醛糖还原酶拮抗剂治疗大鼠血管再狭窄

背景醛糖还原酶增强氧化应激,促进细胞分裂增殖,激活转录因子、核因子кB(NF-кB),但在血管再狭窄中起的作用报告不多 .目的 研究醛糖还原酶(AR)在大鼠再狭窄血管中的表达,探讨AR表达与内膜增生的关系,AR拮抗剂依帕司他对再狭窄血管中AR的表达及AR的抑制作用.方法 健康雄性SD大鼠24只,随机分成对照组(A组)、手术未干预组(B组)及手术 依帕司他组(C组),每组8只.用通气-干燥法损伤B组及C组大鼠右侧颈总动脉,左侧颈总动脉作为对照.分别于7 d及14 d后处死大鼠,HE染色以观察内膜及中膜增生情况,并计算内膜、中膜面积及其比值,FISH原位杂交及免疫组化检测AR及NF-кB的表达.结果 1)术后第7天损伤侧血管内膜增生明显,第14天后内膜增生进一步加重,对照血管无明显增生.2)依帕司他明显抑制血管内皮损伤后血管内膜增生、血管内膜面积、血管内膜与中膜面积比值明显低于未干预组(P＜0.05或P＜0.01).3)AR及NF-кB 在损伤侧血管中的表达明显强于对侧.依帕司他明显抑制AR及NF-кB 的表达量(P＜0.05或P＜0.01).结论 依帕司他对血管内膜的增生及再狭窄的形成有抑制作用,伴有AR及NF-кB 的表达受抑.     

阿托伐他汀对大鼠再狭窄血管醛糖还原酶表达及内膜增生的抑制作用

目的研究醛糖还原酶在大鼠再狭窄血管中的表达,探讨醛糖还原酶表达与内膜增生之间的关系,以及阿托伐他汀对醛糖还原酶表达及内膜增生的抑制作用。方法24只健康雄性SD大鼠,随机分成手术未干预组、假手术组及阿托伐他汀组,每组8只。用通气—干燥法损伤手术未干预组及阿托伐他汀组中的右侧颈总动脉,左侧颈总动脉作为对照。分别于第7天及14天处死动物,HE染色以观察内膜及中膜增生情况,并计算内膜和中膜面积及其比值,FISH原位杂交及免疫组织化学检测醛糖还原酶及核因子κB的表达。结果术后第7天损伤侧血管内膜增生明显,第14天内膜增生进一步加重,对照血管无明显增生。阿托伐他汀组血管内膜面积、内膜与中膜面积比值明显低于手术未干预组(P<0.05或P<0.01)。醛糖还原酶及核因子κB在损伤侧血管中的表达明显强于对照侧。阿托伐他汀组醛糖还原酶及核因子κB的表达明显低于手术未干预组(P<0.05或P<0.01)。结论醛糖还原酶可能参与了大鼠颈动脉损伤后内膜增生及再狭窄的形成。阿托伐他汀可抑制血管内膜增生及再狭窄的形成。阿托伐他汀可能是通过抑制醛糖还原酶及核因子κB而抑制再狭窄的形成。     

醛糖还原酶和糖尿病慢性并发症

醛糖还原酶和糖尿病慢性并发症陈勇综述朱禧星，钟学礼审校糖尿病是慢性高血糖状态所致的综合征。长期高血糖对体内许多组织和器官产生危害，可导致多种糖尿病馒性并发症（ｄｉａｂｅｔｉｃｃｈｒｏｎｉｃｃｏｒｎｐｌｉｃａｔｉｏｎ，简称ＤＣＣ），国内外许多学者［１～...     

醛糖还原酶ELISA测定及意义

从牛睾丸分离纯化醛糖还原酶(AR),皮下注射免疫新西兰兔制备抗血清,血清纯化后用辣根过氧化物酶(HRP)标记制备抗体-HRP交联物,利用夹心ELISA(抗体-抗原-酶标抗体)测定了22例糖尿病人及10例正常对照的红细胞AR水平.结果①糖尿病AR水平显著高于正常人;②AR水平病人约有5倍、正常人约有3倍的变异;③病人AR水平与空腹血糖水平明显相关,正常人无相关;④AR水平与性别、年龄、糖尿病病程无关.结论ELISA测定红细胞AR水平方法简便、特异,为研究AR提供了一个有用的方法.     

醛糖还原酶抑制剂治疗糖尿病神经病变进展

醛糖还原酶抑制剂治疗糖尿病神经病变进展毛晓明张家庆审校糖尿病神经病变的发病机制目前还不完全清楚。近年来普遍认为它是多种因素共同作用的结果，主要包括：（１）徽血管及血液动力学的变化导致神经组织血液供应减少和神经内膜缺氧［１］；（２）蛋白质非酶促糖基化作...     

醛糖还原酶ELISA测定及意义

从牛睾丸分离纯化醛糖还原酶（ＡＲ）,皮下注射免疫新西兰兔制备抗血清,血清纯化后用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记制备抗体－ＨＲＰ交联物,利用夹心ＥＬＩＳＡ（抗体－抗原－酶标抗体）测定了２２例糖尿病人及１０例正常对照的红细胞ＡＲ水平。结果：（１）糖尿病ＡＲ水平显高于正常人;（２）ＡＲ水平病人约有５倍、正常人约有３倍的变异;（３）病人ＡＲ水平与空腹血糖水平明显相关。正常人无相关;（４）ＡＲ水平与性别、年龄、糖尿病病程无关。结论：ＥＬＩＳＡ测定红细胞ＡＲ水平方法简便、特异、为研究ＡＲ提供了一个有用的方法。     

小鼠醛糖还原酶相似基因同源蛋白表达研究

目的 检测小鼠ARL-1同源蛋白的表达情况，分析人醛糖还原酶相似基因(ARL-1)与小鼠ARL-1同源蛋白的同源性和遗传距离，从进化的角度讨论小鼠ARL-1同源蛋白与人ARL-1的亲缘关系。方法 利用GenBank和Swiss-Prot数据库，采用Clustal X 1．8软件分析人ARL-1与小鼠ARL-1同源蛋白的同源性，利用Mega 2．0软件分析人ARL-1与小鼠ARL-1同源蛋白的遗传距离，推测其进化关系；采用western blot方法，运用抗ARL-1多克隆抗体分析小鼠多种组织ARL-1同源蛋白的表达情况。结果 人ARL-1分别与小鼠中国仓鼠卵巢还原酶(CHO-Red)、成纤维细胞生长因子调节蛋白(FR-1)、鼠醛糖还原酶相似蛋白(rARLP)、小鼠输精管蛋白(MVDP)、鼠晶状体醛糖还原酶(LeAR)、δ4-3-5β酮甾类还原酶(5β-Red)、鼠醛酮还原酶蛋白C(RaK-c)、3α-18-羟甾类脱氢酶(3α-HSD)有83％、82％、81％．79％、70％、51％、50％、45％的同源性。人ARL-1与小鼠CHO-Red的遗传距离最短(18．0％，P=0．023)，其次是FR1(19．1％，P=0．023)和rARLP(19．9％，P=0．025)。从进化树来看，人ARL-1与小鼠FR-1、rARLP、CHO-Red亲缘关系较近，其次是MVDP与LeAR。采用western blot在小鼠输精管，睾丸、膀胱、子宫检测到ARL-1同源蛋白。结论 人ARL-1与小鼠CHO-Red、FR-1、rARLP、MVDP较高的同源性、较短的遗传距离和较近的亲缘关系。小鼠输精管、睾丸、膀胱、子宫检测到ARL-1同源蛋白，从同源性的高低、遗传距离的长短以及亲缘关系的远近推测这些蛋白可能是FR-1、rARLP、CHO-Red以及MVDP。     

糖尿病并发症相关基因醛糖还原酶酵母细胞模型的建立

目的 构建由绿色荧光蛋白（GFP）标记的糖尿病慢性并发症相关基因醛糖还原酶（AR）表达载体，并在酵母细胞中表达，建立AR抑制剂筛选模型。方法 构建AR与GFP的嵌合基因，将此AR：：GFP嵌合基因克隆到酵母表达载体pYEX-BX中，再将重组载体pYEX-BX-AR：：GFP转化至酵母宿主菌INVSC1，在SC-UD选择性培养基中表达AR：：GFP。结果 PCR扩增出约l106bp大小片段，为AR基因片段；RT-PCR在酵母细胞中检测到ARmRNA的表达；经CuS04诱导后可见AR：：GFP融合蛋白的绿色荧光；诱导剂CuSO4终浓度在100～200μmol／L范围内相对荧光强度较高，细胞密度适中；培养基SC-UD的pH值为6左右最适合细胞生长和荧光表达。结论 AR：：GFP在酿酒酵母中成功地表达，酵母细胞是研究目的基因功能与表达的良好模式菌。     

糖尿病患者红细胞醛糖还原酶测定的方法学探讨

糖尿病患者20人、健康对照15人,分别应用三种方法测定其红细胞AR,同时测定血糖.结果三种方法测定的AR值糖尿病组均显著高于正常对照,AR值与血糖均相关,柱层析法、荧光法,与ELISA测定的AR水平均有良好的相关性(γ值分别为0.91,0.82,P值均＜0.01).结论糖尿病患者红细胞AR不仅活性增加,而且水平也升高.     

醛糖还原酶基因与糖尿病慢性并发症

讨论了醛糖还原酶基因的结构、调节及其变异与糖尿病慢性并发症之间的关系     

醛糖还原酶抑制剂依帕司他改善大鼠糖尿病膀胱病变组织的功能

目的 研究醛糖还原酶(AR)、一氧化氮(NO)与糖尿病膀胱病(DCP)的关系,探讨醛糖还原酶抑制剂(ARIs)依帕司他对DCP的治疗作用. 方法 雄性SD大鼠60只分三组;正常组、糖尿病组和治疗组.测定膀胱组织AR活性,NO含量及一氧化氮合酶(NOS)活性. 结果与正常组相比,糖尿病组膀胱组织内AR活性、NO含量和NOS活性升高(P<0.01),治疗组AR活性、NO含量和NOS活性均低于糖尿病组(P<0.05). 结论 依帕司他通过抑制AR活性,调节NO含量变化及NOS活性,减轻氧化应激反应,改善膀胱组织的功能.     

Effects of Glucose and SNK-860, an Aldose Reductase Inhibitor,on the Polyol Pathway and Chemiluminescence Response of Human Neutrophils in vitro

An in vitro incubation study was conducted to investigate whether increased activity of the polyol pathway in human neutrophils under diabetic conditions resulted in a decrease of superoxide anion produced by NADPH oxidase on the membrane of neutrophils. Lucigenin-enhanced chemiluminescence (CL) to phorbol myristate acetate as respiratory burst and sorbitol levels in neutrophils after incubation with glucose and an aldose reductase (AR) inhibitor, SNK-860 (SNK) were measured. Sorbitol levels increased from 0.210 ± 0.029 nmol 10⁷ cells ^?1 in 5 mmol I^?1 glucose to 0.446 ± 0.036 nmol 10⁷ cells^?1 in 40 mmol I^?1 glucose, while CL decreased from 0.542 ± 0.034 cpm cell^?1 in 5 mmol I^?1 glucose to 0.430 ± 0.018 cpm cell^?1 in 40 mmol I^?1 glucose. The addition of 10 μmol I^?1 SNK normalized the increased sorbitol levels in neutrophils exposed to 40 mmol I^?1 glucose and improved, but did not normalize, the decrease in CL induced by 40 mmol I^?1 glucose (p < 0.001). Galactose (40 mmol I^?1) also reduced CL, which was improved by the addition of SNK (p < 0.01). These results suggest that impaired respiratory burst induced by high-glucose concentrations is caused by competition for NADPH resulting from increased polyol pathway activity and/or glycation and that an AR inhibitor may be capable in part of preventing increased susceptibility to infection in diabetic patients.     

醛糖还原酶抑制剂与糖尿病慢性并发症

高血糖使醛糖还原酶过度激活,引起组织中山梨醇积聚,与高血糖等因素共同促进糖尿病并发症的发生发展。研究显示醛糖还原酶抑制剂可抑制山梨醇途径,通过抗氧化应激和炎症、抑制细胞凋亡、改善微循环障碍和能量代谢等延缓和治疗糖尿病并发症。醛糖还原酶抑制剂依帕司他在糖尿病微血管病变如周围神经病变、自主神经病变、肾脏疾病和视网膜病变研究中有良好作用,尤其在糖尿病周围神经病变、视网膜病变治疗中有循证医学证据,为美国糖尿病学会和中国糖尿病神经病变诊治规范的推荐药物。醛糖还原酶抑制剂新药开发给糖尿病慢性并发症防治带来新希望。     

A Meta-analysis of Trials on Aldose Reductase Inhibitors in Diabetic Peripheral Neuropathy

Peripheral neuropathy is one of the most common and disabling long-term seque lae of diabetes mellitus. Aldose reductase inhibitors (ARIs) have been proposed and are increasingly used in many countries for the prevention and treatment of diabetic neuropathy. The aim of this study was to review existing evidence on the effectiveness of ARIs in the treatment of peripheral diabetic neuropathy, with particular reference to the type and clinical relevance of the end point used and to the consistency of results across studies. Thirteen randomized clinical trials (RTCs) comparing ARIs with placebo, published between 1981 and 1993 were included in the meta-analysis. Nerve conduction velocity (NCV) was the only end point reported in all trials. Treatment effect was thus evaluated in terms of NCV mean difference in four different nerves: median motor, median sensory, peroneal motor, and sural sensory. A statistically significant reduction in decline of median motor NCV was present in the treated group as compared to the control group (mean 0.91 ms⁻¹; 95 % CI 0.41–1.42 ms⁻¹). For peroneal motor, median sensory, and sural sensory nerves results did not show any clear benefit for patients treated with ARIs. When the analysis was limited to trials with at least 1-year treatment duration, a significant effect was present for peroneal motor NCV (mean 1.24 ms⁻¹; 95 % CI 0.32–2.15 ms⁻¹) and a benefit of borderline statistical significance was also present for median motor NCV (mean 0.69 ms⁻¹; 95% CI −0.07−1.45 ms⁻¹). A heterogeneous picture emerged when looking at the results of different studies and serious inconsistencies were also present in the direction of treatment effects among nerves in the same studies. Although the results of 1-year treatment on motor NCV seem encouraging, the uncertainty about the reliability of the end-point employed and the short treatment duration do not allow any clear conclusion about the efficacy of ARIs in the treatment of peripheral diabetic neuropathy.     

依帕司他对醛糖还原酶和核转录因子-κB表达及血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究依帕司他对醛糖还原酶(AR)、核转录因子(NF)-κB表达及血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响,探讨依帕司他抗细胞增殖的可能机制。方法取大鼠胸主动脉段行VSMC培养,用高浓度葡萄糖(22.5mmol/L)诱导AR基因表达,然后加入不同浓度的依帕司他,培养3d后行VSMC计数,并用免疫组化、RT-PCR及原位杂交的方法检测NF-κB及AR的表达。结果①随依帕司他浓度的增加,VSMC计数逐渐减少。②高浓度葡萄糖时NF-κB表达强阳性,加入不同浓度的依帕司他后,NF-κB表达逐渐减弱。③高浓度葡萄糖可明显诱导AR基因表达,依帕司他对其表达有抑制作用,且呈剂量依赖性。结论①高浓度葡萄糖可促进VSMC增殖,依帕司他可抑制这一增殖作用,且具有剂量依赖性。②依帕司他可抑制AR及NF-κB的表达。③依帕司他可能是通过抑制AR及NF-κB的表达继而抑制VSMC的增殖。