基于线粒体PCR基因芯片的骨关节炎发病机制

背景：软骨细胞具有修复受损软骨组织和维持软骨完整性的重要作用。线粒体功能障碍与细胞凋亡、老化和骨关节炎的病理过程密切相关。 目的：通过线粒体PCR芯片技术研究骨性关节炎软骨细胞中线粒体基因的差异表达。 方法：收集骨性关节炎患者及正常成人车祸后截肢者的关节软骨细胞,经过细胞的提取和培养、RNA提取和质量检测、mRNA提取和cDNA合成等处理后进行实时定量PCR检测。 结果与结论：所检测到的84个与线粒体相关的待检测基因中有18个线粒体基因在骨性关节炎中发生了显著改变。以骨性关节炎患者软骨细胞线粒体基因相对正常成人软骨细胞线粒体基因的表达倍数表示基因表达的改变情况,其中倍数改变和倍数调节均大于2的上调基因有BBC3,BCL2,SLC25A37等15个,倍数改变小于0.5和倍数调节小于-2的下调基因有CPT1B,SLC25A16,SLC25A24 共3个。18个线粒体差异基因功能分类如下： 膜极化和电位：BCL2, BCL2L1, TP53, UCP1, UCP3;线粒体转运功能：BCL2, BCL2L1, CPT1B, FXC1 (TIMM10B), MFN2, STARD3, TP53, UCP1, UCP3;小分子转运功能：SLC25A16, SLC25A2, SLC25A24, SLC25A31, SLC25A37;靶蛋白：FXC1 (TIMM10B),MFN2;线粒体蛋白转入：COX18, FXC1 (TIMM10B);内膜转运：FXC1 (TIMM10B), TIMM17B;线粒体裂变和融合：COX18, MFN2;线粒体局限化：MFN2;凋亡基因：BBC3, BCL2, BCL2L1, SOD2, P53。结果表明,骨性关节炎软骨细胞中线粒体发生了明显的能量代谢功能障碍。     

线粒体铁转运蛋白2(mitoferrin 2/SLC25A28)的原核表达及兔多克隆抗体制备

目的 构建人线粒体铁转运蛋白2(mitoferrin 2/SLC25A28)的原核表达质粒，进行蛋白表达和纯化，制备兔抗多克隆抗体并进行初步鉴定。方法 构建pET28a(+)-SLC25A28-His原核表达质粒，转化至BL21(DE3)大肠杆菌，采用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达。提取蛋白包涵体，并用8 mol/L尿素溶解，His-NTA柱纯化。获得纯化SLC25A28蛋白免疫新西兰大白兔制备SLC25A28多克隆抗体，Western blot法鉴定SLC25A28抗体特异性。结果 成功构建pET28a(+)-SLC25A28-His原核表达载体质粒，并在BL21(DE3)大肠杆菌中成功诱导表达SLC25A28蛋白，蛋白纯度约为90%, Western blot法证明制备的抗体能特异性识别小鼠睾丸组织中的SLC25A28蛋白。结论 成功对人SLC25A28进行了原核表达，并制备了具有特异性的兔抗人SLC25A28多克隆抗体。     

蛋白质如何输入线粒体

绝大多数的线粒体蛋白质是由核-胞浆遗传系统制造,然后再输送到细胞器内。某些输入的蛋白质不仅仅作为单纯的结构单位,也作为一种信息,藕此细胞核对线粒体的生长和分裂进行调节。那么,蛋白质如何穿过线粒体膜并到达它在线粒体内适当的位置呢?一般认为,多肽输送到线粒体内包括以下步骤,前体多肽的合成,这种前体与线粒体表面受体结合并易位(translocation)进入或穿过线粒体膜.根据多肽是否被输入到内膜-基质区域、膜间间隙(intramembrane space)还是外膜,其转运方式明显不同。     

ABCE1基因在人肾小球系膜细胞中的表达

ATP结合盒转运子E1(ATP-binding cassette transporter E1,ABCE1)属ATP结合盒转运子基因亚家族成员之一,其表达定位于细胞质及线粒体.该基因在人体各组织器官表达具有特异性.     

孤独症谱系障碍与线粒体失功能的关系

本文综述了孤独症谱系障碍(ASD)与线粒体失功能的关系。包括:1测定线粒体功能的方法;2原发线粒体疾病与孤独症的关系;3ASD与线粒体失功能的关系;4SLC25A12基因与ASD。     

可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子结合蛋白受体与巨噬细胞的免疫学功能☆

背景：巨噬细胞进行抗原吞噬、分泌细胞因子以及迁移,均需囊泡转运,而可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子结合蛋白受体家族在囊泡转运过程中发挥重要作用。 目的：全面了解可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子结合蛋白受体在巨噬细胞免疫活动中的功能和作用机制。 方法：以“snare proteins,macrophages,SNARE蛋白,巨噬细胞”为检索词检索PubMed、Embase和维普数据库(2011-11),语言限定为英文或中文。经阅读题目和摘要进行初筛,排除研究方向与本文无关、内容重复性研究。另补充必要的对理解其作用机制有帮助的文献。 结果与结论：最终纳入27篇文献。可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子结合蛋白受体家族是保证囊泡物质定向运输和准确卸载的分子基础,在巨噬细胞抗原吞噬、细胞因子分泌、以及移行过程中发挥作用。以可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子结合蛋白受体家族为切入点对巨噬细胞免疫活动进行研究是一种合理的策略。     

Karyopherins家族与核孔转运的研究进展

大分子物质入核是靠其核内定位序列 (NLS) ,而核内输出是靠其核输出信号 (NES)。不同的NLS和NES直接或靠配体间接的被转运受体识别。目前确定的转运受体都属于同一家族 -Karyopherins家族 ,它们可以在核和胞质间穿梭 ,可以与小的RanGTPase以及核孔蛋白相结合。RanGTPase调节转运受体与转运物、配体、核孔蛋白间的结合 ,而这是决定核孔转运的关键。然而一部分受体转运物复合物通过核孔复合体 (NPC)并不需要Ran水解GTP。     

解偶联蛋白及其在基础代谢中的作用

解偶联蛋白 (uncouplingprotein ,UCP)是线粒体内膜上重要的转运蛋白质 ,能引起线粒体质子漏 ,在调控及分配线粒体合成ATP与产热、调节细胞呼吸及NAD /NADH比例、抑制活性氧 (ROS)产生中有重要作用。     

SLC2A2基因变异与糖代谢异常疾病

SLC2A2基因是溶质转运家族2的成员之一，其编码蛋白分布于肝脏、胰腺、肾脏、下丘脑等组织，调节细胞对葡萄糖的摄取，具有重要的生理功能。研究表明SLC2A2基因的变异与糖尿病、Fanconi—Bickel综合征等糖代谢异常的疾病的发生息息相关。     

线粒体膜间隙蛋白的转运机制

线粒体约含有1 000种左右的蛋白质,其中98%以上由核基因编码,在胞质核糖体上以前体形式合成之后再转运至线粒体,并通过各种分选机制定位至线粒体的各部分。线粒体膜间隙(interm embranespace,IMS)蛋白全部在细胞质中合成,这部分蛋白的转运机制与线粒体其他部分蛋白的转运相比有其特殊性。依据转运机制和能量来源不同可以将其分为3类:Ⅰ类蛋白含有一段双组份分选信号;Ⅱ类蛋白需要膜间隙的辅助因子协同折叠;Ⅲ类蛋白含有与膜相互作用的疏水面。