非通气侧肺持续中低流量给氧对患者肺泡巨噬细胞凋亡及自噬的抑制作用

目的 探讨单肺通气(OLV)时非通气侧肺持续中低流量给氧对老年患者肺泡巨噬细胞(AM)凋亡及自噬的影响.方法 择期行胸腔镜下肺癌根治术的老年患者60例,年龄65～80岁,分成研究组和对照组,每组30例.OLV后研究组患者非通气侧肺给予1～4 L/min的持续性中低流量给氧,对照组患者非通气侧肺不给予持续性中低流量给氧....     

吸烟对肺泡巨噬细胞凋亡的影响

目的：观察吸烟或不吸烟者肺泡巨噬细胞凋亡的变化。方法：对吸烟或不吸烟者肺泡巨噬细胞进行染色观察及流式细胞仪ＤＮＡ分析。结果：吸烟者肺泡巨噬细胞生存时间延长,吸烟组存活率为（７６．３±１２．５）％,不吸烟组为（５５．４±１１．６）％,两者差异显著（Ｐ＜０．０５）。荧光染色吸烟组凋亡细胞百分率为（３８．６±１１．５）％,不吸烟组凋亡细胞百分率为（５９．４±１２．１）％。流式细胞仪观察凋亡细胞百分率吸烟组为（１１．５±１０．４）％,不吸烟组为（２９．１±８．６）％。吸烟组巨噬细胞凋亡较不吸烟者明显减少。结论：烟雾中某些成分可能通过抑制巨噬细胞凋亡,在肺气肿的发病中起重要作用。     

全氟化碳对兔肺泡巨噬细胞功能的影响

目的：通过观察全氟化碳（ＰＦＣ）对兔肺泡巨噬细胞（ＡＭ）功能的影响;探讨急性肺损伤（ＡＬＩ）动物应用部分液体通气（ＰＬＶ）治疗后肺部炎症减轻的可能原因。方法：兔ＡＭ暴露于全氟萘烷（ＦＤＣ）后,观察在有效刺激下产生过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）,肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）及一氧化氮（ＮＯ）能力的变化。结果：ＡＭ暴露于ＦＤＣ后产生Ｈ２Ｏ２,ＴＮＦ－α和ＮＯ的量明显降低。结论：在体外ＦＤＣ能明显降低ＡＭ对有效刺激     

术侧肺持续中低流量给氧对单肺通气期间肺保护作用的研究进展

单肺通气(One-lung ventilation, OLV)是胸科手术中常用的通气方法。OLV在胸科手术中能够发挥重要作用，但此种方式会增加术中肺损伤的发生风险，术后易出现肺部并发症，严重影响患者康复，目前临床上缺乏有效的保护措施。近年来，术侧肺持续中低流量给氧对单肺通气期间的肺保护作用逐渐成为临床研究热点。本文讨论了术侧肺持续中低流量给氧对单肺通气期间的肺保护作用。     

脂多糖对衰老大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响

目的探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对衰老大鼠模型肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)凋亡的影响方法用D-半乳糖(D-galactose,D-gal)复制衰老大鼠模型,实验动物分为老年组和青年组,青老年大鼠分别通过支气管肺泡灌洗和细胞贴壁的方法获取AM,将其分为LPS刺激组和对照组,每组6只,LPS刺激组用10mg/l LPS直接攻击细胞,24h后用AnnexinⅤ-FITC细胞凋亡检测试剂盒进行检测。结果衰老大鼠LPS刺激组细胞凋亡百分率(50.57%±2.29%)高于对照组(17.25%±1.68%,P<0.05);青年大鼠LPS刺激组(28.22%±1.75%)较对照组(14.25%±3.09%,P<0.05)高,青老年对照组之间差异无统计学意义。结论LPS刺激组的AM凋亡衰老大鼠明显高于青年组,老年大鼠对LPS刺激的反应程度大于青年组。     

地塞米松对大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响

目的：通过研究地塞米松对大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响,探讨地塞米松治疗急性肺损伤的作用机理。方法：健康雄性Wistar大鼠放血处死后全肺灌洗获取肺泡巨噬细胞（PAMs）,贴壁纯化,在预培养20h后重悬PAMs,分3组分别处理4h。正常对照（C）组：不做任何干预;脂多糖（LPS）组：按10μg／ml。的剂量加入LPS刺激;脂多糖加地塞米松（LPS＋Dex）组：将含Dex终浓度1×10mmol／L～1×6mmol／L的RPMI 1640培养基加入LPS。收集PAMs,与1％鸡红细胞悬液培育后制片,瑞氏染色观察并计算吞噬率和吞噬指数,对两者做相关回归分析并采用单因素方差分析比较组间差异。结果：各组AM的吞噬率和吞噬指数呈线性相关性关系．从高到低依次为：C组（12．50±2．07）％,2．29±0．08;LPS＋DeX组（8．25±1．67）％,1．73±0．18;LPS组（3．50±1．20）％,1．16±0．19;各组间的差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论：LPS可抑制体外培养PAMs的吞噬活性;Dex对LPS抑制的PAMS吞噬活性有一定的活化作用。     

肺泡巨噬细胞凋亡对肺间质纤维化的影响

目的了解肺泡巨噬细胞的凋亡对肺间质纤维化进展的影响。方法收集一组肺间质纤维化患者的肺泡巨噬细胞（AM）,与正常组进行对比,检测两组AM产生细胞因子的活性;然后以干扰素-γ（IFN-1）诱导肺间质纤维化患者AM凋亡,对照诱导前后AM凋亡情况,同时检测诱导前后AM产生细胞因子的活性。结果肺间质纤维化患者AM培养上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）水平均明显高于对照组（P〈0．01）;AM的诱导凋亡率较自然凋亡率明显增高（P〈0．01）;诱导后AM产生细胞因子的活性明显低于诱导前的AM（P均〈0．01）。结论在肺间质纤维化的早期,利用IFN-γ诱导其AM凋亡,就可抑制AM产生细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8等,从而控制肺泡炎,阻止肺间质纤维化的进程。     

肺癌患者肺泡巨噬细胞表现HLA-DR的表达

目的 了解肺癌患者肺泡巨噬细胞表面人白细胞抗原-DR(HLA-DR)的表达。方法 经支气管肺泡灌洗获肺泡巨噬细胞，贴壁分离及培养，免疫组化方法检测HLA-DR表达的阳性细胞百分率。结果 ① 肺癌及良性肺病患者，其肺泡巨噬细胞未经刺激，均已有部分表达HLA-DR，但前者明显高于后者；② 干扰素-α(IFN-α)或脂多糖(LPS)刺激后，HLA-DR的表达均增加，且两者联合刺激优于单独刺激；③ 无论刺激与否，肺癌组荷瘤侧肺与非荷瘤侧肺比较，肺泡巨噬细胞表达HLA-DR的阳性细胞率明显增高。结论 肺癌患者，尤其是肿瘤局部，肺泡巨噬细胞可能通过表达HLA-DR提高抗原递呈功能。IFN-α、LPS均能明显增强肺癌患者肺泡巨噬细胞的抗原提呈功能，且两者有协同作用。     

严重胸部创伤对肺泡巨噬细胞免疫功能的影响

目的观察严重胸部创伤后肺泡巨噬细胞免疫功能的变化,并探讨其意义.方法建立严重胸部创伤模型,支气管肺泡灌洗分离、培养肺泡巨噬细胞,检测创伤前、创伤后2、4、8、16、24h以及复合LPS攻击后肺泡巨噬细胞吞噬功能、抗原提呈以及细胞因子分泌等免疫功能的变化.结果利用小型多功能生物撞击机以400kPa驱动压力对大鼠右侧上胸壁进行致伤,能够建立稳定可靠并符合临床特点的严重胸部创伤模型;严重胸部创伤对肺泡巨噬细胞的吞噬功能表现为先增强后抑制;伤后其抗原提呈功能受抑,伤后4h最低,而分泌细胞因子TNF-α增强,伤后4h达到高峰.结论严重胸部创伤导致肺泡巨噬细胞免疫功能紊乱,本研究为创伤性急性肺损伤的发病机制提供了一定的实验及理论依据.     

慢性阻塞性肺病患者肺泡巨噬细胞凋亡测定及其意义

目的探讨慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)凋亡特点.方法经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞AM.①利用髓过氧化物酶(MPO)染色法观察AM的染色阳性率;②利用TUNEL技术观察支气管肺泡灌洗液中AM凋亡的变化和地塞米松对其凋亡的影响.结果①COPD患者AM之MPO染色阳性率(0.8±0.3)%显著低于对照组(1.2±0.4)%(P＜0.05).②支气管肺泡灌洗液中AM凋亡率(1.9±0.7)%显著低于对照组(4.8±1.3)%(P＜0.01).地塞米松处理12、24、48 h后的AM凋亡率分别为(9.2±2.3)%,(35.4±12.6)%和(45.8±9.2)%,显著高于对照组(5.9±1.8)%,(10.8±2.7)%和(24.1±4.6)%的凋亡率(P均＜0.01).结论吸烟等多种因素可导致COPD患者AM凋亡减少,其对凋亡中性粒细胞(PMN)的吞噬能力下降;较大剂量的糖皮质激素能诱导AM凋亡.     

二氧化硫对大鼠肢体缺血再灌注致急性肺损伤中肺泡巨噬细胞凋亡的影响

目的: 探讨二氧化硫(sulfur dioxide,SO₂)在肢体缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)致急性肺损伤(acute lung injury,ALI)保护作用中对肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)凋亡的影响,为控制炎症反应寻找新的靶点。方法: 分离培养AM,应用肢体缺血再灌注致ALI大鼠血清制备细胞模型,给予外源性SO₂,然后检测线粒体膜电位以及线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)开放情况,AM凋亡情况及凋亡相关Bcl-2、Caspase-3分子蛋白表达情况。结果: 与对照组相比,I/R组红、绿荧光的比值下降,吸光度显著降低,AM凋亡率增加到43.81%±2.40%,Caspase-3蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达下降;而与I/R组比较,I/R+SO₂组红、绿荧光的比值升高,吸光度增高,AM凋亡率减少37.01%±1.93%,Caspase-3蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高。结论: 外源性SO₂可通过抑制线粒体途径改善巨噬细胞的凋亡。     

肺保护性通气对急性肺损伤患者的影响

目的观察肺保护性通气对急性肺损伤(ALI)患者的影响。方法40例ALI患者均在常规治疗的基础上予以机械通气(SIMV模式),随机分为传统通气组和肺保护性通气组,每组各20例。记录ALI患者机械通气后即刻2、h6、h2、4 h及48 h的动脉血气结果、氧合指数(PaO2/FiO2)、气道平台压(PPlat)、吸入峰值压(PPeak)、呼吸系统顺应性(Crs)、呼气末正压(PEEP)、内源性PEEP(PEEPi)及28 d死亡率。结果肺保护性通气组在机械通气48 h后PaCO2明显增加[(48.6±3.5)mm Hg比(37.7±3.1)mm Hg,P<0.05],同时伴pH值明显下降[(7.25±0.16)比(7.33±0.23),P<0.05];两组患者在机械通气后PaO2/FiO2均有改善,且肺保护性通气组在通气后6 h明显优于传统通气组[(156±12)比(146±15),P<0.05];传统通气组的PPlat和PPeak均明显高于肺保护性通气组[通气24 h后分别为:(22.1±1.3)cm H2O比(16.6±2.1)cm H2O,(28.3±3.7)cm H2O比(24.6±2.1)cm H2O;通气48 h后分别为:(24.4±1.6)cm H2O比(16.5±1.7)cm H2O,(31.7±3.5)cm H2O比(25.3±2.3)cm H2O;P均<0.05];肺保护性通气组的PEEPi略高于传统通气组,差异无统计学意义(P>0.05);肺保护性通气组的28 d死亡率小于传统通气组(10%比20%),差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺保护性通气可改善ALI患者的氧合而不增加死亡率。     

健择对非小细胞肺癌患者肺泡巨噬细胞免疫功能影响的研究

目的探讨健择对非小细胞肺癌患者肺泡巨噬细胞(AM)凋亡及其分泌细胞毒效应分子功能的影响。方法ELISA法、酶法分别检测35例非小细胞肺癌患者支气管肺泡灌洗液中及其AM培养上清夜中TNF-α和NO水平,并分别用IFN-α、健择和两药联合干预AM培养,检测其培养上清液中TNF-α、NO变化水平。流式细胞仪检测健择对AM凋亡的影响。结果所有非小细胞肺癌患者其肺泡巨噬细胞均可自发地产生一定量的TNF-α和NO。非小细胞肺癌患者荷瘤侧肺NO和TNF-α活性无论是整体状态,还是细胞水平均明显低于非荷瘤侧肺。健择单独干预组肺泡巨噬细胞培养上清液中TNF-α和NO的浓度无明显变化(P>0.05);经IFN-α刺激肺泡巨噬细胞培养上清液中TNF-α和NO的浓度明显升高,与对照组比较差异呈显著性(P<0.01);健择和IFN-α联合干预下肺泡巨噬细胞培养上清液中TNF-α和NO水平较对照组、IFN-α干预组明显升高,差异呈显著性(P<0.05)。不同时间不同浓度健择对肺泡AM凋亡率无明显差异(P>0.05)。结论健择单独应用对肺泡巨噬细胞免疫功能无明显影响,联合干扰素时能提高非小细胞肺癌患者肺泡巨噬细胞抗肿瘤免疫功能。其机制有待进一步研究。     

单肺通气时降低吸入氧浓度对肺损伤的影响

单肺通气(OLV)期间吸入纯氧能使动脉血氧分压维持在较高的水平,但也会导致吸收性肺不张和氧中毒。虽然OLV期间降低吸入氧浓度会使低氧血症的发生率增加,但在充分评估围术期患者全身情况下,适当降低吸入氧浓度(Fi O2)能够减轻肺损伤。该文主要描述OLV期间氧中毒肺损伤的机制,介绍近年来OLV期间降低Fi O2对肺损伤的研究现状。     

胸科手术中不同单肺通气模式对呼吸力学及氧合的影响

目的观察胸科手术中不同单肺通气模式对呼吸力学及全身氧合的影响。方法将80例择期行胸外科手术患者分为双腔支气管导管组（A组,40例）和Coopdech封堵支气管导管组（B组,40例）。麻醉诱导后分别插入单腔气管导管或双腔气管导管,B组将封堵支气管导管通过普通气管导管放置于手术侧主支气管,两组导管位置均经纤维支气管镜证实并定位。术中观察双肺通气时（TLV）、单肺通气后30min（OLV30）和60min（OLV60）患者的气道阻力（PAW）和血气指标的变化。结果B组插管时间和定位时间均小于A组（〈0.01）;在TLV、OLV30和OLV60B组PAw明显低于A组（〈0.05）。两组血气指标PaO2、PaCO2、SaO2等差异无显著性（〉0.05）。结论Coopdech封堵式支气管导管用于单肺通气胸外科手术具有插管和定位方便,损伤小,分隔双肺完全,对患者生理干扰小等优点。     

LBP多抗对内毒素急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞IL-10、IL-18基因表达的影响

目的探讨脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding protein, LBP)多抗对内毒素急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞IL-10、IL-18基因表达的影响,为LBP多抗治疗急性肺损伤提供实验依据.方法 Wistar 雄性大鼠40只,随机分段等分为5组,A组为正常对照组; B组为LPS处理组;C组为LPS注射前30 min加LBP多抗预处理组;D组为LPS和LBP多抗同时处理组;E组为LPS注射后30 min加LBP多抗处理组.分离培养各组大鼠肺泡巨噬细胞,用RT-PCR方法测定其IL-10、IL-18 mRNA表达.结果 LPS显著增加IL-10、IL-18 mRNA表达(B组);LBP多抗能显著降低二者的表达,尤以预处理组(C)更明显.结论 LBP多抗能显著降低内毒素急性肺损伤炎症因子的IL-10、IL-18表达.     

YAP干扰下调 MARCO 受体表达抑制肺泡巨噬细胞的吞噬功能

摘要:目的 探讨 Yes相关蛋白(Yes-associatedprotein,YAP)对肺泡巨噬细胞(alveolarmacrophages,AMs)吞噬功 能的影响及相关机制。方法 通过鼻滴脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)构建急性肺损伤(ALI)小鼠模型,24h后经支气 管肺泡灌洗获取原代 AMs,采用 Westernblot检测原代 AMs中 YAP的表达;使用200ng/mL的 TNF-α刺激肺泡巨噬 细胞株 MH-S,24h后检测 YAP蛋白表达情况。MH-S细胞经 YAPsiRNA 干扰表达或经 Verteporfin抑制 YAP活性 48h后再与FITC-E.coli共孵育1h,流式细胞术检测 MH-S细胞吞噬率变化。MH-S细胞经 MARCO 阻断抗体(MARCOAb)作用6h后,检测其吞噬E.coli能力的变化。YAPsiRNA 干扰 MH-S细胞 YAP表达48h后,检测 MARCO 受 体的表达情况。结果 与对照组相比,ALI小鼠 AMs总蛋白(P<0.05)和胞质蛋白(P<0.01)中 YAP的表达均下降; TNF-α刺激后的 MH-S细胞,其总蛋白和胞质蛋白中 YAP蛋白水平均下降(均 P<0.05)。与干扰对照组(ScsiRNA 组)相比,YAPsiRNA 组 MH-S细胞吞噬能力降低(P<0.01);与对照组相比,YAP活性抑制组 MH-S细胞的吞噬率明 显下降(P<0.01)。用 MARCO Ab阻断 MARCO 受体后,MH-S吞噬率降低(P<0.01)。与 ScsiRNA 组相比,YAP siRNA 组 MH-S细胞 MARCO 受体表达降低(P<0.01)。结论 ALI小鼠 AMs中 YAP蛋白表达下降,YAP的下调可 以导致 AMs表面 MARCO 受体表达降低和吞噬E.coli能力减弱。     

单肺通气期间非通气侧肺持续给氧对氧合及肺内分流的影响

目的探讨单肺通气（OLV）期间非通气侧肺持续吹入氧对减少肺内分流和预防低氧血症的作用。方法择期开胸手术患者22例,ASAⅠ-Ⅱ级,随机分为对照组（A组）、观察组（B组）2组,每组各11例。B组在OLV期间非通气侧肺持续吹入氧气（1～3L／min）,A组在OLV期间非通气侧肺的支气管导管直接开口于大气中;并于OLV前（T1）、OLV 30min（T2）、OLV 60min（T3）、关胸双肺通气（TLV）30min,分别采动脉血作血气分析并计算肺内分流率（Qs／Qt值）。结果在OLV 30min及OLV 60min时,B组动脉血氧分压显著高于A组（P〈0．05）;OLV 30min时B组Qs／Qt显著低于A组（P〈0．05）。结论OLV期间非通气侧肺持续吹入氧气可以明显提高动脉血氧分压,减少肺内分流,减小低氧血症的发生率。     

不同潮气量机械通气对大鼠支气管和肺组织细胞凋亡的影响

OBJECTIVE: To investigate the changes in bronchial and alveolar epithelial cell apoptosis after mechanical ventilation with different tidal volumes and explore the mechanism and significance of cell apoptosis in ventilation-induced lung injury. METHODS: Thirty healthy male Sprague-Dawley rats were randomly divided into groups A, B and C to receive tracheotomy under anesthesia for ventilation with different tidal volumes (VT) for 4 h (VT of 10 ml/kg in group A, 20 ml/kg in group B and 40 ml/kg in group C). Lung histopathology was assessed after the ventilation and compared between the 3 groups. The severity of lung injury and bronchial epithelial edema was evaluated, and the extent and location of cell apoptosis in the bronchus and lung tissues were studied by transferase d-UTP end-labeling (TUNEL) assay and immunohistochemistry. RESULTS: After mechanical ventilation for 4 h, lung injury and bronchial epithelial edema increased with the increment of VT. By TUNEL assay, the apoptosis index of both alveolar and bronchial epithelial cells was found to increase with VT. Immunohistochemical study identified enhanced caspase-3 expression in the cytoplasm and nuclei of airway and alveolar epithelial cells and vascular endothelial cells in rats with high VT ventilation, and the enhancement was especially obvious in the bronchial epithelial cells. CONCLUSION: Mechanical ventilation with different VTs causes consistent changes in histopathology, cell apoptosis and caspase-3 expression in rats, which support the presumption that cell apoptosis plays an important role in the pathogenesis of high VT ventilation-induced lung injury.     

控制性肺膨胀对急性肺损伤患者的影响

目的：观察控制性肺膨胀（sustained inflation SI）对急性肺损伤（ALI/ARDS）患者的影响。方法：60例ALI/ARDS患者均在常规治疗基础上予呼吸机辅助呼吸,实行肺保护性通气,如指氧饱和度（SpO2）低于90%,予控制性肺膨胀治疗,于治疗前后监测潮气量（VT）、气道平台压（Pplat）、吸入峰值压（Ppeak）、平均气道压（Pmean）、呼吸系统顺应性（Crs）、气道阻力（R）及动脉血气分析。结果：应用控制性肺膨胀后,患者VT、Crs增加,Ppeak、Pplat、Pmean、R下降,动脉血气分析改善。结论：控制性肺膨胀在肺保护性通气的基础上可改善ALI/ARDS患者的氧合。