芽孢杆菌发酵炮制中药红花增强溶血栓药效研究

目的:探讨芽孢杆菌发酵炮制中药红花增强溶血栓药效。方法:采用系统数值化和数值系统调控技术对发酵炮制条件进行合理适量优化,用角叉菜胶法对小鼠尾部进行了血栓实验,检测了大鼠纤溶和凝血指标。结果:在相同剂量下(1000 U/m L)A红发组(红花与C2-13共发酵组)比其余各组有明显缩短血栓长度(P0.05),凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)以及活化的部分凝血活酶时间(APTT)被延长,明显缩短优球蛋白溶解时间(ELT)的作用(P0.05)。结论:红花通过C2-13菌种发酵炮制后可有效提升纤溶活性、抗凝作用,增大溶血栓的药效。     

微生物发酵炮制对红花抗氧化活性的影响

目的研究地衣芽孢杆菌C2-13发酵炮制对红花抗氧化活性的影响。方法邻二氮菲-Fe^2 氧化法测定羟自由基清除率，比色法测定红细胞的溶血作用、肝脂质过氧化物含量，HPLC法分析发酵产物。结果红花经C2-13的发酵炮制其抗氧化功效显著提高。HPLC分析还观察到红花中一些成分发生了改变。结论红花中一些有效成分可能是经C2-13的生物转化提高了其抗氧化功效。     

枯草芽孢杆菌对50种中药的发酵及抗菌活性检测

用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)对50种中药进行发酵,检测发酵产物与原料对结核分支杆菌(Myco-bacterium tuberculosis)和榛色青霉(Penicillium avellaneum)的抗菌活性。结果表明:部分中药的发酵产物抗菌活性增加,而部分中药的发酵产物抗菌活性降低,部分中药的活性不变。说明微生物发酵中药的过程中,两者发生相互作用导致发酵前后中药成分发生变化,从而抗菌活性发生变化。     

中药的发酵炮制初探

本文就近年来中药发酵炮制的下列4个问题作了探讨:(1)定义和特点;(2)传统工艺与现代工艺;(3)共性问题和质量控制;(4)发展前景展望。通过查阅近10年有关中药发酵炮制的文献,获取上述提及4个方面问题的最新研究信息,客观评价了发酵炮制在中药研究和发展中所起的作用。     

五倍子的发酵炮制

五倍子 Melaphischinensis( Beii) Baker.为倍蚜科昆虫五倍子蚜、倍蛋蚜等若干种蚜虫 ,在其寄主漆树科落叶灌木或小乔木植物盐肤木、红麦夫杨、青麦夫杨等树叶上形成的虫瘿 ,一般秋季采摘 ,置沸水中略煮或蒸至表面呈灰色 ,杀死瘿内蚜虫 ,干燥 ,敲开 ,除去杂质 ,生用。五倍子含有五倍子鞣质、没食子酸等 ,有收敛止泻、止血作用。五倍子的收敛止泻、止血作用主要是由于它所含的鞣酸与细胞中的蛋白质结合成不溶于水的沉淀物 ,从而抑制了细胞分泌 ,促进水液的再吸收而发挥收敛作用。但鞣酸在肠道内会遇食物中的蛋白质 ,并与之结合 ,因而降低了…     

增强红花黄色素A抗血栓作用的生物转化机理研究

目的 对地衣芽孢杆菌(C2-13)发酵红花黄色素A(SYA)增强抗血栓作用的转化机理进行研究.方法 高效液相色谱(HPLC)对SYA发酵前后的物质变化进行检测,用聚酰胺和制备型高效液相色谱对新物质进行分离并初步鉴定其结构.抗血栓作用是通过大鼠尾部血栓实验、凝血酶原时间(PT)、部分凝血酶活时间(APPT)等药效实验测定.结果 发酵后生成的新物质(命名为SYA-X)的抗血栓作用较SYA显著增强;其紫外吸收峰为353.6 nm,红外图谱中没有苯环峰出现,质谱显示其分子量为543.结论 SYA通过C2-13的发酵,其抗血栓作用得到明显提高;该过程中,SYA被转化为一种新的高效抗栓成分SYA-X.     

醋红花炮制工艺的优选

目的:以羟基红花黄色素A、山奈素和槲皮素的含量为考察指标,进行综合加权法对醋红花的炮制工艺进行研究,优选醋红花的最佳炮制工艺。方法:采用RP-HPLC法,Diamonsil C18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱测定醋红花中羟基红花黄色素A、山奈素和槲皮素的含量。结果:羟基红花黄色素A、山奈素和槲皮素分别在0.0476～0.238mg/mL、0.2～20μg/mL、0.1～5.0μg/mL内与峰面积呈良好的线性关系,方法回收率分别为100.36(RSD=3.00,n=6)、98.21(RSD=1.30,n=6)、98.60(RSD=1.50,n=6)。结论:醋红花的最佳炮制工艺为A2B3C2,即每100kg红花加醋20kg,拌匀,闷润50min,用中火炒至规定的颜色。     

中药炮制对药效的影响

中药是中医治病的物质基础，而中医运用中药又常常是组成复方应用，药物的炮制方法通常根据组方的需求而定。饮片质量的好坏对方剂的疗效有直接的影响。由于药方对方中药物的炮制要求常用脚注方式标明（亦有直接冠以炮制品名的）或在用法中予以说明，这样就把炮制与药方的疗效紧密结合起来了。笔者主要从以下4个方面来阐述中药炮制对药方的影响，以供参考。     

陈皮乳酸芽孢杆菌发酵过程中风味与理化性质的变化规律

目的：研究乳酸芽孢杆菌DU-106发酵陈皮过程中风味与理化性质的变化规律。方法：采用乳酸芽孢杆菌DU-106对陈皮进行发酵,分别于发酵第0、2、4、6、8、10天取发酵液样品,采用pH计检测陈皮发酵液pH;按照《食品中总酸的测定》(GB 12456—2021)测定发酵液中总酸含量;采用盐酸萘乙二胺法测定发酵液中亚硝酸盐含量;采用高效液相色谱法测定发酵陈皮干燥样品中有机酸含量;采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法测定发酵陈皮干燥样品中挥发性成分含量;采用全自动氨基酸分析仪测定发酵陈皮干燥样品中游离氨基酸的含量。结果：接种乳酸芽孢杆菌DU-106后,陈皮发酵液pH降至3.2左右,总酸最高质量分数达4.67 g·kg^–1。发酵陈皮干燥样品中,亚硝酸盐质量分数为0.14～0.54 mg·kg^–1,远低于卫生限量标准中的20 mg·kg^–1,乳酸质量分数最高可达166.29 mg·g^–1,且多种有机酸含量不断升高,进一步丰富了发酵陈皮的口感;游离氨基酸质量分数由3 914.30 mg·kg^–1     

中药炮制对药效的影响

目的:探讨中药炮制对药性和方剂的影响.方法:通过对中药采用不同的方法和辅料炮制,对药效进行比较.结果:通过炮制,消除方中某些药物的不良反应,提高药方疗效,调整方剂部分适应证,扩大应用范围,保证临床安全有效.     

红花地上部分化学成分研究

利用溶剂提取和硅胶柱层析,对红花地上部分的化学成分进行研究,通过理化常数和波谱解析,鉴定了4个单体化合物,为棕榈酸、羽扇豆醇、β-谷甾醇、羽扇豆醇棕榈酸酯,均为首次从红花地上部分中分得。     

高山桑黄挥发油超临界CO2萃取工艺优化及其生物活性研究

目的 优化高山桑黄Sanghuangporus alpinus挥发油的提取工艺,对其化学成分进行分析,并评价其生物活性。方法采用单因素试验和响应面法(RSM)优化超临界CO₂萃取高山桑黄挥发油的工艺条件;使用GC-MS、MTS和微量稀释方法鉴定挥发油的化学成分,并评估其体外抗炎、抗肿瘤和抗菌活性。结果 超临界CO₂萃取高山桑黄挥发油的最佳工艺条件为萃取温度47℃、萃取压力31 MPa、萃取时间1.5 h,在此条件下挥发油提取得率为(0.326±0.005)%。高山桑黄挥发油主要化学成分为四氯藜芦醚、1,2,4,5-四氯-3,6-二甲氧基苯、1,2,3,4-四氯-5-甲氧基-6-硝基苯、亚油酸乙酯、二十五烷。挥发油表现出显著的体外抗炎和抗肿瘤作用,但其抑菌活性不显著。结论 成功优化了高山桑黄挥发油的提取工艺,在最适条件下获得了较高的得率;结合体外模型与生物活性评价,可为高山桑黄的药物开发和资源利用提供价值参考。     

海洋真菌Penicillium sp.HD-1-1次级代谢产物研究

目的 研究涠洲岛来源的海洋真菌Penicillium sp. HD-1-1产生的次级代谢产物及其生物活性。方法 利用硅胶柱色谱和半制备液相等技术进行化合物的分离纯化,运用HRESIMS、NMR等方法对化合物的结构进行鉴定,使用CCK-8法评估化合物的细胞毒活性。结果 从涠洲岛海洋真菌Penicilliumsp. HD-1-1次级代谢产物中分离鉴定了1个新的霉酚酸类化合物以及16个已知化合物,分别为6-(5-甲氧羰基-3-甲基戊-2-烯)-7-羟基-3,5-双甲氧基-4-甲基苯酚-1-酮（1）、霉酚酸（2）、甲基麦考酚酸（3）、6-(5-甲氧羰基-3-甲基戊-2-烯)-3,7-二羟基-5-甲氧基-4-甲基苯酚-1-酮（4）、6-(5-羧基-3-甲基戊-2-烯)-3,7-二羟基-5-甲氧基-4-甲基苯酚-1-酮（5）、7-羟基-5-甲氧基-4-甲基-6-(3-甲基-4-氧代戊基)-二氢异苯并呋喃-l-酮（6）、6-(3-羧基丁酯)-7-羟基-5-甲氧基-4-甲基苯酞-1-酮（7）、breynivosamide A（8）、伞形香青酰胺（9）、N-(N''-苯甲酰基-S^*-苯丙氨酰基)-S^*-苯丙氨醇苯甲酸酯（10）、(3S,6R)-6-(对-羟苯基)-1,4-二甲基-3,6-二甲硫基哌嗪-2,5-二酮（11）、(3R,6R)-6-(对-羟苯基)-1,4-二甲基-3,6-二甲硫基哌嗪-2,5-二酮（12）、(+)-新海胆灵A（13）、(3R,8S)-5,7-二羟基-3-(1-羟乙基)苯酚（14）、5,7-二甲氧基-4-甲基异苯并呋喃-1(3H)-酮（15）、saccharonol A（16）、6,8-二羟基-3-羟甲基异香豆素（17）。细胞毒活性结果表明化合物2和3对人胃癌AGS细胞显示出强细胞毒活性,半数抑制浓度（median inhibition concentration,IC₅₀）值分别是0.69、1.12 μmol/L,此外化合物2对人非小细胞肺癌NCI-H1581细胞表现出中等程度的抑制活性,IC₅₀值为17.95 μmol/L,化合物3对人结肠癌HT29细胞也显示出中等抑制活性,IC₅₀值为19.30 μmol/L。结论 化合物1为新的霉酚酸类化合物,命名为甲氧基霉酸酯。化合物2和3具有肿瘤细胞毒活性。     

一种豆荚软珊瑚Lobophytum sp.中二萜类成分研究

目的研究采自中国西沙群岛海域的一种豆荚软珊瑚Lobophytum sp.的化学成分。方法采用硅胶柱色谱和高效液相色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱分析方法鉴定化合物的结构。结果从豆荚软珊瑚Lobophytum sp.的95%乙醇提取物中分离得到6个二萜类化合物,分别鉴定为豆荚内酯B(1)、(1S*,3S*,4S*,7E,11E)-3,4-epoxy-13-oxo-7,11,15-cembratriene(2)、(2E,4E,7R,8S,12Z)-1-isopropylcyclotetradeca-4,8-dimethyl-7-hydroxy-1,3,11-triene-8,12-carbolactone(3)、(2E,4E,8S,12Z)-1-isopropyl-4,8-dimethyl-7-oxocyclotetradeca-1,3,11-triene-8,12-carbolactone(4)、sarcrassin D(5)、laevigatol B(6)。结论化合物1为新化合物,化合物2~4为首次从该属软珊瑚中分离得到。     

大蓟内生真菌Coniothyrium sp. DJ-1抗SARS-CoV-2 Mpro活性的化学成分研究

目的 研究大蓟Cirsium japonicum内生真菌Coniothyriumsp. DJ-1中抑制新型冠状病毒主蛋白酶(severea cute respiratory syndrome coronavirus 2 main protease,SARS-CoV-2 M^pro)活性的化学成分。方法 运用新型冠状病毒M^pro/3CLpro抑制剂筛选模型从30株菌株中筛选具有抑制活性的菌株和化学成分。采用正相硅胶、反相RP-18柱色谱和HPLC等技术对抑制率高的菌株的次生代谢产物进行分离纯化,通过NMR、质谱等谱学技术解析化合物结构,利用荧光共振能量转移法测定化合物对SARS-CoV-2 M^pro的抑制活性。结果 在30株菌株中发现抑制活性良好的菌株Coniothyrium sp. DJ-1,并从该菌的大米发酵提取物中分离到17个化合物,分别鉴定为德加隆内酯(1)、5’-表细链格孢烯(2)、细链格孢烯(3)、4’-表细链格孢烯(4)、3-表-二氢细链格孢烯A(5)、瓶霉酚(6)、1-脱氧红藻内酯(7)、6-羟基-8-甲氧基...     

2株内生真菌对菊花抗旱特性的影响

目的:以PEG6000模拟干旱条件,研究接种内生真菌(葡萄孢属C1菌Botrytis sp.、球毛壳菌G4菌Chaetomium globosum对药用菊花Ch.morifolium抗旱性的影响.方法:分别用0%,10%,20%,30%,40%PEG6000胁迫菊花组培苗4 d,测定各处理组菊花生物量,叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性及叶片丙二醛(MDA)、可溶性蛋白含量.结果:模拟干旱胁迫后,接种内生真菌的菊花长势好于对照(未接菌),PEG6000胁迫4 d后,随着胁迫浓度的增加,菊花总生物量不断减少,接菌组生物量显著高于对照,C4组高于C1组;各处理组MDA含量随着胁迫浓度的增加而不断增加;各处理组POD活性、可溶性蛋白含量随着胁迫浓度的增加均呈现先增加后减小的趋势;对照SOD活性随着胁迫浓度的增加而逐渐增加,接菌组SOD活性基本保持不变;对照PAL活性随着胁迫浓度的增加而逐渐增加.不同浓度PEG胁迫后,接菌组MDA含量始终低于对照,SOD活性、POD活性、可溶性蛋白含量、PAL活性均始终高于对照.结论:接种内生真菌提高菊花的抗旱能力.     

沉香中2-(2-苯乙基)色酮类成分及其胃保护活性

目的 研究沉香Aquilariae Lignum Resinatum的2-（2-苯乙基）色酮类成分及其胃黏膜上皮细胞保护活性。方法 采用硅胶和ODS等多种色谱技术对沉香中2-（2-苯乙基）色酮进行分离纯化,结合波谱数据及其理化性质对化合物进行结构鉴定;采用牛磺胆酸诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤模型对分离得到的单体化合物进行胃黏膜保护活性筛选。结果 从沉香醋酸乙酯萃取部位中分离得到5个化合物,分别鉴定为（5R,6S,7S）-5,6,7-三羟基-2-苯乙基-5,6,7,8-四氢-4H-色烯-4-酮（1）、（6S,7S,8S）-6,7,8-三羟基-2-（3-羟基-4-甲氧基）-5,6,7,8-四氢-4H-色烯-4-酮（2）、oxidoagarochromone C（3）、rel-（1αR,2R,3R,7βR）-1α,2,3,7β-tetrahydro-2,3-dihydroxy-5-[2-（4-methoxyphenyl） ethyl]-7H-oxireno[f] [1]benzopyran-7-one（4）、沉香色酮J（5）。化合物3～5 在20 μmol/L浓度时,相对模型组细胞存活率分别提高（27.17±4.38）%、（16.02±2.95）%和（14.84±2.86）%。结论 化合物1 为新化合物,命名为四氢色酮N,通过计算电子圆二色谱（electronic circular dichroism,ECD）确定了其绝对构型。化合物3～5 能显著改善牛磺胆酸诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤,表现出一定的胃黏膜上皮细胞保护活性。     

Syk and Src are major pharmacological targets of a Cerbera manghas methanol extract with kaempferol-based anti-inflammatory activity

Ethnopharmacological relevance

Cerbera manghas L. (Apocynaceae), a semi-mangrove medicinal plant distributed throughout tropical and subtropical countries, is traditionally known to possess analgesic, anti-inflammatory, anti-convulsant, cardiotonic, and hypotensive activity. In vitro and in vivo anti-inflammatory activities of a methanol extract of the leaves of Cerbera manghas and the underlying molecular mechanisms were investigated to validate the ethnopharmacological use of this plant.

Materials and methods

The effect of Cerbera manghas methanol extract (Cm-ME) on the production of inflammatory mediators and the induction of HCl/EtOH-treated gastritis was explored using macrophages, HEK293 cells, and ICR mice. The molecular targets of this extract and potential active components in Cm-ME were also investigated.

Results

Cm-ME inhibited the production of nitric oxide (NO) in lipopolysaccharide (LPS)-treated RAW264.7 cells and peritoneal macrophages in a dose-dependent manner. This extract also suppressed the expression of NO synthase (iNOS) and cyclooxygenase (COX)-2. NF-κB-mediated enhancement of luciferase activity, nuclear translocation of p50 and p65, and phosphorylation of IκBα were markedly reduced by Cm-ME treatment. Direct enzyme assays, reporter gene assays, and immunoprecipitation analysis of kinases revealed Syk and Src as immunopharmacological targets of Cm-ME. Moreover, this extract strongly ameliorated the gastric symptoms induced by HCl/EtOH treatment of mice. Finally, HPLC analysis and pharmacological tests identified kaempferol as an active component of the extract with Src/Syk inhibitory activities.

Conclusion

Inhibition of Syk/Src and the NF-κB pathway by kaempferol could play a key role in the anti-inflammatory pharmacological action of Cerbera manghas.