水芹总酚酸对2．2．15细胞分泌HBsAg与HBeAg的抑制作用

目的观察水芹总酚酸对2．2．15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用。方法以2．2．15细胞为研究对象,通过细胞毒性实验确定水芹总酚酸对细胞的最大无毒浓度（TC0）,在最大无毒浓度以下将药物用培养液对倍稀释成500、250、125μg·mL^-1加入2．2．15细胞进行培养,每4d换同浓度药物培养液;分别收集第4、8天以及停药后4d的培养液,酶联免疫法（ELISA）测定HBsAg、HBeAg含量。结果水芹总酚酸最大无毒浓度为500μg·mL^-1,在最大无毒浓度时对HBsAg、HBeAg具有明显的抑制作用,第8天时的抑制率分别为59．33％和90％,半数抑制浓度（IC50）分别为484．17、379．89μg·mL^-1,治疗指数（TI）分别为3．158、4．025,其中对HBeAg的抑制作用优于HBsAg。结论水芹总酚酸对2．2．15细胞分泌的HBsAg、HBeAg有显著的抑制作用。     

苯丙氨酸二肽类化合物073对2．2．15细胞分泌HBsAg和HBeAg的影响

目的观察苯丙氨酸二肽类化合物073对2．2．15细胞分泌HBsAg、HBeAg的影响。方法以2．2．15细胞为研究对象,通过细胞毒性实验确定苯丙氨酸二肽类化合物073对细胞的最大无毒浓度（TC0）,在最大无毒浓度以下将药物用培养液对倍稀释成50、25、12．5μg·mL^-1加入2．2．15细胞进行培养,每4d换同浓度药物培养液;分别收集第4、8天以及停药后4天的培养液上清,酶联免疫法（ELISA）测定HBsAg、HBeAg含量。结果苯丙氨酸二肽类化合物073最大无毒浓度为50μg·mL^-1,在最大无毒浓度时对HBsAg有明显的抑制作用,第8天时的抑制率为59．3％,半数抑制浓度（IC50）为22．9μg·mL^-1,治疗指数（TI）为3．1;但对HBeAg无明显抑制作用,第8天时的抑制率仅为25．5％。结论苯丙氨酸二肽类化合物073对2．2．15细胞HBsAg有显著的抑制作用。     

Study of the effects of Moerella iridescens polysaccharide on hepatitis B virus transfected HepG2 cells

目的 研究彩虹明樱蛤多糖(MIP)对转染HBV的HepG2细胞表达功能的影响.方法 以不同浓度( 10-2～ 104μg/ml) MIP作用于体外培养的HepG2.2.15细胞,采用MTT法、时间分辨免疫分析法(TRHA)和ELISA法检测MIP对HepG2.2.15细胞的毒性作用及HBsAg、HBeAg、Pre-S1Ag表达的影响,采用FQPCR检测MIP对HBV DNA复制的抑制作用.结果 MIP在10-2～102μg/ml浓度范围内对HepG2.2.15细胞无毒性作用,TC50为4633μg/ml.MIP在10-2～102μg/ml浓度范围内,对HBsAg、HBeAg、Pre-S1Ag以及HBV DNA均有一定抑制作用,相应的治疗指数分别为129、28、20和83.结论 MIP具有一定的抗HBV活性.     

彩虹明樱蛤多糖对转染HBV的HepG2细胞表达功能的影响

目的研究彩虹明樱蛤多糖(MIP)对转染HBV的HepG2细胞表达功能的影响。方法以不同浓度(10-2~104μg/ml)MIP作用于体外培养的HepG2.2.15细胞,采用MTT法、时间分辨免疫分析法(TRFIA)和ELISA法检测MIP对HepG2.2.15细胞的毒性作用及HBsAg、HBeAg、Pre-S1Ag表达的影响,采用FQ PCR检测MIP对HBV DNA复制的抑制作用。结果 MIP在10-2~102μg/ml浓度范围内对HepG2.2.15细胞无毒性作用,TC50为4633μg/ml。MIP在10-2~102μg/ml浓度范围内,对HBsAg、HBeAg、Pre-S1Ag以及HBV DNA均有一定抑制作用,相应的治疗指数分别为129、28、20和83。结论 MIP具有一定的抗HBV活性。     

泛昔洛韦等3种药物抗乙型肝炎病毒的体外实验研究

 目的评价泛昔洛韦、膦甲酸钠及氧化苦参碱的体外抗HBV作用.方法采用MTT法检测3种药物对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC5o),并在此基础上观察不同浓度药物作用于HepG2.2.15细胞后第3、5、7和9天培养上清中HBsAg、HBeAg及HBV DNA含量的变化,比较不同药物抗HBV的效果.结果泛昔洛韦和氧化苦参碱对HepG2.2.15细胞有明显的抗HBV活性,在实验浓度范围内,随着药物浓度增加和作用时间延长,其抗HBV活性增强;膦甲酸钠对HBV无明显抑制作用.结论泛昔洛韦和氧化苦参碱具有明显体外抗HBV活性,而膦甲酸钠体外对HBV无明显抑制作用.     

替芬泰对HepG2-2.2.15细胞HBV-DNA的抑制作用

目的探讨替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞HBV-DNA的抑制作用。方法以Hep G2-2.2.15细胞作为实验模型,通过MTT法检测替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞的毒性,确定替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞的半数中毒浓度(TC50)。在替芬泰浓度为50μg·ml-1时未见明显的细胞毒性,所以设替芬泰3个剂量组为50、25、12.5μg·ml-1,拉米夫定50μg·ml-1作为阳性对照药,收集给药3、6 d的细胞。用实时荧光定量PCR法检测DNA载量。结果替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞的TC50为180.70μg·ml-1。随着替芬泰药物浓度的增加,Hep G2-2.2.15细胞内的HBV-DNA拷贝数相应减少,并有明显的浓度依赖性。结论替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞内HBV-DNA有显著的抑制作用,有效浓度为12.5μg·ml-1,最佳浓度为50μg·ml-1。     

草药肝毒清抗乙型肝炎病毒活性的实验研究

笔者以乙型肝炎病毒体外培养的细胞为对象,观察由8味中草药组方肝毒清抗乙型肝炎病毒活性。结果,肝毒清浓度为5mg/ml时能抑制HBeAg分泌;10、50mg/ml时培养细胞分泌HBsAg和HBeAg受抑制;     

茯苓素对人白血病细胞系HL—60增殖的影响

本文报告了茯苓素对人急性早幼粒白血病细胞系HL-60增殖的抑制作用.经25～100μg/ml茯苓素处理1天,HL-60细胞DNA合成能力明显减弱.药物作用2天后,细胞计数明显少于对照组.这种效应随药物浓度的加大及作用时间的延长而增强.半数抑制浓度为58.4μg/ml.抑制作用为不可逆性.茯苓素处理4天后,HL-60细胞自发形成集落的能力明显减弱.细胞周期分析结果,加药后G_0/G_1期细胞明显增多,S和G_2+M期细胞减少.     

甘遂提取物对肿瘤瘤株Hep、S180的抑制作用观察

目的观察甘遂提取物作用于小鼠移植瘤细胞Hep、S180后的抑制作用。方法模型组、5-Fu组、甘遂提取物组（E）、5-Fu＋E组,每组10只小鼠分别于右前肢腋皮下接种瘤中注射Tween80溶液、5-Fu、甘遂提取物、甘遂提取物＋5-Fu。免疫组化检测Bcl-2表达。体外培养S180细胞,加入药物浓度为50μg/ml、10μg/ml、1μg/ml,培养48h,流式细胞仪测细胞凋亡率。结果模型组与各实验组移植癌和移植癌组织与药物注射引起肿瘤坏死的Bcl-2蛋白表达,在统计学上有显著差别（P〈0.05）。加入药物浓度为50μg/ml、10μg/ml、1μg/ml,流式细胞仪测定凋亡率分别为33.9%、28.8%和23.3%。结论中药甘遂对Hep、S180有明显的抑制作用。     

二烯丙基二硫对白血病细胞株增殖的影响

 目的探讨二烯丙基二硫(DADS)对HL-60白血病细胞株的作用.方法采用MTT法观察DADS对体外培养的HL-60细胞的生长抑制;应用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法检测药物作用前后白血病HL-60细胞培养上清液中VEGF蛋白的含量.结果DADS对HL-60细胞具有明显的生长抑制效应,其对HL-60细胞的生长抑制率与药物浓度、时间有明显依赖关系,DADS(作用细胞72 h)浓度从0.625μg/ml增至20.0μg/ml,其对HL-60细胞的生长抑制率由16.7%增至71%,各实验组随时间增加抑制率明显增加(P＜0.01);HL-60细胞中均有VEGF蛋白的分泌,与空白对照组相比DADS 3个浓度组(0.625,1.25,2.5 μg/ml)作用HL-60细胞72 h均能下调VEGF蛋白的分泌(P＜0.01).结论DADS能明显抑制HL-60细胞的增殖;DADS可能通过抑制HL-60细胞VEGF的分泌发挥抗白血病的效应.     

白细胞介素-18逆转录病毒载体的构建及抗乙型肝炎病毒的研究

研究鼠白细胞介素－18（IL－18）基因的转移、表达及其抗乙型肝炎病毒（HBV）的作用。以逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术从受植物凝血素（PHA）和脂多糖（LPS）刺激BALB/c小鼠脾脏细胞中扩增出IL－18的cDNA，并构建表达IL－8基因的重组逆转录病毒载体pLXSN-IL-18，转染PA317细胞，以逆转录巢式RT－PCR方法，验证细胞培养液上清分泌的假病毒颗粒中IL－18的表达，将假病毒颗粒感染2．2．15细胞，酶联免疫吸附法（ELISA）检测其上清HBsAg和HBeAg，定量检测HBV DNA。成功克隆出580bp的小鼠IL－18全基因并构建逆转录病毒载体，在转染PA317细胞的上清中检测出含IL－18假病毒颗粒，上清感染2．2．15细胞后第3、5、7、14天，HBsAg、HBeAg逐渐下降，到14天时HBsAg已变为阴性，对HBV DNA有明显抑制作用。IL－18能成功地在逆转录病毒载体中表达，并有抑制HBsAg、HBeAg表达的作用。     

皱瘤海鞘体外抗乙肝病毒作用的初步研究

目的：研究皱瘤海鞘乙醇提取物的体外抗乙肝病毒作用。方法：用2.2.15细胞株进行抗HBsAg、HBeAg的试验研究。结果：海鞘醇提取物对HBsAg、HBeAg的分泌均呈现较明显的抑制作用，对细胞的毒性低，其治疗指数均在10以上。结论：海鞘醇提取物体具有明显的抗乙肝病毒作用。     

在2.2.15细胞中siRNA对HBV复制和表达的抑制

目的：检测设计的siRNA对HBV复制和表达的影响。方法：选择针对乙型肝炎病毒（HBV）的siRNA基因序列，化学修饰合成3种stealth siRNA，脂质体转染带有HBV的2．2．15细胞，EMSA法及荧光定量PCR检测其对HBV复制和表达的影响。结果：3种stealth siRNA对HBV的复制和表达在不同时间有不同程度的抑制作用。结论：HBV在2．2．15细胞中的复制和表达被stealth siRNA抑制。     

腺病毒表达Ribozyme在细胞内对HBV的免疫作用

了解利用腺病毒腺体表达针对乙型肝炎病毒（HBV）的核酶在细胞内对HBV表达的抑制作用。将针对HBV的多位点核酶克隆入腺病毒载体中，利用包装细胞包装出含核酶及突变核酶的重组腺病毒，将腺病毒感染2．2．15细胞（含HBV），检测感染细胞中核酶及突变核酶的表达，利用ELISA，打点杂交及激光共聚光共聚焦等方法，检测核酶对细胞内乙型肝炎病毒表达的抑制作用。结果显示核酶及突变核酶的确被克隆入腺病毒载体，并经过包装后可形成包装腺病毒，感染2．2．15细胞后可表达出目的核酶，并发挥核酶的剪切作用，其对HBV表达的抑制率最高可达87．1％。证实包装腺病毒表达的多位点核酶对HBV的复制有明确的抑制作用，支持核酶的抗病毒效果，有希望成为HBV治疗的潜在方法之一。     

皱瘤海鞘醇提物体外抗HBsAg和HBeAg的作用

目的:研究皱瘤海鞘乙醇提取物的体外抗乙肝病毒作用,并推测其作用机理.方法:用血清进行抗HBsAg、HBeAg、Anti-HBs和Anti-HBe的试验研究.结果:当海鞘醇提物的浓度＞0.05 mg/ml时,对HBeAg有良好的抑制作用,其抑制程度的大小与浓度有关.通过海鞘醇提物对Anti-HBs、Anti-HBe的作用结果推测,海鞘中用于抗乙型肝炎病毒的成分大致可以分为两类:一类具有类似抗体样的结果,可以通过与抗原结合形成无感染力的复合物来清除病毒;另一类则在对抗原具有明显抵制作用的同时对抗体亦有一定的抑制作用.     

乙型肝炎相关性肝细胞肝癌HBV血清标志物特征探讨

目的探讨乙型肝炎相关性肝细胞肝癌（HCC）乙型肝炎病毒（HBV）血清标志物特征。方法选择2009年6月~2013年6月临床确诊的有明确HBV感染史的HCC患者312例,分析患者HBV DNA载量,定量检测HBV标志物（包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）并分析其组合方式。结果①312例HCC患者中,HBV DNA阳性299例（299/312,95.83%）。HBeAg阳性者41例（41/312,13.14%）,其HBV DNA载量为（5.79±2.53）Log10copies/ml;HBeAg阴性者271例（271/312,86.86%）,其HBV DNA载量为（4.59±1.66）Log10copies/ml（P〈0.01）。②HBV标志物存在6种组合方式,6.09%患者HBsAg阴性,86.86%患者HBeAg阴性。结论 HBV DNA多为低至中等水平,HBV DNA阳性者中高病毒载量者仅为少数;HBeAg阴性者远多于HBeAg阳性者;HBsAg滴度较低,少数患者HBsAg阴性。