华蟾素抗骨肉瘤作用中相关信号通路的研究进展

骨肉瘤是常发于青少年的恶性肿瘤,具有易转移、预后差的特点。随着诊疗水平的进步,骨肉瘤患者的5年生存率虽有明显提高,但仍有很大的提升空间。传统中药的抗肿瘤作用已被广泛关注,华蟾素是近些年来较为广泛使用的中药制剂,大量研究已经证实华蟾素能对骨肉瘤产生抑制作用,其中的分子机制复杂多样,尚未完全阐明。现就目前已研究的华蟾素抗骨肉瘤涉及的分子机制中相关信号通路进行综述,归纳起来,华蟾素可以通过抑制GSK-3β/NF-κB信号通路,激活ROS/JNK/p38信号通路,下调骨肉瘤细胞中的Notch信号从而发挥抗骨肉瘤的作用,为进一步探索华蟾素抗骨肉瘤的分子机制提供参考。     

Hippo信号通路在骨肉瘤中的研究进展

骨肉瘤是临床上最常见的原发恶性肿瘤之一,新辅助化疗使患者5年生存率得到提高,但是伴有肺部转移的患者5年生存率亦不足20%,亟需新的治疗方案。Hippo信号通路参与了哺乳动物多种细胞和器官的稳态调控,最近研究表明Hippo信号通路调控骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和转移等恶性行为,Hippo信号通路可能为骨肉瘤治疗提供新的靶点,本文综述了Hippo信号通路的组成、调节机制及骨肉瘤中Hippo信号通路分子变异情况,以期为骨肉瘤研究和防治提供更广阔的思路。     

外源性BMP9对骨肉瘤细胞MG63的影响与Wnt/β-catenin信号通路的关系

目的 研究外源性骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)过表达对骨肉瘤细胞的影响与Wnt/β-catenin信号通路的关系.方法 用携带人BMP9基因的重组腺病毒AdBMP9转染人骨肉瘤细胞MG63,上调MG63中BMP9的表达水平;MTT法检测细胞增殖能力的变化,Hochest染色法检测细胞凋亡的变化,Transwell实验检测细胞迁移能力的变化;实时定量PCR和Western blot分别检测Wnt/β-catenin信号通路中相关分子β-catenin、c-myc、cyclinD1和E-cadherin在mRNA和蛋白水平表达的变化.统计分析实验结果.结果 获得了过表达BMP9的MG63细胞;BMP9能促进MG63细胞的增殖、迁移和凋亡;MG63细胞中BMP9的过表达增强了Wnt/β-catenin信号通路中相关分子β-catenin、c-myc、cyclinD1的表达,减弱了E-cadherin的表达.结论 BMP9对于骨肉瘤细胞MG63具有正性调节作用,该调控作用可能与Wnt/β-catenin信号通路相关.     

骨肉瘤外泌体中miRNA促侵袭及血管化机制研究

目的 研究骨肉瘤分泌外泌体中的miR-301 a-3p对骨肉瘤U2-OS细胞侵袭能力以及对血管内皮细胞成血管能力的作用及机制.方法 免疫荧光染色用以检测外泌体能否进入人血管内皮细胞(HUVEC)中发挥作用,Western blot法检测miR-301a-3p对于血管相关蛋白CD31及a-SMA以及信号通路蛋白表达的影响,侵袭实验检测miR-301a-3p对骨肉瘤细胞侵袭性的影响.结果 骨肉瘤细胞分泌的外泌体成功进入HUVEC中发挥作用,血管相关蛋白CD31及a-SMA含量高表达,PI3K/Akt、Mek/Erk通路蛋白高表达,血管生长能力较未处理组增强;miR-301a-3p处理后骨肉瘤细胞侵袭能力增强.结论 骨肉瘤来源外泌体中的miR-301a-3p可能通过PI3K/Akt、Mek/Erk信号通路促进骨肉瘤U2-OS细胞侵袭能力以及HUVEC的成血管能力.     

经典Wnt信号通路在骨肉瘤中的作用机制

随着社会医疗水平的进步,骨肉瘤患者5年生存率提高,已被证实与身高、家族遗传病史、辐射、病毒等相关,但其发病机制至今尚不明确,晚期骨肉瘤患者仍存在远处转移的问题,没有得到有效控制.而经典Wnt信号通路在骨肉瘤的凋亡、化疗耐药性及侵袭转移等方面均起着重要的调控作用,通过抑制经典Wnt信号通路的活性,可以减缓骨肉瘤的生长和侵...     

脂代谢重编程与骨肉瘤的研究进展

骨肉瘤是一种常见于儿童和青少年的原发恶性肿瘤,其增殖和转移与代谢重编程密切相关。脂代谢对于维持机体正常活动具有重要意义,近年来被发现参与了骨肉瘤的发生发展,脂代谢相关分子可作为信号分子调控骨肉瘤的恶性表型。阐明脂代谢重编程有助于理解骨肉瘤的发生和转移机制,靶向脂质代谢途径可能是骨肉瘤十分有前景的治疗策略。本文就脂代谢重编程与骨肉瘤的研究进展进行综述。     

阿霉素可通过MAPK信号转导通路促进成骨肉瘤细胞凋亡

目的: 探讨阿霉素在适宜的加药浓度、作用时间下诱导成骨肉瘤细胞凋亡的分子机制.方法: 首先通过FCM,MTT等方法探讨引起成骨肉瘤细胞凋亡的最佳药物作用浓度及时间;在此条件下应用不同信号转导通路的抑制剂观察导致细胞凋亡的可能通路;最后应用Western-Blotting来检测在成骨肉瘤细胞凋亡过程中相关信号分子的表达水平及磷酸化水平的变化.结果: 0.4 mg/L阿霉素作用成骨肉瘤细胞12 h即可引起细胞凋亡,并呈时间依赖性;用p38的抑制剂SB203580和MEK4/7的抑制剂U0126可明显抑制细胞的凋亡;Western Blotting检测发现阿霉素作用于细胞后,MAPK家族成员JNK、ERK和p38等各激酶的表达水平未发生明显变化,但JNK,p38的磷酸化水平提高了ERK的磷酸化水平有所下降;用Western Blotting检测到阿霉素作用后p53蛋白的表达水平有提高.结论: 阿霉素可导致成骨肉瘤细胞凋亡,而且此凋亡过程与MAPK通路有关.     

mTOR传导通路在骨肉瘤联合化疗中的应用研究

摘要：骨肉瘤是儿童和青少年高发的恶性肿瘤,相比其他肿瘤骨肉瘤具有高侵袭性高转移性。骨肉瘤患者的预后与联合化疗的反应性相关,但是骨肉瘤对现有的化疗药物有较高的耐药性,并且缺乏效果明确的联合化疗方案。最近的研究证实哺乳动物雷帕霉素靶点传导通路在部分肿瘤起到了控制细胞生长、细胞增殖、细胞迁移、细胞存活、蛋白合成和转运的功能。近十年来学者一直在研究哺乳动物雷帕霉素靶点传导通路治疗肿瘤的分子机制,这篇综述回顾了哺乳动物雷帕霉素靶点传导通路应用于骨肉瘤治疗和联合化疗的研究。     

Notch信号通路调控癌症的研究进展

Notch信号通路在调控细胞进程、调节细胞命运方面起至关重要的作用,该通路高度依赖于上下游分子的调控,在不同的细胞环境中功能大相径庭.因此Notch信号调控癌症相关通路具有极强的复杂性,但目前对该通路的具体机制及功能的研究仍然存在许多未知的领域.本文着重于整理近年来研究Notch信号通路及其相关的肿瘤的关系的最新进展,...     

SFRP1-Wnt信号通路在骨肉瘤中的研究进展

Wnt信号通路通过调节许多组织的发育和体内平衡,控制胚胎发育和成体稳态,其信号异常不仅会造成发育缺陷,而且与多种癌症的发生密切相关。近年来,研究发现Wnt信号通路在骨肉瘤的发生发展及转移中扮演重要角色。分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled-related protein 1,SFRP1)因部分结构与Wnt信号通路的卷曲蛋白受体（frizzled,FZD）高度同源而被认为是一类Wnt通路调节剂,调节骨肉瘤中的Wnt信号通路。本文就SFRP1-Wnt信号轴对骨肉瘤的调节作用进行综述。     

去甲二氢愈创木酸抑制骨肉瘤Mg63细胞生长的研究

【目的】 探讨去甲二氢愈创木酸对骨肉瘤细胞Mg63的生长抑制作用及其机制. 【方法】 应用四甲基偶氮唑蓝(MTT法)和克隆形成法测定去甲二氢愈创木酸对Mg63细胞的生长抑制作用,检测其抑制骨肉瘤细胞生长的时间效应和剂量效应;用流式细胞技术进行细胞周期分析;用Western blot法检测药物对Mg63细胞mTORC1信号通路活性的影响.【结果】 去甲二氢愈创木酸对Mg63细胞具有明显的生长抑制作用,且呈时间依赖和剂量依赖关系,72 h IC50值为(48 ± 2)μmol/L?10?20?50 μmol/L可显著抑制Mg63克隆形成数量,且随剂量增加抑制作用明显增强?细胞周期阻滞于G0/ G1 期,mTORC1信号通路蛋白p-S6和p-4E-BP1与对照组相比明显下调. 【结论】 去甲二氢愈创木酸明显抑制骨肉瘤细胞mg63增殖,诱导细胞周期阻滞于G0/ G1 期,这一作用可能是通过对mTORC1信号通路的抑制完成.     

髓锌指基因1对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的研究葡萄糖-6- 磷酸脱氢酶（G6PD）和髓锌指基因1（MZF -1）在骨肉瘤中的作用及其可能的作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测MZF -1 和G6PD在骨肉瘤细胞中的表达;MTT 法检测过表达MZF -1 对骨肉瘤细胞增殖的影响;流式细胞仪检测过表达MZF -1 对骨肉瘤细胞凋亡及细胞周期的影响;荧光素酶报告基因分析法验证MZF-1 与G6PD启动子区的相互作用关系。结果在骨肉瘤细胞中, MZF -1 的表达下降,G6PD表达上升。过表达MZF -1可抑制骨肉瘤细胞增殖,促进细胞凋亡,并且将细胞周期阻滞于G0/G1期。荧光素酶报告基因分析结果表明, MZF -1可靶向结合到G6PD 的启动子区域并负向调控G6PD 的表达。结论MZF -1 可通过负向调节G6PD的表达,在骨肉瘤的发生、发展过程中发挥抑癌的作用,为骨肉瘤治疗提供新的思路。     

Notch 信号通路在增强骨肉瘤化学治疗药物疗效中的机制

骨肉瘤是最常见的骨恶性肿瘤。从20 世纪70 年代起,人类就开始使用化学治疗药物来治疗骨肉瘤。然 而,多药耐药作为影响化学治疗药物疗效的主要不良反应之一,在不同程度上降低了骨肉瘤患者的生存率。Notch 信 号通路在骨肉瘤细胞增殖中起重要作用,同时通过减少细胞内药物累积、调控上皮-间质转化、导致微RNA失调和细 胞凋亡基因的表达紊乱、调节肿瘤干细胞等方面影响肿瘤的耐药性。     

帕金森病相关蛋白DJ-1对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的影响

目的：研究帕金森病相关蛋白DJ-1对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法： Western 印迹检测骨肉瘤细胞株(MG-63,Saos-2和U2OS)及正常人成骨细胞株hFOB1.19中DJ-1和第10号染色体上缺失的 磷酸酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted from chromosome 10,PTEN)基因的表达。DJ-1 siRNA处 理人骨肉瘤细胞后,采用Western印迹检测DJ-1的蛋白表达水平;细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细 胞存活率;膜联蛋白V(annexin V)-异硫氰酸荧光素(fl uorescein isothiocyanate,FITC)/碘化吡啶(propidium iodide,PI)双染 检测细胞凋亡;Transwell侵袭和迁移实验检测细胞侵袭和迁移水平。结果：与hFOB1.19细胞比较,骨肉瘤细胞DJ-1蛋 白表达水平显著升高(均P<0.05),其中U2OS细胞升高最为显著(P<0.01)。DJ-1 siRNA可显著降低U2OS细胞中DJ-1蛋白 表达水平、降低细胞存活率、促进细胞凋亡、抑制细胞侵袭和迁移水平,以及增加PTEN蛋白表达水平(均P<0.05)。 另外,与hFOB1.19细胞比较,PTEN在骨肉瘤细胞中的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论：DJ-1可抑制人骨肉瘤 细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞侵袭和迁移水平,其机制可能与增加PTEN蛋白的表达水平有关。     

YWHAZ Binds to TRIM21 but Is Not Involved in TRIM21-stimulated Osteosarcoma Cell Proliferation

Objective Osteosarcoma is the most common type of malignant bone tumor in children and adolescents. The role of E3 ligases in tumorigenesis is currently a focus in tumor research. In the present study, we investigated the role of the E3 ligase tripartite motif 21(TRIM21) in osteosarcoma cell proliferation.Methods 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide(MTT) assays were used to assess osteosarcoma cell viability. U2-OS cells stably carrying a recombinant lentivirus expressing tetracycline-regulated TRIM21 were screened. Co-immunoprecipitation was coupled with LCMS/MS analysis to identify novel interacting partners of TRIM21. Co-immunoprecipitation and bimolecular fluorescence complementation(BIFC) were performed to validate the interactions between TRIM21 and its novel partner YWHAZ. A TRIM21-ΔRING construct was generated to test the effects of TRIM21 ligase activity on YWHAZ.Results TRIM21 positively regulated osteosarcoma cell proliferation. Overexpression of TRIM21 enhanced osteosarcoma cell tolerance toward various stresses. YWHAZ protein was identified as a novel interacting partner of TRIM21 and its expression levels were negatively regulated by TRIM21. The RING domain of TRIM21 was required for TRIM21 negative regulation of YWHAZ expression. However,overexpression of YWHAZ did not affect positive regulation of osteosarcoma cell proliferation by TRIM21.Conclusion Our results further clarify the molecular mechanisms underlying the pathogenesis of osteosarcoma.     

活化Notch1信号促进骨肉瘤细胞体外侵袭作用及机制

目的:初步探讨活化Notch1信号影响骨肉瘤细胞侵袭行为的分子机制。分析Notch1信号活化后,RANKL-OPG-RANK信号轴的变化情况。方法:体外培养骨肉瘤细胞系Saos-2,转染Notch1信号的胞内段ICN1后,检测骨肉瘤细胞的侵袭能力,利用实时定量PCR检测RANKL、RANK和OPG的mRNA表达水平。结果:实验组(Saos-2-ICN)ICN1的蛋白表达水平高于对照组(Saos-2-G418)。Saos-2-G418侵袭细胞数为(41.4±6.4)个,Saos-2-ICN侵袭细胞数为(93.7±12.8)个。Saos-2-G418组RANKL、OPG和RANK分子mRNA相对表达水平分别为(0.6±0.07),(1.2±0.14)和(0.3±0.04);Saos-2-ICN组RANKL、OPG和RANK分子mRNA相对表达水平分别为(1.8±0.3),(0.58±0.09)和(2.0±0.4),两者间具有统计学差异(P<0.05)。结论:活化Notch1信号,提高细胞侵袭力,升高RANKL和RANK基因mRNA表达水平,降低OPG基因mRNA表达水平。本实验结果提示RANKL-OPG-RANK信号轴可能参与Notch1信号调控骨肉瘤细胞的侵袭和转移。     

自噬调节牙萌出骨改建机制研究进展

骨改建的动态平衡是牙齿正常萌出的基础,调节骨代谢的信号通路可以通过多种细胞因子交互作用,进而精密调节这一复杂的级联过程。自噬是细胞进行自我保护的一种重要机制,近年来研究提示骨改建与细胞自噬间关系密切,但具体作用机制尚不明确。本文从主要骨代谢信号通路与自噬在牙萌出通道形成过程中相互作用的可能机制进行述评,旨在为牙萌出过程中分子调节机制和牙槽骨动态平衡生物学性能的研究提供更全面认识。