不同片段的Dig—HBV—DNA探针在检测血清HBV—DNA的比较

本文运用分子克隆技术、随机引物法用非放射性Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记制备ＰＢＲ３２２－ＨＢＶ－ＤＮＡ全基因探针、单纯ＨＢＶ－ＤＮＡ全基因探针及经ＢｇＬⅡ限制性内切酶切割后片段ＨＢＶ－ＤＮＡ探针。通过检１３０份血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，比较三种探针的敏感度和特异性。     

350例血清乙肝HBV—DNA检测结果分析

荧光定量PCR技术是目前基因诊断中的一个重要手段，因其灵敏度高，特异性强，特别是它采用了荧光技术和闭管检测，克服了常规PCR方法中只有定性而无法定量，假阳性率高，以及紫外线对工作人员的严重伤害等缺点，因而在临床中得到了广泛的应用。本院自２０００年开始应用该技术进行乙肝HBV－DNA检测，现将部分抽调统计定量结果与乙肝三系定性结果作比较。报道如下：１对象和方法１．１检测对象３５０例均为２０００年１１月至２００１年１１月间在两院临床各科的住院患者，其中男性１７９例，女性１７１例，年龄１１～７５岁。１．２方…     

聚合酶链反应检测乙型肝炎血清HBV—DNA的临床意义

我们对112例乙型病毒性肝炎用聚合酶链反应(PCR)检测血清HBV-DNA,并与血清乙肝病毒标志(HBVM)检测对照,以观察其临床意义,现将结果报告如下。 1 对象与方法 1.1 对象 112例乙型病毒性肝炎为我院传染科1995年6月～1996年6月的住院患者,男86例,女26例;年龄8～70岁,其中20～30岁65例,占58％。依据1990年(上海)全国病毒性肝炎学术会议修订的诊断标准分     

慢性乙型肝炎抗—HBe阳性与HBV—DNA检出关系分析

目的 分析慢性乙型肝炎抗－HBe阳性与HBV－DNA检出关系。方法 采用斑点杂交法检测101例抗－HBe阳性的慢性乙型肝炎患HBV－DNA。结果 HBV－DNA阳性36例，阳性率35.64%，HBV－DNA阳性检出率，以慢性重型肝炎最高，其次慢性乙型肝炎重度、中度患，轻度慢性乙型肝炎最低，检出率随着病程的延长而升高。结论 表明抗－HBe阳转，体内HBV－DNA并未彻底清除，HBV的持续存在是变异发生的基础。     

415例HBV感染的不同血清学指标组合的HBV—DNA的检测

目的 了解HBV感染的不同血清学指标组合的HBV－DNA阳性情况。方法 对415份血清同时行ELISA方法测定HBV－M及普通PCR法检测HBV－DNA。结果 HBsAg( )组HBV－DNA阳性率为77．8％（270，347），HBsAg(-)组HBV－DNA阳性率19．1％（13／68），二者差别显著（P＜0．001）。其中153例HBsAg( )HBeAg( )抗HBc( )血清，HBV－DNA全部阳性，阳性率为100％，HBsAg（ ）抗HBe( ）抗HBc( )组血清HBV－DNA阳性率为66．9％（79／118），HBsAg( )抗HBc( )组血清HBV－DNA阳性率为50％（38／76），抗HBs( )组为18％（9／50），9例抗HBs( )抗HBe（＋）抗HBc( )血清中2例HBV－DNA阳性，2例抗HBs( )抗HBc( ）血清中1例HBV－DNA阳性，4例单一抗HBc( )血清中1例HBV－DNA阳性。结论 单凭HBsAg或HBeAg是否阳性来判断肝脏中HBV复制及有无传染性是不够的，易造成部分慢性乙型病毒性肝炎的漏诊，对HBsAg阴性无论抗HBs是否阳性，只要有HBV感染后的任何血清学依据，都应进一步检测血清HBV－DNA作为诊断乙型肝炎的第二步筛选，有条件时肝活检加以证实。     

PCR检测HBV—DNA与乙型型肝炎病毒不同血清标志的对比分析

为探讨ＨＢＶ－ＤＮＡ在乙肝炎病毒血清不同标志模式中的分布状况及临床意义。方法：应用聚合酶链反应技术在４８５例血清标本进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ的检测，并与血清五项免疫指标对比分析。结果：ＨＢＶ－ＤＮＡ在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗－ＨＢｃ阳性模式中，阳性率最高达９２．８６％；其次是ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ和抗－ＨＢｃ及ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＢｃ，阳性率分别为６６．２５％和６８．８３％；除单项抗－ＨＢｓ和免疫指标     

HBV—DNA检测中血清裂解处理效果探讨

待检样品中的DNA是聚合酶链反应（PCR）的模板，能否有效提取是决定PCR检测阳性率高低的关键步骤。我们在采用PCR法检测HBV－DNA时，按试剂盒要求裂解条件是煮沸100℃15min，但我院地处高原地区，海拔1630m，煮沸只能达到95℃，为了探讨裂解效果，提高检测的阳性率，选用了三种裂解方法进行血清裂解处理；并对血清做了乙型肝炎标志物检测。结果报告如下。1材料和方法1．1仪8＊＊R9801D型扩增仪，紫外透射分析仪（西安开元公司）；DY－600型中压电泳仪（广东汕头医用设备厂）【高速离心机TGL－16B（上海安亭科学仪器厂）。1．2试…     

两种DNA探针杂交检测结核分枝杆菌的研究

我们比较了结核分枝杆菌 (结核菌 )基因组ＤＮＡ及其聚合酶链反应 (ＰＣＲ)产物的灵敏度与特异性 ,并对结核病人痰标本进行了检测。一、材料和方法1 菌种来源 :2 4种分枝杆菌来自中国药品生物制品检定所 ,11种非分枝杆菌来自中国科学院微生物学研究所。2 标本收集 :90份痰标本来自本院结核科住院病人 ,经Ｘ线检查、临床表现确诊。 30份非结核病人痰标本来自本院呼吸科、肿瘤科及北京大学第三医院呼吸科住院病人。3 标本ＤＮＡ提取 :采用本室研制的标本前处理试剂盒。4 引物 :引物ａ :根据文献 [1]报道设计。扩增产物为35 0ｂｐ ,5′ ＧＡＡ…     

乙肝患者血清HBV DNA检出率分析

探讨ＰＣＲ技术测定ＨＢＶ ＤＮＡ的临床应用价值。用ＰＣＲ法与ＥＬＩＳＡ法测定乙国清标志物。结果表明ＨＢＶ ＤＮＡ在乙肝患者血清平均检出率５４．８％。人为ＨＢＶ ＤＮＡ的检出率与乙现毒所处的临床阶段,基因的整合与突变及抗病毒药物的应用相关。     

4种方法定量检测血清 HBV DNA结果比较

为了解HBVDNA检测中,斑点杂交、实时荧光定量PCR及PCR—ELISA方法检测的灵敏度,以及定量检测HBVDNA含量时,与公认较好定量方法bDNA（分枝DNA）方法检测结果之间相关性,对70例bDNA方法检测阳性标本,进行检测及对比分析。     

Dig─HBV DNA探针检测血清HBV─DNA与临床应用

Ｄｉｇ─ＨＢＶＤＮＡ探针检测血清ＨＢＶ─ＤＮＡ与临床应用谢春元，林德裕，许建平（广东汕头市中心医院５１５０３１）乙型肝炎（乙肝）病毒脱氧核糖核酸（ＨＢＶ－ＤＮＡ）位于乙肝病毒的核心，是乙肝病毒活性复制的指标［２］。应用Ｄｉｇ－ＨＢＶＤＮＡ探针（随机引...     

PCR方法检测HBV—DNA与ELISA检测HBV—M的对比分析

用PCR技术检测乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（HBV－DNA）的结果已有报道［‘］，部分乙肝标志物阴性或抗一HBe”者血清HBV－DNA呈阳性。HBV－DNA与HBV血清学标志物（HBV－M）的相互关系是目前广泛研究的课题。本文对1248例患者同时检测五项乙肝标志物与HBV－DNA并将其结果进行分析     

光促生物素补骨脂素标记DNA探针检测HBV

光促生物素标记DNA探针检测HBV是基于:将生物素化补骨脂素(Bio-PSoralen),那4′,5′,8′-三甲基补骨脂紊的生物化试剂和HBV DNA在365nm的紫外线照射下形成的加成产物作探针,与待检血清中经碱处理得到的单链H BV-DNA在365nm     

金纳米颗粒基因探针检测HBV DNA

目的 制备金（gold,Au）纳米颗粒HBV DNA基因探针,通过透射电镜直接检测乙肝患者血清中的HBV DNA,实现不经过PCR扩增检测DNA.方法 制备Au纳米颗粒和Au纳米颗粒HBV DNA基因探针,用荧光标记法检测纳米颗粒探针表面寡核苷酸的覆盖数和杂交效率.在检测体系中加入乙肝患者血清中提取的HBV DNA,透射电镜下观察.结果 制备的Au纳米颗粒粒径为（10±5）nm,水相分散良好,在520 nm有Au特征性的最大吸收峰,经寡核苷酸修饰后,其最大吸收峰改变为524 nm.Au纳米颗粒基因探针表面寡核苷酸的最大覆盖数目为（132±10）条,最大杂交效率为（22±3）%.在液相中与HBVDNA反应后,透射电镜下可观察到Au纳米颗粒凝聚成大的聚集体.结论 成功制备了Au纳米颗粒HBV DNA基因探针,可直接用于HBV DNA的检测.     

荧光定量PCR检测HBV—DNA的临床意义

本文采用荧光定量ＰＣＲ法对本院临床和门诊血清标本2 0 0份进行ＨＢＶ ＤＮＡ含量测定 ,探讨ＨＢＶ ＤＮＡ含量与肝病变发展的关系。1　材料和方法1 1　材料　标本取自确诊或怀疑乙肝的患者及无症状体检者 ,共检测 2 0 0例。试剂∶荧光定量ＨＢＶ ＤＮＡ试剂盒由匹基公司提供。仪器∶ＰＥ5 70 0ＰＣＲ仪。1 2　方法　ＨＢＶ ＤＮＡ定量分析采用荧光定量ＰＣＲ法。按操作说明书进行。1 3　统计学方法　各组ＨＢＶ ＤＮＡ含量均数比较采用ｔ检验。遇有阴性结果不参加平均值的统计。2　结果2 1　ＨＢＶ ＤＮＡ、ＦＱ ＰＣＲ标准曲线　ＨＢＶ …     

肝癌患者HBV血清标志物与HBV DNA检测的临床意义

为了解肝癌患者乙型肝炎病毒血清标志物 (ＨＢＶＭ )与ＨＢＶＤＮＡ情况 ,我们对 6 8例肝癌患者进行了观察 ,现将结果报告如下。一、对象和方法1.对象　经确诊的肝癌患者 6 8例 ,男 6 1例 ,女 7例 ,年龄 2 8～ 83岁。2 .方法　所有病例均抽取静脉血 ,分离血清用酶联免疫吸附试验 (ＥＬＩＳＡ)进行ＨＢＶＭ (ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｓ、抗 ＨＢｅ、抗 ＨＢｃ)检测 ,试剂由上海实业科华生物技术有限公司提供 ;ＨＢＶＤＮＡ用聚合酶链反应 (ＰＣＲ) ＥＬＩＳＡ法检测 ,试剂由上海浩源生物制品有限公司提供 ;所有操作步骤按说明书…     

肝癌患者HBV血清标志物与HBV DNA检测的临床意义

为了解肝癌患者乙型肝炎病毒血清标志物(HBVM)与HBV DNA情况,我们对68例肝癌患者进行了观察,现将结果报告如下.