CMV感染细胞核抗早期抗原抗体(PENA)的测定及临床评价

目的对目前国内各种广泛应用于婴、幼儿的CMV实验室检测方法进行初步评价.方法本研究建立了应用间接荧光免疫法测定CMV细胞核抗早期抗原抗体(PENA)的新方法,同时进行PCR检测和ELISA检测IgM、IgA、IgG实验,对491例临床可疑为CMV感染的患儿进行检测,同时进行PCR方法及ELISA-IgM、IgA、IgG方法的检测,观察结果,并与尿中寻找CMV包涵体方法结果相比较.结果PENA(1/20)阳性率54.99%,PENA(1/100)阳性率21.70%,PCR方法的阳性率55.80%,ELISA-IgM阳性率8.76%,ELISA-IgA阳性率5.50%,ELISA-IgG阳性率68.43%.结论PENA方法可以特异的检测出病人血清中的抗病毒早期抗原抗体的存在,并具有敏感、特异、简便的特点,是一种实验室检测CMV的新方法,可作为临床检测CMV感染的补充方法,尤其适用于婴儿.     

PENA-IgG荧光免疫检测方法与ELISA法检测婴儿HCMV感染的比较

目的 本研究介绍了一种敏感、稳定、快速、简便的实验室检测CMV的方法,同时与ELISA检测IgM、IgA、IgG结果比较.方法 建立了检测细胞核内抗早期抗原抗体的新方法,应用该方法,对491例临床可疑为CMV感染的患儿进行检测,同时进行ELISA-IgM、IgA、IgG方法的检测,观察结果,进行比较.结果 PENA(1/20)阳性率54.99%,PENA(1/100)阳性率21.70%,ELISA-IgM阳性率8.76%,ELISA-IgA阳性率5.50%,ELISA-IgG阳性率68.43%.结论 PENA方法可以特异的检测出病人血清中的抗病毒早期抗原抗体的存在,并具有敏感、特异、简便的特点,是一种实验室检测CMV的新方法,可作为临床检测CMV感染的补充方法,尤其适用于婴儿.     

PENA-IgG荧光免疫法与ELISA法检测儿童人巨细胞病毒感染的比较

目的本研究介绍了一种敏感、稳定、快速、简便的实验室检测巨细胞包病毒(CMV)的方法,同时与ELISA检测IgM、IgA、IgG结果比较.方法建立了检测细胞核内抗早期抗原抗体的新方法,应用该方法,对452例临床可疑为CMV感染的患儿进行检测,同时进行ELISA-IgM、IgA、IgG方法的检测,观察结果,进行比较.结果 PENA(1/20)阳性率54.99%,ELISA-IgM阳性率8.76%,ELISA-IgA阳性率5.50%,ELISA-IgG阳性率68.43%.结论 PENA方法可以特异的检测出病人血清中的抗病毒早期抗原抗体的存在,并具有敏感、特异、简便的特点,是一种实验室检测CMV的新方法,可作为临床检测CMV感染的补充方法,尤其适用于婴儿.     

PENA方法的建立及与ELISA IgM检测CMV的比较

目的　介绍一种敏感、稳定、快速、简便的实验室检测CMV的方法 ,同时探讨该种新方法与ELISA检测CMV方法的优、缺点。方法　对 5 5 2例病人应用间接荧光免疫法测定细胞核中的特异病毒早期抗体 (PENA)和ELISA法测定IgM抗体。结果　PENA方法 :强阳性 88例 ,阳性率 15 4 9% ,弱阳性 2 73例 ,阳性率 5 9 4 6 % ;ELISA -IgM方法 :阳性 34例 ,阳性率6 16 %。结论　PENA方法操作简便 ,与ELISA方法相比较 ,可对CMV感染进行早期测定及诊断 ,并可区分既往感染和即时感染 ,具有敏感性和稳定性 ,是测定小儿CMV感染的一种较好的方法     

聚合酶链反应(PCR)方法与其它三种 CMV抗体检测方法的比较

目的 人类巨细胞病毒（cytomegalovirus,CMV)可引起先天性感染，CMV感染所致疾病症状和体征等表现均是非特异性的，感染的病人不表现出任何临床症状，成为潜在感染状态，因而必须结合实验室诊断才能确诊。近年来发展起来并应用的各种检测CMV的实验室方法因有其各自的缺陷，而不能完全满足临床早期，快速诊断的需要。方法 本研究应用PCR方法检测感染CMV患儿，同时与ELISA检测CMV-IgM,CMV-IgA、CMV-IgG方法进行比较。结果 经过491例临床怀疑为CMV感染的患儿进行实验。结果如下：PCR阳性率55.80%,ELISA IgM阳性率8.76%,ELISA IgA阳性率5.50%，ELISA IgG阳性率68.43%。结论 通过实验进一步证实PCR方法是一种较敏感、快速的新的实验室方法，同时与其他三种目前应用较广泛的ELISA测定抗体方法进行了比较，指出PCR方法的优、缺点，对临床应用具有实际意义。     

联合检测巨细胞病毒感染在原位肝移植术后诊断的应用

目的比较外周血巨细胞病毒（CMV）定量PCR检测,CMV-pp65抗原检测及组织病理学检查对原位肝移植术后CMV感染诊断的价值。方法回顾分析45例肝移植患者临床资料,统计三种检查结果,并结合文献进行讨论。结果三种方法检查均显示,有18例患者发生巨细胞病毒感染,18例均为无临床症状的巨细胞病毒感染。经更昔洛韦治疗,18例全部治愈。结论外周血CMV定量PCR,CMV-pp65抗原检测及组织病理学检查均能作为肝移植术后CMV感染早期诊断的有效手段,CMV定量PCR更敏感,CMV-pp65抗原检测更特异,组织病理学检查则具有创伤性,三者的共同应用能够对CMV感染患者做出早期诊断并且指导治疗。更昔洛韦能够有效治疗CMV感染。     

肾移植受者中CMV感染的检测

目的探讨巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)在肾移植受者中的感染状况.方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组化方法及聚合酶链反应技术测定167例肾移植受者的CMV抗体、抗原和CMVDNA.结果肾移植受者的抗CMVIgG和抗CMVIgM阳性率分别为98.8%和1.8%;CMV抗原阳性细胞数平均为(3.2±3.1)/5×104WBC,阳性率为47.3%;CMVDNA的阳性率为50.9%.结论肾移植受者术后存在不同程度的CMV感染.临床上开展CMV抗体、抗原及核酸的检测对早期诊断肾移植受者术后CMV感染具有重要意义.     

新生儿早期TOX、CMV、RV的血清学检测结果分析

目的分析新生儿早期弓形虫病毒（TOX）、巨细胞病毒（CMV）、风疹病毒（RV）的感染情况和临床特点。方法对2008年1月至2009年5月本院新生儿科住院的490例可疑新生儿早期患者采用化学发光法进行TOX、CMV、RV抗体的检测,仪器为美国ABBORT公司AXSYM全自动化学发光仪。结果 TOX-IgG阳性18例（3.67%）,TOX-IgM阳性0例（0%）;CMV-IgG阳性242例（49.38%）,CMV-IgM阳性16例（3.26%）;RV-IgG阳性364例（74.28%）,RV-IgM阳性2例（0.41%）;以IgM阳性视为宫内感染,新生儿早期感染以CMV和RV为主,未见TOX感染;临床特点以高胆红素血症、肝功能异常、新生儿肺炎、胎儿发育迟缓、贫血、先天畸形及神经系统损害为主。结论 CMV为新生儿早期先天性病毒感染的主要病原体,临床特点多样化,可造成新生儿多系统损害,危害性大,对可疑新生儿早期患者应尽早进行检测,以获早期诊治。     

280例新生儿四项病源微生物（TORCH）的血清学检测分析

目的优生四项（TORCH）是指可导致先天性宫内感染及围产期感染而引起围产儿畸形的病原体（包括弓形虫病毒（TOX）、单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）、风疹病毒（RV）、巨细胞病毒（CMV））,对该项目的检测不仅可用于了解妇女对这几种病毒的免疫状况,从而指导孕前妇女怀孕的时间及注意事项,达到优生的目的。还可用于新生儿是否被感染的筛查。本文对新生儿以上4项感染进行了检测,观察发病情况和临床特点。方法对我院280例可疑感染的新生儿抽取静脉血进行TOX,HSV-2,RV,CMV的抗体IgM、IgG检测。结果共检出TOX-IgG阳性0例（0%）;HSV-2-IgG阳性0例（0%）;RV-IgG阳性251例（89.64%）;CMV-IgG阳性211例（75.36%）;TOX-IgM阳性0例（0%）;HSV-2-IgM阳性0例（0%）;RV-IgM阳性3例（1.07%）;CMV-IgM阳性8例（2.85%）;以IgM阳性视为宫内感染,新生儿早期感染以RV和CMV为主,临床特点：新生儿黄疸;新生儿肺炎;早产儿。结论新生儿早期感染危害性大,对可疑患儿进行筛查是必要的可获得早期诊断预防此类感染应该从母亲孕期就开始重视。新生儿优生4项的血清学抗体检测有重要的临床意义。     

巨细胞病毒抑制树突状细胞抗原递呈功能

目的： 探讨巨细胞病毒（CMV）对单核细胞来源的树突状细胞（DC）的感染效率及对受染细胞的功能影响。方法: 以50半数细胞培养感染量（TCID50）滴度的CMV与未成熟及成熟DC（imDC，mDC）共培养，逆转录－聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测细胞内CMV即刻早期抗原（IEA）mRNA水平，间接免疫荧光技术检测受染细胞内早期抗原（EA）阳性率，流式细胞仪检测细胞胞内病毒晚期抗原pp65表达，BrdU ELISA法检测受染DCs（cmv-imDC,cmv-mDC）刺激异基因T细胞增殖能力。结果: 感染 12 h，cmv-mDC内IEA mRNA水平低于cmv-imDC，相对表达量分别为0.102±0.020和0.862±0.124（P<0.05）。24 h，imDC组EA阳性率高于mDC组，分别为(62.32±14.20)%和(10.78±3.04)%（P<0.01）。72 h，cmv-DC胞内低表达pp65抗原，imDC和mDC中阳性率分别为4.86%和0.82%。与未处理mDC相比，cmv-imDC经成熟诱导因子LPS作用后，其刺激异基因T细胞增殖能力较弱（均P<0.05）；而cmv-mDC，仅当DC/T细胞为 1∶1 时，刺激能力下降（P<0.05）。结论: CMV可有效感染imDC，并在细胞内复制活化；cmv-DC的抗原递呈能力下降。     

16S rRNA基因检测在儿童化脓性脑膜炎早期诊断中的研究

目的探讨儿童化脓性脑膜炎快速诊断方法。方法收集可疑化脓性脑膜炎患儿脑脊液标本85例,分别用16S rRNA基因PCR方法和细菌培养法进行检测,比较两种方法检测病原菌的敏感性。结果85例标本中,PCR方法检测出33例,阳性率为38.82%,培养法检出14例,阳性率为16.47%,PCR方法检出率明显高于培养法（P〈0.01）。结论PCR方法能特异、敏感、快速地检测脑脊液感染的常见病原菌。     

固相酶联免疫测定法检测NS1抗原在登革病毒感染早期诊断中的应用

目的探讨固相酶联免疫测定（ELISA）法检测NS1抗原在登革病毒感染早期诊断中的应用价值。方法选取登革病毒感染早期患者血清171份,非登革病毒感染发热患者血清11份,正常人血清10份,采用ELISA法检测全部192份血清的登革病毒NS1抗原和IgM抗体;采用逆转录-聚合酶链反应-限制性内切酶酶切片段长度多态性分析（RT-PCR-RFLP）技术对发病5 d内的125份血清进行扩增和鉴定分型;并采用C6/36细胞微量培养法对发病第1、2天的41份血清进行登革病毒分离培养。结果登革病毒感染患者发病2 d内、3～5 d以及6～10 d血清NS1抗原的检出率分别是92.7%（38/41）、83.3%（70/84）、10.9%（5/46）;IgM抗体的检出率分别是2.4%（1/41）、51.2%（43/84）、97.8%（45/46）;非登革病毒感染的发热患者及正常人血清中,有1例疟疾患者血清登革病毒IgM抗体呈阳性,NS1抗原无一例阳性。RT-PCR在登革病毒感染患者发病第1、2天和3～5天的检出率分别是85.4%（35/41）、83.3%（70/84）;登革病毒感染患者发病第1、2天血清的病毒分离培养阳性率分别是80.0%（16/20）、38.1%（8/21）,总分离率58.5%（24/41）;RT-PCR-RFLP分型鉴定技术及间接免疫荧光法（IFA）均证实2006年广州流行株为登革Ⅰ型病毒。结论ELISA法检测登革病毒NS1抗原操作技术成熟,且具有敏感性高、特异性好的特点,对登革病毒感染的早期诊断和疫情的早期控制具有重要意义,适合于基层医疗机构常规应用。     

TORCH感染与不良妊娠关系的分析

目的比较正常妊娠和异常妊娠妇女血清TORCH感染情况。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对3851例妊娠（包括3449例正常妊娠和402例异常妊娠）妇女进行TORCH-IgM抗体检测。结果 3449例正常妊娠孕妇血清弓形虫（TOX）、风疹病毒（RUV）及巨细胞病毒（CMV）IgM抗体阳性率分别为0.32%、0.20%、1.88%,总阳性率为2.41%;402例异常妊娠妇女TOX、RUV、CMVIgM抗体阳性率分别为3.48%、2.74%、9.20%,总阳性率为15.42%。异常妊娠妇女TOX、RUV、CMV的IgM阳性率以及TORCH感染总阳性率明显高于正常妊娠孕妇,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 TORCH感染与不良妊娠密切相关,应重视TORCH感染的早期筛查和诊治。     

四聚体技术检测人外周血巨细胞病毒抗原特异性OTL

为深入了解抗病毒免疫机制,探索人在健康状态及巨细胞病毒（CMV）急性感染时抗原特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL）数量的动态变化.以CMV抗原肽、HLA-A＊0201重链和轻链制备CMV四聚体;分离并检测12名健康被检者外周血单个核细胞（PBMC）中CMV抗原特异CTL数量;PBMC体外培养建立CTL细胞系,于末次刺激的不同时相进行四聚体染色,流式细胞仪（FACS）检测抗原特异CTL数量.结果发现9名被检者PBMC中均检出抗原特异CTL;细胞系中CMV特异性CTL数量急剧增多,细胞系与PBMC相比,差异有显著的统计学意义（P＜0.001）;研究结果提示,9名被检者感染过CMV,血液中存在少量免疫记忆性T细胞,当再次遭遇同一抗原后发生克隆扩增.     

Ⅰ型登革病毒NS1抗原捕获ELISA的建立和初步临床诊断应用

目的以登革病毒特异性非结构蛋白1（NS1）单克隆抗体为基础建立Ⅰ型登革病毒（DEN1）抗原检测的酶联免疫吸附（ELISA）法，并探索从病人早期血清样品中检测DEN1-NS1的可行性。方法利用已制备的抗DEN1-NS1单克隆抗体（单抗），进行多种抗体组合配对优化模式的分析，建立双抗体夹心抗原捕获ELISA，以469份健康人血清样品确定cut off值，检测DEN1感染患者急性期血清样品。结果对多种抗体组合反复筛选，最终确立了最佳的包被单抗和酶标测定单抗，建立了抗体夹心捕获DEN1-NS1抗原的酶联免疫测定方法，能特异检测DEN1，与其他血清型登革病毒不发生交叉反应。检测16例临床确诊DEN1感染病人急性期血清样品，15例呈特异的抗原反应阳性。结论成功建立了DEN1-NS1抗原捕获ELISA并应用于临床血清样品的检测，为登革热的早期实验室诊断提供技术方法。     

ELISA法检测江门地区性病门诊患者生殖支原体抗原

目的应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测性病门诊患者泌尿生殖道生殖支原体（Mg）抗原，探讨江门地区性传播疾病（STD）门诊患者Mg感染状况。方法采用Mg多克隆抗体，标记酶结合物，建立检测Mg抗原的双抗体夹心ELISA法，对性病门诊患者泌尿生殖道分泌物进行MIg抗原检测。结果双抗体夹心ELISA法可检测到5μg／ml蛋白浓度，除肺炎支原体外与其他泌尿生殖道常见支原体和细菌无交叉反应；共检测了174例标本，Mg抗原阳性33例，阳性率为18．97％，其中男性和女性阳性率分别为19．88％和7．69％；男性患者中，非淋菌性尿道炎（NGU）、淋病、前列腺炎患者的Mg抗原阳性率分别为13．43％、62．5％和4．84％。结论STD门诊患者存在Mg感染，应用双抗体夹心ELISA法检测Mg抗原具有一定的灵敏度，且具有快速、简便的特点，适合临床筛查Mg抗原。     

肾移植围手术期检测CMV-PP65抗原的意义

目的 探讨肾移植围手术期检测CMV-PP65抗原的临床意义.方法 选取我院肾移植患者100例,调查统计全部患者围手术期CMV-PP65抗原及抗CMV-IgM抗体检测结果,比较两项检测指标的敏感性及特异性.结果 CMV-PP65抗原检测的敏感性明显高于抗CMV-IgM抗体检测,两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）;两种检测方法的特异性无统计学意义（P＞0.05）,但是CMV-PP65抗原检测出现阳性结果的平均时间明显小于抗CMV-IgM抗体检测出现阳性结果的平均时间,两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 肾移植患者围手术期检测CMV-PP65抗原对于早期诊断CMV病具有较高的敏感性,对肾移植术后CMV病的诊断和早期抗病毒治疗具有重要的临床意义,值得推广应用.     

张掖地区育龄妇女TORCH感染检测结果分析

目的对张掖地区20～38岁育龄妇女TORCH（TOX、RUV、CMV、HSVⅠ/Ⅱ）感染进行初筛分析,探讨其流行特点,并为进一步诊断与防治提供依据。方法应用ELISA技术检测2068例20～38岁育龄妇女血清中TORCH特异性IgM抗体。结果 TORCH总感染率为7.47%（154/2068）,其中TOX、RV、CMV、HSV的检出率分别为1.26%、2.95%、2.27%、0.97%。单项感染139例,复合感染15例,分别占总感染数90.26%、9.74%。RV夏季高发,季节差异有显著性（P〈0.01）。城乡间TORCH感染差异无显著性。结论 TORCH感染有明显的季节流行特点,ELISA检测TORCH-IgM抗体是初筛育龄妇女TORCH感染简便可靠的实验室诊断指标之一,育龄妇女应常规进行TORCH感染的检测。     

mtLSU-巢式PCR检测实验大鼠卡氏肺孢子虫的实验研究

目的对mtLSU-巢式PCR方法检测大鼠卡氏肺孢子虫的应用价值以及基因序列进行评价。方法采用地塞米松免疫抑制法诱导大鼠感染肺孢子虫;实验组10只,对照组1只;诱导至第7周时收集实验组及对照组大鼠肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF）标本,采用mtLSU-巢式PCR方法对人源与鼠源肺孢子虫共有的基因进行扩增和序列测定,同时采用镜检法对实验组大鼠肺组织和肺泡灌洗液标本进行检测,评估两种方法的敏感性。结果采用mtLSU-巢式PCR方法对实验感染大鼠肺组织和BAL进行检测,卡氏肺孢子虫DNA阳性率分别为100%（10/10）、90%（9/10）。而GMS染色镜检法检测的阳性率分别为80%（8/10）、60%（6/10）。所测Wistar大鼠卡氏肺孢子虫mtLSU基因序列长度为155bp,与GenBank的大鼠源肺孢子虫（U20170）及人源肺孢子虫（DQ473446）同源性均为100%（154/154、155/155）。结论 mtLSU-巢式PCR方法应用于大鼠卡氏肺孢子虫检测敏感性高,特异性强;获得与人源耶氏肺孢子虫相同的Wistar大鼠卡氏肺孢子虫mtLSU的基因序列。     

孕妇血清CMV—DNA与CMV—IgM的检测与分析

应用聚合酶链式反应（PCR）及酶联免疫吸附实验（ELISA）两种方法．同时对100例门诊优生咨询孕妇进行了血清CMV－DNA及CMV－IgM的检测，结果PCR法的阳性检出率为12％，而ELISA法的阳性检出率为6％，PCR法敏感性较ELISA法高，两者差异显著。