66株阴沟肠杆菌超广谱β—内酰胺酶的检测

我们从 6 6株阴沟肠杆菌检出产超广谱 β 内酰胺酶 (ＥＳ ＢＬ) 8株 ,并对头孢噻肟、泰能等 8种抗生素作药敏试验 ,报告如下。1　材料与方法1.1　菌株　 6 6株阴沟肠杆菌从我院临床送检的 875份标本中分离得到 ,常规分离按《全国临床检验操作规程》 ,采用ＡＰＩ2 0Ｅ系统手工法鉴定。1.2　药敏纸片　头孢他啶 (ＣＡＺ) ,头孢他啶 /棒酸 ;头孢噻肟(ＣＴＸ) ,头孢噻肟 /棒酸 ,泰能安灭菌均为Ｏｘｏｉｄ产品。质控菌株ＡＴＣＣ 2 5 92 2大肠埃希菌及ＡＴＣＣ 70 0 6 0 3肺炎克雷伯菌。1.3　方法　药敏试验Ｋ Ｂ法。ＥＳＢＬ的检测程序为纸片扩…     

阴沟肠杆菌产超广谱β内酰胺酶的研究

目的了解我院2004年110月临床分离的83株阴沟肠杆菌中产ESBLs的情况，并对1株多重耐药菌株进行耐药机制研究。方法采用改良双纸片法（MDDT）进行ESBLs的初筛。以8对ESBLs引物（CTX—M，CTX-M-1，CTX-M-2，CTX-M-9，SHV，TEM，VEB，PER型）进行PCR扩增，对其中1株菌株（37号菌株）的扩增产物进行序列分析。结果MDDT初筛结果证明有43株菌产ESBLs，41株菌多种ESBLs引物均有扩增产物，序列分析表明37号阴沟肠杆菌携带的ESBLs为CTX-M-9，CTX-M-1样，SHV型。结论产多种ESBLs是引起该株阴沟肠杆菌对第三代头孢菌素耐药的重要原因。     

阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶检测方法探讨

[目的]探索建立阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检测方法。[方法]使用五种底物的“双纸片协同试验”对47株阴沟肠杆菌进行ESBLs检测。底物距中心的距离分别采用20mm和25mm。[结果】在距离为20mm时,不同底物对ESBLs的检出率分别为头孢吡肟：38．3％,氨曲南：29．8％,头孢噻肟：23．4％,头孢他啶：21．3％及头孢曲松：19.1％。当距离改为25mm时,检出率依次为12．8％、6、4％、2．1％、0和0。[结论]阴沟肠杆菌ESBLs检测的最佳底物为头孢吡肟,底物和阿莫西林克拉维酸纸片间的距离应选择20mm。     

阴沟肠杆菌等细菌超广谱β—内酰胺酶检测的探讨

目的：检测肠直菌科细菌中除肺炎克雷伯菌，产酸克雷伯菌，大肠埃希菌以外的其它细菌超广谱β－内酰胺酶（ESBLs)，以了解其检出情况和耐药性。方法：采用VITEK ESBLs检测系统和双纸片协同试验同时进行ESBLs的实验。结果：280株细菌中，用VITEK506卡检出ESBLs菌96株，其中大肠埃希菌34．5％，肺炎克雷伯菌43．1％，阴沟肠杆菌35．4％，产气肠杆菌25％，费劳地枸橼酸杆菌37．5％，用双纸片协同实验检出91株，检出率略低，在沙雷菌，变形杆菌，摩根菌中未检出ESBLs菌，对头孢西丁药敏试验中，产ESBLs的大肠埃希菌，肺炎克菌伯菌高度敏感，耐其余细菌表现耐药。结论：对大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌可以用VITEK系统和双纸片协同试验作常规ESBLs的试验，而对肠杆菌中中其余的细菌是否可参照应用尚需研究。     

阴沟肠杆菌6株中产超广谱β内酰胺酶的基因型

目的：研究阴沟肠杆菌6株的超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的基因型。方法：分别使用对TEM型、SHV型和CTX-M型基因特异的引物,PCR扩增6株阴沟肠杆菌接合子Esbl基因,对PCR产物直接测序分析其基因型。结果：3株阴沟肠杆菌的接合子均含有CTX—M-3型酶,同时含有TEM型酶。另3株阴沟肠杆菌接合子均含有一种等电点为8．3未知的β内酰胺酶,同时含有一种pI为5．4或5．5未知的β内酰胺酶。结论：临床分离的阴沟肠杆菌可产CTX-M-3型酶,对头孢菌素类产生耐药性。     

肠杆菌科细菌超广谱β—内酰胺酶的检测

为了解临床分离菌株超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬ）的产生情况及不同的方法、不同指示剂的敏感性,我们对收集的肠杆菌科细菌１９５株进行研究。     

55株阴沟肠杆菌产超广谱β—内酰胺酶情况及耐药分析

近年来 ,阴沟肠杆菌 (Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｃｌｏａｃａｅ)已成为医院内感染的常见菌。本研究收集 1999年 3月～ 10月上海长海医院和长征医院分离的阴沟肠杆菌 5 5株 ,用双纸片协同扩散法检测超广谱 β 内酰胺酶 (ｅｘｔｅｎｄｅｄ ｓｐｅｃｔｒｕｍｂｅｔａ ｌａｃ ｔａｍａｓｅｓ ,ＥＳＢＬｓ) ,用Ｋｉｒｂｙ Ｂａｕｅｒ法作药敏试验 ,以了解阴沟肠杆菌产ＥＳＢＬｓ及耐药情况 ,并指导临床用药。一、材料和方法1.材料　 (1)临床菌株 :1999年 3月～ 10月 ,由上海长海医院和长征医院提供从住院患者各种标本中分离的阴沟肠杆菌 5 5株。 …     

55株阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药分析

近年来,阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)已成为医院内感染的常见菌.本研究收集1999年3月～10月上海长海医院和长征医院分离的阴沟肠杆菌55株,用双纸片协同扩散法检测超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lac-tamases,ESBLs),用Jirby-Bauer法作药敏试验,以了解阴沟肠杆菌产ESBLs及耐药情况,并指导临床用药.     

产超广谱β—内酰胺酶阴沟肠杆菌的耐药性分析

由质粒介导的大多数肠杆菌科的细菌均可产生ESBLs,常见于肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌,亦见于阴沟肠杆菌、异型枸橼酸杆菌等,大多源于TEM-1、TEM-2、和SHV-1的突变。对于肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌耐药性问题,已有许多报道,本文不再讨论。本文要讨论的是产ESBLs的阴沟肠杆菌的耐药性情况。     

改良三维试验同时检测阴沟肠杆菌中的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶

目的研究瑞安市人民医院临床标本分离出的的阴沟肠杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）情况,以指导临床用药。方法收集瑞安市人民医院2006年1～12月临床标本分离到的96株阴沟肠杆菌,用纸片扩散法对14种抗菌药物进行了药敏试验,用改良三维试验进行持续高产AmpC酶和ESBLs的双重检测。结果96株阴沟肠杆菌中11株（11．5％）高产AmpC酶;2株（2．1％）既持续高产AmpC酶又产ESBLs;40株（41．6％）只产ESBLs;其余43株（44．8％）未发现持续高产AmpC酶或ESBLs。结论使用改良的酶提取物三维试验可同时检测高产AmpC酶和ESBLs菌株,应根据阴沟肠杆菌产生不同的ESBLs来选择性用药。     

肠杆菌科细菌超广谱β-内酰胺酶的检测

为了解临床分离菌株超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的产生情况及不同方法、不同指示剂的敏感性,我们对收集的肠杆菌科细菌195株进行研究.用双纸片协同试验检测耐氨苄西林的肠杆菌科细菌195株,产ESBL 55株,阳性率为28.2%.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和肠杆菌属细菌是主要的产酶菌.选其中40株用三相试验检测,仅检出33株,三相试验对ESBL的检出率低于双纸片协同试验.在头孢曲松、氨曲南、头孢他啶和头孢噻肟四种抗生素中,头孢曲松筛选ESBL的检出率最高,头孢他啶的检出率最低.常规药物敏感试验的耐药标准和NCCLS关于ESBL的筛选标准(1999)在判断ESBL上存在很大差别,提示临床微生物工作者,为避免可疑ESBL的漏检,应使用NCCLS的新标准对ESBL进行初筛.在常用抗生素20种中,亚胺培南对产ESBL细菌的抗菌效果最好(敏感率为100%),其次为头孢西丁.β-内酰胺抗生素+酶抑制剂(复方氨苄西林、复方阿莫西林和复方替卡西林)的作用效果不好.     

阴沟肠杆菌超广谱β—内酰胺酶、诱导酶的检出与耐药相关性的分析

目的：了解阴沟肠杆菌超广谱β－内酰胺酶和诱导酶的产生和分布情况。并分析产酶特性和耐药表型的相关性。方法：用纸片扩散确证法和相邻纸片法对104株阴沟肠杆菌进行超广谱β－内酰胺酶及诱导酶的检测，用VITEK全自动药敏分析系统和K－B琼脂扩散法检测其对20种抗生素的耐药性。结果：104例阴沟肠杆菌中，检出超广谱β－内酰胺酶阳性株77株，占74％，诱导酶阳性株26株，占25％，13株两种酶同时阳性。超广谱β－内酰胺酶阳性株主要集中在几个病区，诱导酶阳性株则无此倾向，104株菌对多种怀素高度耐药，产超广谱β－内酰胺酶株的耐药率明显高于非产酶株，产诱导酶株的耐药率反而低于非产酶株。结论：阴沟肠杆菌产酶情况和耐药性均十分严重。多重耐药的主要原因是由于菌株产生超广谱β－内酰胺酶，产酶株对三代头孢的体外敏感试验不能正确反映临床的治疗效果。实验室应加强阴肠杆菌产酶情况的检测，治疗产酶阴沟肠杆菌引起的感染，首选亚胺培南，其次为舒普深，任何情况下应避免使用三代头孢。     

仪器法与纸片协同法检测超广谱β—内酰胺酶的结果比较

目的 了解ＶＩＴＥＫ－ＡＭＳ检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）的可靠性,并调查本院这两种菌的产ＥＳＢＬｓ情况。方法 用ＶＩＴＥＫ－ＡＭＳ专用药敏卡ＧＮＳ－５０６进行ＥＳＢＬｓ检测,并以头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶和氨曲南为底物,用纸片协同试验作对照。结果 仪器检测４８株肺炎克雷伯菌中有２４株ＥＳＢＬｓ为阳性,用纸片协同法对照结果一致。检测１０２株大肠埃希菌中,仪器检出４１株阳性,纸协同法对照也为阳性,但仪器检测的６１株阴性菌中,纸片协同法对照有１９株为阳性。结论 ＶＩＴＥＫ－ＡＭＳ检测本地区产ＥＳＢＬｓ菌株尚可能存在一定的局限性,建议各地根据感染菌株的特点及三代头孢菌素的使用情况,用多种底物检测ＥＳＢＬｓ。     

阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶、诱导酶的检出与耐药相关性的分析

目的了解阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶和诱导酶的产生和分布情况,并分析产酶特性和耐药表型的相关性.方法用纸片扩散确证法和相邻纸片法对104株阴沟肠杆菌进行超广谱β-内酰胺酶及诱导酶的检测,用VITEK全自动药敏分析系统和K-B琼脂扩散法检测其对20种抗生素的耐药性.结果 104株阴沟肠杆菌中,检出超广谱β-内酰胺酶阳性株77株,占74%,诱导酶阳性株26株,占25%,13株两种酶同时阳性.超广谱β-内酰胺酶阳性株主要集中在儿个病区,诱导酶阳性株则无此倾向,104株菌对多种抗生素高度耐药,产超广谱β-内酰胺酶株的耐药率明显高于非产酶株,产诱导酶株的耐药率反而低于非产酶株.结论阴沟肠杆菌产酶情况和耐药性均十分严重.多重耐药的主要原因足由于菌株产生超广谱β-内酰胺酶,产酶株对三代头孢的体外敏感试验不能正确反映临床的治疗效果.实验室应加强阴沟肠杆菌产酶情况的检测,治疗产酶阴沟肠杆菌引起的感染,首选亚胺培南,其次为舒普深,任何情况下应避免使用三代头孢.     

阴沟肠杆菌等细菌超广谱β-内酰胺酶检测的探讨

目的检测肠杆菌科细菌中除肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌以外的其它细菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),以了解其检出情况和耐药性.方法采用VITEK ESBLs检测系统和双纸片协同试验同时进行ESBLs的实验.结果280株细菌中,用VITEK506卡检出ESBLs菌96株,其中大肠埃希菌34.5%,肺炎克雷伯菌43.1%,阴沟肠杆菌35.4%,产气肠杆菌25%,费劳地枸橼酸杆菌37.5%.用双纸片协同实验检出91株,检出率略低.在沙雷菌、变形杆菌、摩根菌中未检出ESBLs菌.对头孢西丁药敏试验中,产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌高度敏感,而其余细菌表现耐药.结论对大肠埃希菌,肺炎克雷伯菌可以用VITEK系统和双纸片协同试验作常规ESBLs的试验,而对肠杆菌科中其余的细菌是否可参照应用尚需研究.     

双纸片协同法与GNS-506卡法检测超广谱β-内酰胺酶比较

目的比较双纸片协同法与法国生物梅里埃公司VITEK GNS-506药敏分析卡法对肠杆菌科细菌所产超广谱β-内酰酶(Extended-spectrum β-Lactamases,ESBLs)的实用性.方法以头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南为指示底物的双纸片协同法和GNS-506卡法同时检测临床分离的125株肠杆菌科细菌的ESBLs产生情况.结果从125株肠杆菌科细菌中用双纸片协同法出49株ESBLs阳性;用GNS-506卡法只从95株大肠埃希菌和克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌与产酸克雷伯菌)中检出38株ESBLs阳性.两种方法对大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs的检测结果x2检验,P＞0.05,结果无显著差异.结论双纸片协同法检测ESBLs操作方便,结果可靠,成本低,检测范围广,在已具备VITEK系统的实验室可作为GNS-506卡法的监测和补充.在一般的实验室适合常规应用.     

多重耐药产PER-1型超广谱β内酰胺酶阴沟肠杆菌的研究

目的研究多重耐药阴沟肠杆菌017对β内酰胺类抗菌药物耐药的机制。方法使用双纸片扩散法和改良三相试验对阴沟肠杆菌017进行β内酰胺酶的表型检测，并用聚合酶链反应(PCR)扩增β内酰胺酶基因，对PCR产物进行测序确定基因型别。结果阴沟肠杆菌017经双纸片扩散法证实产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)，经三相试验证实该菌除了产ESBLs外，还同时产AmpC酶。PCR产物经测序长度为579bp，与GENEBANK的PAPER1A基因序列100％符合，确定为PER-1基因。结论阴沟肠杆菌017耐β内酰胺类抗菌药物的主要原因是PER-1型ESBLs和AmpC酶所致。     

产超广谱β-内酰胺酶及AmpC酶的阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的 分析产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β lactamases,ESBLs）及AmpC酶的阴沟肠杆菌的分布情况及耐药特征.方法 选择49株阴沟肠杆菌,采用纸片扩散法进行药物敏感试验,按美国临床实验室标准化协会推荐的确证试验检测产ESBLs阳性菌株;头孢西丁纸片扩散法初步筛选产AmpC酶阳性菌株,采用PCR检测AmpC酶基因.结果 抗生素敏感试验结果显示阴沟肠杆菌对头孢西丁、替卡西林/克拉维酸、头孢曲松、氨曲南的耐药率均达79.6％以上,对美罗培南敏感率较高,达91.8％.49株阴沟肠杆菌中对头孢西丁耐药的菌株46株（93.9％）;产ESBLs菌株29株（59.2％）,PCR 扩增产AmpC酶的阴沟肠杆菌36株（73.5％）,同时产两种酶的菌株为13株（26.5％）.结论 产ESBLs 及AmpC酶阴沟肠杆菌普遍且耐药现象严重.     

介绍一种同时存在AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的检测方法

目的：研究自血培养分离的阴沟肠杆菌的耐药特点，以指导临床用药。方法：收集1997-2000年期间我院住院患血液中分离到的10株阴沟肠杆菌，用纸片扩散法对13种抗菌药物进行了检测，用改良的酶提取物三维试验方法进行持续高产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的双重检测。结果：10株阴沟肠杆菌中1株持续高产AmpC酶，1株既有持续主产AmpC酶，又产ESBLs；3株只产ESBLs，其余5株未发现持续高产AmpC酶和ESBLs。2株持续高产AmpC酶和3株产ESBLs均对第三代头孢菌素和β内酰胺酶抑制剂的复方制剂等多种抗菌药显示高度耐药。结论：使用改良的酶提取物三维试验可同时检测高产AmpC酶（包括染色体型和质粒型）和ESBLs的菌株。根据阴沟杆菌产生不同的β内酰胺酶选择性用药，治疗高产AmpC酶多耐药菌，使用第三代头孢菌素和酶抑制复方制剂通常导致临床治疗失败，应选用第四代头孢菌素或碳青霉烯类，或两与氨基糖苷类或氟喹诺酮类联合治疗。碳青霉烯类抗生素是惟一对AmpC酶和ESBLs均稳定的β内酰胺类抗生素，可用于治疗产ESBLs菌引起的重症感染。