BDNF对视神经切断后视网膜神经节细胞生存的影响

目的应用成熟大鼠视神经切断模型研究BDNF对视网膜神经节细胞的保护作用。方法应用DiI经双侧上丘逆行标记视网膜神经节细胞后,切断视神经,同时玻璃体腔内注入BDNF,14天后取出视网膜,荧光显微镜计数存活的神经节细胞数,并同正常对照及阴性对照比较。结果单纯视神经切断2周后的视网膜神经节细胞生存数为466±105/mm2。玻璃体内注入BDNF视网膜神经节细胞生存数为1052±173/mm2。切断视神经后玻璃体内注入BDNF实验组和单纯切断视神经组比较存活的RGCs有明显差异(P<0.001)。结论本实验证实了BDNF可维持视网膜神经节细胞的存活。     

人参皂苷Rg1对大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的:观察人参皂苷Rg1对成年大鼠视神经挤压伤后视网膜神经节细胞(RGCs)存活的作用。方法:取成年雄性Wistar大鼠30只,眶内距视神经根部2mm处用Yasargil动脉瘤夹夹持左侧视神经30s,术后5d在大鼠左侧上丘注射荧光金标记RGCs。将大鼠随机分为Rg1治疗组和生理盐水对照组。根据不同存活时间将每组动物再分为伤后第7、14和21天3个亚组,每个亚组5只;另取5只作为正常对照组。于相应存活时间点处死各组动物,取出各组大鼠左侧视网膜平铺后计数存活RGCs并计算出RGCs的平均密度。结果:正常对照组RGCs平均密度为2268±100/mm2。视神经挤压伤后RGCs急剧减少,伤后第7、14和21天分别减少至1301±105/mm2、760±/60mm2和648±65/mm2。Rg1治疗组存活RGCs平均密度均显著高于生理盐水对照组,伤后第7、14和21天分别为1748±98/mm2、1030±68/mm2和840±71/mm2(P<0.05)。结论:Rg1在视神经挤压伤后对RGCs具有显著神经保护作用。     

视神经压迫性损伤后视网膜神经节细胞凋亡的研究

目的　探讨凋亡在视神经压迫性损伤导致视网膜神经节细胞死亡中的作用。方法　应用TUNEL凋亡原位染色法检测视神经压迫性损伤后视网膜神经节细胞凋亡的形态和数量。结果　①视网膜神经节细胞 (RGCs)凋亡阳性细胞数于钳夹 2 ,4 ,8,16 ,2 4 ,4 8,72h分别占细胞总数的 10 .7% ,12 .9% ,14 .1% ,15 .8% ,2 0 .3% ,34.5 % ,4 1.2 % ;②伤后 2 4～ 4 8h为视网膜神经节细胞凋亡的快速期。结论　本实验模型可造成明确的视神经和视网膜损伤 ,较贴近于临床视神经管内持续高压状态。推荐临床视神经损伤确诊后 ,如需手术减压应在 2 4h内实施。     

嗅神经鞘细胞和自体坐骨神经移植修复受损视神经

背景:有研究已初步证明了甲泼尼龙对受损视网膜节细胞的早期保护作用。目的:观察甲泼尼龙联合嗅神经鞘细胞和自体坐骨神经移植大鼠受损视神经纤维及其髓鞘的形态学及计数变化。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-09/2006-03于北京大学医学部神经解剖实验室完成。材料:选取成年雄性SD大鼠40只,取其中4只做形态学正常对照。方法:其余36只大鼠按随机数字表法分为6组,即视神经损伤模型组、甲泼尼龙组、嗅神经鞘细胞移植组、嗅神经鞘细胞移植 甲泼尼龙组、坐骨神经移植组、坐骨神经移植 甲泼尼龙组,每组6只。主要观察指标:取视神经,制作冰冻切片,移植后14,21d分别从各组切片中随机抽取10张载玻片,对生物素标记的葡聚糖胺染色的视神经纤维及甲苯胺蓝染色的视神经髓鞘进行形态学观察,电镜下对视神经纤维髓鞘进行计数。结果:顺行追踪剂生物素标记的葡聚糖胺在视神经中的染色结果主要表现为嗅神经鞘细胞移植 甲泼尼龙组、坐骨神经移植 甲泼尼龙组,与视神经损伤模型组相比,神经纤维排列较整齐,发生中晚期溃变的纤维比例较小。移植后14,21d,甲泼尼龙组视神经纤维髓鞘数量均显著高于视神经损伤模型组(P<0.05,0.01)。坐骨神经移植 甲泼尼龙组均显著高于坐骨神经移植组(P<0.05)。嗅神经鞘细胞移植 甲泼尼龙组均显著高于嗅神经鞘细胞移植组(P<0.05)。结论:形态学结果表明嗅神经鞘细胞和自体坐骨神经移植与甲泼尼龙的联合作用能激发并增强受损中枢神经的自我保护及修复作用,对视神经纤维及其髓鞘溃变速度有延缓作用。     

甲基强的松龙对嗅鞘细胞移植治疗受损视网膜神经节细胞的早期保护效应

目的:观察注射甲基强的松龙对嗅鞘细胞移植治疗受损视网膜节细胞的早期保护作用。方法:实验于2005-09/2006-09在北京大学医学部神经解剖实验室完成。实验动物分组:成年雄性SD大白鼠55只随机取出7只为正常对照组,不进行任何实验处理;其余48只为实验组,在手术显微镜下经动物的左侧眶上缘暴露视神经,然后将视神经鞘顺向划开,在距眼球后壁2mm处将视神经剪断。将实验组动物随机分成4组,每组12只:①损伤组。②静脉注射甲基强的松龙组,动物实施术后30min给予一次性尾静脉注射甲基强的松龙注射液(90mg/kg)。③嗅鞘细胞移植组,动物术后移植嗅鞘细胞组织层。④给药后嗅鞘细胞移植组,动物术后30min给予一次性尾静脉注射甲基强的松龙注射液(90mg/kg),然后移植嗅鞘细胞组织层。术后21d麻醉下处死各组大鼠。实验评估:通过视神经逆行荧光标记和蛋白免疫印迹方法观察视网膜神经节细胞存活状况以及热休克蛋白27表达情况。结果:55只SD大鼠均进入结果分析。①视网膜神经节细胞的存活数量:甲基强的松龙静脉注射组高于损伤组[(16.525±9.557),(9.889±5.585)个/视野,P<0.1],给药后嗅鞘细胞移植组明显高于甲基强的松龙静脉注射组和嗅鞘细胞移植组[(28.881±13.660),(16.525±9.557),(13.513±6.840)个/视野,P<0.1,<0.01]。②各组视网膜神经节细胞热休克蛋白27的表达:甲基强的松龙静脉注射组高于损伤组,给药后嗅鞘细胞移植组明显高于甲基强的松龙静脉注射组和嗅鞘细胞移植组。结论:早期注射甲基强的松龙使受损视网膜神经节细胞存活率升高,并使热休克蛋白27表达上调,同时亦表现出了对移植嗅鞘细胞移植治疗受损视网膜神经节细胞的显著保护效应。     

牛磺酸对谷氨酸诱导大鼠视网膜神经节细胞凋亡的抑制

目的:视网膜谷氨酸兴奋毒性可引起视网膜内层神经元尤其是视网膜神经节细胞的凋亡,牛磺酸作为神经保护剂,本研究观察其是否可以减少削弱大鼠视网膜神经节细胞兴奋毒性损伤,减少视网膜神经节细胞凋亡。方法:实验于2003-03/09在第三军医大学营养与食品卫生学教研室完成。通过玻璃体注射谷氨酸建立大鼠视网膜谷氨酸兴奋毒性损伤模型,实验分为正常对照组、玻璃体注射磷酸盐缓冲液对照组,牛磺酸干预高、低剂量组及MK-801干预阳性对照组。牛磺酸干预采用腹腔注射,其高、低剂量分别为25mg/kg体质量及5mg/kg体质量。通过Thy-1免疫组化、原位缺口末端标记法观察谷氨酸兴奋毒性及牛磺酸干预对大鼠视网膜神经节细胞的Thy-1蛋白表达及细胞凋亡的影响。结果:玻璃体注射谷氨酸使视网膜Thy-1免疫反应下降、内核层及神经节细胞层出现大量凋亡细胞。谷氨酸组平均每张视网膜切片节细胞层有(200±12)个原位缺口末端标记阳性细胞,牛磺酸干预使视网膜Thy-1免疫反应增强、节细胞层凋亡细胞数显著下降高、低剂量组分别为(68±6)个及(163±10)个,以高剂量牛磺酸的效果显著。结论:一定剂量的牛磺酸在体内可有效抑制谷氨酸兴奋毒性引起的大鼠视网膜神经节细胞损伤及凋亡。     

牛磺酸对谷氨酸诱导大鼠视网膜神经节细胞凋亡的抑制

目的:视网膜谷氨酸兴奋毒性可引起视网膜内层神经元尤其是视网膜神经节细胞的凋亡,牛磺酸作为神经保护剂,本研究观察其是否可以减少削弱大鼠视网膜神经节细胞兴奋毒性损伤,减少视网膜神经节细胞凋亡.方法:实验于2003-03/09在第三军医大学营养与食品卫生学教研室完成.通过玻璃体注射谷氨酸建立大鼠视网膜谷氨酸兴奋毒性损伤模型,实验分为正常对照组、玻璃体注射磷酸盐缓冲液对照组,牛磺酸干预高、低剂量组及MK-801干预阳性对照组.牛磺酸干预采用腹腔注射,其高、低剂量分别为25 mg/kg体质量及5 mg/kg体质量.通过Thy-1免疫组化、原位缺口末端标记法观察谷氨酸兴奋毒性及牛磺酸干预对大鼠视网膜神经节细胞的Thy-1蛋白表达及细胞凋亡的影响.结果:玻璃体注射谷氨酸使视网膜Thy-1免疫反应下降、内核层及神经节细胞层出现大量凋亡细胞.谷氨酸组平均每张视网膜切片节细胞层有(200&;#177;12)个原位缺口末端标记阳性细胞,牛磺酸干预使视网膜Thy-1免疫反应增强、节细胞层凋亡细胞数显著下降[高、低剂量组分别为(68&;#177;6)个及(163&;#177;10)个],以高剂量牛磺酸的效果显著.结论:一定剂量的牛磺酸在体内可有效抑制谷氨酸兴奋毒性引起的大鼠视网膜神经节细胞损伤及凋亡.     

频谱照射对受损视网膜节细胞的早期保护作用

目的：观察频谱照射对受损中枢神经元自我保护及修复机制的激发和增强作用，使受损的神经元在早期启动自我保护及修复机能，为进一步促进受损中枢神经元存活和纤维再生创造有利的条件。 方法：实验于2004-09／2005-03在北京大学医学部神经解剖实验室完成。选取成年雄性SD大鼠36只，实验中动物随机分成2组：①正常对照组（n=4）：动物不造模，取正常视网膜。②实验组（n=32）：再随机分成2组，手术损伤组，即实施视神经轴索切断术（n=16）；照射治疗组（n=16），建立中枢神经损伤模型（视神经轴索切断术），外加频谱治疗仪照射（术后30min，将实验动物置于周林频谱下，保持照射源与动物之间的距离在30cm，照射30min，连续照射3d）。于实验开始后的7，14，21，28d，取视网膜，制作冰冻切片，Nissl染色观察视网膜节细胞形态和存活数量的变化，用免疫组织化学染色的方法观察节细胞层中热休克蛋白27的表达程度。 结果：实验组32只SD大鼠进入结果分析。①视网膜节细胞层Nissl染色的形态学改变：与手术损伤组相比，照射治疗组细胞排列的较整齐，发生中晚期溃变的细胞比例较小。②视网膜节细胞计数：照射治疗组各时间点细胞计数均高于手术损伤组[7d：（600&;#177;25．40，480&;#177;22．65）；14d：（468&;#177;12．73，324&;#177;12．19）；2ld：（236&;#177;9．15，192&;#177;8．23）；28d：（120&;#177;9．57，104&;#177;5．62）,P〈0．01]。③热休克蛋白27在视网膜节细胞层的分布：各时间点照射治疗组热休克蛋白27的表达（用平均吸光度表示）均强于手术损伤组[7d：（127．179&;#177;8．127，93．799&;#177;4．80）；14d：（117．291&;#177;9．575，80．157&;#177;2.904）；21d：（100.589&;#177;8．275，70．847&;#177;5.052）；28d：（102.078&;#177;31．283，63．669&;#177;2．523），P〈0．01]，并且能观察到清晰的树突野。热休克蛋白27在节细胞层分布的变化趋势与视网膜节细胞存活率的变化趋势近似。 结论：形态学结果表明频谱照射可使具有保护作用的热休克蛋白27表达上调，受损细胞存活数量增加，激发并增强了受损中枢神经的自我保护及修复作用，将为进一步治疗做准备。     

频谱照射对受损视网膜节细胞的早期保护作用

目的:观察频谱照射对受损中枢神经元自我保护及修复机制的激发和增强作用,使受损的神经元在早期启动自我保护及修复机能,为进一步促进受损中枢神经元存活和纤维再生创造有利的条件。方法:实验于2004-09/2005-03在北京大学医学部神经解剖实验室完成。选取成年雄性SD大鼠36只,实验中动物随机分成2组:①正常对照组(n=4):动物不造模,取正常视网膜。②实验组(n=32):再随机分成2组,手术损伤组,即实施视神经轴索切断术(n=16);照射治疗组(n=16),建立中枢神经损伤模型(视神经轴索切断术),外加频谱治疗仪照射(术后30min,将实验动物置于周林频谱下,保持照射源与动物之间的距离在30cm,照射30min,连续照射3d)。于实验开始后的7,14,21,28d,取视网膜,制作冰冻切片,Nissl染色观察视网膜节细胞形态和存活数量的变化,用免疫组织化学染色的方法观察节细胞层中热休克蛋白27的表达程度。结果:实验组32只SD大鼠进入结果分析。①视网膜节细胞层Nissl染色的形态学改变:与手术损伤组相比,照射治疗组细胞排列的较整齐,发生中晚期溃变的细胞比例较小。②视网膜节细胞计数:照射治疗组各时间点细胞计数均高于手术损伤组[7d:(600±25.40,480±22.65);14d:(468±12.73,324±12.19);21d:(236±9.15,192±8.23);28d:(120±9.57,104±5.62),P<0.01]。③热休克蛋白27在视网膜节细胞层的分布:各时间点照射治疗组热休克蛋白27的表达(用平均吸光度表示)均强于手术损伤组[7d:(127.179±8.127,93.799±4.80);14d:(117.291±9.575,80.157±2.904);21d:(100.589±8.275,70.847±5.052);28d:(102.078±31.283,63.669±2.523),P<0.01],并且能观察到清晰的树突野。热休克蛋白27在节细胞层分布的变化趋势与视网膜节细胞存活率的变化趋势近似。结论:形态学结果表明频谱照射可使具有保护作用的热休克蛋白27表达上调,受损细胞存活数量增加,激发并增强了受损中枢神经的自我保护及修复作用,将为进一步治疗做准备。     

羊睾丸提取液对小鼠受损睾丸支持细胞的修复作用

目的:探讨羊睾丸提取液对重金属致损睾丸支持细胞的修复与保护作用,以期为干预男性生育功能障碍提供新思路。方法:选用健康昆明种雄性小白鼠30只,随机将其分为对照组、模型组、给药组,每组小鼠10只。采用醋酸铅制备睾丸受损模型,还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸-黄递酶(NADPH-d)组织化学方法结合显微图像分析,观察各组小鼠睾丸支持细胞一氧化氮合酶(nitricoxidesyn-thase,NOS)活性。结果:模型组睾丸支持细胞肿胀变性,模型组NOS活性(A值:0.146±0.023)明显低于对照组(0.298±0.031);给药组支持细胞形态接近对照组,给药组NOS活性(0.236±0.020)明显高于模型组(P<0.01)。对照组体质量明显高于模型组(P<0.01);给药组体质量明显高于模型组(P<0.05);对照组与给药组无明显差异(P>0.05)。对照组睾丸质量明显高于模型组(P<0.05);给药组睾丸质量明显高于模型组(P<0.05)。结论:羊睾丸提取液对铅等重金属所致的睾丸损伤有一定的修复和保护作用。     

超声微泡介导bcl-xl基因抗视网膜神经节细胞凋亡作用的实验研究

目的评价超声微泡介导bcl-x1基因抗视网膜神经节细胞（RGCs）凋亡的作用。方法体外混合培养Long Evans大鼠RGCs，并建立N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）损伤的RGCs凋亡模型。将体外培养的RGCs分为A组（正常对照组），B组（NMDA组），C组（bcl-x1转染＋NMDA组）；其中C组在加入NMDA前48h用超声微泡介导bcl-x1转染RGCs。转染48h后采用免疫组化分析转染细胞和未转染细胞的bcl-x1蛋白水平；加入NMDA36h后采用吖啶橙／溴化乙锭（AO／EB）双荧光染色检测细胞凋亡的形态特征，琼脂糖电泳检测细胞凋亡DNA片断。结果免疫组化检测表明转染细胞与未转染细胞的bcl-x1蛋白表达水平有差异，AO／EB检测发现B组可见大量凋亡小体，C组可见少许凋亡细胞。琼脂糖电泳检测亦发现B组呈典型的DNA“梯度”条带，而A组和C组无明显的DNA“梯度”条带。结论超声微泡介导bcl-x1基因抗视网膜神经节细胞凋亡有一定作用，有可能为视网膜视神经疾病的基因治疗提供一种新的方法。     

羊睾丸提取液对小鼠受损睾丸支持细胞的修复作用

目的：探讨羊睾丸提取液对重金属致损睾丸支持细胞的修复与保护作用，以期为干预男性生育功能障碍提供新思路。方法：选用健康昆明种雄性小白鼠30只，随机将其分为对照组、模型组、给药组。每组小鼠10只。采用醋酸铅制备睾丸受损模型，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸-黄递酶(NADPH-d)组织化学方法结合显微图像分析，观察各组小鼠睾丸支持细胞一氧化氮合酶(nitric oxide synthase。NOS)活性。结果：模型组睾丸支持细胞肿胀变性，模型组NOS活性(A值：0．146&;#177;0．023)明显低于对照组(0．298&;#177;0．031)；给药组支持细胞形态接近对照组。给药组NOS活性(0．236&;#177;0．020)明显高于模型组(P&;lt;0．01)。对照组体质量明显高于模型组(P&;lt;0．01)；给药组体质量明显高于模型组(P&;lt;0．05)；对照组与给药组无明显差异(P&;gt;0．05)。对照组睾丸质量明显高于模型组(P&;lt;0．05)；给药组睾丸质量明显高于模型组(P&;lt;0．05)。结论：羊睾丸提取液对铅等重金属所致的睾丸损伤有一定的修复和保护作用。     

超声微泡介导bcl-xl基因抗视网膜神经节细胞凋亡作用的实验研究

目的评价超声微泡介导bclxl基因抗视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的作用。方法体外混合培养LongEvans大鼠RGCs,并建立N甲基D天冬氨酸(NMDA)损伤的RGCs凋亡模型。将体外培养的RGCs分为A组(正常对照组),B组(NMDA组),C组(bclxl转染 NMDA组);其中C组在加入NMDA前48h用超声微泡介导bclxl转染RGCs。转染48h后采用免疫组化分析转染细胞和未转染细胞的bclxl蛋白水平;加入NMDA36h后采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色检测细胞凋亡的形态特征,琼脂糖电泳检测细胞凋亡DNA片断。结果免疫组化检测表明转染细胞与未转染细胞的bclxl蛋白表达水平有差异,AO/EB检测发现B组可见大量凋亡小体,C组可见少许凋亡细胞。琼脂糖电泳检测亦发现B组呈典型的DNA“梯度”条带,而A组和C组无明显的DNA“梯度”条带。结论超声微泡介导bc1xl基因抗视网膜神经节细胞凋亡有一定作用,有可能为视网膜视神经疾病的基因治疗提供一种新的方法。     

神经营养因子对视网膜神经节细胞的影响

目的:探讨神经营养因子对视网膜神经节细胞的影响。资料来源:进行全面的检索,检索手段包括电子检索(网站为www.jneurosci.org,www.ncbi.nlm.nih.gov,else.hebis.de)、手工检索(6种以上国外期刊)。资料选择:选择关于神经营养因子以及视网膜神经节细胞的文献,不排除其是否为随机、盲法等论证推荐的文章。数据提炼:对检索到的关于神经营养因子对视网膜神经节细胞的影响文章中相关信息进行综述。资料综合:越来越多的实验研究证实神经元的发育、轴突的生长、递质的合成和细胞的凋亡等4个阶段均依赖于神经营养因子的调控,而神经营养因子在视网膜神经节细胞的神经调控、再生、保护和修复等方面的作用亦已被许多实验证实并初步应用于临床。结论:神经营养因子对于视网膜神经节细胞有神经保护和修复作用,如何最大限度地发挥神经营养因子的作用,仍需进一步研究。     

神经营养因子对视网膜神经节细胞的影响

目的：探讨神经营养因子对视网膜神经节细胞的影响。资料来源：进行全面的检索，检索手段包括电子检索(网站为www．ineurosci．org。www．ncbi．nlm．nih．gov，else．hebis．de)、手工检索(6种以上国外期刊)。资料选择：选择关于神经营养因子以及视网膜神经节细胞的献，不排除其是否为随机、盲法等论证推荐的章。数据提炼：对检索到的关于神经营养因子对视网膜神经节细胞的影响章中相关信息进行综述。资料综合：越来越多的实验研究证实神经元的发育、轴突的生长、递质的合成和细胞的凋亡等4个阶段均依赖于神经营养因子的调控，而神经营养因子在视网膜神经节细胞的神经调控、再生、保护和修复等方面的作用亦已被许多实验证实并初步应用于临床。结论：神经营养因子对于视网膜神经节细胞有神经保护和修复作用，如何最大限度地发挥神经营养因子的作用．仍需进一步研究。     

神经节细胞复合体对糖尿病视网膜病变诊断的意义

目的 观察糖尿病患者视网膜黄斑区神经节细胞复合体(ganglion cell complex,GCC)厚度变化,分析GCC厚度检测对早期糖尿病视网膜病变诊断的意义.方法 回顾性分析糖尿病患者83例(83眼),其中无糖尿病视网膜病变(no diabetic retinopathy,NDR)50例(50眼)设为NDR组,另...     

胎鼠平滑肌细胞移植对心肌缺血大鼠受损心功能的保护作用

目的：研究胎鼠平滑肌细胞移植对心肌缺血大鼠受损心功能的作用。方法：选取孕18d的SD胎鼠9只，取胎鼠胃组织，用酶消化法分离、提取平滑肌细胞，进行体外培养、扩增，移植前BrdU标记。结扎大鼠左冠状动脉前降支，制成心肌缺血模型。移植组(n=10)将培养的平滑肌细胞注射移植到冠脉结扎后2周形成的心肌组织中；对照组(n=10)则用同样的方法注射等量DMEM培养液；两组动物术后均给予环孢霉素A(5mg／kg&;#183;d)抑制免疫排斥反应。4周后，超声检查评价移植组和对照组的心功能、测量左心室前壁厚度；心脏标本用免疫组化染色的方法检测移植细胞的存活情况，并研究细胞移植后心肌缺血组织的促血管新生作用。结果：移植后4周，植入的平滑肌细胞在心肌缺血组织中存活，并形成肌样组织；和对照组比较，移植组左心室前壁明显增厚[分别为(2．54&;#177;0．23)，(1．34&;#177;0．18)mm，P&;lt;0．01|，心肌瘢痕组织中血管新生明显[(血管密度分别为(3．92&;#177;0．45)，(0．52&;#177;0．26)／mm^2，P&;lt;0．01|，左心室舒张末容积缩小[分别为(1．22&;#177;0．11)，(1．82&;#177;0．17)mL，P&;lt;0．01]，射血分数提高[(分别为(55．8&;#177;7．1)％，(31．5&;#177;3．2)％，P&;lt;0．01]。结论：平滑肌细胞移植后能在心肌缺血组织中存活，并通过促进局部血管新生，改善室壁顺应性，限制心腔扩大，抑制心室重构，增加心室输出，保护受损的心功能。     

葛根素对STZ糖尿病模型大鼠视网膜VEGF的调节及对视网膜细胞凋亡的促进作用的研究

目的研究葛根素对链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子(VEGF)的调节及对视网膜细胞凋亡的促进作用。方法清洁级SD大鼠随机分为实验组及对照组各28只,实验组一次性腹腔注射1%STZ诱发糖尿病模型,对照组腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS)。成模后给两组大鼠分别注射葛根素,4、8、16、24周后采用实时荧光定量(Real-time PCR)观察VEGF的表达水平,流式细胞技术检测细胞凋亡,WB检测凋亡相关蛋白磷酸化AKT(pAKT)及Caspase3、8、9表达量。结果与对照组相比,实验组大鼠注射葛根素4、8周后VEGF表达量,视网膜组织细胞凋亡,pAKT、Caspase8、Caspase9及Caspase3表达均改变不明显,差异无统计学意义(P0.05);但16、24周后VEGF表达量发生明显下降(P0.05),视网膜组织细胞凋亡发生明显升高(P0.05),pAKT表达下调,Caspase8、Caspase9及Caspase3表达均上调(P0.05)。结论较长时间注射葛根素能下调糖尿病大鼠视网膜VEGF的表达,从而下调pAKT表达,最终导致Caspase3、8、9的表达上调,诱导细胞发生凋亡。此研究结果为糖尿病性视网膜病变的治疗提供了实验依据。     

胎鼠平滑肌细胞移植对心肌缺血大鼠受损心功能的保护作用

目的研究胎鼠平滑肌细胞移植对心肌缺血大鼠受损心功能的作用。方法选取孕18d的SD胎鼠9只,取胎鼠胃组织,用酶消化法分离、提取平滑肌细胞,进行体外培养、扩增,移植前BrdU标记。结扎大鼠左冠状动脉前降支,制成心肌缺血模型。移植组(n=10)将培养的平滑肌细胞注射移植到冠脉结扎后2周形成的心肌缺血组织中;对照组(n=10)则用同样的方法注射等量DMEM培养液;两组动物术后均给予环孢霉素A(5mg/kg·d)抑制免疫排斥反应。4周后,超声检查评价移植组和对照组的心功能、测量左心室前壁厚度;心脏标本用免疫组化染色的方法检测移植细胞的存活情况,并研究细胞移植后心肌缺血组织的促血管新生作用。结果移植后4周,植入的平滑肌细胞在心肌缺血组织中存活,并形成肌样组织;和对照组比较,移植组左心室前壁明显增厚[分别为(2.54±0.23),(1.34±0.18)mm,P<0.01],心肌瘢痕组织中血管新生明显[(血管密度分别为(3.92±0.45),(0.52±0.26)/mm2,P<0.01],左心室舒张末容积缩小[分别为(1.22±0.11),(1.82±0.17)mL,P<0.01],射血分数提高[(分别为(55.8±7.1)%,(31.5±3.2)%,P<0.01]。结论平滑肌细胞移植后能在心肌缺血组织中存活,并通过促进局部血管新生,改善室壁顺应性,限制心腔扩大,抑制心室重构,增加心室输出,保护受损的心功能。     

视神经损伤后视网膜节细胞的凋亡及视神经的再生与修复

视神经损伤后，大量的视网膜节细胞发生凋亡，视神经再生受阻。造成这些现象的原因复杂，而对抗节细胞凋亡以及促进视神经的再生修复是治疗视神经损伤的重点。