胃粘膜癌前病变肿瘤相关抗原的表达及其与胃癌的关系

本文系卫生部与中华医学会联合召开的“第四次全国中青年医学论文交流会”获奖论文。值此刊行之际,我们希望全省有更多的中青年医务科技工作者,为活跃、浓厚讨论和研究的学术空气,写出更多、更好的锦秀文章,在全国及国际讲坛上崭露头角。     

胃癌和胃癌前病变中SLC9A1蛋白的表达及临床意义

目的探讨SLC9A1在胃癌和胃癌前病变中的表达及与患者临床病理特征的关系。方法回顾性分析某院手术治疗的各类胃组织标本70例,其中慢性萎缩性胃炎患者13例,肠上皮化生患者14例,异型增生患者6例,正常胃黏膜11例,胃癌患者26例。采用免疫组织化学检测上述组织中SLC9A1蛋白表达水平,并分析其与患者临床病理特征的关系。结果11例正常胃黏膜SLC9A1蛋白均未表达,胃癌前病变及胃癌中SLC9A1蛋白的表达情况对照,差异性显著(P<0.05)。相较于正常胃黏膜及各型胃癌前病变患者,胃癌患者的SLC9A1蛋白表达水平及SLC9A1蛋白阳性率均显著增高(P<0.05);SLC9A1蛋白表达与癌变组织的浸润情况、淋巴结转移情况具有紧密的关联性(P<0.05),但是与患者的年龄及肿瘤分化程度并无直接关系(P>0.05)。结论SLC9A1在胃癌患者肿瘤组织中表达水平上调,并与淋巴转移和浸润深度有关。     

子宫内膜癌组织中SC3A抗原和雌激素与孕激素受全的检测及意义

为探讨子宫内膜癌组织中抗人大肠癌相关抗原MAbSC3A及雌激素受体（ER）和激素受体（PR）表达的意义,用免疫组化方法检测66例子宫内膜癌组织中SC3A抗原的表达,并与ER和PR的表达水平进行比较,结果显示,在66例中阳性表达率分别为81．8％（54／66）、56．1％（37／66）和53．0％（35／66）。29例非典型子宫内膜增生病变和31例正常子宫内膜SC3A阳性率分别为51．7％（15／29）和12．9％（4／31）。结果表明,子宫内膜癌组织中SC3A抗原的表达率明显高于ER和PR,同时也高于子宫内膜非典型增生病变和正常子宫内膜组（P＜0．05）。结论：SC3A抗原检测对子宫内膜癌的诊断和研究具有一定应用价值。     

PLA2G2A基因在胃癌前病变组织中的表达及意义

目的探讨并分析PLA2G2A基因与胃癌前病变组织之间的关系。方法选取2010年6月至2011年6月我院行胃镜检查,确诊为胃癌前病变的患者,同时随机选取53名健康对照,应用RT-PCR方法研究PLA2G2A基因在胃癌前病变组及正常对照组的表达是否存在统计学意义。结果 PLA2G2A基因在癌前病变组织中的表达明显高于正常组织(P<0.01),具有统计学意义。结论 PLA2G2A基因在癌前病变组织中的表达明显高于正常组织,提示PLA2G2A基因在胃癌前病变的发生中可能起到重要的作用,PLA2G2A基因可能成为预测癌前病变,甚至胃癌的重要指标。     

T抗原在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 研究T抗原在胃癌组织的表达及其与临床病理指标的关系,并探讨其与胃癌术后生存率的关系.方法 应用免疫组化Envision法检测T抗原在胃癌中的表达.结果 (1)106例胃癌组织中T抗原的阳性率为56.6%(60/106),而36例胃良性溃疡组织中无一例T抗原表达阳性.(2)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期胃癌组织中T抗原阳性率分别为23.1%(3/13)、61.3%(19/31)、59.1%(26/44)和66.7%(12/18),Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期比Ⅰ期明显增高(P<0.05).(3)中分化和低分化胃癌组织中T抗原阳性率分别为60.7%(17/28)和70.5%(31/44),明显高于高分化的35.3%(12/34)(P<0.05).(4)胃癌中伴有淋巴结转移者T抗原阳性率为74.2%(66/89)、无淋巴转移者为35.3%(6/17)(P<0.01).(5)胃癌中伴有肝转移者T抗原阳性率为100%(8/8)、无肝转移者为53.1%(52/98)(P<0.05).(6)胃癌中伴有腹膜转移者T抗原阳性率为90.0%(9/10),无转移者为53.1%(51/96)(P<0.05).(7)T抗原的表达与胃癌的部位无关(P>0.05).(8)在Ⅲ期或者Ⅳ期的胃癌患者中T抗原阳性比T抗原阴性的预后差(P<0.05).结论 T抗原在胃癌有高表达,而在良性溃疡中无表达.T抗原的表达随着胃癌的分期增加、分化降低及有淋巴结、肝、腹膜转移而升高,可能成为胃癌预后判断的一个良好指标.     

幽门螺杆菌在胃癌前病变中的感染分布

目的研究胃癌前病变和幽门螺杆菌感染分布的关系。方法检测内镜及病理确诊的胃癌前病变439例中幽门螺杆菌感染分布情况。结果439例病人中胃癌前病变与性别之间无明显差别(P>0.05)。随着年龄的增长,CAG、IM、DYS病变显著增加,Hp感染率随病变类型的加重而明显上升,而且感染的部位逐步上移(P<0.05)。结论Hp感染在胃癌前病变发展过程中可能起持续促进作用。常规Hp检测应包括胃窦部及胃体高位。     

增殖细胞核抗原在胃癌中的表达及其临床意义

目的　研究增殖细胞核抗原 (PCNA)在消化道肿瘤 ,尤其是胃癌中的表达及其临床意义。方法　应用免疫组化技术 ,对胃癌、食管癌、大肠癌和良性对照组织标本中PCNA的含量进行半定量检测 ,观察其与临床病理参数的关系及其临床意义。结果　 (1)在良性对照中 ,增殖细胞核抗原标记指数 (PCNALI)为 (2 7 80± 12 2 0 ) ,明显低于各种肿瘤组 ,P <0 0 1。 (2 )在胃癌组、食管癌组和大肠癌组中 ,PCNALI分别为 (5 2 73± 12 2 5 )、(5 1 5 4± 10 2 4)和 (5 7 19± 7 78) ,相互之间经统计学处理 ,P >0 0 5。 (3)PCNA的表达与患者的性别、年龄、病变部位和大体分型无关 ,同时也与胃癌的组织学类型及其分化程度无关 (P >0 0 5 )。 (4 )PCNA的表达与患者的临床分期、浸润深度及淋巴结转移情况相关 ,P <0 0 5。结论PCNA的检测可作为判断肿瘤的恶性程度、预测淋巴结转移的趋势、指导制定合理的治疗方案和预后评估的有益指标。     

蛋白A亲和层析法纯化抗乙肝核心抗原单克隆抗体

建立从小鼠腹水中纯化抗乙肝核心抗原(HBcAg)单克隆抗体的一步层析法。将含抗HBcAg单克隆抗体的腹水经离心、过滤和缓冲溶液变换预处理后,采用HiTrap rProtein A FF亲和层析柱纯化,并探讨了上样缓冲液的pH值和NaCl浓度,洗脱液的种类、pH值以及体积流量对抗体纯度及回收率的影响,纯化后的单克隆抗体的生物学活性用间接ELISA法测定。结果显示,以pH7.0,20mmol/LPB+3.0mol/LNaCl为上样缓冲液,0.1mol/LGly-HCl为洗脱液,体积流量为5.0ml/min时,抗HBcAg单抗的纯度大于95%,回收率达75%,纯化后的单克隆抗体的生物学活性没有下降。本研究建立了蛋白A亲和层析法纯化抗HBcAg单克隆抗体的方法,其操作简便、快速而且效果良好。     

Wnt通路相关蛋白在胃癌前病变组织中的表达和临床意义

目的 探讨Wnt通路相关蛋白在胃癌前病变发生、发展中的作用以及在胃癌早期诊断中的意义.方法 选取2012年6月-2015年6月胃癌前病变胃镜活检标本256例(20例轻度异型增生、44例中度异型增生、52例重度异型增生、140例肠上皮化生),同时选取45例正常胃黏膜组织标本作为对照组.采用免疫组织化学方法对各组组织标本中Wnt通路相关蛋白Wnt1、β-连环蛋白(β-catenin)、结肠腺瘤性息肉病蛋白(APC)和细胞周期蛋白D1(cyclinD1)蛋白表达水平进行检测.分析各组Wnt通路相关蛋白的表达水平及阳性表达率.结果 各观察组Wnt1、β-catenin和cyclin D1蛋白表达水平高于对照组,且APC蛋白水平显著低于对照组(P＜0.05).中度和重度异型增生组Wnt1、β-catenin和cyclin D1蛋白表达水平高于轻度异型增生组和肠上皮化生组,而APC蛋白水平低于轻度异型增生组和肠上皮化生组(P＜0.05).重度异型增生组Wnt1、β-catenin和cyclin D1蛋白表达水平高于中度异型增生组,而APC蛋白水平低于中度异型增生(P＜0.05).与对照组比较,Wnt1、β-catenin和cyclin D1在各观察组中的阳性表达率增加(P＜0.05),APC阳性表达率下降(P＜0.05);中度和重度异型增生的各蛋白阳性表达率与轻度异型增生组差异比较具有统计学意义(P＜0.05).结论 Wnt通路相关蛋白在胃癌前病变组织中呈异常表达,从而激活了Wnt通路,参与了胃癌的发生和发展,对其进行联合检测有助于胃癌的早期诊断.     

ⅡA分泌型磷脂酶A2在胃癌及癌前病变中的表达及意义

目的分析ⅡA分泌型磷脂酶A2（ⅡA sPLA2）在胃癌及癌前病变中的表达,并探讨其与胃癌临床病理特征间的关系。方法 MaxVision免疫组化法检测60例进展期胃癌（AGC）、20例基本正常胃黏膜（NGM）、20例慢性胃炎伴肠化（IM）、20例不典型增生（DYS）病理组织标本中ⅡA sPLA2的表达情况。结果ⅡA sPLA2在IM、DYS和AGC中的阳性率分别为80.0%、55.0%以及41.7%,高于NGM的15.0%（P〈0.05）。从IM、DYS到AGC,ⅡA sPLA2的阳性率逐渐降低（P〈0.05）。在AGC组,有浆膜层浸润及淋巴结转移的AGC的ⅡA sPLA2阳性表达率明显低于无浆膜层浸润及淋巴结转移的AGC（P〈0.05）。结论ⅡA sPLA2表达下调可能是胃癌形成的早期事件,而ⅡA sPLA2表达下调可能与胃癌侵袭、转移有着一定的关系。     

人巨细胞病毒重组抗原及单克隆抗体在ELISA中的应用

用重组人巨细胞病毒（rhCMV)gp52蛋白作抗原及相应的单克隆抗体酶标记物建立捕获ELISA，检测人血清中的HCMV特异性IgM抗体。其工作浓度均由方阵滴定法确定。并进行精密度、特异性和干扰实验。用该法检测体检献血员病毒性肝炎患者及疑似CMV感染的肝炎综合症患者血清共计939份。结果gp52蛋白抗原最佳浓度为1μg/ml,酶标单抗的工作浓度为1：1600，批内平均变异系数CV3．7％，批间CV7．9％。634例献血员IgM抗体阳性17例（2．7％）；288例病毒性肝炎患者，阳性10例（3．5％）；17例肝炎综合症患者，阳性11例（64．7％）。均经免疫印迹法证实。该组合特异性强，灵敏度高，不受类风湿因子的影响，结果可靠，优于全病毒抗原构成的检测试剂。适用于临床诊断和流行病学调查。     

人磷酸二酯酶同工酶3A在昆虫杆状病毒系统中的表达

目的利用杆状病毒表达系统探讨人磷酸二酯酶同工酶3A(HPDE3A)在Tn细胞中的表达。方法用重组HPDE3A杆状病毒感染昆虫Tn细胞进行蛋白表达，通过RT-PCR，SDS-PAGE和Western blotting技术检测HPDE3A表达情况。结果重组杆状病毒在感染Tn细胞后形态变化明显，获得表达产物,RT-PCR扩增结果证实了Tn细胞中HPDE3A的mRNA水平增高，Tn细胞能够表达出与HPDE3A多克隆抗体结合的蛋白，蛋白分子质量约为120 kD。结论HPDE3A在昆虫杆状病毒表达系统中可以稳定表达，为进一步研究HPDE3A的生物学活性及筛选HPDE3A抑制剂奠定了基础。     

用鼠单克隆抗体McAbl7-1A治疗转移性结肠直肠癌

肿瘤细胞可表达肿瘤相关抗原(TAA)，该抗原能开发用于诊断，也可作为免疫治疗的靶子。几乎每例结肠直肠癌的大部分肿癌细胞表达有TAACO17—1A。该抗原为非茹泌的糖蛋白MW37KD。曾将鼠抗该抗原的单克隆抗体(McAb，IgG2A)用于治疗。     

维A酸对大鼠胃癌前病变胃黏膜 PCNA、 VEGF和Bcl-2 表达的影响

目的观察维A酸（RA）对大鼠胃癌前病变胃黏膜增殖细胞核抗原（PCNA）、血管内皮生长因子(VEGF)和凋亡抑制因子 2(Bcl 2)表达的影响。方法采用甲硝基亚硝基胍（MNNG）、0.03%雷尼替丁、56 ℃15%氯化钠溶液、0.85%脱氧胆酸钠、40%乙醇、饥饱失常等多种因素制作大鼠胃癌前病变模型，分别给予不同剂量维A酸（20和40 mg·kg 1）灌胃治疗；另一组模型大鼠不给予治疗，设为自然恢复组。采用免疫组化方法检测各组大鼠胃黏膜PCNA（以增殖指数 PI表示）、VEGF和Bcl 2蛋白表达水平。结果正常对照大鼠和维A酸不同剂量组大鼠胃黏膜PI、VEGF和Bcl 2蛋白阳性率均较自然恢复组低（P＜0.01或P＜0.05）。结论维A酸可能通过下调PCNA、VEGF和Bcl 2蛋白表达而抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡，进而发挥治疗大鼠胃癌前病变的作用。     

整合素β1和β3在胃癌及癌前病变组织的表达及临床意义

目的 探讨整合素β1和β3在胃癌及癌前病变中的表达及其生物学行为的关系,为揭示胃癌发生和发展机制、进一步鉴定胃癌早期诊断的标志物和未来胃癌的药物研发提供理论依据.方法 采用SP免疫组化方法检测整合素β1和β3在45例胃癌及24例非典型增生、20例慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生和25例慢性浅表性胃炎中的表达情况.结果 (1...     

宫颈癌及癌前病变中P16^INK4A蛋白的表达及临床意义

目的探讨宫颈癌及癌前病变中P16^INK4A蛋白的表达及临床意义。方法采用S-P免疫组化法检测P16^INK4A蛋白在宫颈癌（CC）、宫颈上皮内瘤样变（CIN）及正常宫颈组织中的表达。结果 P16^INK4A蛋白在60例宫颈癌患者中表达阳性率为96.7%,在60例宫颈上皮内瘤样变患者中表达阳性率为88.3%,在10例正常宫颈组织中无阳性表达,三组相比较,宫颈癌组、宫颈上皮内瘤样变组阳性率明显高于正常宫颈组织组,差异具有统计学意义（P〈0.01）,宫颈癌组阳性率虽较宫颈上皮内瘤样变组高,差异无统计学意义（P〉0.05）。P16INK4A蛋白的表达与宫颈癌患者的年龄、病理分型无关（P〉0.05）,与分化程度、临床分期和淋巴转移相关（P〈0.05）。结论 P16INK4A蛋白在宫颈癌、宫颈上皮内瘤样变患者中存在过度表达,可作为早期筛查、早期诊断的敏感指标,P16INK4A蛋白可能成为判断宫颈癌预后的指标。     

黑色素瘤抗原-3原核重组质粒的构建及表达

目的 构建MAGE-3目的 基因原核重组表达质粒pGEX-4T-1-MAGE-3并检测其在大肠杆茵(E.coli)B121(DE3)中的表达.方法 RT-PCR法制备MAGE-3目的 基因,连接入原核表达载体pGEX-4T-1.构建MAGE-3目的 基因的原核重组表达质粒pGEX-4T-1-MAGE-3并测序,将该质粒转化E.coli BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导,12%SDS-PAGE和Western Blot表达鉴定.结果 扩增出349bp的MAGE-3 目的 基因并构建了原核重组表达栽体pGEX-4T-1-MAGE-3;测序结果与GenBank收录序列相一致;在E.coli BL21(DE3)中检测到含该重组表达载体的转化菌表达出分子量约35kD的融合蛋白并证实其为目的 蛋白.结论 成功构建的原核重组表达栽体pGEX-4T-1-MAGE-3及其所表达的融合蛋白,为以MAGE-3为基础的肽疫苗及特异诊断试剂的研制提供抗原打下了基础,为后续实验提供了依据.     

Livin、Caspase-3 蛋白在不同胃病变组织中的表达及其临床意义

目的探讨Livin、Caspase-3蛋白在不同胃病变组织中的表达及其临床意义。方法选择2013年3月~2014年3月在哈里逊国际和平医院确诊为慢性非萎缩性胃炎(chronic non atrophic gastritis)的患者20例、慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)非肠化的患者30例、CAG伴肠化的患者30例以及胃癌患者30例(其中低分化组10例、中分化组10例、高分化组10例)为研究对象,应用免疫组织化学法(IHC)检测和比较各组患者胃病变组织中Livin、Caspase-3蛋白的表达。结果慢性非萎缩性胃炎、CAG非肠化、CAG伴肠化和胃癌组织中Livin蛋白的阳性表达率分别为0%、40%、43.33%、60%,差异均有统计学意义(P<0.001),低、中、高分化胃癌组织中Livin蛋白的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);慢性非萎缩性胃炎、CAG非肠化、CAG伴肠化、胃癌组织中Caspase-3蛋白的阳性表达率分别为90%、53.33%、46.67%、30%,差异均有统计学意义(P<0.001),低、中、高分化胃癌组织中Caspase-3蛋白的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。胃癌组织中,Livin、Caspase-3蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.505,P<0.05)。结论 Caspase-3与Livin蛋白的表达失调促进了胃癌的发生,二者可能有助于早期诊断和预防胃癌。     

胃癌及癌前病变中PCNA和Caspase-3的表达及其与Hp感染的关系

目的探讨PCNA和Caspase-3在胃癌及癌前病变中的表达及其与Hp感染的关系。方法应用快速尿素酶试验与吉姆斯染色法将各种病变分为Hp感染阳性组和阴性组,应用免疫组化法对各种病变胃组织PCNA和Caspase-3的表达进行检测。结果①胃癌及癌前病变组PCNA表达及Hp感染率明显高于慢性浅表性胃炎组（P〈0．05）,而Caspase-3的表达显著低于慢性浅表性胃炎组（P〈0．05）;②Hp感染阳性组PCNA及Caspase-3表达明显高于Hp感染阴性组（P〈0．05）。结论Hp感染可能通过促进PCNA及Caspase-3基因蛋白的过度表达,从而使胃黏膜细胞增生与凋亡平衡失调诱发癌变。     

胸苷激酶1在胃癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨TK1和K-i67在胃癌患者肿瘤组织中的表达和其之间的相关性,分析其表达与胃癌术后病理各指标之间的相关性。方法：采用免疫组织SP法检测60例胃癌组织和30例健康体检者正常胃组织中TK1和K-i67的表达水平。结果：60例胃癌组织中TK1和K-i67的阳性表达率分别为83.3%（50/60）、81.7%（49/60）,30例健康对照组中胃黏膜组织中TK1和K-i67都未见到表达。TK1和K-i67的表达与胃癌的TNM分期、肿瘤的浸润深度以及淋巴结转移呈现显著相关（TK1 P〈0.05,K-i67 P〈0.01）,与患者的性别以及年龄等无相关性;TK1与K-i67的表达显著相关（P〈0.01）。结论：TK1和K-i67在胃癌组织中的表达应该与胃癌的发生发展存在一定的相关性,对二者进行检测可作为判断胃癌增殖指标,并对胃癌患者的预后提供参考。