反相高效液相色谱法测定患者血浆中万古霉素的浓度

目的建立快速测定人血浆中万古霉素的RP-HPLC法。方法采用液-液萃取法对血样进行预处理,以去甲万古霉素为内标。色谱条件：Diamonsil C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾缓冲液（9.5∶90.5,pH=3.0）,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为紫外230 nm。结果万古霉素的最低定量浓度为2.07 mg.L-1,线性范围为2.07~132.64 mg.L-1,相对回收率〉95%,绝对回收率〉65%,日内、日间RSD均〈10%。结论该方法方便、经济、无杂质干扰,适用于万古霉素血药浓度监测及药动学研究。     

固相萃取-反相HPLC荧光法快速测定血浆中左氧氟沙星的含量

目的建立固相萃取—反相HPLC荧光法快速测定人血浆中左氧氟沙星的方法。方法采用C18固相萃取小柱萃取血浆中的左氧氟沙星。色谱柱为ODS-BP柱(5μm,250mm×4.6mm),流动相为含1.31g.L-1L-异亮氨酸和0.80g.L-1Cu-SO4的水溶液-甲醇(80:20),激发波长为280nm,发射波长为504nm,流速为0.8mL.min-1。结果该方法在1.0～20μg.mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9976),最小检测限1ng.mL-1,萃取回收率和方法回收率分别为89.12%和109.47%,高、中、低3个浓度的日内RSD为3.2%,日间RSD为1.4%。结论该法血样处理简单,干扰小,灵敏度高,精密度好,可用于该药物的快速测定。     

固相萃取高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中度洛西汀浓度

目的:建立固相萃取高效液相色谱荧光法测定人血浆度洛西汀血药浓度的方法。方法:采用固相萃取HPLC荧光法,以氟西汀为内标,依利特Hypensil ODS2(4.6mm×200mm,5μm)柱为色谱柱,20mmol.L-1醋酸铵溶液(pH3.5)-甲醇-乙腈(40∶20∶40)为流动相,荧光激发波长:232nm,荧光发射波长:350nm。结果:度洛西汀血浆质量浓度在1.0~200.0μg.L-1范围内与峰面积比之间线性关系良好,回归方程为:A/AIS=0.01221C 0.004557(r=0.9992,n=8),方法回收率在90%~110%之间,萃取回收率大于85%;日内日间RSD小于10%。结论:本方法测定人血浆中度洛西汀浓度可靠、实用;可用于临床药物动力学研究。     

固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆中多奈哌齐浓度

目的:建立固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆中多奈哌齐浓度的方法。方法:血浆经碱化后,用OASIS固相萃取小柱提取血浆中多奈哌齐,紫外检测器检测,检测波长316nm。色谱柱:Sh im-Pack C18柱(150mm×4.6mm,5μm),保护柱:Sh im-Pack C18柱,流动相:0.5%三乙胺溶液(磷酸调pH3.0)-乙腈(65∶35),流速为1.0mL.m in-1。结果:标准曲线线性范围为5~100mg.L-1(r=0.999 3),萃取回收率在81.9%~90.7%之间。日内、日间RSD在5.4%~10.2%之间,最低检测浓度为2mg.L-1。结论:本测定方法快速、灵敏、准确,适用于临床治疗药物浓度检测的要求。     

HPLC测定人血浆中盐酸美沙酮的浓度

目的建立HPLC测定人血浆中盐酸美沙酮浓度的方法。方法采用Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-磷酸盐缓冲液（pH 2.5）=32∶68为流动相,流速为1.5 mL.min-1,检测波长为206 nm,盐酸苯海索为内标,对血浆中的盐酸美沙酮进行检测。血浆样品以乙醚提取,取有机相用100μL盐酸二次萃取,取水相20μL进样分析。结果盐酸美沙酮浓度在0.1～10 mg.L-1内线性关系良好（r=0.999 6）;定量下限为0.05 mg.L-1;平均相对回收率为（96.89±0.64）%;平均绝对回收率为（77.68±2.47）%;日内、日间RSD均〈5%。结论该法简便、快速、准确,可用于血浆中盐酸美沙酮浓度的测定。     

HPLC法测定人血浆中氯氮平浓度

目的建立测定人血浆中氯氮平浓度的HPLC法.方法血浆经碱化后,用OASIS固相萃取小柱提取血浆中氯氮平,采用反相高效液相色谱法二极管阵列检测器检测.色谱柱为Dikma Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),保护柱为WatersNova-Pack C18柱,流动相为0.5%三乙胺溶液(磷酸调pH=3.0)-乙腈(7228,V/V),流速为1 mL·min-1,检测波长(λ)215 nm.结果本方法在0.10～2.00mg·L-1范围内线性良好(r=0.998 8,n=6).高、中、低浓度加样回收率均在92.1%～105.8%之间,日内、日间RSD在4.1%～8.6%之间,最低检测浓度为5μg·L-1.结论本测定方法适用于临床氯氮平血药浓度监测.     

固相萃取结合HPLC-荧光法测定人血浆中维生素B2含量

目的:建立固相萃取结合HPLC-荧光法测定人血浆中维生素B2含量的方法。方法:采用SiroccoTM96孔蛋白沉淀板和正压固相萃取装置处理样品,采用SymmetryshieldTMRP-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol.L-1乙酸铵(35∶65),流速为0.6 mL.min-1,荧光检测器检测(激发波长:450 nm,发射波长:520 nm)。结果:维生素B2线性范围为0.2～10 ng.mL-1(r=0.9937)。定量下限为0.17 ng.mL1,日内精密度(RSD)为2.0%～4.8%,日间精密度(RSD)为3.8%,方法回收率为101.5%～116.0%(n=3),提取回收率为91.8%～115.1%。结论:所建方法采用96孔蛋白沉淀装置自动处理样品,高效液相色谱-荧光法测定,可用于临床血浆样品中维生素B2含量的测定。     

高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素浓度

目的:建立万古霉素血药浓度的快速高效液相色谱法测定方法.方法:以去甲万古霉素为内标,血浆样品经硫酸锌沉淀,采用Thermo-C18柱(250mm×4.6mm,5μm)色谱分析柱;以甲醇-pH 3.2磷酸二氢钾缓冲液(20:80)为流动相;流速为1.0mL·min-1;检测波长为230nm;柱温为25℃;进样量为10μL.结果:万古霉素最低检测浓度为80ng·mL-1;血浆样品浓度在5.0～80.00mg·L-1范围内呈良好的线性关系,r=0.994 7,n=5;相对回收率为在98.67%～100.4%;日内RSD与日间RSD均在1.6%～3.4%(n=5).结论:该方法采血量少,简便快速、灵敏度高、重复性好,适用于临床常规血药浓度监测及药动学研究.     

高效液相色谱法测定盐酸吡格列酮的血药浓度

目的:建立高效液相色谱法测定人血浆中盐酸吡格列酮浓度的方法.方法:以卡马西平为内标,血浆样品用醋酸乙酯萃取,采用Diamonsil(TM)C18柱(250 mm×4.6mm,5μm)分析.流动相为乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾(pH 6.5)(42:58),流速1.2 mL·min-1,检测波长229 nm,柱温35℃.结果:本法在0.025～4.0 mg·L-1间线性关系良好,γ=0.999 9,RSD为2.08%,(n=6),最低检测质量浓度为0.02 mg·L-1.日内、日间精密度RSD均小于10%,低、中、高浓度的提取回收率均大于99%(n=5).结论:此方法灵敏度高、重复性好,尤其适用于临床治疗合并用药时的药物浓度监测.     

HPLC法测定人血浆中表柔比星的浓度

目的：建立人血浆中表柔比星浓度的测定方法。方法：采用HPLC法测定,色谱柱为Waters XTerra C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（30∶70,pH 2.5）,柔红霉素为内标,荧光检测波长为λex=465 nm,λem=550 nm,样品在碱性条件下,用乙酸乙酯液液萃取、浓集后进样。结果：表柔比星在0.02～40μg·ml-1浓度范围内线性关系良好（r=0.999 5,n=12）,日内RSD〈3.20%,日间RSD〈4.71%,方法回收率95.28%～104.62%。结论：该方法简便可靠、专属性好、精密度高,可用于人血浆中表柔比星浓度的测定。     

高效液相色谱法测定人血浆中奥卡西平活性代谢物利卡西平的浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中奥卡西平(OXC)活性代谢物利卡西平(MHD)的浓度。方法以苯巴比妥为内标,血样用乙醚萃取;采用SHIMADZU VP-ODS(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-甲醇-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾缓冲液-四甲基乙二胺(20∶19∶61∶0.1,用磷酸调pH=6.0),流速0.8 mL.min-1,柱温为30℃,二极管阵列检测器检测波长232 nm。结果血浆中内源性杂质对样品测定无干扰,MHD在1.0~80.0μg.mL-1线性关系良好。MHD日内、日间RSD均<9%,平均萃取回收率均>66%,方法回收率为87%~98%。结论本法简便、灵敏、准确,适用于人体内奥卡西平活性代谢物MHD的血药浓度监测。     

高效液相色谱法测定人血浆中万古霉素的浓度

目的建立以去甲万古霉素为内标的人血清中万古霉素HPLC测定法。方法血样处理采用10%三氯醋酸沉淀法,色谱分析采用Agi-lent C18（250mm×4.6mm,5μm）分析柱,流动相为甲醇-乙腈-0.05mol.L-1磷酸二氢钾溶液（15：2：83,pH3.2）,紫外检测波长236nm,流速1.0mL.min-1,柱温35℃。结果万古霉素的线性范围为1.3mg.L-1～83.2mg.L-1（r〉0.999）;平均回收率为100.6%;日内、日间RSD均〈4%。结论此法具有采血量少,检测快速、稳定、灵敏度高而成本低特点,适合临床常规血药浓度的监测。     

高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度

目的 建立一种快速测定人血清中万古霉素浓度的RP-HPLC法.方法 采用液-液萃取法对血样进行预处理,以去甲万古霉素为内标.色谱柱:依利特C18柱(4.6mm×250mm,5μm).流动相:乙腈-0.05mmo1·mL-1磷酸二氢钾缓冲液(10:94,pH=3.2),流速为1.0mL·min-1,紫外检测波长为230 nm.结果 万古霉素血清浓度在5.00～100.00mg·L-1范围内呈良好的线性关系,(n=5,r=0.9996),提取回收率＞95％,日内、日间RSD均小于10％.结论 该方法方便、经济、无杂质干扰,适用于万古霉素血药浓度监测及药动学研究.     

RP-HPLC法测定人血浆中烟酸的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法测定人血浆中烟酸浓度的方法。方法:以咖啡因为内标,血浆样品用10%硫酸锌沉淀后进行分析,色谱柱为DiamonsilTM C18,流动相为乙腈-0.01mol·L-1磷酸二氢钾(内含0.01mol·L-1四丁基溴化铵,pH6.5)=15:85,流速为1.0mL·min-1,检测波长为262nm,柱温为40℃。结果:烟酸血药浓度在0.2～20.0μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),最低检测浓度为0.1μg·mL-1;低、中、高浓度的回收率在93.27%～102.65%之间,日内、日间RSD均<8%。结论:本方法准确、灵敏、重复性好,且不受他汀类药物的干扰,能为烟酸,尤其临床上与他汀类药物联合应用时的血药浓度监测及人体药动学研究提供检测手段。     

万古霉素血药浓度快速测定方法的建立

目的建立血浆样品中万古霉素测定的高效液相色谱法,为临床监测血药浓度以调整万古霉素剂量提供方法学基础。方法血浆样品通过10%硫酸锌沉淀,采用C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱分析柱,以乙腈-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH3.20,10∶90)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为236 nm,柱温为25℃,进样量为10μL。结果万古霉素血浆样品质量浓度在2.08~83.0 mg.L-1范围内呈良好的线性关系(r=0.999 5,n=7)。高、中、低3个质量浓度溶液的提取回收率分别为97.3%,92.1%和92.8%,RSD分别为2.2%,4.5%和9.0%;其方法回收率分别为101.2%,95.6%和99.2%,RSD分别为6.0%,4.5%和8.5%。结论方法灵敏、快速、简便、可靠,可用于万古霉素的血药浓度监测及临床药学研究。     

RP-HPLC法同时测定浓苯甲酸水杨酸软膏中苯甲酸和水杨酸的含量

目的建立同时测定新型浓苯甲酸水杨酸软膏中苯甲酸和水杨酸浓度的RP-HPLC法。方法采用Kromasil-C₁₈（150 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱;流动相为V（甲醇）:V(0.02 mol·L^-1,KH₂PO₄溶液,磷酸调pH=3.1)=50:50;检测波长280nm;流速1.0 mL·min^-1;柱温20℃。结果苯甲酸、水杨酸进样质量浓度分别为96～144 mg·L^-1（r=0.999 5）、48～72 mg·L^-1（r=0.999 7）时具良好线性关系,加样回收率分别为99.6%～100.6%、99.4%～100.2%,批间、批内RSD为0.3%～0.7%。结论本方法简便、精确、重现性好,适用于测定新型浓苯甲酸水杨酸软膏中苯甲酸和水杨酸浓度。     

LC-MS/MS法测定人血浆中白藜芦醇的浓度

目的:建立液相色谱-串联质谱法测定人血浆中白藜芦醇浓度的方法。方法:血浆样品经四硼酸钠溶液碱化后,经甲基叔丁基醚提取处理。分析柱为RestekC1(82.1mm×150mm,5.0μm),保护柱为GminiC1(84mm×3.0mm,10.0μm),流动相为乙腈-水(85∶15,V/V,其中含0.2mmol·L-1乙酸铵),流速为0.3mL·min-1,进样量为5μL,内标为3,5-二羟基-4-异丙基二苯乙烯,使用电喷雾离子源,以负离子多重反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量白藜芦醇和内标的MRM扫描离子通道分别为m/z227.0→143.0、253.2→211.0。每个样品的分析时间为5min。结果:白藜芦醇和内标的保留时间分别为1.43、2.55min。血浆中内源性物质对测定无干扰,白藜芦醇检测浓度在0.1～50.0ng·mL-1范围内同其与峰面积之比呈良好线性关系(r=0.9969),定量下限为0.1ng·mL-1。日内、日间RSD均低于11.25%,方法回收率为(91.70±3.81)%～(99.00±3.29)%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于白藜芦醇的血药浓度测定。     

HPLC-UV法测定人血浆及尿液中比阿培南的浓度

目的建立HPLC-UV法测定人血浆及尿液中比阿培南的浓度。方法血浆样品经超滤离心法提取后,采用XB-C18柱分离,流动相:乙腈-0.1 mol.L-1醋酸铵缓冲液(pH 4.6)=3∶97(v/v),流速:1.0 mL.min-1,检测波长:300 nm,柱温:40℃,进样量:30μL;尿样处理方法同血样,但以甲醇代替乙腈,进样量20μL。结果比阿培南与血浆、尿液中内源性物质分离度好,血药、尿药浓度分别在0.1~50、0.5~300 mg.L-1与峰面积线性关系良好,定量下限分别为0.1、0.5 mg.L-1,绝对回收率分别在90.9%~97.3%、99.1%~102.5%,相对回收率分别为102.1%~110.1%、100.3%~104.4%,日内精密度(RSD)分别<3.4%、2.1%,日间精密度(RSD)分别<5.7%、2.8%。均满足生物样本测定要求。结论所建立方法高效、灵敏、简捷快速、专属性好、重现性高,可用于比阿培南药动学研究。     

HPLC法同时测定复方儿茶酊中儿茶素与原儿茶素的含量

目的：建立同时测定复方儿茶酊中儿茶素与原儿茶素含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为YMC ODS（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为0.04mol·L-1枸橼酸溶液-N,N-二甲基甲酰胺-四氢呋喃（45∶8∶2,V/V/V）,流速为1.0mL·min-1,检测波长为280nm,柱温为35℃。结果：儿茶素与原儿茶素的检测浓度分别在0.0518～0.2590、0.0101～0.2030mg·mL-1（r均为0.9999）范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为101.63%和100.49%,RSD分别为1.27%和1.12%（n均为9）。结论：本方法简便、准确、稳定,能有效控制复方儿茶酊的质量。