陈旧性心肌梗死时兔心室肌细胞瞬间外向钾电流的变化

目的　观察陈旧性心肌梗死时心室肌细胞瞬间外向钾电流 (Ito)的变化 ,探讨心律失常发生的离子机制。方法　采用结扎兔冠状动脉左前降支的方法建立急性心肌梗死动物模型 ,2个月后处死动物并分离心室肌细胞 ,应用膜片钳全细胞记录方法 ,观察心肌梗死后 2个月心外膜梗死区 (MI)、远离梗死区 (REM )与正常对照组 (CON)心室肌细胞Ito的变化。结果　①心肌梗死后 2个月REM组心肌细胞电容为 ( 15 5 .7± 5 .8)pF ,明显大于CON组的 ( 12 0 .3± 6.2 ) pF和MI组的( 13 0 .4± 7.8) pF(P <0 0 5 ) ,MI组与CON组相比无统计学差异 (P >0 0 5 )。②Ito电流密度 ( +60mV时 )的对比显示 ,CON组为 ( 17.4± 5 .2 ) pA pF (n =16) ,MI组为 ( 10 6± 4 1) pA pF (n =18) ,明显低于CON组 (P <0 0 1) ;REM组为 ( 13 .2± 4 1)pA pF(n =2 3 ) ,明显低于CON组 (P <0 0 1) ,但明显高于MI组 (P <0 0 5 )。 结论　心肌梗死后心室肌细胞Ito电流密度的变化 ,可能是导致折返性室性心律失常的离子基础     

黄芪对兔急性心肌梗死左室心外膜细胞瞬间外向钾电流影响的研究

目的探讨黄芪对急性心肌梗死（AMI）后心外膜梗死边缘区及非梗死区心肌细胞瞬间外向钾电流（Ito）的影响。方法建立AMI动物模型后,腹腔注射黄芪,酶解分离心室肌细胞,采用全细胞膜片钳记录技术分别记录梗死边缘区（AMI—R）及非梗死区（AMI-N）心外膜心肌细胞（Epicardium,Epi）Ito密度。结果正常左心室Epi细胞的Ito于＋70mV时的电流密度明显大于AMI—R及AMI—N（P〈0．01）;AMI—R及AMI—NEpi细胞的It0密度差异有统计学意义（P〈0．05）;黄芪使受抑制的AMI-R及AMI—Nho密度恢复。结论黄芪对AMI—R及AMI—Nho密度的异常有部分改善作用。     

羧甲基壳聚糖对豚鼠单-心室肌细胞延迟外向钾电流的作用

研究羧甲基壳聚糖对豚鼠单一心室肌细胞延迟外向钾电流 (IK)的作用 ,从离子通道角度初步探讨其作用机理。应用膜片钳全细胞记录方式 ,设保持电位为 - 50 m V,指令电位为 - 50～ 70 m V,步阶脉冲 1 0 m V,刺激频率 1 Hz,波宽 1 0 0 0 ms,刺激间隔 5s的方波钳制方案。羧甲基壳聚糖能抑制 IK,并呈浓度依赖关系。选择指令电位 70 m V时给药前后 IK 的变化进行统计 ,当浓度为 0 .1 %时 ,IK由给药前的 1 .1 6± 0 .30 n A减少至药后的 0 .96± 0 .2 7n A(n=4,P<0 .0 1 ) ,其抑制率是 1 7.70± 0 .0 5%。当浓度为 0 .2 %时 ,IK 由给药前的 1 .46±0 .62 n A减少至给药后的 1 .0 6± 0 .49n A(n=4,P<0 .0 1 ) ,抑制率是 2 8.66± 0 .0 6%。其它指令电位下的 IK 的改变也符合此趋势。羧甲基壳聚糖抑制豚鼠单一心室肌细胞延迟外向 K 电流。     

山莨菪碱对急性心肌梗死兔心室肌细胞瞬间外向钾通道电流的影响

目的 探讨山莨菪碱对兔急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后心室肌细胞瞬间外向钾通道电流(Ito)的影响及其抗心律失常的细胞学离子机制.方法 将45只新西兰大耳白兔随机分为AMI组、山莨菪碱组和假手术组3组,各15只.AMI模型建立术前山莨菪碱组耳缘静脉注射山莨菪碱5 mg/kg,AMI组和假手术组耳缘静脉注射相同剂量0.9%氯化钠注射液.AMI组和山莨菪碱组采用结扎兔冠状动脉左前降支的方法建立AMI动物模型,假手术组开胸后仅分离左冠状动脉前降支并穿线但不结扎.术后3组均使用酶解法分离心室肌外膜单个心室肌细胞,并采用全细胞膜片钳技术记录跨膜Ito.结果 3组Ito的电流-电压关系(I-V)曲线均呈线性电压依赖性.AMI组与假手术组和山莨菪碱组比较,I-V曲线均明显下移.AMI组、山莨菪碱组和假手术组电压为+60 mV时Ito电流密度分别为[(10.56 ±1.95)pA/pF,n=12]、[(15.34 ± 2.55) pA/pF,n=12]、[(17.41±3.13)pA/pF,n=15],AMI组与山莨菪碱组、假手术组比较均显著下降,差异有统计学意义(P＜0.01);山莨菪碱组与假手术组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 AMI可导致Ito明显下降,山莨菪碱预处理可使下降的Ito上调,逆转电重构,其可能为山莨菪碱降低心律失常发生率的细胞学离子机制.     

山莨菪碱对急性心肌梗死兔心室肌细胞瞬间外向钾通道电流的影响

目的 探讨山莨菪碱对兔急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后心室肌细胞瞬间外向钾通道电流(Ito)的影响及其抗心律失常的细胞学离子机制.方法 将45只新西兰大耳白兔随机分为AMI组、山莨菪碱组和假手术组3组,各15只.AMI模型建立术前山莨菪碱组耳缘静脉注射山莨菪碱5 mg/kg,AMI组和假手术组耳缘静脉注射相同剂量0.9%氯化钠注射液.AMI组和山莨菪碱组采用结扎兔冠状动脉左前降支的方法建立AMI动物模型,假手术组开胸后仅分离左冠状动脉前降支并穿线但不结扎.术后3组均使用酶解法分离心室肌外膜单个心室肌细胞,并采用全细胞膜片钳技术记录跨膜Ito.结果 3组Ito的电流-电压关系(I-V)曲线均呈线性电压依赖性.AMI组与假手术组和山莨菪碱组比较,I-V曲线均明显下移.AMI组、山莨菪碱组和假手术组电压为+60 mV时Ito电流密度分别为[(10.56 ±1.95)pA/pF,n=12]、[(15.34 ± 2.55) pA/pF,n=12]、[(17.41±3.13)pA/pF,n=15],AMI组与山莨菪碱组、假手术组比较均显著下降,差异有统计学意义(P＜0.01);山莨菪碱组与假手术组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 AMI可导致Ito明显下降,山莨菪碱预处理可使下降的Ito上调,逆转电重构,其可能为山莨菪碱降低心律失常发生率的细胞学离子机制.     

伊布利特对兔左心室中层细胞瞬间外向钾电流活性的影响

目的观察正常左心室中层心肌细胞(M细胞)瞬间外向钾电流(transient outside potassium current,Ito)的离子通道的变化,了解伊布利特抗室性心律失常的可能机制。方法新西兰纯种白兔60只,取其心脏行Langendorff灌流,以酶解法分离出单个左心室中层心肌细胞,以伊布利特10-6mol/L细胞外液及伊布利特10-5mol/L细胞外液对M细胞进行灌注,以膜片钳技术分别记录Ito的电流密度、电流-电压曲线(I-V)、失活曲线、失活后再恢复等变化,和对照组进行对比。结果 +60mV电流密度对照组为(17.4±5.2)pA/pF(n=14cells),10-6mol/L组(n=14cells)为(6.0±1.2)pA/pF,与对照组相比下降明显(P<0.01)。10-5mol/L组(n=14cells)为(4.5±1.1)pA/pF,与对照组比较有明显下降(P<0.01)。10-5mol/L组与10-6mol/L组比较差异有统计学意义(P<0.01)。I-V曲线比较显示伊布利特组I-V曲线均下移。伊布利特组与对照组相比,失活曲线明显左移(P<0.05或P<0.01),10-6mol/L组与10-5mol/L组半数最大失活电压与对照组比较下降显著(P<0.01)。Ito失活后再恢复明显减慢。结论伊布利特呈浓度依赖性抑制正常左心室中层心肌细胞Ito电流,可能是伊布利特临床上抗心律失常作用的机制之一。     

陈旧性心肌梗死时兔心室肌细胞瞬间外向钾电流的变化

目的观察陈旧性心肌梗死时心室肌细胞瞬间外向钾电流(Ito)的变化,探讨心律失常发生的离子机制.方法采用结扎兔冠状动脉左前降支的方法建立急性心肌梗死动物模型,2个月后处死动物并分离心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录方法,观察心肌梗死后2个月心外膜梗死区(MI)、远离梗死区(REM)与正常对照组(CON)心室肌细胞Ito的变化.结果①心肌梗死后2个月REM组心肌细胞电容为(155.7±5.8)pF,明显大于CON组的(120.3±6.2)pF和MI组的(130.4±7.8)pF(P＜0.05),MI组与CON组相比无统计学差异(P＞0.05).②Ito电流密度(+60mV时)的对比显示,CON组为(17.4±5.2)pA/pF(n=16),MI组为(10.6±4.1)pA/pF(n=18),明显低于CON组(P＜0.01);REM组为(13.2±4.1)pA/pF(n=23),明显低于CON组(P＜0.01),但明显高于MI组(P＜0.05).结论心肌梗死后心室肌细胞Ito电流密度的变化,可能是导致折返性室性心律失常的离子基础.     

大鼠心室肌细胞急性酶分离及瞬时外向钾电流的记录

目的：探索成年SD大鼠心室肌细胞急性酶分离及记录瞬时外向钾电流的方法。方法以成年SD大鼠为研究对象,利用Langendorff灌流系统,利用Ⅱ型胶原酶二步灌流方法分离细胞,利用膜片钳技术记录大鼠心室肌瞬时外向钾电流。结果镜下可见存活心肌院呈杆状或矩形,表面干净,横纹清晰,立体感强,能记录出瞬时外向钾电流达3000 pA。结论本实验所用的方法细胞成活率高,能记录出瞬时外向钾电流。     

槟榔碱对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响

目的：研究槟榔碱(Are)对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流(I_(to))的影响。方法：利用全细胞膜片钳技术测定大鼠心室肌细胞的I_(to)。结果：10.0μmol·L~(-1) Are可以降低I_(to),使I_(to)幅值从(10.6±s 1.2)pA·pF~(-1)降至(6.2±0.9)pA·pF~(-1)(P＜0.01,n=20)。在1～100μmol·L~(-1)范围内Are的作用呈浓度依赖性,IC_(50)为8.2μmol·L~(-1)。10.0μmol·L~(-1)Are使稳态激活曲线右移,半激活电压(V_(1/2))从(-11.6±0.6)mV移至(-2.3±0.1)mV,但曲线斜率基本不变。Are对失活曲线影响不大,但10.0μmol·L~(-1)Are使通道失活后恢复时间常数从(88±16)ms延长为(152±24)ms(P＜0.01,n=18)。结论：Are浓度依赖地阻滞大鼠心室肌细胞的I_(to)。     

醋柳黄酮对大鼠心室肌细胞瞬间外向整流钾电流的影响

目的探讨醋柳黄酮对大鼠心室肌细胞膜瞬间外向钾电流(Ito)的影响。方法用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞,标准的全细胞膜片钳技术记录瞬间外向钾电流。结果①醋柳黄酮呈浓度和电压依赖性抑制Ito,在+50mV时,0.06、0.1和0.14g.L-1醋柳黄酮分别阻断Ito峰电流(18.34±0.99)%、(25.32±1.43)%和(38.88±1.96)%。②0.14g.L-1醋柳黄酮使Ito失活曲线明显左移,但对激活和复活曲线无影响。结论醋柳黄酮呈浓度和电压依赖性抑制心肌细胞Ito,这可能是其抗心律失常作用的重要机制之一。     

Effect of haloperidol on transient outward potassium current in rat ventricular myocytes

Although sigma ligand haloperidol is known to affect repolarization in heart, its effect on potassium currents in cardiomyocytes has not yet been studied. We analyzed the effect of 1 micromol/l haloperidol on transient outward K(+) current (I(to)) in enzymatically isolated rat right ventricular cardiomyocytes using the whole-cell patch-clamp technique at room temperature. Haloperidol induced a decrease of amplitude and an acceleration of apparent inactivation of I(to), both in a voltage-independent manner. The averaged inhibition of I(to), evaluated as a change of its time integral, was 23.0+/-3.2% at stimulation frequency of 0.1 Hz. As a consequence of slow recovery of I(to) from the haloperidol-induced block (time constant 1482+/-783 ms), a cumulation of the block up to about 40% appeared at 3.3 Hz. We conclude that haloperidol causes a voltage-independent block of I(to) that cumulates at higher stimulation frequencies. Based on the computer reconstruction of experimental data, a block of I(to)-channels in both open and open-inactivated states appears to be likely mechanism of haloperidol-induced inhibition of I(to).     

马桑内酯对瞬时外向钾电流的影响及在致痫机制中的作用

目的本实验拟采用全细胞膜片钳记录技术,研究马桑内酯(CL)对培养大鼠皮层神经元瞬时外向钾电流(ⅠA)的影响,从而探讨CL致癫痫的电生理机制及与ⅠA的关系,为临床更有效地防治癫痫提供新的依据。方法采用全细胞膜片钳技术记录ⅠA,进行以下方面实验①培养大鼠皮层神经元ⅠA的特性及鉴定;②三种不同浓度CL对神经元ⅠA的影响;③CL对神经元ⅠA的I-V曲线的影响。结果测试电压为+65mV时,三种不同浓度CL后均可抑制IA的电流振幅,其抑制差异均有统计学意义。结论CL具有抑制瞬时外向钾电流的作用,且在一定范围内抑制呈剂量依赖性,推测CL致癫痫的发生机制可能与IA的抑制有关。     

苄基四氢巴马汀对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响

利用全细胞膜片钳技术测定大鼠心室肌细胞的I_to, 研究苄基四氢巴马汀（BTHP）对大鼠心室肌瞬时外向钾电流 (I_to) 的影响. 结果显示,5.0 μmol·L^-1 BTHP可以降低I_to, 使I_to幅值从（13.8±2.2）pA·pF^-1降至（5.1±1.4）pA·pF^-1（P＜0.01）. 在1～100 μmol·L^-1范围内BTHP的作用呈浓度依赖性,IC₅₀为3.6 μmol·L^-1,该药不改变I_to 电流-电压曲线的形状,而使电流幅值减少. 5.0 μmol·L^-1 BTHP使稳态激活曲线右移,半激活电压（V_1/2）从（－6.8±0.2）mV移至（－1.5±0.1）mV,但曲线斜率基本不变. BTHP对失活曲线影响不大,5.0 μmol·L^-1 BTHP使通道失活后恢复时间常数从（75±19）ms延长为 （119±21）ms（P＜0.01）. 结果说明,BTHP浓度依赖地阻滞大鼠心室肌细胞的I_to.     

苄基四氢巴马汀对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响

利用全细胞膜片钳技术测定大鼠心室肌细胞的Ito,研究苄基四氢巴马汀 (BTHP)对大鼠心室肌瞬时外向钾电流 (Ito)的影响 .结果显示 ,5 .0 μmol·L- 1BTHP可以降低Ito,使Ito幅值从 (13.8± 2 .2 )pA·pF- 1降至 (5 .1± 1.4 )pA·pF- 1(P <0 .0 1) .在 1～ 10 0μmol·L- 1范围内BTHP的作用呈浓度依赖性 ,IC50 为3.6μmol·L- 1,该药不改变Ito电流 电压曲线的形状 ,而使电流幅值减少 .5 .0 μmol·L- 1BTHP使稳态激活曲线右移 ,半激活电压 (V1/2 )从 (- 6.8±0 .2 )mV移至 (- 1.5± 0 .1)mV ,但曲线斜率基本不变 .BTHP对失活曲线影响不大 ,5 .0 μmol·L- 1BTHP使通道失活后恢复时间常数从 (75± 19)ms延长为(119± 2 1)ms(P <0 .0 1) .结果说明 ,BTHP浓度依赖地阻滞大鼠心室肌细胞的Ito.     

瞬时外向钾电流在糖尿病心肌病电重构中的作用

目的：探讨糖尿病心肌病（DCM）大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流（Ito）的变化,了解其在电重构中的作用。方法选用20只健康成年SD大鼠,随机分为对照组（n=10）和DCM组（n=10）,并通过病理组织学证实为DCM心肌病理学改变。分别对两组大鼠采用改进的耐钙成年大鼠急性酶分离方法分离心肌细胞,运用膜片钳技术以全细胞模式分别记录两组大鼠心室肌单细胞的Ito和膜电容,并分析比较两组大鼠心室肌Ito的变化。结果与对照组比较,DCM组大鼠左心室心肌细胞的Ito电流密度显著低于对照组[＋70 mV时,（16.80±9.10） pA/pF v s（36.25±5.20）pA/pF]（P〈0.05）,DCM组的Ito的I-V曲线明显较对照组下移。结论 DCM的Ito数量明显减少,在DCM心肌电重构中起着重要作用。 Ito的减少及Ito通道的分布密度不同,可导致动作电位时程与有效不应期发生变化,可能与临床严重心律失常的发生有关。