PCR-SSCP技术分析线粒体DNA 多态性及其法医学应用

 目的探讨SSCP法在线粒体DNA分析中的应用及其在法医实际检案中的意义。方法利用PCR 方法直接扩增D-
LOOP区的HVI16106-16297 区域192 bp 片段作为目的片段,进行SSCP分型。检验150 例随机个体、10 例正常组织和5例甲醛
固定石蜡包埋的组织。结果在150例随机个体中,SSCP 检测发现9 种单倍型,DP值为0.881。在10例正常组织中,各个组织
的SSCP带型完全相同。5 例包埋组织的SSCP分型与对照组织一致。结论SSCP 技术分析线粒体DNA有较高的鉴别能力,适
用于陈旧降解检材的检验。     

DNA分析技术在法医学中的应用

脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)分析应用于法医学鉴定是近十几年来的事,是将分子生物学方法应用于法医学领域,对案件所涉及的生物检材的DNA 进行分型,达到个人识别或亲子鉴定的目的.世界上有120 多个国家和地区已应用DNA分析技术办案,解决刑事案件、民事纠纷问题,以及追查尸体身源,包括战争及大型灾难中罹难者的个人识别等,个人同一认定接近100%.     

游离DNA的研究进展及其法医学应用

游离DNA在人体内分布广泛,被临床广泛研究和应用,成为多种疾病无创诊断、疗效监测及预后评估的重要分子标志物,但游离DNA在法医学中的研究与应用尚属少见。游离DNA既可增加DNA产量同时又能完善DNA分型,在法医学实践中特别是痕量检材分型方面有较大潜在应用价值。     

线粒体DNA在法医学中的应用及其研究进展

线粒体含核外ＤＮＡ基因组 ,且该基因组与核基因组分别独立复制。其序列在 1981年第一次由Ａｎｄｅｒｓｏｎ报道[1] 。现在Ａｎｄｅｒｓｏｎ序列已被作为序列比对时的参照标准。尽管与含 3亿ｂｐ的核ＤＮＡ相比较 ,仅有 16 5 6 9ｂｐ的环状线粒体ＤＮＡ基因组要小得多 ,但ｍｔＤＮＡ对于人类学、进化研究、法医学研究都具有相当重要的作用[2～ 6] 。在核ＤＮＡ与ｍｔＤＮＡ之间一点重要的差异在于其遗传方式 :ｍｔＤＮＡ来自于卵母细胞 ,很少或不含父亲成分 ,相反核ＤＮＡ却含有父母双方的成分[7] 。因此 ,核ＤＮＡ在每一代都要经过重组 ,而…     

人类基因组微卫星DNA多态及其法医学应用

人类基因组是指人类细胞的DNA 分子中所包含的储藏有人体全部遗传信息的一整套基因它包括细胞核所构成的基因组和线粒体DNA 所构成的基因组两部分细胞核基因组规模庞大结构复杂包含了人类基因组的绝大部分基因其DNA 分子总长度可达3 10 6 Kb 基因总数约5 ~10 万个而线粒体基因组是一个结构简单的小基因组DNA 分子总长度约1 6 .6 Kb 基因数仅37 个人类基因组是一个十分稳定的体系不同民族不同群体的个体有相同数目的基因也有基本相同的核苷酸序列正是基因组结构的这种稳定性保证了人类作为一个物种的稳定性和同一物种向的共同性然而人…     

DNA多态性分析最新研究进展及其在法医学研究中的应用

2003年10月，法国斯特拉斯堡法科学研究院院长路德(Berfrand Ludes)教授应邀前来中国昆明，与昆明医学院共同开展了法医学专业学术交流，为双方即将启动的合作项目奠定了基础。路德先生于1985年获法国法医病理学医学博士学位，于1990年获法国药理学医学博士学位。路德先生主要研究方向是DNA多态性及相关技术方法在法医学中的应用。路德先生所成功建立的独具一格的研究技术与方法，已广泛应用于法国的大学、研究所和侦察部门相关实验室，在法国处领先地位。它为法国司法实践所需的法医学鉴定提供了最新的研究方法和检测手段，同时也为我国法医学专业建设提供了重要的借鉴内容。本将路德先生来昆学术交流演讲内容汇总编写于下，供我国广大法医工作学习和探讨。     

DNA多态性分析凝胶干胶保存法及其法医学应用价值

目的：探讨凝胶干胶保存法及其在法医学中的应用价值。方法：采用饱和酚／氯仿抽提法提取血祥DNA，STR—PCR进行扩增，6％变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳，聚丙烯酰胺凝胶经银染显色后，采用玻璃纸处理制成干胶。结果：将银染后的聚丙烯酰胺凝胶及时进行拍照同时将其制成干胶，用Marker做对照通过测量DNA带的位置发现所得干胶同原始胶及拍照获取胶的结果一致。结论：通过玻璃纸干胶保存法可使原始资料永久而真实的保存，此方法对法医物证的保存具有极其重要的意义。     

短串联重复子DNA多态性及其法医学应用研究

调查云南汉族人群18个常染色体和性别染色体STR基因座遗传多态性,获得18个基因座的群体遗传学数据,并探讨该18个STR基因座的法医学应用价值。709份EDTA抗凝血（男456、女253份）来自昆明地区无血缘关系汉族个体,法医案件及亲子鉴定标本取自本教研室的检案,各种动物血痕取自动物中心。应用酚-氯仿法或Chelex-100法提取DNA,STR-PCR、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染显带分析技术和377测序技术对上样本进行分析。709例样本中18个基因座观察到的等位基因数分别为4-15;累积个人识别率（TDP）为0．9999999999925334;累积非父排除率（CCE）为0．999962106。18个STR基因座在群体遗传学研究和法医学个人识别、亲子鉴定中均有较高的应用价值。     

DNA单位点分析在法医学中的应用

用多聚酶链式反应技术检测了人血痕、唾液（斑）、混合斑、人体组织及毛发中ＡｐｏＢ，ＰＭＣＴ１１８，ＨｕｍＴＨ０１，ＨｕｍＴＨ位点的ＤＮＡ多态性，并探讨了不同保存时间对血痕中ＡｐｏＢ，ＰＭＣＴ１１８，ＨｕｍＴＨ０１，ＨｕｍＴＨ位点检测结果的影响，将上述位点应用于亲子鉴定案例，其中２例排除了错误被控父亲．此法用于刑事案件的鉴定成功地认定了罪犯     

DNA提取技术在法医学的应用与进展

DNA鉴定技术在现代法医物证检验中有着广泛的应用,其应用分子生物学的方法,对犯罪现场遗留的生物物证所含的DNA与犯罪嫌疑人的DNA样本进行比对,鉴定DNA结构是否相同,从而对生物物证是否来自于犯罪嫌疑人作出评价.不过大多犯罪现场遗留的生物样本存在着许多不利于法医提取的因素,比如腐败、变质、污染等.本文就现场DNA提取纯化技术方面来介绍当今法医学的技术进展.     

DNA条形码技术在法医学中的研究进展

DNA条形码技术自提出至今,已在动植物以及微生物等相关领域的种属鉴定中发挥了重要作用。因该技术可实现生物样本的快速、准确识别,可为司法实践提供所需的科学证据。综述了DNA条形码的概念与优点,重点总结了DNA条形码技术在法医学基础研究与实践应用方面的研究进展。     

依赖于STR的法医学DNA分型技术研究进展

ＤＮＡ分型技术 ,又称ＤＮＡ指纹技术 ,是对人类基因组中具有多态性的重复序列进行基因分型的技术。该技术首先出现在 2 0世纪 80年代中期 ,它的出现使法医学实验室根据一个人的体液进行个体识别的能力有了划时代的进步 ,从而摆脱以前依赖于血型、血清酶型和ＨＬＡ等技术而无法对个体识别做出肯定结论的尴尬境况。在过去的 16年里 ,现代分子生物学技术在法医遗传学中的应用使个体识别和亲权鉴定技术得到飞速发展 ,现在分析样本所需ＤＮＡ的量仅为 1985年英国遗传学家ＡｌｅｃＪｅｆｆｒｅｙｓ进行第一次ＤＮＡ分型所需量的 1/2 5～ 1/10 0 ;…     

DNA芯片技术及其临床应用

<正> DNA芯片(DNA chips)也称为DNA微阵列(DNA microar-rays)、基因芯片(gene chips)或高密度寡核苷酸微阵列(high-density oligonucleotide arrays),它是在一个固相支持物(如硅、玻璃或硝酸纤维膜、尼龙膜)的表面,排列了成千上万个已知基因的克隆,或包括了一个遗传因子及其全部可能突变的cDNA或寡核苷酸序列。这种高密度的DNA片段排列,可以在一个实验中检测上万个基因的表达,甚至可以提供一个有机体全部基因表达的鉴定。DNA芯片技术的发展和临床应用,宣布了一个疾病诊治的新时代的到来。     

随机扩增多态性DNA技术及其应用

随机扩增多态性DNA技术（RAPD）是在PCR基础上建立起来的遗传分析方法,因其具有简便,经济,快速等优点,显著潜在的应用前景,本文就影响RAPD分析的因素,以及在实验动物遗传检测和病原生物体检测方面的应用作一介绍。     

DNA微条形码技术在降解检材种属鉴定中的应用及法医学意义

【立题依据】 标准DNA条形码技术是基于COI基因序列分析而建立的一种物种鉴定方法,但由于目的基因扩增片段长达645bp,在法医物证降解检材中的应用受到限制。因此,本研究拟建立DNA微条形码技术,以解决法医物证特殊检材种属鉴定的难题。 【设计思路】 设计分别扩增不同近缘动物COI基因的通用引物,构建相应的复合扩增体系,并从种属特异性、林敏性、稳定性、案件适应性等方面进行验证。 【实验内容】 DNA提取及处理:有机溶剂法提取实验样本的基因组DNA;制备DNA<200bp的降解检材和两种动物DNA不同比例混合的混合检材。引物设计与合成:设计4对种属特异性引物和1对无种属特异性的ND3引物,并合成COI基因的标准引物。PCR扩增:①以10种动物基因组DNA为模板,分别用自行设计的4对引物进行扩增,以检验引物种属特异性;②以10种动物不同浓度基因组DNA为模板,分别用对应种属特异性的引物进行扩增,以检验引物扩增效能;③以降解检材基因组DNA为模板,分别用自行设计引物和标准引物进行扩增,以评估引物应用价值。PCR复合扩增:在确定自行设计引物特异性、扩增灵敏度的基础上,通过调整引物量和退火温度构建含有5对引物的复合扩增体系,并用于单一样本和混合样本基因组DNA的扩增。扩增产物检测:用聚丙烯凝胶电泳结合银染的方法检测各种动物模板DNA的扩增效果,以判定引物的扩增特异性和灵敏度,及降解检材和混合检材的扩增效果;用循环测序的方法获得各扩增产物的碱基序列,并通过BLAST软件与DNA数据库比对及遗传距离分析,判定检材的种属来源。 【实验材料】 常见家禽(鸡、鸭、鹅、鹌鹑、鸽子)和常见家畜(水牛、黄牛、山羊、绵羊、马、驴、犬)共7科18种动物及人类血液样本各5例。 【可行性】 (1)不同种属动物COI基因序列可从相应DNA数据库获得;(2)熟练掌握引物设计的操作方法和PCR技术;(3)具备本研究所需的各种仪器、设备和试剂。 【创新性】 为法医物证降解检材的种属鉴定提供一种有效的方法。     

联合应用10个DNA基因座进行法医学亲权鉴定

亲权鉴定是法医学实践的重要内容之一。法医学亲权鉴定的主要目的是为怀疑医院产房错调婴儿、婚外子女的抚养与财产继承以及强奸致孕、被拐卖儿童认亲等民事、刑事纠纷案件的调查处理提供科学证据。传统方法是对各种血型、酶型和血清蛋白型等蛋白质水平的遗传标记的检测 ,但存在着检测项目繁多、操作繁琐和非父排除率不高等缺点。自1985年 DNA指纹图技术应用于法医学实践以来 ,DNA多态性检测技术因其具有较高的非父排除率和易于检测等优点 ,逐渐成为法医学实验室进行亲权鉴定的良好手段。我们1997年 9月至 1999年 12月采取联合检测 10个 …