织工程构建物的血运重建,保证更多种子细胞的成活。     

脂肪组织功能新发现

脂肪组织过去只被看作是燃料贮存库或组织器官间的填充料,随着一些脂肪细胞分泌的因子被人们发现后,脂肪细胞的其他重要功能被逐渐发掘出来.脂肪组织可以分泌多种生物活性物质--脂肪因子,这些因子作用于中枢神经系统、免疫系统及内分泌器官,如垂体、性腺、甲状腺和内分泌胰腺,参与神经、内分泌、免疫网络和组织损伤的修复.     

处理不良的脂肪组织快速改良方法

在常规病理制片中,脂肪组织制片困难一下载是困扰技术人员的常见问题之一。引起制片困难的原因,主要是由于脂肪组织没有完全脱水,并且含有多量的油脂成分,从而影响切片的正常制作（图1）。传统的处理办法通常是将组织放在脱水机里退回重新处理,或再取组织重新制作,结果费时、费力,而且需要1～2天的制片时间,往往会造成对病理诊断的延误。为此我们在实际工作中摸索出一种方法,能够快速改善处理不良的脂肪组织,并且有助于得到质量良好的完整切片,而无须将组织标本进行全过程的重新处理。     

脂肪干细胞与外源性血管内皮生长因子及纤维蛋白胶复合物体内构建血管化组织工程脂肪

背景：血运重建机制是组织工程化脂肪组织成功构建的决定性因素。 目的：观察脂肪干细胞与外源性血管内皮生长因子和纤维蛋白胶复合物在体内构建血管化组织工程脂肪的可行性。 方法：从健康成年人吸脂术后的脂肪组织中分离脂肪干细胞并行原代及传代培养,将第3代经BrdU标记的脂肪干细胞向脂肪细胞定向诱导2周后,制成5×10¹⁰ L^-1细胞悬液。由0.5 mL细胞悬液、100 μL的血管内皮生长因子工作液或DMEM培养基与0.5 mL纤维蛋白胶组成实验组和对照组移植物,分别植入裸鼠背部皮下。 结果与结论：术后8周取材时：①实验组可见血管增生并长入材料,呈轻度纤维包裹;对照组有少量血管长入材料中,也有轻度纤维包裹现象。实验组新生组织湿质量大于对照组(P < 0.01)。②苏木精-伊红染色均可见移植物中有新生脂肪组织形成和不同程度的微血管长入;实验组微血管数多于对照组(P < 0.01)。③新生组织免疫荧光染色示,两组新生脂肪细胞的胞核及部分微血管内皮细胞的胞核呈现绿色荧光。结果说明脂肪干细胞与外源性血管内皮生长因子和纤维蛋白胶复合物在体内可构建血管化组织工程脂肪,脂肪干细胞与外源性血管内皮生长因子共同参与新生脂肪组织的血管化过程。     

胎盘组织——间充质干细胞的新来源

间充质干细胞（mesenchymal stemcells,MSC）是最早分离自人骨髓组织的一类具有多向分化潜能的干细胞,随后陆续在人脂肪组织、外周血、肌肉和结缔组织中也发现了MSC。目前MSC是临床研究最普遍的细胞来源,在组织工程研究、创伤修复和肿瘤治疗等领域应用广泛,但MSC在骨髓、外周血等组织中的含量极低,并且有研究表明MSC含量会随着人年龄的增长而逐渐降低,同时细胞的增殖分化能力也大大下降因此国内外学者们开始探索在更为幼稚的组织如胚胎、胎盘组织中是否含有MSC。     

A simple and economical method for the manual construction of frozen tissue arrays

Tsao S‐C, Wu C‐C, Wen C‐H, Huang Y‐C, Chai C‐Y. A simple and economical method for the manual construction of frozen tissue arrays. APMIS 2010; 118: 739–43. Tissue microarray has been developed to enable multiple cores of tissue in one or more new paraffin blocks. Currently, almost all tissue microarrays are made by coring cylindrical tissues from formalin‐fixed and paraffin‐embedded tissues. The disadvantages of formalin‐fixed and paraffin‐embedded tissues include the poor preservation of antigenicity of certain proteins and mRNA degradation induced by the fixation and embedding process. However, frozen tissue array construction presents technical difficulties, and tissue array devices are expensive, particularly for small‐ and medium‐sized laboratories. We describe a simple manual method for producing well‐aligned tissue arrays by a capsule freeze method that allows us to successfully perform hematoxylin–eosin and immunohistochemical stain. All 120 tissue samples were collected and constructed into blocks by this capsule freeze method. The capsules were not affected during the sectioning process, and the capsule material always disappeared during the aqueous steps of the stain processing. The frozen tissue arrays were smoothly sectioned without the use of a tape transfer system and immunohistochemical study was performed with satisfactory results. This alternative method can be applied in any laboratory, and is both simple and economical.     

用于组织工程化培养生物反应器的研究进展

生物反应器是组织工程研究与临床应用的重要工具之一 ,近年来一直受到国内外学者和企业的广泛关注。本文系统地介绍了各种用于组织工程化培养生物反应器的研究现状。由于生物反应器的机械性能、传质以及流体剪应力等因素对培养组织的形态和功能有很大的影响 ,因比 ,深入研究和开发新型生物反应器对组织工程的研究和今后临床的应用都有着十分重要的意义     

Tissue-Specific Effects of Peptides

Synthetic peptides (cytogens) Cortagen, Epithalon, Livagen, and Vilon stimulated the growth of explants from rat brain cortex, subcortical structures, liver, and thymus, respectively, in organotypic cultures. These peptides produced tissue-specific effects: they stimulated the growth of explants from tissues, whose cytomedins (peptide complexes) were used for chemical synthesis.     

应用组织芯片研究PBK/TOPK在人体正常及肿瘤组织中的表达

目的观察PBK/TOPK在人体正常组织和常见恶性肿瘤组织的分布和表达,探讨作为肿瘤标志物的可能性。方法应用免疫组织化学EnV ision法,在含有人体19种正常组织的组织芯片和含有19种恶性肿瘤组织的组织芯片上进行PBK/TOPK染色,检测PBK/TOPK蛋白的表达。结果在19种正常组织中,只有头皮的汗腺、睾丸的精原细胞、肝脏的胆管上皮、食管黏膜下腺体、胰腺外分泌部的导管上皮、前列腺的基底细胞和肾脏的远曲小管8种组织有不同数量细胞明确阳性表达。在19种恶性肿瘤组织中,乳腺癌、子宫颈癌、甲状腺癌等多种肿瘤组织中存在PBK/TOPK的大量、强阳性表达。结论PBK/TOPK在少数正常组织特定细胞中的明确表达及其在多种恶性肿瘤细胞的强阳性表达,为其成为研究肿瘤起源与发生的标志物提供了依据。     

Soft and hard tissue response to endosseous dental implants

The last two decades have seen a remarkable growth in the development of dental implants and their incorporation into the practice of dentistry. This turn of events was made possible by an improved understanding of the biological response of living tissues to implants as well as clinical trials that validated the long-term success of these implants. Despite major structural differences between teeth and implants, such as the absence of a periodontal ligament around implants, the latter appear to provide a reliable functional replacement for their natural counterparts. This review briefly summarizes the major structural differences of the interfacial region of teeth and dental implants and their supporting tissues. It focuses on our current understanding of the soft and hard tissue responses to submerged and nonsubmerged root-form dental implants. The influence of a number of factors that affect the tissue response is reviewed, including biomaterials, implant design, surgical technique, and the local microbiota. Our recently acquired ability to modulate wound healing with guided tissue regeneration and growth factors will undoubtedly play an important role in the future utilization and success rates of dental implants. © 1996 Wiley-Liss, Inc.     

Partial volume mapping using magnetic resonance fingerprinting

Magnetic resonance fingerprinting (MRF) is a quantitative imaging technique that maps multiple tissue properties through pseudorandom signal excitation and dictionary‐based reconstruction. The aim of this study is to estimate and validate partial volumes from MRF signal evolutions (PV‐MRF), and to characterize possible sources of error. Partial volume model inversion (pseudoinverse) and dictionary‐matching approaches to calculate brain tissue fractions (cerebrospinal fluid, gray matter, white matter) were compared in a numerical phantom and seven healthy subjects scanned at 3 T. Results were validated by comparison with ground truth in simulations and ROI analysis in vivo. Simulations investigated tissue fraction errors arising from noise, undersampling artifacts, and model errors. An expanded partial volume model was investigated in a brain tumor patient. PV‐MRF with dictionary matching is robust to noise, and estimated tissue fractions are sensitive to model errors. A 6% error in pure tissue T₁ resulted in average absolute tissue fraction error of 4% or less. A partial volume model within these accuracy limits could be semi‐automatically constructed in vivo using k‐means clustering of MRF‐mapped relaxation times. Dictionary‐based PV‐MRF robustly identifies pure white matter, gray matter and cerebrospinal fluid, and partial volumes in subcortical structures. PV‐MRF could also estimate partial volumes of solid tumor and peritumoral edema. We conclude that PV‐MRF can attribute subtle changes in relaxation times to altered tissue composition, allowing for quantification of specific tissues which occupy a fraction of a voxel.     

组织修复的再生生物学与工程学

组织工程作为生物医学工程一个极为令人关注的发展领域 ,目前进展迅速。因为它与再生生物学理论存在着不可分割的内在联系 ,故一些学者将二者归结为一个新的领域“再生生物学与工程学”。本文试就近几年其涉及组织修复的有关进展作了简要介绍。     

组织工程化组织的临床应用

自有现代外科学问世的 10 0多年里 ,对各种原因导致的组织缺损 ,主要采用自体组织移植治疗 ,临床效果满意 ,挽救了不少肢体 ,减少了残废。但自体组织移植必须从健康部位切取组织修复病损的组织 ,增加了创伤 ,对供区造成了新的缺损 ,虽然所切取的组织在功能上不太重要 ,但也会遗留不同程度的并发症 ,是一种以牺牲健康组织为代价的”以伤治伤”的办法 ,且自体组织供区也十分有限 ,因此这不是最佳的治疗方法。采用同种异体组织移植或异种组织移植克服了自体组织移植的缺点 ,但由于移植后的免疫排斥反应尚不能完全克服 ,需长期使用免疫抑制剂 ,…     

在不同组织中淀粉样物质5种染色法的比较

目的：探寻淀粉样物质更好的特殊染色方法。方法：采用甲醇刚果红、甲基紫、Bennhola氏刚果红、Freudenthal氏刚果红、碱性刚果红5种染色,显微镜下观察组织切片中淀粉样蛋白的染色情况。结果：喉部组织、皮肤组织、肾穿刺组织经甲醇刚果红、甲基紫、Bennhola氏刚果红、Freudenthal氏刚果红、碱性刚果红染色方法分别将淀粉样物质均染成红色但其鲜艳程度不同,背景着色程度不同。结论：喉部组织、皮肤组织、肾穿刺组织在淀粉样物质选择特殊染色方法时甲醇刚果红是阳性着色部位最准确、色彩最鲜明、背景最干净的方法。     

壳聚糖在牙周组织工程中的应用进展

牙周组织缺损的修复一直是一个热点,但始终无法完善地解决。壳聚糖及其复合物具有良好的生物相容性和生物功能性,它也是惟一在牙周组织工程的各个方面都可以应用的可降解材料。“壳聚糖牙周修复系统”的应用对于牙周修复再生是一条非常有前景的解决途径。