低氧对SH-SY5Y细胞miR-124及BACE1蛋白表达的影响

目的研究低氧对培养细胞miR-124及β-淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)蛋白表达的影响。方法培养人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),分为对照组、氧-糖剥夺组、Aβ1-42处理组、过表达或抑制miR-124组,用实时定量PCR方法检测miR-124表达,Western blot法检测BACE1蛋白表达。结果氧-糖剥夺处理48 h,细胞内miR-124表达水平明显下降,仅为对照组的46.9%(P0.05),BAE1蛋白表达水平与较对照组增高36%(P0.01);转染miR-124过表达组组细胞内miR-124表达水平较对照组增高245倍(P0.01),为miR-124过表达对照组的219倍(P0.01),BACE1蛋白表达水平较对照组下降了29%(P0.05),较miR-124过表达对照组下降25%(P0.05)。转染miR-124抑制剂组miR-124表达水平下降至对照组的45.4%(P0.05),至miR-124抑制对照组的48%(P0.05),BACE1表达水平较对照组升高21%(P0.05),较miR-124抑制对照组升高40.3%(P0.01);细胞经Aβ1-42处理24 h,miR-124表达水平较对照组下降52%(P0.05),BACE1蛋白表达水平较对照组增高51%(P0.05)。结论低氧通过降低SH-SY5Y细胞miR-124表达进而升高BAEC1蛋白表达,且可能在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)早期发病中发挥作用。     

miR-7通过调节AEG-1途径对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的分析miR-7对肝癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响及其作用机制。方法取对数生长期的HepG-2细胞分为对照组、miR-7模拟物组、转染miR阴性组并选择非肿瘤细胞系HL7702作为HL7702组,依照分组转染miR-7及阴性miR;后使用RT-PCR法检测其中miR-7水平,并检测各组细胞增殖活性、细胞侵袭活性、细胞迁移活性及AEG-1蛋白表达情况。结果 miR-7模拟物组miR-7水平明显高于HepG-2对照组及转染miR阴性组(P0.01);24 h或48 h时miR-7模拟物组细胞增殖活力明显高于HepG-2对照组及转染miR阴性组(P0.01);miR-7模拟物组侵袭细胞数、细胞迁移率及AEG-1蛋白明显低于HepG-2对照组及转染miR阴性组(P0.01)。结论在肝癌细胞中miR-7可通过调控AEG-1途径而有效抑制增殖、侵袭和迁移。     

miR-186介导YAP1调控乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨 miR-186 介导的 YAP1 对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 采用 qRT-PCR 和 Western blot法检测 miR-186、YAP1 蛋白在正常乳腺细胞 MDA-kb2及人乳腺癌细胞MDA-MB-231 中的表达;利用Lipofectamine 2000 试剂将miR-186 mimic转染至乳腺癌细胞,荧光显微镜下观察转染效率;采用CCK-8 法检测乳腺癌细胞的增殖能力;细胞划痕实验检测细胞的迁移能力;Transwell细胞侵袭实验检测细胞的侵袭能力;Western blot法检测YAP1 蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验检测miR-186 与 YAP1 的靶向关系.结果 与正常乳腺细胞相比,乳腺癌细胞中miR-186 表达量显著减少(P＜0.01),YAP1 蛋白表达量显著增加(P＜0.01).与对照组相比,miR-186 过表达可明显降低乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P＜0.05),同时降低了YAP1 蛋白表达(P＜0.01).miR-186 和野生型YAP1 载体共转染细胞的荧光素酶活性显著降低(P＜0.01).结论 miR-186 在乳腺癌细胞中表达下调,过表达miR-186 通过介导YAP1 抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭.     

CHRDL1 调节结直肠癌增殖、 迁移和侵袭

目的 探讨腱蛋白样蛋白 1 (chordin-like 1, CHRDL1) 对结直肠癌 (colorectal cancer, CRC) 进 展的调节作用。 方法 数据库分析 CHRDL1 与 CRC 进展、 预后关系, 构建 CHRDL1 过表达 SW480、 HT29 细胞系并检测细胞增殖、 迁移和侵袭, 体外移植瘤实验检测肿瘤生长, 分析 CHRDL1 过表达对 CRC 细胞迁 移和侵袭作用机制。 结果 CHRDL1 在 CRC 进展中呈高表达且可影响预后。 CHRDL1 过表达可促进细胞增 殖、 迁移、 侵袭和移植瘤生长, 促进 Vimentin、 N-Cadherin、 snail 表达, 抑制 E-Cadherin 表达, CHRDL1 与 snail 存在互作关系, 干扰 snail 表达可逆转上述指标趋势。 结论 CHRDL1 可促进 CRC 细胞增殖, 还可通 过 Snail 促进 CRC 细胞上皮间质转化来发挥促进细胞迁移、 侵袭作用。     

miR-451a通过靶向调节MEF2D抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的研究miR-451a在膀胱癌中的表达及对膀胱癌发生发展的影响。方法通过实时定量PCR(real-time PCR)检测miR-451a在膀胱癌细胞系及组织标本中的表达。采用real-time PCR和Western blot检测MEF2D在膀胱癌组织及转染miR-451a mimics和inhibitor的T24细胞中的表达。双荧光素酶基因报告实验分析MEF2D是否为miR-451a直接的靶基因。通过MTT,Transwell迁移和侵袭实验检测T24细胞在转入miR-451a mimics和inhibitor后细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。结果 miR-451a在膀胱癌细胞及组织中的表达水平下调。miR-451a抑制了T24细胞的增殖、迁移和侵袭。双荧光素酶基因报告证实MEF2D为miR-451a的直接靶基因。miR-451a能够降低T24细胞MEF2DmRNA和蛋白表达水平。结论 miR-451a在膀胱癌中表达下调,通过靶向调节MDF2D起到了抑癌的作用,可能成为膀胱癌诊疗的潜在靶点。     

miR-760对胃癌细胞系MGC-803增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨miR-760对胃癌细胞系MGC-803增殖、迁移和侵袭的影响。方法 Real-time PCR分析50例胃癌组织(C)及其癌旁(N)中miR-760的表达水平;用pc DNA3.1载体构建过表达miR-760的重组质粒(pc DNA-miR-760),实现miR-760在MGC-803细胞中的过表达;分别用CCK-8法、Transwell和划痕实验检测细胞增殖、侵袭和迁移能力。结果与癌旁对照组相比,36例(72%)胃癌组织中出现miR-760的表达下调;过表达miR-760能显著抑制MGC-803细胞的迁移和侵袭能力(P0.05),但对其增殖影响不大。结论 miR-760的表达下调可能与胃癌的进展有关,过表达miR-760可以抑制胃癌MGC-803细胞的迁移和侵袭。     

miR-541-3p靶向SPOCD1基因通过Wnt/β-catenin信号通路抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:探讨miR-541-3p对乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制.方法:将miR-con、miR-541-3p、anti-miR-con、anti-miR-541-3p、si-con、si-SPOCD1分别转染至MCF-7细胞中,分别记为miR-con组、miR-541-3p组、anti-miR-con组...     

miR-379对胶质瘤U87MG细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的研究miR-379对胶质瘤U87MG细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法 Real-time PCR方法检测miR-379在胶质瘤U87MG细胞和正常星型胶质细胞中的表达水平。在胶质瘤U87MG细胞中瞬时转染miR-379 agomir并用real-time PCR方法验证其转染效率。CCK-8方法检测miR-379对胶质瘤U87MG细胞增殖能力的影响。划痕实验检测miR-379对胶质瘤U87MG细胞迁移能力的影响。Transwell侵袭实验检测miR-379对胶质瘤U87MG细胞侵袭能力的影响。结果 miR-379在胶质瘤U87MG细胞中的表达水平显著低于在正常星型胶质细胞中的表达。miR-379 agomir抑制胶质瘤U87MG细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结论 miR-379抑制胶质瘤U87MG细胞的增殖、迁移和侵袭能力。     

LncRNA TMPO-AS1通过调节miR-204-3p影响肺癌细胞的增殖、凋亡和侵袭

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)TMPO-AS1通过调节miR-204-3p的表达对肺癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法:实时荧光定量PCR(qPCR)检测人肺癌细胞系A549、H1975、H1299和H1650和人正常支气管上皮细胞系HBE中TMPO-AS1的表达水平.采用脂质体转染技术沉默A549细胞中T...     

lncRNA PSMA3-AS1 靶向 miR-3619-5p 调控宫颈癌 SiHa 细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制研究

目的 探讨 lncRNA PSMA3-AS1 调控宫颈癌细胞增殖、 迁移及侵袭的分子机制。 方法 收集 2020 年 3 月至 2021 年 6 月西安医学院第二附属医院收治的 42 例宫颈癌患者的癌组织及其癌旁组织标本, 采用 qRT-PCR 法检测宫颈癌组织、 癌旁组织、 人宫颈上皮永生化细胞 H8、 与人宫颈癌细胞系 SiHa、 HeLa、 Caski 中 lncRNA PSMA3-AS1、 miR-3619-5p 的表达量; 以 SiHa 细胞为研究对象, 分组为: si-NC 组、 si-lncRNA PSMA3-AS1 组、 miR-NC 组、 miR-3619-5p 组、 anti-miR-NC + si-lncRNA PSMA3-AS1 组、 anti-miR-3619-5p + si-lncRNA PSMA3-AS1 组; MTT 法与 Transwells 实验分别检测每组 SiHa 细胞的增殖活力、 迁移及侵袭能力; 双 荧光素酶报告实验检测 miR-3619-5p 过表达对野生型载体 lncRNA PSMA3-AS1-WT、 突变型载体 lncRNA PSMA3-AS1-MUT 荧光素酶活性的影响; Western 印迹检测 MMP2、 MMP9 蛋白表达量。 结果 宫颈癌组织中 lncRNA PSMA3-AS1 的表达量比癌旁组织增加 ( P < 0. 01), miR-3619-5p 的表达量比癌旁组织减少 ( P < 0. 01); 与 H8 细胞比较, SiHa、 HeLa、 Caski 细胞中 lncRNA PSMA3-AS1 的表达量升高 (P< 0. 01), miR-3619-5p 的表达量降低 (P< 0. 01); 与 si-NC 组比较, si-lncRNA PSMA3-AS1 组细胞活力和 MMP2、 MMP9 蛋 白水平降低 (P< 0. 05), 迁移及侵袭细胞数减少 (P< 0. 05); 与 miR-NC 组比较, miR-3619-5p 组细胞活力 和 MMP2、 MMP9 蛋白水平降低 (P< 0. 01), 迁移及侵袭细胞数减少 (P< 0. 05); miR-3619-5p 过表达可抑 制 lncRNA PSMA3-AS1-WT 的荧光素酶活性 (P< 0. 01), 而未能影响 lncRNA PSMA3-AS1-MUT 的荧光素酶活 性; 与 anti-miR-NC + si-lncRNA PSMA3-AS1 组比较, anti-miR-3619-5p + si-lncRNA PSMA3-AS1 组细胞活力和 MMP2、 MMP9 蛋白水平升高 (P< 0. 01), 迁移及侵袭细胞数增多 (P< 0. 01)。 结论 干扰 lncRNA PSMA3- AS1 表达可通过促进 miR-3619-5p 而降低宫颈癌细胞增殖、 迁移及侵袭能力。     

LncRNA DSCAM-AS1通过靶向miR-627-3p调控皮肤鳞状细胞癌增殖、侵袭和迁移

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)唐氏综合征细胞粘附分子反义1(DSCAM-AS1)靶向miR-627-3p对人皮肤鳞状细胞癌增殖和侵袭能力的影响和分子机制.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测DSCAM-AS1和miR-627-3p在人永生化表皮细胞HaCaT和3种皮肤鳞状细胞癌细胞(SCC13...     

LINC00659靶向miR-149-5p调控食管鳞癌细胞Eca-109的增殖、迁移、侵袭及放射敏感性

目的 探讨长基因间非编码RNA 00659(LINC00659)是否靶向miR-149-5p调控食管鳞癌Eca-109细胞的增殖、 迁移侵袭及放射敏感性.方法 实时定量PCR(RT-qPCR)分析30对食管鳞癌组织、 对照组织中LINC00659和miR-149-5p表达量.将Eca-109细胞分为si-NC组、si-...     

白蛋白结合型紫杉醇调控SLC25A25-AS1对肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨白蛋白结合型紫杉醇是否调控SLC25A25-AS1影响肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭.方法 将A549细胞分为对照组、低剂量药物组、中剂量药物组、高剂量药物组、高剂量药物+si-NC组、高剂量药物+si-SLC25A25-AS1组.细胞计数试剂盒(CCK-8)法、集落形成实验检测细胞增殖;划痕实验和Tran...     

circUBE2D2 靶向 miR-376a-3p 调控结直肠癌 SW620 细胞的增殖、迁移及侵袭

目的 探讨 circUBE2D2 对结直肠癌 SW620 细胞增殖、 迁移及侵袭的影响及其可能作用机制。 方法 收集 2020 年 1 月至 2020 年 5 月大连大学附属新华医院肛肠外科收治的 45 例结直肠癌患者的癌组织及 其相应癌旁组织标本, 采用 qRT-PCR 法检测 circUBE2D2、 miR-376a-3p 的表达量; 以人结直肠癌细胞 SW620 为研究对象, 随机分为 si-NC 组、 si-circUBE2D2 组、 miR-NC 组、 miR-376a-3p 组、 si-circUBE2D2 + anti-miR-NC 组和 si-circUBE2D2 + anti-miR-376a-3p 组; CCK-8 法、 平板克隆形成实验、 划痕实验与 Transwell 实验分别检测细胞增殖、 克隆形成、 迁移及侵袭; 双荧光素酶报告实验检测 miR-376a-3p 过表达对野 生型载体 WT-circUBE2D2 的荧光素酶活性; Western 印迹法检测上皮型钙黏蛋白 (E-cadherin)、 神经型钙 黏蛋白 (N-cadherin) 蛋白表达量。 结果 与癌旁组织比较, 结直肠癌组织中 circUBE2D2 的表达量升高 (P< 0. 05), miR-376a-3p 的表达量降低 (P< 0. 05); 与 si-NC 组比较, si-circUBE2D2 组细胞活力、 划痕愈 合率和 N-cadherin 蛋白水平降低 (P< 0. 05), 细胞克隆形成数和侵袭细胞数减少 (P< 0. 05), E-cadherin 蛋 白水平升高 (P< 0. 05); 与 miR-NC 组比较, miR-376a-3p 组细胞活力、 划痕愈合率和 N-cadherin 蛋白水平 降低 (P< 0. 05), 细胞克隆形成数和侵袭细胞数减少 (P< 0. 05), E-cadherin 蛋白水平升高 (P< 0. 05); miR-376a-3p 过表达可抑制野生型载体 WT-circUBE2D2 的荧光素酶活性 (P< 0. 05); 与 si-circUBE2D2 + anti-miR-NC 组比较, si-circUBE2D2 + anti-miR-376a-3p 组细胞活力、 划痕愈合率和 N-cadherin 蛋白水平升高 (P< 0. 05), 细胞克隆形成数和侵袭细胞数增多 (P< 0. 05), E-cadherin 蛋白水平降低 (P< 0. 05)。 结论 干扰 circUBE2D2 表达可通过靶向调控 miR-376a-3p 表达而降低结直肠癌细胞增殖、 克隆形成、 迁移及侵袭 能力。     

miR-133b 靶向 PTBP1 对肾细胞癌增殖和侵袭的影响

目的 探讨 miR-133b 靶向多聚嘧啶区结合蛋白1 (polyrimidine tract binding protein 1, PTBP1) 对 肾细胞癌 (renal cell carcinoma, RCC) 增殖和侵袭的影响。 方法 检测 miR-133b 在 RCC 癌组织及细胞中 的表达水平; 验证 miR-133b 与 PTBP1 的靶向关系及 miR-133b 表达对肾癌细胞 PTBP1 表达及增殖、 迁移的 影响。 结果 与癌旁组织比较, miR-133b 在 RCC 组织中表达下降, 而 PTBP1 上升 (P< 0. 05)。 PTBP1 是 miR-133b 的靶基因; 与 miR-NC 组比较, miR-133b mimic 组的克隆形成率、 侵袭细胞数目及 PTBP1 表达明 显下降, 而 miR-133b inhibitor 组上升; 与 miR-133b mimic + pc-NC 组比较, miR-133b mimic + pc-PTBP1 组的 克隆形成率、 侵袭细胞数目及 PTBP1 表达水平上升 (P< 0. 05)。 结论 miR-133b 在 RCC 癌组织及细胞中 表达下调, 且其可能通过调控 PTBP1 的表达水平来影响细胞的增殖和侵袭能力。     

miR-188-3p靶向YAP1抑制肝细胞癌的侵袭和迁移

目的 探究miR-188-3p在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其抑制HCC细胞侵袭和迁移的分子机制.方法 利用RT-qPCR检测miR-188-3p在人HCC组织和细胞系中的表达情况,进一步分析miR-188-3p表达在HCC中的临床价值;利用Western印迹检测转染m...     

lncRNA SNHG17 靶向 miR-525-5p 对人绒毛膜滋养层细胞增殖、 迁移和侵袭的影响

目的 探讨 lncRNA SNHG17 对人绒毛膜滋养层细胞生长及转移的影响及其可能作用机制。 方法 qRT-PCR 检测正常胎盘组织、 子痫前期胎盘组织中 lncRNA SNHG17 和 miR-525-5p 表达。 体外培养人绒 毛膜滋养层细胞 HTR-8 / SVneo, 分别转染 si-SNHG17、 anti-miR-525-5p 及其阴性对照; 采用平板克隆形成实 验、 划痕实验与 Transwell 实验分别检测细胞增殖、 迁移及侵袭能力; 双荧光素酶报告实验检测 miR-525-5p 与 SNHG17 的靶向关系。 结果 与正常胎盘组织比较, 子痫前期胎盘组织中 lncRNA SNHG17 表达升高, miR-525-5p 表达降低 (P< 0. 05)。 转染 si-SNHG17 后细胞克隆形成数和侵袭细胞数增多, 划痕愈合率升高 (P< 0. 05)。 lncRNA SNHG17 靶向调控 miR-525-5p; 共转染 si-SNHG17 和 anti-miR-525-5p 后细胞克隆形成数 和侵袭细胞数减少, 划痕愈合率降低 (P< 0. 05)。 结论 沉默 lncRNA SNHG17 可通过促进 miR-525-5p 表 达而促进人绒毛膜滋养层细胞增殖、 迁移及侵袭。     

SOX12 Promotes Thyroid Cancer Cell Proliferation and Invasion by Regulating the Expression of POU2F1 and POU3F1

PurposeSOX12 is overexpressed in many cancers, and we aimed to explore the biological function and mechanism of SOX12 in thyroid cancer.Materials and MethodsWe first analyzed the expression of SOX12 in thyroid cancer using data in The Cancer Genome Atlas. Immunohistochemistry and qRT-PCR were performed to identify SOX12 expression in thyroid cancer tissue and cells. Thyroid cancer cells were transfected with small interfering RNA targeting SOX12, and cellular functional experiments, including CCK8, wound healing, and Transwell assays, were performed. Protein expression was examined by Western blot analysis. A xenograft model was developed to evaluate the effect of SOX12 on tumor growth in vivo.ResultsSOX12 expression was increased in thyroid cancer tissue and cells. SOX12 promoted cell proliferation, migration, and invasion and accelerated tumor growth in vivo. The expression of PCNA, Cyclin D1, E-cadherin, Snail, MMP-2, and MMP-9 was affected by SOX12 knockdown. Bioinformatic analysis showed that SOX12 could interact with the POU family. SOX12 knockdown inhibited the expression of POU2F1, POU2F2, POU3F1 and POU3F2, and SOX12 expression showed a positive correlation with POU2F1, POU3F1, and POU3F2 expression in clinical data. POU2F1 and POU3F1 were able to reverse the effect of SOX12 knockdown on thyroid cancer cells.ConclusionSOX12 affects the progression of thyroid cancer by regulating epithelial-mesenchymal transition and interacting with POU2F1 and POU3F1, which may be novel targets for thyroid cancer molecular therapy.