反义硫代寡核苷酸对小鼠柯萨奇病毒B3性心肌炎影响的研究

目的；观察AODN对小鼠病毒性心肌炎的影响。方法：选取4-6周龄雄性Balb/C鼠（体重18-20g)48只，随机分为6组，8只/组，其中正常对照和病毒对照各1组，4个实验组，正常对照组小鼠腹腔内注射0.1mlRPMI1640。其它5组小鼠腹腔内接种0.1mlCVB3(200TCID50)。半小时后4个实验组小鼠腹腔内注射0.2ml不同剂量的AODN，正常对照组和病毒对照组分别注射0.2mlAODN媒体溶液，7天后测定血清LDH活性，并且进行心肌组织病理学检查，结果：随注射AODN剂量增加，血清LDH活性逐渐降低；心肌细胞变性，坏死及间质炎性细胞浸润程度逐渐减轻；心肌炎发病率也逐渐降低。结论：AODN可保护小鼠心肌组织抵抗CVB3感染。     

柯萨奇病毒B3感染致小鼠心肌细胞凋亡的研究

目的探讨柯萨奇病毒B3感染与心肌细胞凋亡的关系。方法将 10 0TCID50 柯萨奇病毒B3腹腔注射BALB/c小鼠 ,于接种后 3、5、7、9和 14天各处死 5只 ,取心脏 ,将右半心脏匀浆 ,冻融 3次后离心取上清 ,用HeLa细胞分离病毒并滴定其效价 ;左半心脏进行组织病理学检查和用TUNEL方法检测凋亡细胞。结果接种病毒后第 3天和第 5天光镜观察可见心肌纤维崩解、断裂 ;第 9天和 14天间质纤维增生 ,填充坏死心肌吸收后的间隙。接种后 3～ 9天心肌内可分离到病毒 ,第 7天病毒效价达高峰 ,第 9天下降 ,第 14天分离不到病毒 ;接种后 3～ 14天在心肌内检测到凋亡细胞 ,凋亡细胞数量呈逐渐增加趋势。结论柯萨奇病毒B3型感染BALB/c小鼠可以引发心肌细胞凋亡 ,心肌细胞凋亡是病毒性心肌炎的致病机理之一     

柯萨奇B组病毒感染与病毒性心肌炎关系的研究

用微量中和试验法检测１００例病毒性心肌炎患者，５０例正常人和５０例其他心脏病患者血清ＣｏｘｓａｃｋｉｅＢ病毒（ＣＢＶ）中和抗体。ＣＢＶ中和抗体阳性串分别为５３％、２４％和２０％，前组阳性率显著高于后两组，Ｐ＜０．０１。后两组阳性率之间无显著差异，Ｐ＞０．０５，提示该组病毒性心肌炎病人的病因有半数以上与ＣＢＶ感染有关。     

苦瓜素对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的治疗作用

病毒性心肌炎(viral myocarditis，VMC)是常见的获得性心肌疾病之一，近年来发病率逐年上升，成为青少年猝死的重要原因，严重危害人类健康，但目前尚无有效的抗病毒药物治疗。苦瓜为葫芦科属植物苦瓜Mornordica charantia L.的果实，已有数百年的药食两用史。最近国内外学者从苦瓜果肉、种     

卡托普利治疗实验性小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的疗效研究

在小鼠柯萨奇Ｂ３病毒性心肌炎模型上采用卡托普利治疗其感染时和感染１周后和疗效，并与维生素Ｃ治疗组和生理盐水对照组比较。结果：卡托普利对其感染时的自下而上率高于对照组和维生素，感染１周后用药生存率高于对照组，心肌炎症，坏死，钙化的程度在感染同时或１周后用药均明显低于对照组和维生素组，心脏重量均低于对照组。     

抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊对柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠LDH、CK的影响

①目的 探讨抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊(K-CoxB-JK复方)对实验性小鼠柯萨奇B3病毒(CVB3)性心肌炎的治疗作用.②方法 采用雄性BALB/C小鼠腹腔注射CVB3,建立实验性小鼠病毒性心肌炎模型.将84只雄鼠随机分为正常对照组、模型组、病毒唑组、复方组,每组21只.模型组、病毒唑组和复方组小鼠腹腔接种CVB3稀释液半小时后即给药,正常对照组给予一定量生理盐水.将接种当天定为第1天,每日1次,连续给药18天,于第19天处死.观察小鼠精神状态,统计小鼠死亡率并检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)浓度.③结果 复方组LDH、CK较模型组低,病毒唑组LDH、CK高于模型组、正常组.④结论 K-CoxB-JN复方对小鼠CVB3病毒性心肌炎的有治疗作用,且其治疗作用优于病毒唑.     

柯萨奇B3m病毒感染Balb／c鼠接种浓度的研究

通过柯萨奇Ｂ３ｍ病毒接种Ｂａｌｂ／ｃ发书法家 度的研究，探索其与ＣＶＢ３ｍ 的ＬＤ５０、血清抗体、病毒分离和脏器病理变化之间的关系，以获得产生明确病毒标志的最合适病毒接种浓度来筛选抗病毒性心肌炎药物。表明此接种浓度可出现有利于药物筛选的病毒标志。     

苦瓜蛋白对柯萨奇3型病毒感染大鼠心肌细胞的保护作用

目的 在病毒性心肌炎心肌细胞模型上观察苦瓜蛋白对柯萨奇3型病毒(CVB3)感染SD大鼠心肌细胞的保护作用及其机制. 方法 体外原代培养SD大鼠心肌细胞,以CVB3感染培养大鼠心肌细胞,复制病毒性心肌炎心肌细胞模型,分别测定心肌细胞搏动百分比(PBC)、半数有效率(ED)、细胞病变(CPE)、心肌酶谱、半感染致死量(TCID50),分析其对心肌细胞的保护作用. 结果 苦瓜蛋白的ED值为0.045 mg/mL,80、40、20、10 μg/mL苦瓜蛋白可显著提高心肌细胞PBC、降低病毒的复制,80、40 μg/mL苦瓜蛋白可减少CPE,降低心肌酶水平. 结论 苦瓜蛋白对感染CVB3的心肌细胞有较强的保护作用.     

芪红胶囊对柯萨奇病毒体外感染HeLa细胞的影响

目的 体外观察芪红胶囊对柯萨奇病毒感染HeLa细胞的影响.方法 采用柯萨奇病毒感染HeLa细胞,XTT实验和空斑形成抑制实验测定芪红胶囊和利巴韦林的半数有效量(ED50)、能够减少50%空斑形成的最小药物浓度(IC50)及半数细胞毒性浓度(CC50),并计算治疗指数(SI);抗病毒时程实验比较两者在不同时间点的抗病毒作用;黏附实验和穿入实验观察芪红胶囊对病毒黏附和穿入的抑制作用.结果 芪红胶囊的ED50和IC50分别为(7.16±0.80)和(2.63±0.50)mg/L,利巴韦林分别为(4.35±0.40)和(1.92±0.30)mg/L.芪红胶囊的CC50和SI分别为(1 648±219)mg/L和232及618,明显高于利巴韦林的(103±14)mg/L和24及54(P均＜0.01).两种药物在用药8h和12h时间点的抑制病毒效果差异有统计学意义(P均＜0.05).芪红胶囊对病毒黏附和穿入的抑制作用呈现明显量效关系,当浓度为10 mg/L时,能抑制50%的病毒黏附;当浓度为3 mg/L时,能够抑制50%的病毒穿入.结论 芪红胶囊能够在体外有效抑制病毒对HeLa细胞的入侵,且毒性较低,其抗病毒作用主要源于对病毒黏附和穿入的抑制作用.     

芪红胶囊通过免疫调节治疗病毒性心肌炎小鼠

目的 观察芪红胶囊是否通过调节病毒性心肌炎小鼠的免疫系统发挥抗病毒作用.方法 实验选用纯系雄性BALB/c小鼠,分组为:正常对照组、假处理对照组、利巴韦林对照组、芪红胶囊高、中、低剂量组,每组均为20只小鼠,腹腔注射10-3 TCID50 CVB3病毒造成病毒性心肌炎模型,4 h后灌胃给予芪红胶囊进行治疗,以利巴韦林作为阳性对照药物,于第3、6、9、12、15天随机选择每组中的4只动物进行实验.应用SABA18生化分析仪检测小鼠血清中LDH和CK-MB含量;通过芪红胶囊抑制VSV病毒在L929细胞上的毒力,测定芪红胶囊刺激脾细胞产生干扰素的效价;应用固定病毒稀释血清法测定血清中中和抗体浓度,最后取出小鼠心脏,制备心肌组织悬液,检测不同分组心脏组织中CVB病毒滴度.结果 芪红胶囊能够显著降低血清中CK-MB和LDH含量(P＜0.05),显示心脏受损程度减轻,并呈现量效关系;芪红胶囊具有诱生干扰素的能力,与病毒对照组间存在显著的统计学差异(P＜0.05),利巴韦林组刺激干扰素产生的能力非常明显,优于芪红胶囊.此外,芪红胶囊具有刺激机体产生中和抗体的能力.对各组小鼠心肌组织悬液进行病毒滴度测定,发现病毒对照组小鼠的血清中,从第3天开始病毒滴度逐步上升,芪红胶囊药效组能够明显降低血清中的病毒滴度,在5个不同的时期均与病毒对照组存在显著的统计学差异(P＜0.05),利巴韦林组也有明显的降低病毒滴度的作用(P＜0.05).结论 芪红胶囊能够减少CVB病毒在心肌组织中的繁殖,其机制与芪红胶囊对小鼠免疫系统的调节有关.     

312例正常小鼠心电图分析

目的心电图是临床最常用的诊断手段之一,而基础研究和动物实验最缺乏的指标就是病理生理学的指标.找出正常小鼠心电图变化规律,以期为基础和临床的动物模型提供检测指标,为临床药物研究等提供较特异的依据.方法用频响为0～90Hz,纸速为50mm/s的普通心电图仪.描记正常小鼠312只,选择Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ标准导联和aVR、aVL、aVF单极加压肢体导联的心电图.结果总结出了正常小鼠心电图规律,结果显示出生35?d以后小鼠心电图各鼠龄组间无显著性差异.其均值心率为(354.22±49.86)次/min;心电轴71.64°±10.3°;P-R间期(0.036±0.005)s,Ⅱ导P波波幅平均为(0.079±0.025)mV、时间为(0.017±0.003)s、波形及QRS时间平均为(0.021±0.005)s.结论小鼠心电图的正常值可为感染小鼠与其比较提供依据,对判断小鼠疾病发生过程有较高的参考价值,为利用动物模型进行发病机理、免疫、药物治疗研究提供病理生理学实验指标.     

小鼠病毒性心肌损伤过程中炎症介质表达异常及其组织学改变的研究

目的 :研究小鼠柯萨奇病毒 B3感染过程中炎症介质动态表达与心肌组织损伤间的关系。方法 :于Balb/ c小鼠腹腔接种 1× 10 8TCID50 柯萨奇病毒 B3(CVB3)液 ,诱发心肌损伤的发生 ,在 CVB3感染后观察 2 1天 ,分别在第 3、6、9、12、15、18和 2 1天 ,采集外周血作肿瘤坏死因子 (TNF-α)和一氧化氮合酶 (NOS)分析 ,并留取心肌组织进行病理组织学观察。结果 :对照组心肌无改变 ,实验组小鼠心肌细胞出现肿胀 ,横纹不清 ,胞质染色嗜酸性增强 ,胞核出现核固缩及核碎裂、变性、坏死崩解 ,胞核和细胞轮廓消失 ,周围出现炎性细胞浸润 (主要是单核细胞和淋巴细胞 ) ,间质内可见较多的胶原纤维 ,可见钙化灶 ;超微结构的电镜观察 ,可见线粒体肿胀、嵴断裂、严重空泡样变及细胞核异形变、染色质浓缩边聚。在病毒感染过程中 ,NOS和 TNF-α异常升高并呈动态的双峰型改变 ,第 2峰与心肌的损伤密切相关。结论 :柯萨奇病毒 B3感染引起心肌细胞损伤 ,可能与炎症介质、细胞因子的参与有关     

药物对创伤弧菌感染小鼠肾脏各时段超微结构病变的影响

目的：探讨药物对创伤弧菌感染小鼠肾脏各时段超微结构改变的影响。方法：清洁级ICR小鼠(25～27g)60只。分四组：空白对照和阴性对照各5只．阳性组25只(分1、3、6、12h四个时段)和药物保护组25只(分3、6、12h三个时段)。阴性组腹腔注射灭菌生理盐水O．2m1．阳性组与药物保护组腹腔注射2h增菌液O．2ml(10^5CFU／m1)．1h后保护组注射联合药物(氧氟沙星、肝素钠、地塞米松、非那根、间羟胺和多巴胺)。比较阳性组和保护组小鼠肾脏超微结构，同时采取空白对照、阴性对照、阳性对照和保护组血液37℃过夜培养。结果：阳性组各时段先后出现肾小管上皮细胞内皮细胞扩张、肿胀．细胞核固缩浓染。线粒体肿胀、嵴模糊或消失，微绒毛排列紊乱；保护组较之阳性组病变状况明显改善。结论：药物联合保护在一定程度上能改善创伤弧菌所致的肾脏进行性损伤。     

柯萨奇B3病毒抗体与心肌细胞结合的发病作用

目的 研究柯萨奇B3病毒单克隆抗体（CVB3－mAb0与心肌细胞结合，以探讨CVB3－mAb对心肌细胞的致病作用。方法 采用细胞副合技术制备CVB3-mAb，并应用各细胞株分泌的mAb与人、牛、大鼠心肌细胞进行免疫组化分析,比较各株分泌的CVB3－mAb与不同种动物心肌细胞间结合的差异。结果 利用细胞融合技术制备出26种CVB3-mAb。其部分CVB3－mAb可与心肌细胞膜或心肌细胞内的肌原纤维结合，呈棕黄色环状重叠或横纹，CVB3－mAb 2A4，2D4，1G6，1H9，1H10，1H11与人、牛、大鼠心肌细胞均呈阳性反应；CVB3－mAb 2A2仅与人的心肌细胞结合；CVB3－mAb 2B2，2H4，1C10，1G4与人及大鼠心肌细胞结合；CVB3－mAb 2A3与牛和大鼠心肌细胞结合；CVB3－mAb 2G12仅与大鼠心肌细胞结合；CVB3-mAb 1E8仅与牛的心肌细胞结合，且CVB3－mAb 2D4与人心肌的结合为心肌细胞膜，而与牛及大鼠心肌的结合为心肌细胞内的肌原纤维。结论 各CVB3－mAb与不同动物心肌细胞间的结合及结合形式不同；且同一动物的心肌细胞与CVB3－mAb结合有差异。部分柯萨奇B3病毒抗体与动物心肌细胞结合，可引起心肌炎。     

不同品系小鼠感染甲型流感病毒肺小血管内血栓形成

目的本实验旨在观察不同品系小鼠感染甲型流感病毒后肺组织内血栓形成的情况。方法使用H1N1病毒A/California/7/2009(CA7)株和H3N2病毒A/Brisbane/10/07株,对BALB/C小鼠、Scid小鼠、NOD/LTJ小鼠、BALB/C-nu小鼠、NOD-Scid小鼠和icosl-KO小鼠经乙醚麻醉后进行滴鼻攻毒。检测小鼠感染后肺组织病毒拷贝数并观察肺组织病理学改变。结果 H1N1和H3N2滴鼻攻毒的各组小鼠均染毒,病理表现为程度略有差异的间质性肺炎。13只H1N1病毒感染小鼠和6只H3N2感染小鼠在肺组织中观察到多个小血管内有血栓形成,血栓成分主要为纤维素和血小板。结论各品系小鼠感染H1N1和H3N2流感病毒后均可能出现肺组织内血栓形成。     

用核酸杂交检测心肌炎小鼠心肌中柯萨奇B病毒RNA

作者报道了柯萨奇B_(3m)病毒感染BALB/c小鼠后,用常规病毒分离方法,于感染后第9天心肌内病毒分离开始转阴,而使用cDNA-RNA分子杂交方法,在感染后观察的整个36天内,小鼠心肌内病毒基因一直存在,提示病毒性心肌炎病变的持续存在可能与病毒在心肌中的继续作用有关。