罗汉果对雄性小鼠骨髓微核和精子形态的影响

背景：对罗汉果的遗传毒性进行研究,可为其安全使用提供实验依据。 目的：观察罗汉果水提液对雄性小鼠骨髓细胞微核率和附睾精子畸形率的影响,了解其是否有遗传毒性。 方法：按罗汉果水提液最大使用剂量(3 g/mL)和最大灌胃容量(20 mL/kg)灌胃小鼠,观察罗汉果水提液的急性毒性。将雄性昆明小鼠随机分为5组,分别灌胃给予30,15,7.5 g/kg的罗汉果水煎液、蒸馏水,连续5 d;或腹腔注射40 mg/kg环磷酰胺。于灌胃第5天,采用骨髓嗜多染红细胞微核试验计算小鼠的骨髓微核率。于首次灌胃后第35天,观察小鼠精子畸形率。 结果与结论：罗汉果水提液对昆明小鼠的经口急性毒性最大耐受剂量大于120 g/kg。罗汉果水提液30,15,7.5 g/kg灌胃后,小鼠的骨髓微核率、精子畸形率与正常小鼠无差异(P > 0.05),均明显低于环磷酰胺诱发的骨髓微核率和精子畸形率(P < 0.05)。说明罗汉果水提液对成年雄性小鼠无明显遗传毒性。     

聚甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米义齿树脂材料遗传毒性的小鼠骨髓微核试验评价

背景：甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米复合材料已通过了包括细胞毒性试验、溶血试验、急性全身毒性试验、口腔黏膜刺激试验、皮肤致敏反应试验的生物安全性检测。 目的：采用小鼠骨髓微核试验进一步探讨聚甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米义齿树脂对细胞遗传物质可能产生的损伤作用。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-11/2008-01在天津医科大学公共卫生学院毒理实验室完成。 材料：SPF级昆明小白鼠50只,随机分为5组：阴性对照组,低、中、高剂量混悬液组,阳性对照组,10只/组。聚甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米义齿树脂由天津医科大学口腔医院制备。 方法：将聚甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米义齿树脂材料粉碎成细小颗粒,过筛后加入生理盐水形成混悬液,质量浓度为0.3 g/mL。阴性对照组灌胃生理盐水;低、中、高剂量混悬液组分别按15.0,7.5,3.75 g/kg灌胃混悬液进行染毒;阳性对照组腹腔注射环磷酰胺,按40 mg/kg给药。第1次染毒后24 h再次染毒,末次染毒后6 h取材,取胸骨骨髓加入胎牛血清制备涂片,Giemsa染色。 主要观察指标：每只小鼠骨髓涂片计数1 000个嗜多染红细胞,记录含微核的嗜多染红细胞数,求出微核率。 结果：阴性对照组微核率为0.248%,阳性对照组为4.384%,低、中、高剂量混悬液组微核率分别为0.150%,0.254%,0.277%。与阴性对照组比较,低、中、高剂量混悬液组微核率无明显变化（P > 0.05）,阳性对照组微核率显著升高（P < 0.01）。 结论：聚甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米义齿树脂对小鼠细胞染色体无明显的诱变效应,具有较好的生物安全性。     

细胞培养法评价自制镍铬烤瓷合金的细胞毒性

背景：具有良好抗腐蚀性能的镍铬铸造烤瓷合金正在临床广泛应用,但不容忽视的是其释放出的镍离子、铍离子具有明显的毒副作用。因此,改进合金的组成成分,提高其理化性能和生物相容性是目前研究的热点。 目的:检测自制镍铬烤瓷合金的体外细胞毒性,并与口腔科常用的镍铬合金、纯钛金属的细胞毒性进行比较。 设计、时间及地点：对比观察实验,于2006-05/12在中国医科大学中心实验室完成。 材料：细胞选用对数生长期的小鼠成纤维细胞 (L-929细胞)。自制镍铬烤瓷合金由中国科学院金属研究所提供,纯钛由日本松风公司提供,镍铬合金由贺利氏古莎齿科有限公司提供。 方法: 实验分为自制镍铬烤瓷合金、纯钛组、镍铬合金组,阳性对照组,阴性对照组。取96孔培养板,每板选出5组孔,每组重复孔12个,每孔中均加入浓度为1.0×108 L-1的细胞悬液100μL。在自制镍铬烤瓷合金、纯钛组、镍铬合金组孔中分别加入各种材料浸提液100μL,阳性对照组孔中加入铅浸提液100μL,使材料浸提液浓度最终为50%,在阴性对照组孔内加入RPMI 1640培养液100μL。 主要观察指标：分别于培养1,2,3,4, 5 d时采用四唑盐比色法测定各组吸光度值,计算相对增殖率。 结果: 3种金属材料组与阴性对照组之间的吸光度值差异均无显著性意义(P > 0.05),与阳性对照组之间的吸光度值差异有显著性意义(P < 0.05或P < 0.01)。纯钛组细胞增殖率>100%,细胞毒性为0级,自制镍铬烤瓷合金组和镍铬合金组的细胞增殖率为86.36%~99.49%,细胞毒性为1级,阳性对照组在培养3 d后细胞毒性增长至2级。 结论:自制镍铬烤瓷合金仅具有极微弱的细胞毒性,符合口腔材料临床应用的要求。 关键词：金属烤瓷合金;材料试验;MTT实验     

两种镍铬烤瓷合金的致突变性观察★

摘要：实验对自制镍铬烤瓷合金和含铍镍铬合金的致突变性进行检测和比较。选取健康小白鼠64只，随机分为8组，即阴性对照组（生理盐水），阳性对照组（环磷酰胺，40 mg/kg ），自制镍铬烤瓷合金高剂量（0.769 g/L）、中剂量（0.390 g/L）、低剂量组（0.077 g/L）组，含铍镍铬合金高、中、低剂量组（剂量同镍铬烤瓷合金组），每组8只。采用腹腔注射给药（25 μL /g）。24 h后以同样剂量第2次注射,给药后6 h麻醉下处死采集骨髓。在油镜下用双盲法计数1 000个嗜多染红细胞的微核细胞数。结果两种样品之间及与阴性对照组相比骨髓细胞的微核率差异均无显著性 (P > 0.05)；样品组与阳性对照组数据相比差异均有显著性 (P < 0.000 1)；表明两种镍铬烤瓷合金均不具有明显致突变作用。可作为金属烤瓷冠的基底材料。     

载微球骨水泥的体内生物相容性

背景：课题组在前期实验中已经证实了载聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物微球骨水泥具有较高的强度,良好的注射性能和体外可降解性能,但其生物相容性如何还不清楚。 目的：选择急性毒性试验,溶血试验,微核试验等检测载微球骨水泥的生物相容性。 方法：首先合成柱状骨水泥和包裹微球骨水泥,取1 g材料加入到100 mL的磷酸缓冲液中无菌条件下浸泡3 d后提取的上清液即为骨水泥浸提液和微球骨水泥浸提液。以急性毒性实验、溶血试验、微核试验和热原试验来考察材料的体内毒性。 结果与结论: 急性毒性实验结果显示,骨水泥浸提液组和微球骨水泥浸提液组(除高浓度微球骨水泥组外)与阴性对照组均无明显差异,说明该材料浸提液没有对小鼠产生明显的毒性反应。溶血实验显示,各组材料对健康人血的溶血率均未超过5%。微核实验结果显示除0.4 mL骨水泥组和0.4 mL微球骨水泥组的微核率与阴性对照组差异有显著性意义,其余各组差异无显著性意义,说明该微球骨水泥的浸提液无明显细胞遗传毒性作用,但是高浓度和高剂量组的微球骨水泥仍有较低的毒性作用,主要表现为溶血率和微核率的提高,因此在应用时要适当控制微球骨水泥的剂量和浓度。热原试验显示,注射后家兔平均体温升高为0.06 ℃,小于1.4 ℃,说明材料无致热作用。 关键词：聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物;骨水泥;微球;体内生物相容性;生物材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.12.007     

碳纤维复合材料人工颅骨板急性期生物相容性的研究

目的 评价碳纤维复合材料人工颅骨板在急性期的生物相容性。方法 制作碳纤维复合材料、含重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）的碳纤维复合材料、钛网、MEM培养基、含有0.64%苯酚的MEM培养基的浸出液，用于测试。采用L929小鼠成纤维细胞进行细胞毒性试验，采用健康ICR小鼠进行急性毒性试验，采用新西兰大白兔耳静脉血进行急性溶血试验，采用白化豚鼠进行皮肤致敏试验。结果 碳纤维复合材料、含rhBMP-2的碳纤维复合材料、钛网浸提液对L929细胞的相对增殖率均在75%以上，细胞毒性1级，无明显细胞毒性；小鼠腹腔注射相应材料的浸提液后，均活动良好，均无不良反应，均无明显急性毒性；碳纤维复合材料、含rhBMP-2的碳纤维复合材料、钛网浸提液溶血率均小于5%，均不引起溶血反应；碳纤维复合材料、含rhBMP-2的碳纤维复合材料、钛网浸提液不引起致敏性。结论 碳纤维复合人工颅骨板急性期生物相容性良好。     

牙科全瓷修复用长石瓷的生物相容性评价*★

背景：可加工的长石瓷材料结合计算机辅助设计/计算机辅助加工技术，促进了牙科快速修复技术的进步。修复用全瓷材料不仅应具有合适的机械性能，同时还需要具有良好的生物相容性。 目的：通过急性溶血实验、体外细胞毒实验初步评价牙科全瓷修复用长石瓷的生物相容性。 设计、时间及地点：单一样本开发性实验，于2004-08/2006-03在首都医科大学附属北京口腔医学院动物实验室完成。 材料：长石瓷材料为自制；健康新西兰大白兔1只；小鼠结缔组织成纤维细胞（L-929细胞）为ISO推荐。 方法：①急性溶血实验：以长石瓷材料浸提液为实验组、生理盐水为阴性对照组，蒸馏水为阳性对照组3组，分别测定吸光度值，计算被测材料的溶血程度。②体外细胞毒实验：设立100％和50％长石瓷材料浸提液两个浓度的实验组，空白对照组划区分组，每组样本5孔。测定各孔光吸收值，计算细胞增殖率和细胞毒性级。 主要观察指标：各组材料的溶血程度及细胞毒性分级。 结果：①长石瓷材料的溶血程度值为1.52％，与阴性对照组比较无显著性差异（P > 0.05），可认为长石瓷无溶血现象，初步检验合格。②100％和50％长石瓷材料浸提液组A值均与空白对照组无显著性差异（P > 0.05），细胞毒性级别均为1级，，满足生物安全要求。 结论：自制长石瓷材料的急性溶血实验、体外细胞毒实验结果均满足临床要求，反映其生物相容性初筛实验合格。     

纯镁及两种不同涂层纯镁的溶血现象

背景：尽管作为植入材料镁具有良好的生物相容性及可降解吸收等优点,但镁腐蚀过快,它的快速腐蚀将引起其机械性能在骨组织康复之前就显著下降。 目的：检测纯镁及微弧氧化、二水磷酸氢钙涂层后的纯镁的血液相容性。 方法：将纯镁及微弧氧化、二水磷酸氢钙两种涂层后的纯镁浸提液与抗凝稀释兔血接触,阴性对照组用为生理盐水,阳性对照为蒸馏水。混匀后离心,用分光光度计测定其上清液的A值,计算溶血率。 结果与结论：未经处理的纯镁浸提液组溶血率为52.34%,微弧氧化涂层后的纯镁浸提液组溶血率为0.32%,二水磷酸氢钙涂层后的纯镁浸提液组溶血率为0.14%,阴性对照组溶血率为0,阳性对照组溶血率为100%。提示未经处理的纯镁出现了较严重的溶血现象,涂层后的纯镁血液相容性良好,溶血率小于5%,符合国家标准。     

镍钛合金表面氧化处理对L-929细胞凋亡相关基因bax/bcl-2 mRNA表达的影响

背景：镍钛形状记忆合金用于人体最大的问题是合金受到腐蚀后释放出有毒的Ni2+离子,采用各种不同的方法在合金表面制备TiN、TiO2、HA等保护层,可有效抑制Ni离子的溶出,改善其生物相容性。 目的：在镍钛形状记忆合金表面制备氧化涂层观察对其生物相容性的影响。 方法：将NiTi-SMA板材合金表面进行氧化处理。用10%HF+40%HNO3+50%H2O进行酸洗,丙酮中超声波清洗,干燥,在H2O2溶液中氧化,再经清洗、干燥、灭菌、浸提等处理。L-929细胞体外培养,实验分为阴性对照组：培养液培养;表面氧化组：面氧化处理NiTi-SMA浸提液培养;未处理组：未经处理NiTi-SMA浸提液培养。采用实时反转录聚合酶链反应法检测细胞凋亡相关基因bax/bcl-2 mRNA表达的变化。 结果与结论：Bax及bcl-2mRNA 表达阴性对照组均高于表面氧化组和未处理组,而bax/bcl-2比值阴性对照组低于表面氧化组和未处理组,上述结果均具有显著性意义(P < 0.01),表面氧化组和未处理组之间bax及bcl-2 mRNA 表达及bax/ bcl-2比值均无显著性意义(P > 0.05)。结果提示,镍钛合金浸提液由于镍离子的释放,可引起L-929细胞的bax及bcl-2 mRNA 表达改变,bax及bcl-2mRNA 表达的检测可能成为评价生物材料生物相容性的重要指标。 关键词：镍钛形状记忆合金;表面氧化;细胞凋亡;生物相容性;医用智能高分子材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.12.014     

新型抗菌不锈钢微螺钉种植体的细胞毒性分析

背景：降低不锈钢微螺钉种植体的脱落率,开发新型的抗菌材料,可以从根本上预防种植体周围炎的发生。 目的：通过体外细胞培养法评价新型抗菌不锈钢种植体的细胞毒性。 方法：将待检试件(抗菌不锈钢、医用不锈钢、医用纯钛)制备成15 mm×10 mm×3 mm的长方体,表面逐级抛光后,无水乙醇脱脂、超声清洗并行高温高压消毒。将各试件以3 cm2/mL的比例浸泡于DMEM高糖培养基中置于37 ℃温箱内96 h,微孔滤膜过滤除菌。实验设0.64%的苯酚培养液作为阳性对照组及空白DMEM培养基阴性对照组。倒置相差显微镜观察MG63细胞在各试件浸提液中的生长情况,通过MTT实验得出细胞在培养24,48,72,96,120 h后的吸光度值,并计算其相对增殖率评价抗菌不锈钢的细胞毒性。 结果与结论：①培养24 h,阳性对照组细胞形态异常呈空泡状、其余各组细胞贴壁生长良好。②培养48 h后,随着作用时间的延长,阳性对照组细胞表现出明显的中毒形态,其余各组细胞生长旺盛,医用不锈钢及抗菌不锈钢组开始出现少量细胞核固缩。③3组试件吸光度值由高到低依次为医用纯钛、抗菌不锈钢、医用不锈钢,但3者之间差异无显著性意义。④在观察期医用纯钛组、医用不锈钢组、抗菌不锈钢组细胞毒性等级均为0级。结果表明抗菌不锈钢毒性等级与医用不锈钢和医用纯钛相同,符合口腔正畸材料的临床应用要求。 关键词：抗菌不锈钢;细胞毒性;MTT;种植体;浸提液;生物材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.16.017