申克孢子丝菌酵母相对人THP-1巨噬细胞样细胞p38MAPK激活及白细胞介素6表达的影响

目的 探讨申克孢子丝菌酵母相对人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)巨噬细胞样细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)活化及白细胞介素6(IL-6)表达的影响.方法 实时荧光定量反转录PCR分析申克孢子丝菌酵母相刺激THP-1巨噬细胞样细胞3、6h后IL-6 mRNA表达水平变化,酶联免疫吸附法检测刺激24 h后IL-6分泌量;Western印迹法分析2×106 CFU/ml申克孢子丝菌酵母相体外作用于THP-1巨噬细胞样细胞30 min和60 min后p38MAPK磷酸化水平的变化,同时检测100 nmol/L地塞米松(p38MAPK抑制剂)预处理THP-1巨噬细胞样细胞30 min后p38MAPK磷酸化水平及IL-6 mRNA表达水平的变化.采用SPSS19.0统计软件,进行多因素方差分析、单因素方差分析,组间多重比较采用LSD检验.结果 刺激THP-1巨噬细胞样细胞3h后,酵母相组、凝胶多糖组、空白对照组IL-6 mRNA表达水平分别为56.81±7.36、26.69±1.22、0.97±0.05,刺激6h后分别为378.03±16.67、276.24±39.13、1.02±0.04,组间差异有统计学意义(F=5 552.22,P＜0.001).申克孢子丝菌酵母相刺激6h后IL-6 mRNA表达高于刺激3h后(q=16.74,P＜0.001),申克孢子丝菌酵母相与THP-1巨噬细胞样细胞共孵育24 h后,酵母相组、凝胶多糖组及空白组细胞上清液中IL-6浓度分别为(59.96±18.16)、(91.01±17.27)、(5.50±2.30) pg/L,组间差异有统计学意义(F=26.62,P＜0.01);酵母相组高于空白对照组(P＜ 0.01).地塞米松处理后,酵母相组IL-6 mRNA表达水平(4.46±1.03)低于未用地塞米松处理组(493.52±113.87,P＜0.001).申克孢子丝菌酵母相作用THP-1巨噬细胞样细胞30、60 min后,磷酸化p38MAPK蛋白相对表达量均高于空白对照组(P＜0.01).地塞米松预处理THP-1巨噬细胞样细胞后,磷酸化p38MAPK水平低于未用地塞米松处理组,差异有统计学意义(q=10.81,P＜ 0.01).结论 人THP-1巨噬细胞样细胞体外与申克孢子丝菌酵母相作用后,通过激活p38MAPK信号通路促进IL-6表达.     

申克氏孢子丝菌和白念珠菌培养上清液对多形核白细胞所产生的活性氧成分的影响

本文作者研究了申克氏孢子丝菌和白念球菌液体培养基上清液对多形核白细胞(PMNs)产生活性氧成分(ROS)和化学发光(CL)作用的影响.方法是:取健康人外周静脉血分离出PMNs,再分别与申克氏孢子丝菌和白念珠菌上清液孵育,观察上清液对PMNs产生ROS的影响及加热处理和透析处理后产生ROS的变化.ROS测定包括超     

申克孢子丝菌酵母相对人急性单核细胞白血病细胞NF-κB信号通路及TNF-α的影响

目的:明确申克孢子丝菌酵母相对人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)NF-κB信号通路激活和肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌的影响。方法:实时荧光定量PCR分析申克孢子丝菌酵母相刺激THP-1细胞TNF-αmRNA的表达,酶联免疫吸附法检测TNF-α分泌量,免疫印迹法分析申克孢子丝菌酵母相体外作用于THP-1细胞后IκBα和磷酸化IκBα的水平,免疫荧光法观察NF-κB-p65核转位。同时设置地塞米松(NF-κB抑制剂)抑制组,并检测100 n M地塞米松预处理THP-1细胞后TNF-αmRNA水平的变化。结果:申克孢子丝菌酵母相刺激THP-1细胞后6 hTNF-αmRNA水平显著高于空白对照组(P0.001)。申克孢子丝菌酵母相刺激THP-1细胞后24 h,TNF-α蛋白水平为(4610.419±121.501)pg/mL,显著高于空白对照组(186.964±98.073)pg/m L,差异具有统计学意义(P0.001)。申克孢子丝菌酵母相作用THP-1细胞后30~60 min,磷酸化IκBα蛋白水平显著升高,为时间依赖性。申克孢子丝菌酵母相组细胞核内NF-κB-p65较空白对照组荧光强度增强。100 nM地塞米松预处理各组THP-1细胞后,TNF-αmRNA水平较前明显降低。结论:人THP-1细胞体外与申克孢子丝菌酵母相作用后激活NF-κB信号通路并上调TNF-α分泌。     

真菌病

20080068 白念珠菌磷脂酶和患者血清可溶性IL-2受体测定分析；20080069 Dectin-1在真菌免疫中的作用研究（综述）；20080070申克孢子丝菌双相体外药物敏感试验研究（综述）；20080071 申克孢子丝菌基因型与临床表现型关系研究；20080072 米替福新对常见皮肤癣菌体外抑菌活性的研究；     

聚合酶链反应技术检测申克孢子丝菌的实验研究

目的研究申克孢子丝菌的种特异性引物聚合酶链反应鉴定方法,从而为临床孢子丝菌病的分子诊断奠定基础。方法采用根据申克孢子丝菌几丁质合成酶基因1序列设计合成的一对寡核苷酸引物,分别对26株申克孢子丝菌(包括1株标准株,7株实验室保存株,18株临床分离株)及6种6株普通真菌(分属于3个菌属)的基因组DNA进行PCR扩增。结果扩增产物选择性的从26株申克孢子丝菌基因组DNA中获得,而对念珠菌属、毛癣菌属、小孢子菌属的6株普通真菌基因组DNA均为阴性。结论采用以申克孢子丝菌几丁质合成酶基因1序列为基础的聚合酶链反应法鉴定申克孢子丝菌特异、简便、快捷,可用于临床诊断。     

苏北地区病原真菌调查报告

本文报告1975~1983年间我们在江苏省泰州市分离得的1303株致病性真菌中,红色毛癣菌居首位,占30.84%,其次为申克氏孢子丝菌及其变种当18.18%,再次为未经鉴定的酵母样菌及白念珠菌,分别为10.43%及10.42%,与国内其它地区分离得的菌种有所不同.     

孢子丝菌病的超微结构观察

本文报道5例孢子丝菌病的超微结构改变.在TEM下,角朊细胞间晾增宽和桥粒减少,在表皮内可见嗜中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润.超微结构提示在初发皮损的表皮颗粒层中,可见炎性细胞吞噬的吞噬体和中克氏孢子丝菌,而非初发皮损表皮颗粒层中不见石噬体和申克氏孢子丝菌.真皮浅层中可见固编的孢子和炎性细胞浸润.     

广东省珠海市金湾区孢子丝菌及暗色真菌的生态学研究

目的：了解珠海市金湾区自然环境中申克孢子丝菌及致病性暗色真菌在该地区的分布情况及生态学。方法：分别于2006年4月、7月、10月、2007年1月四季从该区三灶、南水、平沙、红旗四地区自然环境中采集土壤、腐木、树皮、沼泽淤泥、枯枝等标本160份,用含放线菌酮的马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基分离菌株,沙堡葡萄糖琼脂培养基（SDA）传代培养,通过观察菌落形态、颜色,显微镜下菌丝和孢子的生长形态等方法,鉴定申克孢子丝菌及暗色真菌。结果：分离出申克孢子丝菌24株（分离率为15%）。暗色真菌共89株（分离率为56%）,其中外瓶霉属33株（21%）,枝孢霉10株（6%）,链格孢19株（12%）,着色真菌13株（8%）,疣状瓶霉6株（4%）,待定8株（5%）。除此之外,还分离出镰刀菌、念珠菌、曲霉等多种条件致病菌。结论：在珠海金湾区自然环境中能够分离出申克孢子丝菌及暗色真菌。     

申克孢子丝菌双相体外药物敏感试验研究

目的：研究双相真菌申克孢子丝菌分别在菌丝相和酵母相两种形态下对常用抗真菌药物的敏感性。方法：分别采用Roseo纸片扩散法及微量液基稀释法对临床分离的4株申克孢子丝菌的两种形态（菌丝相及酵母相）进行体外药敏试验。测定的抗真菌药物为：两性霉素B、伊曲康唑、氟康唑、特比萘芬。结果：除AMB二者一致外，其余各抗真菌药的MIC，菌丝相30℃孵育比酵母相35℃孵育高。结论：申克孢子丝菌的生长形态（菌丝相或酵母相）及孵育温度（30℃或35℃）对其药敏试验MIC值有明显影响。     

复发性念珠菌颈部淋巴结炎1例易感基因筛查及免疫学研究

【摘要】 目的 探究1例复发性念珠菌性颈部淋巴结炎患者的遗传学病因及抗真菌免疫功能。方法 采用二代测序技术筛查患者及父母真菌病易感基因,提取患者及6例健康对照者外周血单个核细胞（PBMC）以及中性粒细胞,与白念珠菌进行体外共培养,采用Western印迹检测患者PBMC中胱天蛋白募集域蛋白9（CARD9）表达水平,酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6、IL-17A、IL-1β和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）的分泌水平,菌落计数法检测中性粒细胞处理后白念珠菌存活率。两组间均数比较采用t检验。结果 患者CARD9基因存在2号外显子c.68C>A（p.S23X）和6号外显子c.820dupG（p.D274Gfs*61）复合杂合突变,两突变分别来自其父母。Western印迹显示,健康对照组PBMC中CARD9蛋白相对表达水平为0.41 ± 0.07,而患者表达缺如。热灭活白念珠菌孢子刺激后,患者PBMC的TNF-α、IL-6、IL-17A、IL-1β和GM-CSF分泌水平均低于健康对照组（P < 0.001）。体外培养30、120 min时,与患者中性粒细胞共培养的白念珠菌存活率（78.00%、74.00%）均高于健康对照（70.91% ± 1.75%、34.55% ± 5.35%）,差异有统计学意义（t值分别为3.743、6.988,P <0.05）。结论 1例复发性念珠菌颈部淋巴结炎患者CARD9基因存在复合杂合突变,导致CARD9蛋白表达缺如,该患者存在抗白念珠菌免疫功能缺陷。     

C型凝集素1受体参与人中性粒细胞体外杀伤白念珠菌活性的实验研究

【摘要】 目的 探讨人中性粒细胞能否通过C型凝集素1受体（dectin-1）识别白念珠菌细胞壁不溶性β葡聚糖来介导体外杀伤白念珠菌的活性。 方法 100 mg/L β葡聚糖体外作用于中性粒细胞1、6、24 h后,实时荧光定量逆转录PCR分析dectin-1和Toll样受体2 mRNA表达水平。100 mg/L β葡聚糖体外分别刺激中性粒细胞15 min、2 h、6 h,或先用dectin-1抑制剂昆布多糖100 mg/L和50 mg/L预处理30 min后,再予100 mg/L β葡聚糖刺激2 h,微量培养板荧光分析法检测中性粒细胞H2O2释放水平。昆布多糖预处理的中性粒细胞与白念珠菌体外共培养后,检测菌落形成单位（CFU）。结果 β葡聚糖作用中性粒细胞1、6、24 h后,dectin-1 mRNA水平分别为2.8195 ± 0.1669、5.4859 ± 0.7244、3.6041 ± 0.5372,均明显高于空白对照组（均P < 0.01）。β葡聚糖刺激中性粒细胞15 min后H2O2水平为（64.55 ± 15.67） μmol/L,2 h时为（290.34 ± 30.56） μmol/L,6 h时为（208.54 ± 26.88） μmol/L,与空白对照组（22.05 ± 3.99） μmol/L比较,差异均有统计学意义（均P < 0.01）;100 mg/L和50 mg/L昆布多糖预处理组分别为（80.45 ± 22.41） μmol/L和（130.42 ± 44.55） μmol/L,与β葡聚糖刺激组相比,分别降低了73%和45%,差异均有统计学意义（P < 0.01）。昆布多糖能明显抑制中性粒细胞体外杀伤白念珠菌的活性（均P < 0.01）。 结论 Dectin-1参与人中性粒细胞分泌H2O2以及对白念珠菌杀灭活性,为过继性粒细胞转输治疗系统性念珠菌感染提供初步依据。 【关键词】 念珠菌,白色; 中性白细胞; β葡聚糖类; 外源凝集素类,C型; 过氧化氢     

The phagocytosis of Candida albicans blastospores and germ tubes by polymorphonuclear leukocytes.

This in vitro study investigates the phagocytosis and killing rate of Candida albicans blastospores and germ tubes by polymorphonuclear leukocytes. Suspensions of C. albicans blastospores and germ tubes were incubated for 60 and 150 min with a neutrophil suspension. The rate of phagocytosis was found to be 92 +/- 3% for blastospores, but only 9.5 +/- 2.5% for germ tubes. The candidacidal activity rate was 29 +/- 6% for blastospores, but only 5.5 +/- 1.5% for germ tubes. Electronmicroscopically, cytoplasmic and plasma membrane alterations of phagocytized yeast cells lying in phagosomes were observed. Short germ tubes surrounded by a phagosomal membrane were found in neutrophils. Older, longer germ tubes were seen in an extracellular position. Usually, several neutrophils were adjacent to these long tubes. Obviously phagocytosis could not take place owing to the size of the germ tubes. The findings indicate that the transition of the yeast phase to the mycelium phase in a case of Candida infection may be a mechanism enabling the parasite to escape phagocytosis by the host.     

临床分离白念珠菌ERG4基因高表达与唑类抗真菌药物耐药的关系

目的 探讨临床分离白念珠菌ERG4基因高表达与唑类抗真菌药物耐药的关系。 方法 M27-A2微量肉汤稀释法对34株临床分离白念珠菌菌株进行体外药物敏感性试验。抽提白念珠菌ERG4基因的总RNA,并逆转录合成cDNA,采用实时荧光定量PCR（FQ-RT-PCR）方法检测ERG4基因mRNA表达水平。结果 白念珠菌耐氟康唑菌株组ERG4基因表达量（4.20 ± 2.56）高于敏感组（1.72 ± 1.33）（t = 3.99,P < 0.05）;耐伊曲康唑组（3.60 ± 2.47）高于敏感组（1.66 ± 1.61）（t = 3.71,P < 0.05）;耐伏立康唑组（3.99 ± 2.72）高于敏感组（2.07 ± 1.58）（t = 2.91,P < 0.05）;对氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑同时耐药菌株组（4.49 ± 2.73）显著高于敏感组（1.69 ± 1.82）（t = 3.81,P < 0.05）。 结论 临床分离白念珠菌耐药菌株ERG4基因高表达与氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑耐药及交叉耐药有关,但白念珠菌ERG4基因高表达在耐药中的作用还有待于通过基因下调进一步研究证实。     

β联蛋白对体外过氧化氢所致人皮肤成纤维细胞衰老表型的影响

目的 观察高表达的β联蛋白对体外过氧化氢（H2O2）所致正常人皮肤成纤维细胞（NHSF）衰老表型的影响。方法 NHSF分别转染pcDNA3.1-β联蛋白或空载体pcDNA3.1,然后150 μmol/L H2O2处理2 h。实验分为转染H2O2处理组（NHSF + β联蛋白 + H2O2）、转空载体H2O2处理组（NHSF + 空载体 + H2O2）以及转空载体组（NHSF + 空载体）。用RT-PCR和Western印迹分析β联蛋白的表达,显微镜观察细胞形态,试剂盒检测衰老相关的β半乳糖苷酶（SA-β-gal）、细胞活性氧（ROS）以及超氧化物歧化酶（SOD）的活性。所有数据均用SPSS 13.0软件进行统计分析,多组间比较采用ANOVA检验。结果 pcDNA3.1-β联蛋白明显上调了NHSF中β联蛋白的表达。NHSF + 空载体 + H2O2组β联蛋白mRNA和蛋白水平（与GAPDH mRNA和蛋白的比值分别为0.2900 ± 0.0195和0.3130 ± 0.0171）明显低于NHSF + 空载体组（分别为0.5963 ± 0.0400和0.6190 ± 0.0090）,两组比较,均P ＜ 0.05;NHSF + β联蛋白 + H2O2组β联蛋白表达水平（0.7953 ± 0.0074）高于NHSF + 空载体 + H2O2组（P ＜ 0.05）。SA-β-gal染色率在NHSF + 空载体组、NHSF + 空载体 + H2O2组、NHSF + β联蛋白 + H2O2组分别为（2.9667 ± 0.2517）%、（37.70 ± 0.9539）%、（29.330 ± 0.6359）%,各组比较,差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。NHSF + 空载体、NHSF + 空载体 + H2O2、NHSF + β联蛋白 + H2O2组ROS活性分别为（50.9963 ± 9.2688）%、（109.9190 ± 11.5215）%、（75.1063 ± 3.0138）%,SOD水平分别为（88.0856 ± 3.9181）、（35.5585 ± 3.4438）、（61.7029 ± 3.1716） U/mg,各组比较,差异均有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论 高表达的β联蛋白能够抑制细胞衰老相关β-半乳糖甘酶（SA-β-gal）和细胞活性氧（ROS）的表达,同时上调了SOD的活性。 【关键词】 β连环素; 过氧化氢; 成纤维细胞; 氧化性应激; 细胞衰老     

电子传递链对白念珠菌菌丝形成的影响

目的 探讨电子传递链对白念珠菌菌丝形成的影响。方法 用含10％小牛血清的RPMI 1640在5% CO2 37 ℃培养条件下诱导白念珠菌菌丝形成,观察加用电子传递链的抑制剂和激动剂对白念珠菌菌丝形成的影响、生长曲线和菌丝形成率,MTT法检测对白念珠菌的抑制率。结果 氯仿和二甲基亚砜的溶媒对照和空白对照对白念珠菌的生长和菌丝形成的影响无差异。噻吩甲酰三氟丙酮（TTFA）和苯甲羟肟酸作用于白念珠菌24 h后细胞形态以酵母为主。鱼藤酮、抗霉素A、寡霉素、叠氮钠、TTFA和丙二酸钠盐与对照组比较,在白念珠菌生长的对数期显著抑制白念珠菌的生长（P < 0.01）。苯甲羟肟酸作用于白念珠菌后显著抑制白念珠菌的生长,与空白组比较以生长对数期的抑制差异有统计学意义（P < 0.01）。鱼藤酮、抗霉素A、寡霉素、叠氮钠、TTFA、丙二酸钠盐、苯甲羟肟酸和鸟苷酸钠作用于白念珠菌12 h的菌丝形成率分别为87.49 ± 0.52、48.75 ± 4.44、50.33 ± 8.50、99.00 ± 1.00、1.60 ± 0.53、94.01 ± 0.99、0.00 ± 0.00和92.33 ± 2.08。MTT法检测鱼藤酮、抗霉素A、寡霉素、叠氮钠、TTFA、丙二酸钠盐、苯甲羟肟酸和鸟苷酸钠对白念珠菌的抑制率分别为1.34% ± 0.15%、70.61% ± 1.02%、50.63% ± 5.38%、17.80% ± 7.89%、45.17% ± 1.27%、10.75% ± 3.62%、72.46% ± 1.14%和-（5.96% ± 4.07%）。结论 经典呼吸链和替代途径电子传递链的抑制剂能不同程度抑制白念珠菌的菌丝形成,替代氧化途径是白念珠菌菌丝形成的主要途径。     

不同培养基中耐药株及标准株白念珠菌生物膜法尼醇分泌的比较研究

目的 比较不同培养基中白念珠菌耐药株及标准株生物膜法尼醇分泌量的差异,了解生物膜各时相法尼醇分泌变化趋势,探讨耐药株法尼醇产生的特点。方法 用氟康唑诱导形成白念珠菌耐药株。将白念珠菌标准株及耐药株分别接种到RPMI 1640、酵母浸出粉蛋白胨葡萄糖（YPD）、无氨基酵母氮源（YNB） + 0.5%葡萄糖（Glu）和RPMI 1640 + 10%胎牛血清（FCS）4种培养基中培养,构建白念珠菌生物膜。倒置显微镜下观察培养24 h时白念珠菌生物膜形态,气相色谱-质谱联用（GC/MS）法检测培养1.5、3、6、12、24、36、48 h法尼醇分泌量。结果 在相同培养基中,耐药株及标准株生物膜形态没有明显差异,但不同培养基中生物膜形态各不相同。三因素重复测量方差分析显示,白念珠菌生物膜法尼醇的分泌有随时间变化的趋势（F = 70.628,P < 0.001）,耐药株和标准株生物膜形成过程中,法尼醇分泌量在RPMI 1640、YPD及YNB + 0.5% Glu培养基中均先逐渐增加,在生物膜形成后期至成熟期达到高峰值,随后降低。两种菌株在各培养基中法尼醇浓度达到高峰时间不同。两种菌株分泌法尼醇浓度在RPMI 1640 + 10% FCS培养基中均在12 ~ 48 h呈现缓慢上升趋势。培养基不同会影响法尼醇的分泌（F = 176.665,P < 0.001）,标准株及耐药株生物膜法尼醇分泌量在YNB + 0.5% Glu培养基中较高。此外,在RPMI 1640培养基（36 h：1.157 ± 0.064比0.250 ± 0.075,P < 0.05）及YPD培养基（6 h：0.262 ± 0.036比0.055 ± 0.062;12 h：0.730 ± 0.030比0.482 ± 0.024;均P < 0.05）中耐药株生物膜法尼醇分泌量显著高于标准株,但在YNB + 0.5% Glu培养基中（36 h）标准株法尼醇分泌量显著高于耐药株（2.950 ± 0.677比0.523 ± 0.266,P = 0.020）。结论 培养基不同可影响白念珠菌生物膜法尼醇的分泌,且耐药株与标准株之间法尼醇分泌有一定差异。     

白念珠菌诱导小鼠骨髓来源巨噬细胞焦亡的初步研究

【摘要】 目的 探讨白念珠菌对小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDM）焦亡的影响。方法 通过活细胞工作站实时观察白念珠菌［感染复数（MOI） = 50,下同］体外诱导BMDM后是否发生焦亡;将BMDM分为对照组、白念珠菌组,分别用磷酸盐缓冲液和白念珠菌酵母诱导BMDM 6 h,实时荧光定量PCR检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 （NLRP3）、白细胞介素1β （IL-1β）、IL-18 mRNA表达水平,Western印迹法检测NLRP3、胱天蛋白酶1（Caspase-1）、Gasdermin D（GSDMD）的表达及剪切水平。用白念珠菌诱导BMDM不同时间（0、10、15、20及25 h）后,酶联免疫吸附试验检测IL-1β、IL-18分泌水平。白念珠菌体外诱导野生型（WT）BMDM及 GSDMD 敲除（KO）BMDM 15 min,采用流式细胞仪比较WT、GSDMD KO BMDM对白念珠菌的吞噬率;诱导6 h后,采用流式细胞仪及乳酸脱氢酶（LDH）释放法分别检测WT、GSDMD KO BMDM的死亡率。分别设置空白对照组、对照组、样品最大酶活性对照孔组、IL-1β组、白念珠菌组、IL-1β + 白念珠菌组,用IL-1β和/或白念珠菌酵母诱导BMDM后用LDH释放法分析WT及GSDMD KO BMDM死亡率。采用非配对t检验、Kruskal-Wallis 检验、方差分析等统计学方法进行统计分析。结果 白念珠菌体外诱导BMDM后细胞可出现气球样变及出泡现象,证实焦亡发生;与对照组相比,白念珠菌组诱导BMDM 6 h后NLRP3、IL-1β的mRNA表达水平明显升高（t = 13.02、17.51,P = 或＜0.001）,而IL-18 mRNA表达水平无明显变化（P = 0.486）,且白念珠菌诱导可引起炎症小体NLRP3表达增多及Caspase-1、GSDMD剪切。白念珠菌诱导BMDM不同时间（0、10、15、20及25 h）后IL-1β的分泌水平随时间逐渐升高（H = 12.90,P = 0.012）,而IL-18的分泌水平无明显变化（F = 0.48,P = 0.753）,且GSDMD KO组BMDM的IL-1β分泌水平低于WT BMDM组（F = 24.22,P = 0.008）。白念珠菌体外诱导15 min后,GSDMD KO BMDM［（50.3 ± 1.10）%］对白念珠菌的吞噬率低于WT BMDM［（58.53 ± 1.19）%,t = 5.09,P = 0.007］;白念珠菌体外诱导6 h后,流式细胞仪检测显示GSDMD KO组BMDM的死亡率（38.40% ± 0.50%）高于WT组BMDM（34.37% ± 0.52%）,t = 4.72,P = 0.009;LDH检测同样显示GSDMD KO BMDM的死亡率（22.52% ± 0.18%）高于WT BMDM（12.48% ± 0.15%）,t = 42.36,P＜0.001;IL-1β预处理后予白念珠菌体外诱导的WT BMDM及GSDMD KO BMDM 的细胞死亡率均较单纯白念珠菌诱导组降低（均P＜0.001）。结论 白念珠菌可诱导BMDM发生焦亡,焦亡的发生可促进IL-1β释放,并通过提高巨噬细胞的免疫活性,降低巨噬细胞死亡率。     

白念珠菌伊曲康唑耐药性与乳酸脱氢酶抗体结合水平的关系研究

目的:探讨白念珠菌与乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)抗体的结合水平与伊曲康唑耐药性的关系.方法:实验用白念珠菌临床株共30株,包括伊曲康唑耐药株、中介株和敏感株各10株,采用P0013B放射免疫沉淀分析裂解液提取白念珠菌总蛋白,应用ELISA法与LDH抗体反应,检测并比较三组菌株与LDH抗体结合的水平.结果:ELISA检测耐药株与LDH抗体相对结合量为348.71±34.36,中介株与LDH抗体相对结合量为327.00±85.60,敏感株与LDH抗体相对结合量为443.43±35.64,三组差异有统计学意义(F=8.52,P＝0.003).结论:白念珠菌耐药株与LDH抗体相对结合量较敏感菌株低,提示白念珠菌与LDH抗体相对结合量下降可能与菌株耐药的发生有关.