肝癌大鼠在体应用济南假单胞菌苗后单核巨噬细胞的抗肝癌细胞作用

肝癌大鼠在体应用济南假单胞菌苗后单核巨噬细胞的抗肝癌细胞作用顾云娣，白咸勇，成令忠，朱继红，钟翠平（上海医科大学基础医学院组织胚胎学教研室２０００３２）生物制剂已广泛用于肿瘤免疫治疗，如干扰素（ＩＦＮ）、白细胞介素－２（ＩＬ－２）、肿瘤坏死因子（ＴＮ...     

免疫制剂对肝癌大鼠单核巨噬细胞抑人肝癌细胞增殖作用的影响

以ＥＤＮ诱发大鼠实验性肝癌，同时连续１２周分别腹腔注射干扰素α－２ｂ，卡介苗，济南假单胞菌苗和ＩＦＮ和ＢＣＧ二者联用，对照组给予生理盐水。在诱癌过程第８，１２，１６周从同只大鼠体内分离出高纯度的腹腔巨噬细胞，血单核细胞，肺巨噬细胞和脾巨噬细胞，并分别与人肝癌细胞联合培养，采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定免疫制剂在４种效应细胞抑人肝癌细胞增殖作用的影响。     

济南假单胞菌苗对肝癌大鼠枯否细胞释放TNF和IL-1的影响

近些年来对肝癌患者越来越多地应用免疫治疗,常用的有ＩＦＮ、ＩＬ－２、ＴＮＦ等。肝枯否细胞（ＫＣ）对肝癌的发生和发展起重要的监视作用。本室曾报道济南假单胞菌苗（ＰＪＶ）能使正常大鼠及肝癌大鼠的ＫＣ体积增大,数量增多及抗癌细胞作用增强［１,２］。本实验进...     

干扰素和卡介苗对肝癌大鼠单核巨噬细胞释放TNF的影响

目的：观察干扰素和卡介苗对肝癌大鼠单核巨噬细胞释放ＴＮＦ的影响，方法：以二乙基亚硝胺（ＤＥＭ）诱发大鼠肝癌，正常大鼠和肝癌大鼠分别腹腔注射干扰素（ＩＦＮα－２ｂ）、卡介苗（ＢＣＧ）或二者联用。从各组正常大鼠和肝癌大鼠体内分离出高纯度的血单核细胞、肺、脾和腹腔内的巨噬细胞，体外分别与人肝癌细胞联合培养，以ＥＬＩＳＡ酶联反应分别测定培养液中的ＴＮＦ含量。从未用免疫制剂的肝癌大鼠体内分离出高纯度的血单核     

双特异性单克隆抗体介导的单核—巨噬细胞抗肝癌作用

研究双特异性单克隆抗体介导的单核－巨噬细胞抗肝癌作用。方法采用化学交联法，用异型化学交联剂Ｎ－琥珀酰亚氨基－３－，将具有高亲和性的抗肝癌单抗ＨＡｂ１８Ｆ２与抗单核－巨噬细胞的单抗ＭＡｂ７Ｆ２联结双特异性单抗ＨＡｂ１８Ｆ２－Ｍａｂ７Ｆ２，经ＦＰＬＣ Ｓｅｐｈａｃｒｙ１ Ｓ－２００纯化。     

双特异单克隆抗体介导的人单核－巨噬细胞对肝癌细胞的杀伤作用

目的：证实双特异性单克隆抗体在肝癌导向治疗，尤其是细胞免疫治疗方面的作用．方法：用化学交联剂ＳＰＤＰ将抗肝癌单克隆抗体ＨＡｂ１８与抗单核－巨噬细胞单克隆抗体ＭＡｂ７联结成双特异抗体ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７；用流式细胞仪证实其双特异性；软琼脂培养法证明其对肝癌细胞的导向杀伤作用．结果：ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７具有特异性地结合肝癌细胞及单核－巨噬细胞的双重特性；软琼脂培养结果表明：ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７实验组较对照组克隆形成率明显降低（Ｐ＜０．０１）．结论：ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７可明显提高单核巨噬细胞对肝癌细胞的杀伤作用．     

双特异性单克隆抗体介导的单核－巨噬细胞抗肝癌作用

目的研究双特异性单克隆抗体介导的单核－巨噬细胞抗肝癌作用。方法采用化学交联法，用异型化学交联剂Ｎ－琥珀酰亚氨基－３－（２－二硫吡啶）丙酸酯（ＳＰＤＰ），将具有高亲和性的抗肝癌单抗ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２与抗单核－巨噬细胞的单抗ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）２联结成双特性单抗ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２－ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）２，经ＦＰＬＣＳｅｐｈａｃｒｙ１Ｓ－２００纯化。用间接免疫荧光法鉴定其特性。结果ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２及ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２－ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）２对肝癌细胞间接免疫荧光染色阳性，ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）２及ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２－ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）２对单个核细胞染色为阳性。而这些抗体对肺腺癌细胞均呈阴性；单纯ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２无导向单核－巨噬细胞杀伤肝癌细胞作用，ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２－ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）２及ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）２均可介导单核－巨噬细胞对肝癌细胞起杀伤作用，并且前者强于后者。结论ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ′）２－ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ′）是一种具有双特异性的单克隆抗体，可以提高人单核－巨噬细胞杀伤肝癌细胞的作用。     

双特异单克隆抗体介导的人单核—巨噬细胞对肝癌细胞的杀伤作用

证实双特异性单克隆抗体在肝癌导向治疗，尤其是细胞免疫治疗方面的作用。方法：用化学交联剂ＳＰＤＰ将抗肝癌单克隆抗体ＨＡｂ１８与抗单核－巨噬细胞单克隆抗体ＭＡｂ７联结成双特异抗体ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７，用流式细胞仪证实其双特异性；软琼脂培养法证明其对肝癌细胞的导向杀伤作用。结果ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７具有特异性地结合肝癌细胞及单核－巨噬细胞的双重特性。软琼脂培养结果表明：ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７实验组较对照组克     

粉被虫草抗紫外线及对巨噬细胞吞噬功能影响的初步研究

目的:研究粉被虫草抗紫外线及对巨噬细胞吞噬功能的影响。方法:采用孔雀绿比色法测定粉被虫草菌丝体水提物在体外对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。同时采用紫外线辐射的方法测定其对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、枯草芽胞杆菌抗紫外线辐射的保护效应。结果:粉被虫草菌丝体水提物在较高浓度下能够抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,但在较低浓度下却能拮抗氢化可的松对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的抑制;对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、枯草芽胞杆菌抗紫外线辐射具有一定的保护效应。结论:粉被虫草菌丝体水提物能调节巨噬细胞吞噬功能和抗紫外线辐射。     

济南假单胞菌苗胸腔注入治疗癌性胸腔积液

本文应用济南假单胞菌苗胸腔内注入治疗癌性胸腔积液２０例，取得了较好的疗效。临床实践表明。该菌苗能迅速控制胸水增长，周身副作用小，是目前治疗癌性胸腔积液较理想的方法。     

长白忍冬药理实验研究

目的：对长白忍冬进行药理研究。方法：（1）采用小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验，观察对鼠免疫功能的作用。（2）采用角叉菜胶致鼠发热和三联菌苗引起家兔发热观察其解热作用。（3）通过长白忍冬对大鼠角叉菜胶足肿胀和大鼠蛋白性足肿胀的作用做抗炎实验。结果：长白忍冬水煎液、口服液、注射液对角叉菜胶、三联菌苗致热有不同程度的退热作用，对蛋清、角叉菜胶、二甲苯所致足肿用也有一定的抑制作用。对小鼠中枢神经系统、消化系统，对犬、兔的基本生理无影响。结论：长白忍冬有清热解毒作用，可以代替金银花用于临床并安全使用。     

济南假单胞菌疫苗对大鼠肝枯否细胞数量和体积的影响

给大鼠腹腔注射济南假单胞菌疫苗(PJV),以墨汁吞噬实验及溶菌酶免疫组织化学法显示肝枯否细胞(KC),用图象分析仪测定KC的数量和面积。结果显示:PJV可诱发KC扩增,使溶菌酶阳性KC增加46％,吞噬墨汁后KC数也增多。细胞面积也增大,溶菌酶阳性KC面积平均增大70.4％。结果提示,PJV可使细胞吞噬活性和杀菌功能增强。PJV有可能具有类似卡介苗(BCG)和干扰素(IFN)等免疫制剂的作用,可增强KC抗肝癌细胞效应,并用于肝癌患者免疫治疗。     

双特异抗体介导的人单核—巨噬细胞对荷人肝癌裸鼠的抑制作用

观察双特异性单克隆抗体介导的人单核－巨噬细胞在裸鼠体内对肝癌生长的抑制作用。用化学交联法制备双特异性单克隆抗体ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７及ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ）２－ＭＡｂ７Ｆ（ａｂ＇＿２，并将其与单核－巨噬细胞－同注入荷人肝癌裸鼠体内，观察肿瘤体积的变化。     

细胞融合肝癌疫苗体内抗肿瘤特异性及T细胞作用的初探

目的：观察大鼠ＢＥＲＨ－２肝癌细胞与自体激活Ｂ细胞的融合细胞作为疫苗抗肿瘤作用的特异性，并观察该肝癌疫苗体内抗肿瘤作用与Ｔ细胞亚群的关系。方法：（１）应用聚乙二醇（ＰＥＧ）融合大鼠ＢＥＲＨ－２肝癌细胞与激活Ｂ细胞制备细胞融合大鼠肝癌疫苗；（２）事先经该肝癌疫苗免疫的大鼠分别接种肝癌ＢＥＲＨ－２细胞和大鼠膀胱癌ＮＢＴ－Ⅱ细胞，观察该肝癌疫苗抗肿瘤作用的特异性；（３）该肝癌疫苗免疫大鼠之前或之后，以小鼠抗大鼠ＣＤ４单抗或抗ＣＤ８单抗多次注射，以清除大鼠ＣＤ４＋或ＣＤ８＋Ｔ细胞，随后观察大鼠的成瘤性。结果：ＢＥＲＨ－２细胞不能在经细胞融合大鼠肝癌疫苗免疫的大鼠体内致瘤，而ＮＢＴ－Ⅱ细胞可致瘤；事先清除ＣＤ４＋或ＣＤ８＋Ｔ细胞的大鼠经细胞融合大鼠肝癌疫苗免疫后仍能被肝癌ＢＥＲＨ－２细胞致瘤；而经该肝癌疫苗免疫的大鼠，清除了ＣＤ４＋细胞后不能被ＢＥＲＨ－２细胞致瘤，清除了ＣＤ８＋细胞后则可被ＢＥＲＨ－２细胞致瘤。结论：细胞融合大鼠肝癌疫苗有特异性抗肿瘤作用，这种作用与ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞有关     

金龙利咽口服液解热镇痛的研究

目的：研究金龙利咽口服液抗炎、解热、镇痛等药理作用，方法：观察金龙利咽口服液对小鼠腹腔毛细血管通透性升高，蛋清和甲醛所致大鼠足肿胀，大鼠棉球肉芽肿胀程度的作用，探讨该口服液对小鼠痛阈及三联菌苗所致新西兰兔发热的影响。结果：（1）该口服液对小鼠腹腔毛细血管通透性升高，蛋清和甲醛所致大鼠足肿胀、大鼠棉球肉芽肿亦有不同程度的抑制作用；（2）该口服液提高小鼠的痛阈、对伤寒、副伤寒甲乙三联菌苗所致新西兰兔发热体温有解热作用。结论：金龙利咽口服液具有抗炎、解热、镇痛等药理作用。     

还原型谷胱甘肽对DEN诱发大鼠肝癌的预防作用

目的：研究还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）对化学致癌原Ｎ－二乙基亚硝胺（ＤＥＮ）诱致雄性Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠肝癌的保护作用。方法：雄性 ＳＤ大鼠 ７５只分成 ７组，每天 ＤＥＮ ８ｍｇ／ｋｇ ｉ．ｇ 诱发大鼠肝癌模型，分别不同途径预防性给予ＧＳＨ。结果：对照组１６ｗ后大鼠的肝脏癌变率为７６．５％，伴有镜检典型的弥漫性癌结节、畸型核分裂和重度肝硬化及胆管炎，于 １２ｗ及 １６ｗ ＡＫＰ及 γ－ＧＴ明显增高；同剂量 ＤＥＮ １６ｗ伴以 ＧＳＨ １５０ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ、 １０００ｍｇ／ｋ（ｉｐ）及 １０００ｍｇ／ｋｇ（ ｉｇ） １６ｗ，明显降低癌变率，分别降为１１．１％、１６．７％、１６．７％及１８．２％；ＧＳＨ大剂量组大鼠未癌变，肝组织仅见少量纤维增生，ＡＫＴ及γ－ＧＴ值与正常大鼠无显著差异；ＤＥＮ诱癌１２ｗ后用ＧＳＨ治疗４ｗ对大鼠肝脏癌变率无明显防治效果。结论：早期用外源性 ＧＳＨ对 ＤＥＮ诱发大鼠肝癌有预防作用，ＤＥＮ诱发肝癌形成后用ＣＳＨ无效。     

鱼腥草素钠增强妥布霉素抗铜绿假单胞菌生物被膜作用及抗菌协同作用

目的：研究鱼腥草素钠增强妥布霉素抗铜绿假单胞菌生物被膜的作用。方法：微量倍比稀释法测定鱼腥草素钠、妥布霉素对铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度（MIC）,棋盘稀释法测定两者联合抗菌作用,结晶紫染色法测定单药及联合用药对铜绿假单胞菌生物被膜的最小抑膜浓度（SMIC）,扫描电镜下观察药物对铜绿假单胞菌生物被膜形态的影响,采用倾注平板法进行菌落数计数。结果：鱼腥草素钠对铜绿假单胞菌的MIC为512μg/mL,妥布霉素对铜绿假单胞菌的MIC为4μg/mL,两药联合后MIC分别为64μg/mL和1μg/mL,分级抑菌浓度指数（FIC）为0.375,提示两药协同作用明显。妥布霉素对铜绿假单胞菌生物被膜SMIC50黏附期为8μg/mL,早期生物被膜阶段为16μg/mL,成熟期生物被膜阶段为32μg/mL,两药联合后铜绿假单胞菌生物被膜SMIC50黏附期为8μg/mL,早期为0.5μg/mL,成熟期为8μg/mL,鱼腥草素钠对妥布霉素抗铜绿假单胞菌生物被膜有增强作用。结论：鱼腥草素钠与妥布霉素抗菌协同作用明显,鱼腥草素钠对妥布霉素抗铜绿假单胞菌生物被膜有增强作用。     

门静脉化学栓塞治疗肝癌的实验研究

目的：应用大鼠单叶肝癌模型，研究门静脉支化学栓塞对肝癌的治疗作用。方法：经大鼠门静脉种植腹水肝癌细胞，制作大鼠单叶肝癌模型，开腹向门静脉支内注入新开发的化学栓塞物质。术后观察大鼠生存天数、体内化疗药浓度及肝功能变化，并进行了组织学观察。结果：栓塞后的肝癌大鼠生存天数较不栓塞大鼠明显延长，化疗药选择地集聚于癌灶内，肝功能损伤轻微。组织学观察到确切的门静脉支栓塞及癌灶周边部的部分坏死效果。结论：门静脉支化学栓塞对肝癌有确切的治疗作用，可以进一步在临床上开展     

维拉帕米对人单核巨噬细胞蛋白质、DNA、RNA合成的影响

目的：观察维拉帕米对人单核巨噬细胞ＤＮＡ、ＲＮＡ及蛋白质合成过程的影响。方法：维拉帕米与人单核巨噬细胞孵育２４ｈ或４ｄ，测定细胞３Ｈ－ＴｄＲ、３Ｈ－ＵＲ、３Ｈ－Ｌｅｕ掺入人单核巨噬细胞状态及细胞内蛋白质含量。结果：维拉帕米在低浓度时对ＤＮＡ、ＲＮＡ合成有抑制作用，呈浓度依赖性；高浓度时作用明显，对ＲＮＡ作用较ＤＮＡ显著（Ｐ＜０．０５）；对蛋白质合成在高浓度时有抑制作用。维拉帕米与成熟过程中人单核巨噬细胞作用４ｄ，细胞蛋白含量显著降低（Ｐ＜０．０５），并呈浓度依赖性。结论：此作用可能为维拉帕米抑制细胞生长及动脉粥样斑块形成逆转心肌肥厚的机制之一。     

佳代胞治愈乳糜胸1例

佳代胞治愈乳糜胸１例周健青岛铁路医院２６６００２患者女３８岁，胸痛胸闷２月余，在外院胸穿为乳糜胸水，诊断左侧乳糜胸入院。患者有胸部挤压史，“脾破裂”，“脾切除术”史。入院后每周一次胸腔注射ＰＪＶ（济南假单胞菌苗，又称佳代胞）共３次、第一次抽乳白色液１...