癌胚抗原与γ-干扰素真核双表达质粒的构建及体外表达

目的 :构建癌胚抗原 (CEA)与γ 干扰素 (γ IFN)的真核双表达质粒 ,并检测其在体外的表达。方法 :利用分子生物学技术 ,将CEA基因片段和γ IFN基因片段连接于真核双表达质粒pIRES中 ,测定序列后 ,用脂质体包裹转染细胞 ,采用ELISA双抗体夹心法检测CEA和γ IFN的表达。结果 :核酸序列测定证实本实验所构建的质粒正确 ,该双表达质粒在体外转染细胞后可表达CEA和γ IFN分子。结论 :实验所构建的pIRES CEA γIFN双表达质粒能在体外同时表达CEA和γ IFN分子     

γ-干扰素基因转染对宫颈癌细胞株细胞周期及表面抗原的影响

目的 :研究IFN γ基因转染对宫颈癌细胞表面抗原、细胞周期的影响 ,初步探讨IFN γ基因治疗抗肿瘤作用的机制。方法 :制备含人IFN γ基因的真核表达质粒pcDNA 3 IFN γ ,脂质体包浆后转染人宫颈癌HeLa细胞株 ,流式细胞仪检测基因转染后HeLa细胞表面HLA DR抗原表达、细胞凋亡及细胞周期的变化。结果 :IFN γ基因转染后 ,HeLa细胞表面的HLA DR的表达量明显增强 (P <0 .0 1)。转染IFN γ基因促进了HeLa细胞的凋亡 (P <0 .0 5 ) ,细胞的S期比例随作用时间延长而呈逐渐降低趋势 ,显示了基因转染后DNA的合成代谢受到抑制。结论 :IFN γ基因转染可有效增强宫颈癌细胞表面抗原的表达 ,诱导机体产生抗肿瘤免疫应答 ;并可能通过抑制细胞DNA的合成 ,促进细胞的凋亡 ,抑制肿瘤细胞的增殖等机制发挥抗肿瘤作用     

原位杂交方法检测IFN-γ在胃癌中的表达

目的 :研究干扰素 -γ(IFN γ)在胃癌中的表达规律及可能的意义。方法 :应用分子克隆方法 ,克隆IFN γ基因片断 ,并通过体外转录方法制备寡核苷酸探针。在石蜡包埋的 5 8例胃癌组织和 5 3例癌旁正常组织中 ,采用原位杂交方法检测IFN γmRNA的表达。结果 :癌旁组织中胃上皮细胞IFN γ阳性率为 4 9 1% ,而胃癌组织中未发现 1例阳性 ,两组间差异有极显著意义 ,χ2 =37 15 6 ,P =0 0 0 0。结论 :胃癌细胞不表达IFN γ ,可能与胃上皮细胞癌变及免疫逃逸有关。     

血清IL-12、IFN-γ、VEGF在急性白血病中的表达及其意义

 目的　探讨急性白血病患者血清白细胞介素 12 (IL 12 )、干扰素 γ(IFN γ)和血管内皮生长因子(VEGF)的变化及其意义。方法　应用酶联免疫法测定急性白血病患者IL 12 ,IFN γ ,VEGF化疗前后血清的水平 ,并与正常对照组比较。结果　化疗前急性白血病患者血清IL 12 ,IFN γ低于对照组 ,VEGF高于对照组 (P <0 .0 1) ,化疗后达完全缓解 (CR)时血清IL 12 ,IFN γ水平升高 ,VEGF水平下降 ,与正常对照组无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论　急性白血病患者血清IL 12 ,IFN γ ,VEGF的变化可能与白血病细胞的生长及机体抗肿瘤免疫功能受损有关。     

肿瘤免疫治疗进展

肿瘤免疫治疗是肿瘤研究的热点之一.现综述自然杀伤T细胞、树突状细胞、细胞因子诱导的杀伤细胞及γδT细胞在肿瘤免疫治疗研究的新进展,重点阐述抗肿瘤免疫原理研究进展及实验室抗肿瘤作用的相关结果、意义,并提出需进一步注意及研究的问题.     

中药对T细胞免疫干预的抗肿瘤作用

中药具有一定的抗肿瘤疗效,不仅能够缓解肿瘤患者症状从而改善生活质量,还能在一定程度上控制肿瘤大小并延长患者生存期。由于T淋巴细胞在肿瘤细胞所产生的免疫应答中起主要作用,因此探索中药对T细胞免疫干预的作用机制可以为肿瘤治疗提供新的思路与方法。目前大多数中药通过促进T细胞因子释放、诱导细胞凋亡、增加T细胞总数及T辅助细胞、促进γδT细胞增殖等途径达到抗肿瘤作用。由于T细胞可分为αβT细胞与γδT细胞两大类,本文综合归纳了常用中药及其单体对αβT细胞与γδT细胞进行干预的主要机制,并提出了未来研究的方向,为进一步研究提供参考。     

肿瘤热休克蛋白70对几种Th1型细胞因子的诱升作用

目的 :研究肿瘤热休克蛋白 70 (HSP70 )免疫后小鼠体内几种Th1型细胞因子水平的变化 ,探讨肿瘤来源的热休克蛋白 70的抗肿瘤免疫机制。方法 :用肿瘤细胞中提纯的HSP70免疫小鼠 ,ELISA法测定免疫前后体内细胞因子水平的变化 ,并观察其抗移植肿瘤的效果。结果 :HSP70有明显的抗肿瘤作用 ,HSP70免疫后的小鼠外周血中IL 2、TNF α、TNF β、IFN γ水平较对照组明显升高 ,差异具有极显著性 (P <0 0 1) ,IFN γ在升高后 4周后仍未见下降。结论 :HSP70对Th1型细胞因子有明确的诱升作用 ,Th1型细胞因子的升高对于机体产生及维持抗肿瘤免疫效应是HSP70抗肿瘤免疫作用的一个重要方面     

γδT细胞与疾病的关系

γδT细胞已是当今细胞治疗研究的热点,活化的γδT细胞具有较强的杀伤活性,具有抗感染、抗肿瘤作用;γδT细胞还可以维持免疫耐受,调节免疫应答,其异常可导致自身免疫性疾病的发生,本文就γδT细胞在这几方面的作用作一综述。     

干扰素在妇科肿瘤中的应用

干扰素（interferon－a、β、r，简称IFN）作为一种治疗性生物制剂，用于基础及临床研究已有十多年的历史，它具有抗病毒、抗恶性肿瘤及免疫调节等多种生物学功能。近年资料显示：干扰素可调节细胞分化及增殖，影响细胞基因的表达及免疫状态，具有多种抗肿瘤作用。本文综述了干扰素在妇科肿瘤中的应用进展。一、干扰素对肿瘤细胞增殖的作用目前的研究证实，IFN－a对已知其生长方式且伴有腹水的卵巢癌具有明显疗效。Berek等[1]曾报道用IFN－a－2b腹腔注射治疗复发性卵巢癌，在临床Ⅰ、Ⅱ期试验中，11例患者通过再探查来判定干扰素的疗效…     

白介素12抗肿瘤作用的研究进展

白介素 - 12 (IL 12 )是一种异源二聚体细胞因子 ,被认为是细胞免疫应答过程中的关键调节因子。IL 12能激活NK细胞、T细胞 ,并诱使其分泌大量IFN γ ,抑制肿瘤血管生成 ,对多种肿瘤的预防和治疗显示了良好的应用前景。综述了IL 12及其抗肿瘤方面的研究进展。     

IFN-γ在肿瘤免疫及免疫治疗中的作用

IFN-γ在抗肿瘤过程中发挥了重要作用,近年来人们逐渐认识到了其在肿瘤免疫治疗中的必要性。IFN-γ作用于肿瘤发生发展的全过程,其在抗肿瘤方面的作用机制主要分为免疫机制和非免疫机制。IFN-γ可以直接抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成,协同固有免疫和适应性免疫的NK、NKT细胞、γδT细胞以及CD4 + /CD8 + T细胞等完成肿瘤杀伤。然而也有报道IFN-γ的促肿瘤作用,主要表现为在长期慢性炎症和肿瘤微环境中重塑免疫微环境促进免疫逃逸。因此,在肿瘤免疫治疗中要注意IFN-γ的双向效应,防止产生定向选择造成肿瘤免疫抑制。     

2023年γδT细胞肿瘤治疗领域重大进展

γδT细胞是一类表达γδTCR异源二聚体的特殊固有免疫T细胞。过去,缺乏对其全面系统的基础研究,在其发育、分化、增殖、活化、效应和耗竭等所有环节仍有很多问题尚不清楚。然而,因为成熟的γδT细胞优势定植于皮肤、消化道、呼吸道、生殖道等肿瘤高发的黏膜组织,能以MHC非限制性的方式直接识别和杀伤多种肿瘤细胞,在肿瘤免疫治疗领域具有不可替代的优势,近年来其应用异军突起,发展迅速,也因此反过来促进了基础研究的深入,取得了一些亮眼的进展。本文对2023年γδT细胞在肿瘤免疫治疗领域的重大进展进行述评,主要集中在γδT细胞肿瘤抗原识别机制、肿瘤微环境中γδT细胞的功能调控、γδT细胞抗肿瘤细胞毒活性的机制、新型基于γδT细胞的肿瘤免疫治疗协同增效策略四个方面,以期推动γδT细胞在肿瘤免疫治疗领域的进一步发展,为临床γδT细胞应用协同增效的策略提供新的思路。     

慢性髓性白血病来源的树突状细胞诱导的CTL体外作用研究

 目的　研究慢性髓性白血病来源的树突状细胞的免疫功能。方法　分离慢性期CML患者外周血单个核细胞 (PBMNC) ,用细胞因子GM CSF及IL 4在体外诱导培养DC ,检测细胞表型 ,并观察其诱导的CTL体外抗肿瘤效应。用酶联免疫 (ELISA)方法测定CML DC混合淋巴细胞反应 (MLR)上清液中IL 12及IFN γ的量 ,并与正常DC进行比较。结果　联合GM CSF及IL 4可诱导CML细胞分化为CML DC ,CML DC的CD1a、CD80、CD83表达率均低于正常DC ;CML DC混合淋巴细胞反应上清IL 12及IFN γ含量均低于正常DC ;CML DC能诱导出对自身CML细胞有特异性杀伤作用的CTL。结论　CML DC具有抗原提呈细胞的免疫功能 ,能诱导抗白血病CTL反应。     

肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中IL-17的分布特征及临床意义

目的:探讨肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中IL-17的分布特征及其临床意义。方法:流式细胞术检测15例肺癌组织和15例配对远癌正常组织中浸润淋巴细胞的IL-17表达水平。结果:肺癌患者肿瘤组织浸润淋巴细胞中IL-17A显著高于远癌正常组织（P＜0.000 1）,肿瘤组织中浸润产生IL-17的CD3+CD4+T细胞（Th17）（P＜0.001）、CD3+CD8+T细胞（Tc17）（P＜0.001）、γδT细胞（γδT17）(P＜0.000 1)均高于远癌正常组织;肺癌患者肿瘤组织浸润Th17和Tc17水平无明显差异（P＞0.05）,而γδT17水平显著高于Th17（P＜0.001）和Tc17（P＜0.000 1）;肿瘤组织中浸润的γδT17表达水平和淋巴结转移相关（P＜0.05）。结论:IL-17和肺癌发生相关,其早期主要来源是肿瘤浸润的γδT细胞;γδT17数量与淋巴结转移有关,提示γδT17细胞可能参与肺癌病程的进展。     

γδT细胞与疾病的关系

γδ T细胞已是当今细胞治疗研究的热点,活化的γδ T细胞具有较强的杀伤活性,具有抗感染、抗肿瘤作用;γδT细胞还可以维持免疫耐受,调节免疫应答,其异常可导致自身免疫性疾病的发生,本文就γδT细胞在这几方面的作用作一综述.     

重组干扰素加白介素3联合化疗治疗肝癌临床观察

干扰素是人体重要细胞功能调节物质,调节人体免疫功能是它的重要生理效应。肿瘤的发生与机体免疫功能失常有关已是所有防癌、治癌专家的共识。重建失调的免疫功能是肿瘤治疗的重要手段。干扰素经实验证明有提高机体吞噬机能、活化K细胞和细胞毒T细胞功能。也有人认为干扰素有抗肿瘤细胞增殖作用,抑制癌基因表达和癌细胞正常分化机制。干扰素可由单核细胞和淋巴细胞诱导产生。天然干扰素产量小、生产成     

T细胞介导性抗肿瘤免疫治疗的研究进展

在肿瘤发生与发展的过程中 ,机体的免疫系统发挥着重要的免疫监视功能 ,其中 T细胞介导的细胞免疫起关键性作用。因此 ,基于 T细胞的肿瘤免疫治疗策略与方法的探索一直是肿瘤免疫研究领域的热点。1　T细胞介导的抗肿瘤免疫的效应机制大量研究结果表明 ,细胞毒性 T淋巴细胞(CTL)在体内提供了有效的抗肿瘤免疫。事实上 ,CTL介导的对移植肿瘤的排斥是体内特异性抗肿瘤免疫的唯一例证。CD8 CTL是主要的抗肿瘤效应细胞 ,通过识别肿瘤细胞表面由 类 MHC分子所呈递的肿瘤抗原肽 ,进而启动对靶细胞的杀伤。CTL介导的针对致癌病毒感染细胞…     

肺癌肿瘤全溶物脉冲自体树突状细胞体外诱生T细胞抗肿瘤反应的研究

目的　探讨非小细胞肺癌 (NSCLC)患者全瘤溶解物 (WTL)冲击的自体树突状细胞 (DCs)瘤苗体外诱生T细胞介导的抗肿瘤反应。方法　在含重组人粒细胞 巨噬细胞 集落刺激因子 (rhGM CSF)和重组人白细胞介素 4 (rhIL 4 )的培养条件下 ,以 10例患者的贴壁外周血单核细胞 (PBMCs)衍生不成熟的树突状细胞 (imDCs) ,分别添加肿瘤坏死因子 (TNFα)、自体WTL或WTL TNFα诱导成熟 ,即分别为DCs/TNF、DCs/WTL和 DCs/WTL ,用流式细胞仪和混合淋巴细胞反应 (MLR) ,检测细胞表面分子的表达变化及其刺激异基因或同基因的T细胞增殖能力。将 DCs/WTL和自体T细胞共培养1～ 2周 ,以诱导细胞毒性T淋巴细胞 (CTL) ,用计数γ 干扰素 (IFN γ)释放的酶联免疫斑点 (ELISPOT)试验和乳酸脱氢酶 (LDH)释放的细胞毒试验 ,分别检测该CTL中识别自体肿瘤细胞释放特异性IFN γ的T细胞数和溶瘤活性。结果　以 30 μg/ml蛋白的WTL体外冲击自体 10 6imDCs,可导致上调DC表型 ,包括CD1a、CD83和CD86以及HLA DR的分子表达 ,与常规TNFα诱导成熟的DCs表型相似。虽然两者均能显著刺激异基因T细胞的增殖 ,但其刺激自体T淋巴细胞的增殖能力 ,DCs/WTL却显著高于DCs/TNF(P <0 .0 5 )。将体外与 DCs/WTL共培养的自体T细胞作为反应或效应细胞 ,再次     

肿瘤细胞免疫治疗的研究进展

嵌合抗原受体(CAR)T细胞已成为精准和即用的肿瘤治疗"药物",基于γδT细胞、自然杀伤(NK)细胞和巨噬细胞的免疫治疗也逐渐应用到实体瘤中.免疫细胞的毒性、抵抗、休眠、衰老、耗竭、脱靶、自食和失功能等因素限制了其治疗效果,提高编辑技术、应用纳米传输、改善免疫微环境和免疫联合治疗等方法可以提高免疫治疗抗肿瘤反应.本文系...     

γδT细胞淋巴瘤一例并文献复习

目的 探讨γδT细胞淋巴瘤的临床特点和诊疗方法,提高对γδT细胞淋巴瘤的认知和诊疗水平.方法 回顾性分析1例γδT细胞淋巴瘤患者的临床特点及治疗情况并复习相关文献.结果 患者经hyperCVAD-A(环磷酰胺+吡柔比星+长春新碱+地塞米松)、hyperCVAD-B(甲氨蝶呤+阿糖胞苷)方案化疗后,病情一过性好转,后病情进行性加重,出现骨髓转移,最终临床死亡,生存时间4个月.结论 非肝脾来源的γδT细胞淋巴瘤是一种罕见的高度侵袭性肿瘤,病情进展快,预后差,主要通过组织病理学、免疫组织化学及克隆性T细胞抗原受体γ和(或)δ基因重排诊断,早期诊断,尽早行造血干细胞移植有望改善患者预后.