“嗅三针”对阿尔茨海默病小鼠空间记忆能力和海马APP、Aβ蛋白表达的影响

目的:观察"嗅三针"对阿尔茨海默病(AD)小鼠学习和海马APP、Aβ蛋白表达的干预效应,以阐明其基于嗅觉通路治疗AD的作用机制。方法:将40只AD小鼠随机分为AD模型组、嗅三针组、嗅三针加嗅神经切断组、盐酸多奈哌齐组,每组10只,另取10只同窝的阴性小鼠作为正常对照组。通过"嗅三针"对印堂穴和双侧迎香穴行电针刺激,以3mg/(kg·d)的剂量对盐酸多奈哌齐组AD小鼠进行灌胃,每周干预5次,间歇2d,共干预4周。小鼠空间记忆能力采用Morris水迷宫进行检测,海马APP、Aβ蛋白表达采用western blot法进行检测。结果:嗅三针刺激和盐酸多奈哌齐灌胃均能显著增加AD小鼠穿越平台次数和靶象限占总时间百分比,并能显著降低海马APP、Aβ蛋白表达(P0.05);嗅三针加嗅神经切断组对各指标表达均无明显影响(P0.05),嗅三针组与盐酸多奈哌齐组比较无显著性差异(P0.05)。结论:"嗅三针"具有改善AD小鼠空间记忆能力,降低海马APP、Aβ蛋白表达的作用,嗅觉通路的完整性是其发挥干预效应的核心机制。     

嗅三针对阿尔茨海默病小鼠学习能力和海马IL1-β、IL-6表达的影响

目的:观察"嗅三针"对阿尔茨海默病(AD)小鼠学习和海马IL1-β和IL-6表达的影响,以阐明其基于嗅觉通路治疗AD的作用机制。方法:采用APP/PS1转基因小鼠作为AD小鼠模型,小鼠嗅觉通路阻断模型采用嗅神经切断术建立,将40只AD小鼠随机分为模型对照组、嗅神经切断嗅三针组、嗅三针组、盐酸多奈哌齐组,每组10只,另取10只同窝的阴性小鼠作为正常对照组。通过"嗅三针"对印堂穴和双侧迎香穴行电针刺激,每次10分钟,以3mg/kg/d的剂量对盐酸多奈哌齐组AD小鼠进行灌胃,每周干预5次,间歇2天,共干预4周。小鼠学习能力采用Morris水迷宫进行监测,应用Western blot技术检测海马IL1-β和IL-6表达水平。结果:嗅三针刺激和盐酸多奈哌齐灌胃能够显著缩短AD小鼠平均逃避潜伏期,并能显著降低海马IL1-β和IL-6的表达,与AD模型组比较,差异具有显著性(P0. 05);嗅神经切断嗅三针组对AD小鼠平均逃避潜伏期以及海马IL1-β和IL-6的表达均无明显影响,与AD模型组比较,差异无显著性(P0. 05),嗅三针组与盐酸多奈哌齐组比较无显著性差异(P0. 05)。结论:"嗅三针"具有改善AD小鼠学习能力,降低海马水平IL1-β和IL-6表达的作用,嗅觉通路的完整性可能是其发挥干预效应的核心机制。     

“嗅三针”对阿尔茨海默病大鼠海马Bcl-2和Bax表达的干预效应

目的:探讨"嗅三针"通过嗅觉通路对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马神经元细胞凋亡的影响,以阐明其治疗AD的作用机制。方法:成年SD雄性大鼠40只,随机分为正常对照组、AD模型组、嗅神经切断嗅三针组、嗅三针组,每组10只。β-淀粉样蛋白(Aβ)1-40肽段注射法制作AD大鼠模型,嗅神经切断术造大鼠嗅觉通路阻断模型。"印堂"穴及两侧"迎香"穴交替电针刺激行"嗅三针"治疗,每次10 min,每周治疗5次,共治疗6周。免疫组化法检测海马Bcl-2和Bax表达。结果:AD模型组较正常对照组Bcl-2阳性细胞减少(P<0.05),Bax阳性细胞表达增多(P<0.01);嗅三针组较AD模型组Bcl-2阳性细胞明显增多(P<0.01),Bax阳性细胞显著减少(P<0.01);嗅神经切断嗅三针组与AD模型组比较Bcl-2、Bax阳性细胞变化不明显(P>0.05)。结论:"嗅三针"能够调节海马Bcl-2和Bax的表达,其治疗效应的发挥依赖于嗅觉传导通路的完整性。     

"嗅三针"对阿尔茨海默病大鼠海马毒覃碱型受体的影响

目的:探讨"嗅三针"对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马胆碱能毒覃碱型受体(M受体)表达及功能的影响,了解其对嗅觉通路完整性的依赖作用.方法:成年SD雄性大鼠40只,随机分为正常对照组、AD模型组、嗅神经切断+嗅三针组和嗅三针组,每组10只.采用Aβ1-40淀粉样肽注射法制作AD大鼠模型,嗅神经切断术造大鼠嗅觉通路阻断模...     

嗅三针对AD大鼠的治疗效应与海马细胞钙稳态的相关性研究

目的:探讨嗅三针疗法对阿尔茨海默病(AD)大鼠的疗效与海马细胞钙稳态的相关性。方法:成年SD雄性大鼠50只,随机分为正常对照组、AD模型组、AD嗅神经切断模型组、嗅三针组和嗅三针对照组,每组10只。制作AD大鼠模型和AD嗅神经切断大鼠模型,通过嗅三针治疗,测试大鼠水迷宫学习记忆能力并采用荧光分光光度法测定海马细胞内Ca2+浓度。结果:水迷宫定位航行试验结果显示:平均逃避潜伏期和平均游泳路程比较,正常对照组和嗅三针组均明显短于AD模型组(P0.01);嗅三针对照组短于AD模型组(P0.05);嗅三针组短于嗅三针对照组(P0.05);AD模型组与AD嗅神经切断模型组相比较,其差异无显著性意义(P0.05)。海马细胞内Ca2+浓度比较:正常对照组、嗅三针组和嗅三针对照组均明显低于AD模型组(P0.01);嗅三针组低于嗅三针对照组(P0.05);AD模型组与AD嗅神经切断模型组相比较,其差异无显著性意义(P0.05)。结论:嗅三针能够显著增强AD大鼠学习记忆功能,并且能够降低海马细胞内Ca2+浓度,其治疗效应的发挥依赖于嗅觉传导通路的完整性。     

黑逍遥散对APP/PS1双转基因小鼠海马和脑皮层CaMKⅡα蛋白及其磷酸化表达的影响

目的:观察黑逍遥散对阿尔茨海默症(AD)小鼠海马和脑皮层钙调蛋白依赖性激酶2α(CaMKⅡα)及其磷酸化表达水平的干预效应。方法:30只APP/PS1双转基因雄性小鼠称体质量并按随机原则分为模型组、盐酸多奈哌齐组、黑逍遥散组,每组10只。同月龄、同种系的野生型C57BL/6雄性小鼠10只为空白组。盐酸多奈哌齐组(6 g·kg~(-1))、黑逍遥散组(3. 25 mg·kg~(-1))分别连续给药90 d后,Morris水迷宫检测行为学变化,免疫组化和蛋白免疫印迹法检测小鼠海马区和脑皮层CaMKⅡα蛋白及其磷酸化的表达。结果:干预90 d后,与空白组比较,AD模型组小鼠,逃避潜伏期显著延长,跨原平台和有效区域次数显著减少(P 0. 01),小鼠海马区及脑皮层Ca MKⅡα蛋白表达显著减弱或降低,而p-CaMKⅡα蛋白表达显著升高(P 0. 05,P 0. 01);与模型组比较,盐酸多奈哌齐和黑逍遥散组小鼠的逃避潜伏期均显著缩短、跨原平台次数均显著增加(P 0. 01),小鼠海马区及脑皮层Ca MKⅡα蛋白显著增强或升高,p-CaMKⅡα蛋白表达显著降低(P 0. 05,P 0. 01)。结论:黑逍遥散通过调节AD小鼠不同脑区参与细胞记忆形成机制的关键蛋白Ca MKⅡα及其磷酸化表达,进而发挥改善AD小鼠的学习记忆能力。     

嗅三针治疗AD大鼠效应与海马腺苷酸环化酶活性的相关性研究

目的:探讨嗅三针疗法对AD大鼠的疗效与海马组织腺苷酸环化酶(AC)活性的相关性。方法:选择成年雄性SD大鼠50只,按随机方法分为5组,每组10只,即有AD模型组、AD并嗅神经切断组、嗅三针组、嗅三针对照组及正常组。首先复制AD模型和AD嗅神经切断模型,然后通过嗅三针疗法治疗8个疗程,测试大鼠水迷宫学习记忆能力和海马组织AC活性(RIA)。结果:AD模型组大鼠Morris水迷宫测试游泳路程及逃避潜伏期明显长于正常组与嗅三针组(P0.01);AD模型组略长于嗅三针对照组(P0.05);嗅三针对照组略长于嗅三针组(P0.05);AD并嗅神经切断模型组与AD模型组比较,二者没有显著差异(P0.05);AD模型组海马组织AC活性显著低于正常组、嗅三针组及嗅三针对照组(P0.01);嗅三针对照组略低于嗅三针组(P0.05);而AD并嗅神经切断模型组与AD模型组比较,二者没有显著差异(P0.05)。结论:嗅三针能够显著增强AD大鼠学习记忆功能、并且能提高海马组织AC活性,嗅三针疗法之疗效的体现有赖于嗅感觉之传导路的完整性。     

黑逍遥散对APP/PS1双转基因小鼠海马CREB1蛋白及其磷酸化表达的影响

目的探讨黑逍遥散治疗阿尔茨海默病的可能作用机制。方法 30只APP/PS1双转基因雄性小鼠随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组、黑逍遥散组,每组10只。同月龄、同种系的野生型C57BL/6雄性小鼠10只设为空白组。黑逍遥散组给予黑逍遥散6 g/(kg·d)灌胃,盐酸多奈哌齐组给予盐酸多奈哌齐片3. 25 mg/(kg·d)灌胃,模型组、空白组给予双蒸水0. 2 ml/10 g灌胃,各组均每日灌胃1次,连续3个月。采用Morris水迷宫于实验结束第1～5天进行定位航行实验观察逃避潜伏期,第6天开展空间搜索实验记录跨原平台次数。采用免疫组化法检测小鼠海马CA1、CA3及DG区环腺苷酸应答元件结合蛋白1 (CREB1)及磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白1 (p-CREB1)表达。结果与空白组比较,模型组小鼠第1～5天逃避潜伏期明显延长,第6天跨原平台次数明显减少,小鼠海马CA1、CA3及DG区CREB1及p-CREB1蛋白表达显著降低(P 0. 05或P 0. 01)。与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和黑逍遥散组各时间点逃避潜伏期均缩短,第6天跨原平台次数明显增加,小鼠海马CA1、CA3及DG区CREB1、p-CREB1蛋白表达显著升高(P 0. 05或P 0. 01)。黑逍遥散组和盐酸多奈哌齐组各指标组间比较差异无统计学意义(P 0. 05)。结论黑逍遥散可能通过调节海马CREB1及其磷酸化表达发挥防治阿尔茨海默病的作用。     

健脾益肺方对肌萎缩侧索硬化hSOD1-G93A转基因小鼠脊髓p38 MAPK蛋白及炎症因子表达的影响

目的:探讨健脾益肺方对hSOD1-G93A转基因小鼠p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)蛋白及炎症因子表达的影响。方法:将24只8周龄的SPF级hSOD1-G93A转基因小鼠随机分为模型组、健脾益肺方(2.86,5.72,11.44 g·kg~(-1))组,每组6只。8周龄SPF级同窝出生正常野生型小鼠6只作为正常组。模型组和正常组予生理盐水灌胃,药物组予不同剂量的中药灌胃,每日1次,共120 d。用免疫荧光法(immunofluorescence)检测小鼠脊髓小胶质细胞的活化情况,p38 MAPK,p-p38 MAPK蛋白的荧光强度核浆比,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测小鼠脊髓p38MAPK,p-p38 MAPK,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及环氧化酶-2(COX-2)蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组、健脾益肺方(2.86 g·kg~(-1))组小胶质细胞激活数明显增多(P0.05,P0.01),p38 MAPK,p-p38 MAPK荧光强度核浆比显著升高(P0.01),与模型组比较,健脾益肺方(5.72,11.44 g·kg~(-1))组小胶质细胞激活数及所占总数比例显著减少(P0.01),p38 MAPK,p-p38 MAPK荧光强度核浆比显著下降(P0.01);与正常组比较,模型组、健脾益肺方(2.86 g·kg~(-1))组p38 MAPK,p-p38 MAPK,COX-2,TNF-α蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01),与模型组相比,健脾益肺方(5.72,11.44 g·kg~(-1))组p38 MAPK,p-p38 MAPK,COX-2,TNF-α蛋白表达显著降低(P0.01)。结论:健脾益肺方可能通过介导p38MAPK通路抑制p38 MAPK蛋白磷酸化,以浓度依赖性抑制小胶质细胞的活化,下调p38 MAPK蛋白及炎症因子的表达,从而发挥神经保护作用。     

苦参颗粒对兔耳痤疮模型P38MAPK/ERK相关信号通路的影响

目的:探讨苦参颗粒溶液对兔耳痤疮模型P38MAPK/ERK相关信号通路的影响及其治疗效果。方法:家兔除空白对照组外,其余各组用kligman法建立兔耳痤疮模型,于造模成功后,予模型组、夫西地酸乳膏组、苦参颗粒100、200、400mg/ml组分别涂敷生理盐水和相应药物,每日一次,连续14d。通过HE染色显微镜下判断其治疗效果;免疫组化检测TNF-α、IL-6、IL-8蛋白的表达;Western blot法检测p-p38MAPK、p-ERK、p38MAPK、ERK蛋白表达;ELISA测定法p-p38MAPK、p-ERK蛋白的含量。结果:与空白组比较,模型组TNF-α、IL-6、IL-8 MOD值和p-p38MAPK、p-ERK表达明显升高,p38MAPK、ERK表达明显下降;与模型组相比,给药各组TNF-α、IL-6和IL-8 MOD值和p-p38MAPK、p-ERK表达明显降低,p38MAPK、ERK表达明显增加。结论:苦参颗粒溶液能降低TNF-α、IL-6、IL-8含量,下调p-p38MAPK、p-ERK蛋白表达,上调p38MAPK、ERK蛋白表达,干预ERK、p38MAPK通路,从而干预痤疮的形成,对痤疮有疗效。     

基于突触和突触蛋白探讨复方金思维对拟散发性阿尔茨海默病小鼠早期突触传递和功能的影响

目的通过观察复方金思维干预后拟散发性阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)小鼠海马突触形态以及α7尼古丁乙酰胆碱受体(α7-nicotinic acetylcholine receptors,α7-nAChRs)和代谢性谷氨酸受体5(metabotropic glutamate receptors 5,mGluR5)两种突触相关蛋白的变化,探讨复方金思维对拟散发性AD小鼠早期学习记忆的影响。方法将3月龄C57/BL6J小鼠随机分为对照组、模型组、多奈哌齐组[0.92 mg/(kg·d)]及复方金思维大、中、小剂量组[20 mg/(kg·d),10 mg/(kg·d),5 mg/(kg·d)],对照组双侧侧脑室注射人工脑脊液,其余各组小鼠双侧侧脑室注射链脲佐菌素建立散发性AD模型,造模1个月后连续灌胃3个月,进行Morris水迷宫行为检测,之后取小鼠海马对其CA1区突触进行超微结构观察,并采用免疫组织化学和Western blot技术对海马CA1区α7-nAChRs和mGluR5分布和表达进行检测。结果Morris水迷宫结果显示,随着训练次数的增加每组小鼠定向航行潜伏期均缩短。电镜结果显示,与模型组相比,各干预组小鼠突触超微结构均有一定程度改善。免疫组化结果显示,与模型组比较,多奈哌齐组和复方金思维大剂量组α7-nAChRs的阳性细胞数均有所增加(P<0.05),多奈哌齐组及复方金思维大、中剂量组mGluR5的阳性细胞数均有所减少(P<0.01或P<0.05);Western-blot检测mGluR5结果与免疫组化结果一致。结论复方金思维可能通过改善拟散发性AD小鼠海马CA1区突触结构,调节突触相关蛋白α7-nAChRs和mGluR5表达起到早期神经保护作用,进而提高其学习记忆能力。     

宽筋藤有效部位对D-半乳糖联合Aβ2535所致AD大鼠海马蛋白组学的影响

目的探讨宽筋藤大孔树脂提取物大孔树脂提取物体积分数80%,100%乙醇洗脱部位对D-半乳糖联合Aβ2535,所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马蛋白组表达的影响。方法采用D-半乳糖联合Aβ2535复制AD大鼠模型,随机分成假手术组、模型组、多奈哌齐组(多奈哌齐,6.0 mg·kg^-1)、宽筋藤80%提取部位组(生药量6 g·kg^-1)。多奈哌齐组灌胃多奈哌齐0.1mL·10 g^-1,给药宽筋藤有效部位组灌胃0.1 mL·10 g^-1,模型组与假手术组灌胃等容量的生理盐水,每日1次,连续给药15 d后分离大鼠海马提取蛋白,Nanol-ESI液相-质谱联用系统检测,Protein Discovery软件进行蛋白鉴定,SIEVE软件对海马蛋白进行相对定量定性分析PANTHER Classification System软件对差异蛋白进行GO分析,运用IPAD软件进行信号通路富集。结果后得结果与模型组相比,给药组大鼠共有66个差异蛋白包含微管蛋白、热休克蛋白、能量代谢相关蛋白、囊泡生成/转运相关蛋白和脑保护相关蛋白等与AD密切相关的蛋白以上差异蛋白共涉及21条信号通路。结论宽筋藤可能通过上调网格蛋白等与囊泡生成转运及神经递质释放相关蛋白,促进了神经递质的合成与释放,改善了脑内胆碱能功能来达到干预AD病理进程的作用。     

寿尔智胶囊对阿尔茨海默病模型大鼠海马PSD-95蛋白表达的作用

目的:探讨寿尔智胶囊对阿尔茨海默病(Alzheimer Disease,AD)模型大鼠海马PSD-95蛋白表达的影响。方法:经脑立体定位仪向SD大鼠海马CA1区注射Aβ25-35,建立AD大鼠模型。将40只SD大鼠随机分为假手术组、盐酸多奈哌齐组、模型组、寿尔智组,每组各10只。造模后的第3天开始使用药物进行干预,寿尔智组大鼠给药剂量:12 mg·(kg·d)-1,盐酸多奈哌齐组大鼠给药剂量0.52 mg·(kg·d)-1,模型组及假手术组灌胃液为等体积的生理盐水,每天灌胃两次,共4周。采用免疫组织化学法测定海马CA1区PSD-95的表达。结果:模型组大鼠海马CA1区PSD-95阳性细胞的平均光密度明显少于假手术组,差异具有显著性(P0.01);盐酸多奈呱齐组和寿尔智组则可见较多的阳性细胞,其平均光密度较模型组显著增加,差异具有显著性(P0.01);但盐酸多奈呱齐组和寿尔智组与假手术组比较,阳性细胞平均光密度明显减少,差异具有显著性(P0.01);且盐酸多奈呱齐组和寿尔智组之间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:寿尔智胶囊对阿尔茨海默病模型大鼠海马PSD-95蛋白表达具有改善作用。     

活血荣络片对AD模型小鼠AchE和ChAT表达的影响

目的观察活血荣络片对阿尔茨海默病(AD)小鼠脑组织乙酰胆碱酯酶(Ach E)和乙酰胆碱转移酶(Ch AT)表达的影响。方法将50只APP/PS1双转基因AD模型小鼠随机分为模型组、低剂量活血荣络片组、中剂量活血荣络片组、高剂量活血荣络片组、多奈哌齐组,每组10只。同期将同月龄的10只KM小鼠作为正常组。每天灌胃1次,连续治疗2个月。治疗结束后,取各组小鼠脑组织,采用Western Blot检测Ach E和Ch AT蛋白含量。结果与正常组相比,AD模型组小鼠脑组织Ach E蛋白表达提高、Ch AT蛋白表达降低(P0.01);与模型组相比,低中高剂量活血荣络片组、多奈哌齐组脑组织Ach E蛋白表达降低、Ch AT蛋白表达增高(P0.01);与多奈哌齐组比较,中、高剂量活血荣络片组降低Ach E蛋白表达的变化无统计学意义(P0.05),而高剂量活血荣络片组提高Ch AT蛋白的表达(P0.05)。结论活血荣络片可一定程度上抑制AD模型小鼠脑组织Ach E蛋白的表达并促进Ch AT蛋白的表达。     

补肾益智方对Aβ_(25-35)致阿尔茨海默病小鼠空间学习记忆及细胞凋亡机制的研究

目的:探讨补肾益智方对阿尔茨海默病模型小鼠空间学习记忆功能及细胞凋亡的作用机制。方法:应用随机数字法将50只昆明种小鼠随机分为假手术组、模型组、多奈哌齐3 mg/kg组、补肾益智方1.46 g/kg组和补肾益智方5.84 g/kg组,10只/组。采用Aβ25-35海马注射诱导的认知功能障碍小鼠作为AD模型,补肾益智方组和多奈哌齐组于造模后第3天灌胃给药,干预治疗4周后进行Morris水迷宫检测空间学习记忆功能,蛋白免疫印迹法检测海马Bcl-2、Bax的表达量,HE染色法观察海马锥体细胞的形态变化。结果:与模型组比较,多奈哌齐组、补肾益智方组(1.46 g/kg、5.84 g/kg)均可缩短逃避潜伏期,延长目标象限停留时间,增多穿越平台次数;增加海马区Bcl-2的表达,同时抑制了Bax的表达;改善海马锥体细胞的病理形态。结论:补肾益智方可提高阿尔茨海默病小鼠的空间学习记忆功能,其机制可能与抗细胞凋亡有关。     

中药复方对链球菌性肺炎小鼠炎症p38MAPK信号转导通路的影响

目的:观察中药复方对链球菌性肺炎小鼠炎症p38MAPK信号转导通路的影响。方法:将48只BALB/c小鼠随机分为4组:正常组、模型组、中药组、SB203580组,每组12只。模型组、中药组、SB203580组采用麻醉并破损鼻黏膜滴注一定量肺炎链球菌法建立链球菌性肺炎模型;中药组在造模后以中药复方7.5 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃治疗,2次·d~(-1),SB203580组造模后以SB203580 1mg·kg~(-1)·d~(-1)腹腔注射,1次·d~(-1),共7 d。造模第7天解剖取肺组织,检测各组小鼠肺组织p38MAPK基因及p-p38MAPK蛋白表达水平和TNF-α、IL-6含量变化。结果:中药组小鼠肺组织中p38MAPK基因及p-p38MAPK蛋白表达水平和TNF-α、IL-6含量较正常组高(P0.05),无统计学意义;较模型组低(P0.05),有统计学意义。结论:中药复方能有效抑制链球菌性肺炎小鼠炎症p38MAPK信号通路的活化,控制炎症进程。     

加减薯蓣丸介导线粒体自噬改善APP/PS1小鼠氧化应激损伤及学习记忆能力

目的:探讨加减薯蓣丸对阿尔茨海默病(AD)小鼠学习记忆能力减退的作用及相关机制。方法:将40只5月龄SPF级APP/PS1小鼠随机分为模型组、多奈哌齐组、加减薯蓣丸组、加减薯蓣丸+氯喹(CQ)组,每组10只,同背景野生型C57BL/6J小鼠10只设定为正常组。其中加减薯蓣丸组予以加减薯蓣丸煎剂(10 g·kg^-1)灌胃,多奈哌齐组予以盐酸多奈哌齐溶液(0.45 mg·kg^-1)灌胃,加减薯蓣丸+CQ组则在加减薯蓣丸组基础上予以CQ(10 mg·kg^-1)腹腔注射1次,与灌胃同时进行,正常组与模型组予以等量生理盐水灌胃,1次/d,共35 d。给药结束后,Morris水迷宫实验和新物体识别实验检测小鼠空间记忆能力;原位末端标记法(TUNEL)染色检测小鼠海马CA1神经元凋亡水平;生化检测小鼠海马神经元活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;透射电镜观察小鼠海马CA1区神经元线粒体超微结构;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠海马线粒体自噬接头蛋白(p62)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、PTEN诱...     

醒脑益智汤对AD模型小鼠tau蛋白及Aβ表达的影响

目的观察醒脑益智汤对AD模型小鼠tau蛋白及Aβ表达的影响。方法小鼠右侧海马注射3μL老化的Aβ_(25-35)(3 nmol/L)构建AD模型,将114只ICR小鼠随机分成假手术组、模型组、醒脑益智汤组(18 g生药/kg)、醒脑益智汤组(9 g生药/kg)、醒脑益智汤组(4.5 g生药/kg)、多奈哌齐组(1.3 mg/kg)。造模后第2天,小鼠分别灌胃给予不同剂量的醒脑益智汤及盐酸多奈哌齐,灌胃28 d。第23天进行Morris水迷宫训练;第28天,ELISA及硫黄素S染色测定Aβ表达;Western blot测定tau蛋白磷酸化位点(Ser 202,Thr 231)、PI3K/Akt及NEP、IDE蛋白表达。结果醒脑益智汤可降低AD模型小鼠的游泳潜伏期,降低Aβ表达,抑制tau蛋白化点(Ser 202,Thr 231)发生磷酸化,增加p-PI3K、p-Akt、NEP及IDE的表达(P0.05)。结论醒脑益智汤可能是通过PI3K/Akt信号通路,抑制tau蛋白位点的异常磷酸化,通过增加NEP、IDE的表达,抑制AD模型小鼠脑内的Aβ表达,进而改善其学习记忆能力。     

恒清Ⅱ号方对阿尔茨海默病模型小鼠认知行为的影响

目的探讨恒清Ⅱ号方对阿尔茨海默病模型小鼠认知行为的影响。方法将72只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、恒清Ⅱ号方低剂量组、恒清Ⅱ号方中剂量组、恒清Ⅱ号方高剂量组和盐酸多奈哌齐组,每组12只。采用海马CAI区Aβ1-42寡聚体溶液注射方法造模。造模次日起,恒清Ⅱ号方低、中、高剂量组小鼠分别给予恒清Ⅱ号方20 mg/kg、40 mg/kg、80 mg/kg灌胃,盐酸多奈哌齐组给予盐酸多奈哌齐片5 mg/kg灌胃,假手术组和模型组小鼠给予生理盐水灌胃,均1次/d,连续8周。灌胃结束后采用水迷宫实验检测各组小鼠的认知行为。结果水迷宫实验第1-4天,模型组小鼠逃避潜伏期和定位航行路径长度均明显长于假手术组(P均0.05),恒清Ⅱ号方中、高剂量组和盐酸多奈哌齐组小鼠逃避潜伏期和定位航行路径长度均明显短于模型组(P均0.05);水迷宫实验第3天和第4天,恒清Ⅱ号方中、高剂量组和盐酸多奈哌齐组小鼠逃避潜伏期和定位航行路径长度均明显短于恒清Ⅱ号方低剂量组(P均0.05);水迷宫实验第4天,恒清Ⅱ号方高剂量组小鼠逃避潜伏期和定位航行路径长度均明显短于恒清Ⅱ号方中剂量组和盐酸多奈哌齐组(P均0.05)。水迷宫实验第5天,模型组小鼠穿越隐匿平台次数明显少于假手术组(P0.05),恒清Ⅱ号方中、高剂量组和盐酸多奈哌齐组小鼠穿越隐匿平台次数均明显多于模型组和恒清Ⅱ号方低剂量组(P均0.05),且恒清Ⅱ号方高剂量组明显多于恒清Ⅱ号方中剂量组和盐酸多奈哌齐组(P均0.05)。结论恒清Ⅱ号方可明显改善阿尔茨海默病模型小鼠的学习记忆能力,且量效关系呈正相关,高剂量恒清Ⅱ号方的效果优于盐酸多奈哌齐。     

嗅三针干预对AD模型大鼠学习记忆及大脑边缘叶突触素蛋白含量的影响

目的研究嗅三针疗法对AD大鼠学习、记忆功能的改善及其与大脑边缘叶突触素蛋白含量多少的相关性。方法选取成年雄性SD大鼠50只,体重在290±9g。随机每组选取10只大鼠,分为五组即:AD模型组、AD嗅神经切断模型组、实验组、实验对照组及正常对照组。用嗅三针针刺AD大鼠模型及AD嗅神经切断大鼠模型组,针刺结束用水迷宫实验测试实验大鼠学习和记忆能力,采用ELISA法测定大脑边缘叶突触素蛋白含量。结果水迷宫试验结果表明:AD模型组与AD嗅神经切断模型组平均逃避潜伏期和平均游泳路程数据相比,差异无显著性意义(P0.05);实验对照组小于AD模型组(P0.05);实验组小于实验对照组(P0.05);正常对照组和实验组均明显小于AD模型组(P0.01);大脑边缘叶突触素蛋白含量比较:AD模型组与AD嗅神经切断模型组相比较,差异无显著性意义(P0.05)。实验组高于实验对照组(P0.05);正常对照组、实验组和实验对照组均明显高于AD模型组(P0.01)。结论嗅三针疗法可明显强化AD大鼠学习记忆功能、疗效机制与提高大脑边缘叶突触素蛋白含量有明显相关性。