经空肠注入大承气汤对急性胰腺炎大鼠细胞因子和胰腺细胞凋亡的影响

目的观察空肠内注人大承气汤对急性胰腺炎大鼠细胞因子、胰腺腺泡细胞凋亡的影响。方法将90只大鼠随机分为假手术组、模型组和对照组。建立急性胰腺炎模型,术后第2天检测各组外周血中自介素113（IL-1β）、白介素18（IL-18）、肿瘤坏死因子（TNF—α）浓度,胰腺组织病理学积分和胰腺腺泡细胞凋亡指数的差异。结果急性胰腺炎大鼠模型应用大承气汤后,血清IL-1β、IL-18、TNF—α浓度水平均较模型组减低,胰腺组织病理学积分较模型组明显减低,胰腺腺泡细胞凋亡指数明显升高。结论空肠内注入大承气汤具有抑制急性胰腺炎大鼠炎症反应、促进胰腺腺泡细胞凋亡的作用。     

胰腺腺泡细胞凋亡在大鼠急性胰腺炎病程中的作用

目的 :探讨胰腺腺泡细胞凋亡与急性胰腺炎 (acutepancreatitis ,AP)严重度的关系 ,进一步研究AP的发病机制。方法 :2 4只SD大鼠随机分为对照组、APⅠ组和APⅡ组。采用胰胆管共同通道内逆行注射不同浓度的脱氧胆酸钠制备不同重症程度的AP模型。应用TUNEL技术 ,分析AP时胰腺腺泡细胞凋亡情况。结果 :AP时 ,腺泡细胞死亡包括坏死和凋亡两种形式 ;病变程度轻的APⅠ组大鼠腺泡细胞凋亡指数比病变程度重的APⅡ组高 (6 36± 2 4 1VS 2 34± 1 15 ,P <0 0 5 )。结论 :AP时 ,腺泡细胞死亡包括坏死和凋亡两种形式 ;在急性期 ,腺泡细胞凋亡与AP病情严重程度呈负相关 ,腺泡细胞凋亡可能是一种保护现象     

急性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡分析方法的比较

目的探讨牛磺胆酸钠所诱导的急性胰腺炎急性期胰腺细胞凋亡现象的特点和作用。方法大鼠造模、分组、取材后采用电镜定性检测，DNA末端原位染色法检测（TUNEL）和流式细胞仪定量检测（FCM）。结果①电镜检测：对照组胰腺腺泡细胞超微结构正常；水肿组自噬空泡形成，凋亡细胞和凋亡小体出现。坏死组早期凋亡和坏死可以并存，且凋亡现象较水肿组明显：②TUNEL检测：除了在3h时段坏死与对照组间差异非常显著（P〈0．01）、水肿与对照组间差异显著（P〈0．05）外，其余组间差异均无显著性，但以坏死组凋亡现象最为明显：③FCM检测：TUNEL与FCM检测结果呈正相关。结论凋亡只是一种代偿，可能减轻病情的严重程度，但他只是在一定限度内发挥着积极作用。     

实验性胰腺炎大鼠胰腺外分泌细胞的坏死与凋亡

按Ａｈｏ等的方法，给大鼠胆胰管内逆行注射牛磺胆酸钠，制成急性坏死性胰腺炎动物模型。采用ＨＥ染色及ＤＮＡ末端标记法（ＴＵＮＥＬ）观察了术后（注药后）不同时程胰腺外分泌细胞的病理组织学改变。发现牛磺胆酸钠可引起胰腺组织的坏死及凋亡，前者出现较早并随术后时间延长而逐渐加重，且伴有明显的炎症反应；后者出现略迟，占较小部分。这表明，这种胰腺炎动物模型可引起胰腺外分泌细胞的坏死及凋亡，与胰腺炎的病变程度密切相关     

大承气汤治疗重症急性胰腺炎大鼠的实验研究

目的 探讨大承气汤治疗重症急性胰腺炎(SAP)的作用机制.方法 健康Wistar大鼠50只随机分成5组,分别为:假手术组(A组),SAP模型组(B组),SAP+乌司他丁治疗组(C组),SAP+大承气汤治疗组(D组),SAP+大承气汤+乌司他丁治疗组(E组).采用胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠法建立SAP大鼠模型,于制模后24 h收集样本,检测大鼠肺组织、回肠和血浆中促炎因子白细胞介素-6(IL-6)、内毒素(ET)和抑炎因子白细胞介素-10(IL-10)的含量变化.结果 SAP+乌司他丁治疗组、SAP+大承气汤治疗组、SAP+大承气汤+乌司他丁治疗组与SAP模型组比较血浆及组织ET、IL-6含量明显降低(P<0.05),IL-10含量明显升高(P<0.05);SAP+大承气汤+乌司他丁治疗组与SAP+乌司他丁治疗组、SAP+大承气汤治疗组比较血浆及组织ET、IL-6含量明显降低(P<0.05),IL-10含量明显升高(P<0.05).结论 大承气汤可能通过减少致炎因子ET、IL-6和增加抑炎因子IL-10来影响SAP的炎症反应,大承气汤和乌司他丁对大鼠SAP具有相加或协同的抗炎作用.     

大承气汤抗急性坏死性胰腺炎肺损伤的实验研究

为研究急性坏死性胰腺炎（ＡＮＰ）早期白细胞粘附强弱和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的变化及其与肺损伤的关系,以及大承气能否减轻肺损伤的程度,将１４只家犬随机分成承气汤组（ｎ＝５,ＡＮＰ模型＋大承气汤治疗）,盐水组（ｎ＝５,ＡＮＰ模型＋生理盐水治疗）和假手术组（ｎ＝４）３组。术后在流室系统下观察白细胞与内皮细胞的粘附强弱,并测定血清及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）ＴＮＦ活性和损伤程度。结果显示：实验犬ＡＮＰ时     

大承气汤治疗对实验性急性胰腺炎大鼠炎症反应及氧化应激水平的影响

目的：探讨大承气汤治疗对实验性急性胰腺炎大鼠炎症反应及氧化应激水平的影响。方法：将成年雄SD大鼠54只随机分为3组：假手术组、模型组和治疗组。经十二指肠行胆胰管逆行加压注射50 g/L牛磺胆酸钠建立大鼠急性胰腺炎模型。造模后治疗组立即给予大承气汤喷雾干燥颗粒20 g/kg灌胃治疗1次,模型组和假手术组给予等量的生理盐水。分别于造模后3、6、12 h处死每组各6只大鼠并立即心脏取血,ELISA方法测定血清中TNF-α、IL-β和IL-6含量;同时切取各时间点大鼠胰腺组织,检测丙二醛（malondialdehyde,MDA）、组织髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的含量。结果：与模型组相比,治疗组各时间点的血清TNF-α、IL-β、IL-6含量均显著降低（P〈0.01或P〈0.05）;同时胰腺组织中MDA、MOP含量亦明显减少（P〈0.05）,而SOD含量则明显升高（P〈0.05）。结论：大承气汤对于急性胰腺炎具有重要的治疗和保护作用,其机制可能与清除氧自由基,减轻脂质过氧化反应,以及减轻炎症反应相关。     

大鼠重症急性胰腺炎胰腺细胞凋亡的研究

目的 :探讨大鼠重症急性胰腺炎 (SAP)胰腺组织细胞凋亡与细胞因子TGFβ1和凋亡调控基因Bax蛋白表达的关系 .方法 :32只雌性SD大鼠以 4 %牛磺胆酸钠诱导建立SAP模型 ,2 4只雌性SD大鼠建立假手术模型作为对照 .TUNEL法检测胰腺组织细胞凋亡 ;免疫组化SP技术检测胰腺组织细胞因子TGFβ1、凋亡调控基因Bax蛋白表达 .结果 :HE染色显示胰腺组织炎症随时间进展而迅速加重 .TUNEL显示假手术组胰腺组织存在极少量的凋亡细胞 ,与时间变化无关 ;SAP模型组胰腺组织中凋亡细胞明显增多 ,并随胰腺炎症程的变化而变化 :3h达到高峰 ,随后迅速减少 ,12h时细胞凋亡以坏死为主 .建模后 1,3,6 ,12h凋亡指数分别为 2 5 .0(8.5 )‰ ,78.5 (11.8)‰ ,4 2 .0 (11.3)‰ ,9.0 (2 .5 )‰ ,均明显高于假手术组 (P <0 .0 0 1) .免疫组化显示假手术组TGF β1,Bax蛋白仅有极少量表达 ;SAP模型组TGFβ1,Bax蛋白的染色阳性率明显高于对应时相的假手术组 ,建模后 1,3,6 ,12hTGFβ1蛋白的阳性表达率分别为 2 7.5 (5 .0 ) % ,2 7.5 (5 .0 ) ) % ,5 2 .5 (8.8) % ,77.5 (8.8) % ;Bax蛋白的阳性表达率分别为 4 5 .5 (12 .5 ) % ,80 .0 (7.5 ) % ,6 7.5 (10 .0 ) % ,35 .0(8.75 % .结论 :SAP大鼠胰腺细胞凋亡与胰腺炎症程度有关 ;胰腺细胞凋亡可     

吲哚美辛对重症急性胰腺炎大鼠胰腺血流和细胞凋亡的影响

目的　研究吲哚美辛对重症急性胰腺炎大鼠胰腺血流和细胞凋亡的影响 ,并探讨其作用机制。方法　将大鼠随机分成吲哚美辛组 (IN)、重症急性胰腺炎组 (SAP)和对照组 ,术后 12、2 4和 36h处死 ,运用多普勒超声测定胰腺局部动脉血流、门静脉血流、脾动脉血流和肠系膜上动脉血流。取大鼠胰腺病理标本 ,进行胰腺病理损害评分 ,采用TUNEL法检测胰腺腺泡细胞凋亡指数。结果　SAP时 ,大鼠胰腺局部动脉血流、门静脉、脾动脉和肠系膜上动脉的血流量明显下降 (vs对照组P <0 .0 1)。吲哚美辛明显改善了胰腺血流 ,同时改善了门静脉、脾动脉和肠系膜上动脉的血流量 (vsSAP组P <0 .0 1)。吲哚美辛治疗干预可使SAP大鼠胰腺细胞凋亡指数上升 (vsSAPP <0 .0 1) ,同时治疗组各时点胰腺病理损害较SAP组明显减轻 (P <0 .0 1)。结论　吲哚美辛能促使SAP大鼠胰腺血流量增加 ,SAP时存在着胰腺细胞凋亡 ,胰腺细胞凋亡和胰腺的病情变化呈负相关     

生长抑素对急性胰腺炎胰腺细胞凋亡作用机制的初步研究

目的 探讨生长抑素治疗小鼠急性胰腺炎对胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因ｐ５３,ｂａｘ的影响。方法 以蛙皮素诱导ＣＤ－１小鼠急性胰腺炎模型,并应用ＴＵＮＥＬ染色,免疫组化ＳＰ技术等检测胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因ｐ５３,ｂａｘ的蛋白表达以及生长抑素治疗后对胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因ｐ;５３,ｂａｘ蛋白表达的影响。结果 苏木精－伊红染色观察到胰腺组织中典型的细胞凋亡形态学特征：细胞核固缩及凋亡小体形成。     

柴芩承气汤减轻急性胰腺炎大鼠胰腺钙超载的机制研究

目的：观察柴芩承气汤（Chaiqinchengqi decoction,CQCQD）对急性胰腺炎大鼠胰腺组织肌浆网钙ATP酶（sarcoendoplasmic reticulum Ca2＋-ATPase,SERCA）mRNA表达的影响。方法：30只SD大鼠随机分成正常对照组、模型组及CQCQD组。采用蛙皮素腹腔注射法建立急性胰腺炎大鼠模型。逆转录聚合酶链式反应检测胰腺组织SERCA1和SERCA2 mRNA表达的变化;激光共聚焦显微镜检测腺泡细胞内钙离子浓度,并比较各组大鼠胰腺组织病理变化。结果：SERCA1 mRNA在正常胰腺和急性胰腺炎胰腺腺泡细胞均不表达。模型组与正常对照组比较,腺泡细胞SERCA2 mRNA表达下调,表达率为0.536（P=0.001）;CQCQD组与模型组比较,腺泡细胞SERCA2 mRNA的表达上调,表达率为1.803（P=0.035）。模型组大鼠细胞内钙离子的荧光强度高于正常对照组及CQCQD组（P〈0.05）;CQCQD组大鼠胰腺组织的病理评分低于模型组（P〈0.05）。结论：CQCQD可以通过上调SERCA2 mRNA表达,减缓胰腺细胞内钙超载,减轻胰腺组织的病理改变。     

精氨酸对急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响

目的:探讨左旋精氨酸与急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的关系.方法: 以蛙皮素制造AP模型,观察不同剂量L-Arg治疗AP大鼠后,胰腺组织中一氧化氮合酶(NOS)活性、一氧化氮(NO)的含量、胰腺腺泡细胞凋亡及胰腺组织病理改变.结果: AP胰腺组织中NOS活性较正常胰腺组织中升高,而此时胰腺组织NO浓度反而降低,低剂量L-Arg(75, 150 mg/kg)使胰腺组织中NO浓度升高致接近正常组水平,促进了胰腺腺泡细胞凋亡,减轻胰腺病理损害;高L-Arg剂量(1200, 2400 mg/kg),胰腺组织中NO浓度升高超出正常组,胰腺腺泡细胞凋亡减少,胰腺病理损害加重.结论: L-Arg对AP的的双重作用与NO的生物活性有关.小剂量可通过诱导胰腺腺泡细胞凋亡, 而起保护作用, 大剂量则有害.     

RIP1在急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡中的作用探讨

目的：探讨细胞凋亡在急性胰腺炎炎症中的作用及受体相互作用蛋白（RIP ）的调控作用。方法将30只C57小鼠分为3组：对照组、急性水肿性胰腺炎（AEP）组、急性坏死性胰腺炎（ANP）组。AEP组连续注射雨蛙素（50μg／kg）13次;ANP组连续注射雨蛙素（50μg／kg）13次,另注射1次脂多糖（15 mg／kg）;对照组注射等量生理盐水7次。末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记法观察胰腺腺泡细胞凋亡,实时荧光定量PCR法检测RIP1 mRNA的表达,蛋白质免疫印迹法检测RIP1蛋白的表达。结果成功建立AEP及ANP小鼠模型。与对照组比较,2个胰腺炎模型组均存在细胞凋亡,且与AEP组比较,ANP组小鼠细胞凋亡减少,差异有统计学意义（P＜0．05）。与对照组比较,AEP组RIP1 mRNA及蛋白表达均升高,而ANP组降低,差异均有统计学意义（ P＜0．05）。结论 RIP1参与急性胰腺炎的发病过程,可能与调控腺泡细胞凋亡有关。     

大承气汤对大鼠急性重症胰腺炎并发腹腔高压的影响

目的观察中药大承气汤对大鼠急性重症胰腺炎(SAP)并发腹腔高压的影响。方法选用健康雄性SD大鼠60只,随机分为三组,假手术组、SAP组、大承气汤治疗组,每组20只。通过腹腔置管直接测定大鼠急性重症胰腺炎时腹腔内压力。检测2周后实验动物死亡率、胰腺病理学和腹水细菌学、门静脉血内毒素(ET)和体静脉血淀粉酶。结果 SAP组、大承气汤治疗组间动物死亡率、血清淀粉酶水平差异无统计学意义(P>0.05),胰腺病理改变类型及程度相似;大承气汤治疗组腹腔内压力显著低于SAP组(P<0.05),门静脉ET水平及腹水细菌阳性率亦显著低于SAP组(P<0.01及P<0.05)。提示大承气汤可有效减轻SAP大鼠腹腔内压力,减少腹腔感染发生率。结论大承气汤可能在一定程度上减轻大鼠急性重症胰腺炎并发腹腔高压。     

重症急性胰腺炎急性期细胞因子及胰腺腺泡细胞凋亡的动态变化

目的 本研究通过重症急性胰腺炎（SAP）大鼠血清淀粉酶、TNFa、IL－6、胰腺腺泡细胞凋亡指数及胰腺组织学变化程度作用的动态观察，以进一步了解治疗SAP的作用机理。方法 用chetty法制做大鼠SAP模型，动态测定术后0h、24h、30h、36h各组血清TNFa、IL－6浓度，并取得胰组织做病理学检查；同时，应用TUNEL技术分析大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的变化。结果 研究发现SAP组30、36h时血清TNFa、IL－6水平明显升高，腹水量明显增加，胰组织病变程度明显加重；胰腺腺泡细胞凋亡指数较SAP组胰腺腺泡细胞凋亡指数明显升高。结论 重症急性胰腺炎（SAP）胰酶及炎症介质的释放及胰腺腺泡细胞凋亡在其病情发展起一定的作用。     

白藜芦醇上调FasL表达对大鼠重症急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的影响

目的 探讨白藜芦醇对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠腺泡细胞凋亡的影响及其机制.方法 以3.5%牛磺胆酸钠诱导SD大鼠SAP模型,采用全自动生化分析仪检测血清淀粉酶浓度,应用TUNEL染色检测胰腺腺泡细胞凋亡,RT-PCR及Western blot技术检测胰腺组织凋亡调控基因Fas和FasL mRNA及蛋白的表达,以及白藜芦醇治疗对腺泡细胞凋亡及Fas和FasL表达的影响,光镜下观察胰腺组织的病理变化.结果 与SAP组相比,白藜芦醇治疗组血清淀粉酶水平及胰腺病理损害评分明显下降,腺泡细胞凋亡指数明显升高,FasL mRNA及其蛋白的表达水平亦显著升高. 结论 白藜芦醇通过上调胰腺组织凋亡调控基因FasL的表达诱导损伤的胰腺细胞凋亡以减轻胰腺组织病理损害,可能对SAP具有重要的治疗作用.     

急性胰腺炎时环氧化酶-2表达与腺泡细胞凋亡

目的探讨急性胰腺炎(AP)时环氧化酶-2(Cox-2)表达与腺泡细胞凋亡的关系。方法 SD大鼠30只,随机分为假手术组(A组)、急性水肿性胰腺炎组(B组)和急性出血坏死性胰腺炎组(C组)。采用逆行胰胆管穿刺注射法复制急性水肿性与出血坏死性胰腺炎模型。检测造模后12 h各组的血清淀粉酶活性、腹水量、胰腺组织大体病理改变及评分、镜下病理改变与评分、腺泡细胞凋亡指数(AI)及Cox-2蛋白表达情况。结果①C组血清淀粉酶活性、腹水量、大体及镜下病理评分、Cox-2阳性率显著高于B组(P<0.01),AI显著低于B组(P<0.01)。②B、C组中AI与大体及镜下病理评分均呈显著负相关关系(P<0.05)。③B、C组中Cox-2表达与AI均呈显著负相关关系(P<0.01)。结论 AP时腺泡细胞凋亡是机体的一种自我保护机制,Cox-2过度表达可能通过抑制腺泡细胞凋亡加重胰腺病变。     

大承气汤对老年大鼠急性肺损伤过程中H2S/CSE的影响

目的 观察硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)在大承气汤抗脂多糖(LPS)所致老年大鼠急性肺损伤(ALI)过程中的变化.方法 将88只SD老年大鼠随机分为假手术组、ALI模型组(经气管内滴注LPS复制ALI模型)、炔丙基甘氨酸(PPG,CSE抑制剂)组和大承气汤治疗组.分别于给药后4h、8h处死动物,测定肺系数;光镜观察肺组织形态学改变;化学法检测血浆H2S含量、肺组织丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性以及CSE活性的变化;RT-PCR方法检测肺组织CSEmRNA表达的变化.再将血浆H2S含量与上述指标进行相关性分析.结果 气管内滴注LPS可引起肺组织明显的形态学改变;肺系数和肺组织MDA含量、MPO活性增加;血浆H2S含量、肺组织CSE活性及CSEmRNA表达下降.预先给予PPG可加重LPS所致肺损伤;而给予大承气汤后,肺组织损伤减轻,肺系数和肺组织MDA含量、MPO活性下降,血浆H2S含量、肺组织CSE活性及CSEmRNA表达增加.相关性分析显示,H2S含量与CSE活性呈正相关(r值=0.950～0.981,P均＜0.01);与其他指标呈负相关(r值=-0.985～-0.933,P均＜0.01).结论 H2S/CSE体系的下调参与了LPS所致老年大鼠ALI的发病;上调H2S/CSE体系是大承气汤抗LPS所致老年大鼠ALI的作用机制之一.