CBS在小鼠卯泡发育过程中的表达模式及其功能初探

目的：研究调节同型半胱氨酸水平的关键酶——胱硫醚β合成酶（cystathionine-β-synthase，CBS）在卵母细胞和卵泡发生过程中的动态表达模式及潜在的生物学作用。方法：以体外培养的卵泡以及去除卵泡中卵母细胞后培养的颗粒细胞为载体系统，利用半定量RT-PCR的方法，研究不同时期卵泡以及颗粒细胞中CBS的动态表达模式。结果：在各级卵泡的颗粒细胞中均有高水平的CBS表达，用完整卵泡进行的表达研究表明，各级卵泡中也都有CBS高水平的表达，同时期的颗粒细胞与完整卵泡相比，前者具有更高水平的CBS表达；而不同发育阶段的卵母细胞中均未见CBS表达。结论：CBS在卵泡和卵母细胞的生长、发育和成熟过程中起着重要的作用，其中CBS在卵泡和卵细胞中不同的表达模式提示cBs对卵母细胞发育的影响可能是通过卵泡细胞与卵母细胞的相互作用而实现的。     

PCOS患者卵泡液内IGF-Ⅰ的水平对卵母细胞成熟的影响

目的:探讨PCOS患者卵泡液内胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)的水平与卵母细胞发育成熟的关系。方法:选取因PCOS接受IVF治疗的患者41例为PCOS组、同期因输卵管因素接受治疗的患者37例为对照组。在取卵日根据卵泡直径进行分组,分为≤14mm组和>14mm组,每例患者留取不同直径3～4个卵泡的卵泡液。分别检测PCOS组和对照组患者卵泡液内IGF-Ⅰ的水平,并分析其与卵母细胞成熟和受精的关系。结果:PCOS组IGF-Ⅰ、雌二醇(E2)、睾酮(T)的水平显著高于对照组(P<0.05),与卵泡直径不相关。在卵泡直径≤14mm组,PCOS患者卵母细胞成熟率和受精率明显高于对照组(P<0.05)。在卵泡直径>14mm组,PCOS组与对照组间卵母细胞成熟率和受精率无差异性。PCOS组卵泡液内IGF-Ⅰ水平和E2、T呈正相关(P<0.05)。结论:PCOS患者促排卵过程中卵泡液内IGF-Ⅰ水平的升高与卵泡直径无相关性,而卵泡液内高IGF-Ⅰ水平可影响PCOS患者小于14mm卵泡的卵母细胞成熟和受精。     

胰岛素样生长因子—Ⅰ对卵母细胞成熟度,受精力及卵裂力的影响

目的：探讨胰岛素样生长因子－Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）对卵巢功能的调节作用。方法：体外培养小白鼠未成熟卵母细胞、成熟卵母细胞和精子及受精卵。实验组加入不同浓度的ＩＧＦ－Ⅰ，对照组不加ＩＧＦ－Ⅰ。观察卵母细胞成熟度、受精率及卵裂率。结果：实验组小白鼠卵母细胞成熟度、受精率及卵裂率均大于对照组，差异有极显著性及显著性（Ｐ＜０．０１及Ｐ＜０．０５）。实验组及对照组受精卵均有不均匀分裂和细胞碎片出现，但在同一培养时间内，差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论：ＩＧＦ－Ⅰ可促进体外培养的小白鼠卵母细胞成熟度及受精卵的卵裂过程，提高受精率；对受精卵和胚胎无明显不良影响。     

骨形态发生蛋白-15基因与卵巢早衰关系的研究进展

骨形态发生蛋白-15(BMP-15)是重要的卵母细胞源性生长因子。它在卵泡发育早期以较低水平特异性地表达于卵巢,影响卵泡刺激素(FSH)对颗粒细胞甾体激素分泌水平的调控,是与颗粒细胞增生、FSH依赖性细胞分化相关的卵母细胞特异性调节因子,对卵泡的早期发育极其重要。目前研究认为其基因突变可能是卵巢早衰发生、发展的机制之一。     

胰岛素样生长因子-Ⅰ与妊娠关系的研究进展

胰岛素样生长因子—Ⅰ(IGF—Ⅰ)是一种重要的组织生长因子，具有类胰岛素及促有丝分裂的作用。IGF—Ⅰ通过与其受体结合产生生物学效应，并受IGF—Ⅰ结合蛋白调节。正常妊娠母血及脐血IGF-Ⅰ水平均有升高，而在各种病理妊娠其变化不同，提示IGF—Ⅰ对妊娠及其相关疾病的发生发展有重要意义。     

EGF与胚胎生长发育

表皮生长因子(EGF)对胚胎生长发育有重要作用，通过与胎盘、胎儿各组织器官细胞表面的EGF受体结合调节有丝分裂和其它细胞活动。EGF可促进胎盘细胞增殖、增加绒毛营养摄人、促进滋养细胞合体化及增加胎盘分泌功能；对卵母细胞成熟和受精环节有重要促进作用，可能与早期胚胎生长调节和植人及体外受精结局有关；EGF对胎儿肺、肝、肠、胃、肾上腺等多组织器官生长和成熟有明显促进作用，参与胎儿性别分化调节，缺乏或不足可引起胎儿官内生长迟缓。     

从人排卵前卵泡分离得的卵丘细胞能分泌甾体激素

排卵前的LH峰促使哺乳类的卵母细胞复始并完成成熟分裂.与此同时,卵母细胞周围的颗粒细胞,即卵丘细胞也发生特有的成熟性变化.近年有报道,使用形态学标准可发现人类卵丘细胞的成熟与卵母细胞的成熟密切相关.Lopata等提出,离体培养条件下,人卵母细胞周围的放射冠细胞能分泌孕酮和雌激素.本文旨在进一步研究以下问题:(1)由完整的人卵丘-卵母细胞复合体分泌的孕酮、睾酮和雌二醇硬其与体外受精作用的关系;(2)观察由单层卵丘细胞培养所分泌的孕酮.作者还试图弄清卵丘细胞的甾体分泌能力与某些临床指标,如诱导排卵方式之间的关系.选择了32例因输卵管疾病而致不育的妇女作为     

颗粒细胞和卵泡液因子在评估卵母细胞质量中的价值

正确评估卵母细胞的质量对于改善人类辅助生殖技术的治疗结局有重要意义。卵母细胞的评估方法有多种,其中,颗粒细胞和卵泡液因子在评估卵母细胞质量中的作用备受关注。研究显示颗粒细胞的凋亡率与卵母细胞的发育能力呈负相关;卵泡液中的雌激素水平或雌激素与雄激素(或孕激素)的比率、胰岛素样生长因子(IGF)和胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)的表达与卵母细胞的质量有关,而卵泡液中的其他因子,如瘦素、抗苗勒激素等与卵母细胞质量之间的关系尚不明确。卵丘细胞的基因表达、卵泡液因子及代谢组学的进一步研究,有望成为评估卵母细胞质量的重要工具。     

哺乳动物黄体生成素(LH)峰效应由颗粒细胞向卵母细胞传递的分子通路

血液中黄体生成素(luteinizing hormone,LH)在排卵前形成一个极大的峰值,LH与壁层颗粒细胞中的LH受体(LHR)结合诱导类表皮生长因子(EGF)的表达,通过自分泌和旁分泌的作用激活颗粒细胞与卵丘细胞中的EGF受体(EGFR)、大鼠肉瘤病毒致癌基因(KRAS)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2),激活的ERK1/2诱导表达前列腺素合成酶2(PTGS2)、类固醇合成快速调节蛋白(STAR)、透明质酸合成酶2(HAS2)、肿瘤坏死因子α诱导蛋白6(TNFAIP6)产生的前列腺素又和卵丘细胞上的PTGER2结合,激活p38MAPK,这一LH作用的信号转导通路最终刺激卵丘扩展卵母细胞成熟并最终排卵。     

肝细胞生长因子与妊娠高血压综合征

滋养细胞功能异常导致胎盘血管重铸障碍是妊娠高血压综合征(PIH)发病的重要环节，肝细胞生长因子(HGF)是胎盘局部具有调节滋养细胞增殖、迁移等生物学功能的细胞因子，体内外实验显示PIH患者胎盘HGF表达显著下降，胎盘HGF分泌的改变可能与PIH发病有关。     

丁内酯-Ⅰ对小鼠卵母细胞体外成熟及发育能力的影响

目的:观察丁内酯-Ⅰ(BL-Ⅰ)对小鼠未成熟卵的体外成熟及发育能力影响。方法:用不同浓度的BL-Ⅰ培养液培养小鼠未成熟卵3h或6h,观察卵母细胞生发泡破裂(GVBD)的发生率。将6.25μmol/L和100μmol/L的BL-Ⅰ培养液分别培养未成熟卵3h和6h,以抑制其核的成熟,然后移入成熟培养液继续培养成熟,行体外受精,观察受精率和胚胎发育至囊胚的能力,并与对照组进行比较。结果:BL-Ⅰ培养液培养3h时,6.25μmol/LBL-Ⅰ就可抑制未成熟卵发生GVBD;培养6h时,100μmol/L才能抑制未成熟卵的GVBD。两种情况下,各组间的成熟率无差异。6.25μmol/L组卵母细胞的受精率(83.1%)和囊胚形成率(25.4%)虽低于体内成熟组(93.3%和46.4%),但显著地高于体外成熟组(59.9%和4.9%)。结论:BL-Ⅰ能可逆性地抑制小鼠未成熟卵的核成熟且不影响其成熟能力,适量的BL-Ⅰ对核成熟的短暂性抑制可显著提高小鼠未成熟卵的发育能力。     

多囊卵巢综合征患者血清胰岛素样生长因子-Ⅰ的检测及临床意义

胰岛素样生长因子系统 (IGFs)是卵巢局部诸多调节系统中重要的因素之一,以自分泌、旁分泌方式参与卵泡发育、优势卵泡选择及排卵。胰岛素样生长因子 I(IGF I)可以调节卵泡发育及卵巢性激素的合成 [1, 2]。因此,IGF I在多囊卵巢综合征(PCOS)病理生理机制中的作用受到关注。本研究对 36例PCOS患者血清IGF Ⅰ水平进行测定,旨在探讨IGF Ⅰ在PCOS发病中可能的作用机制。1　资料与方法1. 1　研究对象　2002年 1月至 2002年 11月就诊于我院PCOS患者 36例,年龄 19 ~34岁,平均 ( 27 86±3 55 )岁。其中原发不孕 28例,继发不孕 5例,…     

抗苗勒管激素及其Ⅱ型受体与卵母细胞成熟的关系

目的:探讨抗苗勒管激素(AMH)及其Ⅱ型受体(AMHⅡ)与卵母细胞成熟的关系.方法:选取因男性因素不孕进行卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的32例患者,于取卵日采集3ml静脉血,收集卵泡液及卵丘颗粒细胞,记录获卵数、卵子成熟度.采用ELISA法测定血清及卵泡液中的AMH水平;Real-time PCR测定卵丘颗粒细胞中AMHⅡ型受体(AMHRⅡ)mRNA的相对表达.结果:卵泡液中的AMH水平[(3083.78±682.19)pg/ml]显著高于血清[(1012.29±423.21) pg/ml] (P＜0.001);卵泡液中AMH水平与血清AMH水平/获卵数呈正相关(P=0.045).MⅠ期卵母细胞卵泡液中的AMH水平显著高于MⅡ期(P=0.000);MⅠ期卵丘颗粒细胞中的AMHRⅡmRNA的表达量显著高于MⅡ期(P=0.000).结论:AMH可能通过Ⅱ型受体抑制卵母细胞成熟;血清AMH/获卵数可作为预测卵母细胞成熟度的参考因子.     

人卵巢颗粒细胞生长液对小鼠卵母细胞体外成熟的影响

卵母细胞体外成熟 (invitromaturation ,IVM)技术是近年来研究的热点 ,但IVM的卵受精和胚胎发育能力差 ,提示IVM培养条件有待于进一步研究。本研究探讨颗粒细胞生长液对卵母细胞IVM和发育潜能的影响 ,现将结果报道如下。一、材料和方法1 .材料来源 :(1 )人卵巢黄素化颗粒细胞来自 2 0 0 2年 1 0月在天津医科大学总医院生殖中心接受体外受精 胚胎移植(IVF ET)治疗的 4例患者的卵泡液。 (2 )未成熟卵母细胞来自雌性昆明白小鼠 ,周龄 8～ 1 0周。2 .方法 :(1 )获取颗粒细胞生长液 :从卵泡液中分离颗粒细胞[1 ] ,用含 1 0 %胎牛血清、2 …     

转化生长因子-α和myc癌基因蛋白在卵泡发育与黄体形成及退化中的表达

目的：探讨转化生长因子（ＴＧＦ）－α和ｍｙｃ癌基因蛋白（ｍｙｃ蛋白）对人卵巢卵泡发育的局部调控机理。方法：收集３６例月经规则、因不同妇科情况切除的子宫及卵巢标本，采用免疫组织化学方法，研究ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白在卵巢组织中的表达。结果：卵母细胞在始基卵泡阶段，ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白的表达呈强阳性，随着卵泡的发育与成熟表达逐渐减弱。在颗粒细胞中，ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白表达均出现在窦前卵泡阶段，随卵泡的增大与成熟，ＴＧＦ－α表达逐渐增强。闭锁卵泡中ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白表达仅限于卵泡膜细胞。在晚期退化的黄体中，ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白表达均局限于黄体中央瘢痕周围的黄体膜细胞。结论：ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白作为卵巢内局部的调节因子，通过自分泌和旁分泌途径，协同参与人卵母细胞最初的生长、卵泡细胞的增殖分化和黄体细胞凋亡的过程。     

人绒毛膜匀浆及人脐静脉内皮细胞对人未成熟卵母细胞体外成熟的影响

目的 :研究人早孕绒毛膜匀浆 (UPHC)和人脐静脉内皮细胞 (ECHUV)对人未成熟卵母细胞体外成熟的影响及其作用机理。方法 :应用UPHC培养系统和ECHUV单层细胞培养系统分别培养人未成熟卵母细胞 ,观察卵母细胞体外成熟情况 ;用ELISA方法检测各培养系统中表皮生长因子 (EGF)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)和血管表皮生长因子 (VEGF)的浓度。结果 :人未成熟卵母细胞在UPHC和ECHUV培养系统中的成熟率分别为 4 1.0 %和 4 5 .2 % ,明显高于对照组的 14 .3% (P <0 .0 5 ) ;UPHC培养系统和ECHUV培养系统中 ,EGF的浓度分别为 5 2 .6 5± 7.37pg/ml和 5 8.14± 3.0 3pg/ml ,GM CSF的浓度分别为 11.81± 3.76pg/ml和 9.2 0± 2 .5 9pg/ml ,VEGF的浓度分别为 6 1.4 3± 11.38pg/ml和 2 5 6 .5 4± 9.15pg/ml ,均显著高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;ECHUV组的VEGF浓度又显著高于UPHC组 (P <0 .0 1) ;<30岁者卵母细胞体外成熟率为 4 2 .6 % ,显著高于 30～ 4 0岁和 >4 0岁的 2 2 .2 %和 13.3% (P <0 .0 5 )。卵 冠 丘复合物体外成熟率为 37.9% ,显著高于裸卵的 2 4 .3% (P <0 .0 5 )。结论 :UPHC和ECHUV促进人未成熟卵母细胞体外成熟 ,其作用与EGF、GM CSF、VEGF有关 ;年龄和卵丘细胞是卵母细胞体外成熟的影响因素。     

卵巢颗粒细胞中卵泡刺激素的受体后信号传导通路

卵泡刺激索(FSH)是下丘脑-垂体-性腺轴中的关键激素,通过与颗粒细胞的FSH受体(FSHR)结合,发挥卵泡募集、促卵泡生长和卵母细胞成熟的作用,并与黄体生成素(LH)一起,介导排卵过程,促进和维持正常的性腺发育和生殖功能.研究颗粒细胞中FSH与FSHR结合后的信号传导通路(即受体后信号传导通路)机制,对了解颗粒细胞在卵泡发育过程中的作用以及对治疗不孕、不育药物的研制具有重要意义.本文将对颗粒细胞中FSH的受体后信号传导及功能调节的分子学机制的研究进展做一综述.     

人类卵巢胰岛素样生长因子系统与多囊卵巢综合征

多囊卵巢综合征 (PCOS)的发病机制涉及下丘脑、垂体、肾上腺、胰岛、脂代谢异常等 ,卵巢局部调节失衡也起一定的作用。PCOS患者卵巢泡膜细胞生成雄激素过多 ,与高黄体生成激素、高胰岛素有关。卵巢颗粒细胞不能继续增殖及合成雌二醇 ,导致优势卵泡选择受阻。但PCOS患者卵泡液中促卵泡激素、胰岛素样生长因子 (IGF) Ⅰ水平正常。颗粒细胞在体外对促卵泡激素、IGF Ⅰ反应不低 ,说明芳香化酶功能良好。因此提出 ,“PCOS患者卵泡局部存在促卵泡激素抑制物 ,阻断芳香化酶激活”的假说。本文拟介绍妇女生长激素 IGF Ⅰ轴、卵巢IGF系…     

雌孕激素对体外卵泡黄素化颗粒细胞分泌巨噬细胞集落刺激因子的影响

目的　探讨雌、孕激素对卵泡黄素化颗粒细胞 (颗粒细胞 )分泌巨噬细胞集落刺激因子(M CSF)的调节作用。方法　抽取接受卵母细胞单精子显微注射 (ICSI)的 12例妇女的颗粒细胞 ,在不同浓度 ( 0、1× 10 - 7、1× 10 - 6 、1× 10 - 5 、1× 10 - 4、1× 10 - 3 mol L)的雌二醇或孕酮作用下培养 72h ,采用酶联免疫吸附法测定颗粒细胞培养液中的M CSF含量。结果　颗粒细胞在雌二醇或孕酮为 0mol L(即无雌二醇或孕酮作用———基础状态 )的情况下培养 72h后 ,分泌一定量的雌二醇 [( 1 0 2± 0 2 3 )×10 - 7mol L]、孕酮 [( 1 0 0± 0 12 )× 10 - 5 mol L]和少量的M CSF[( 4 7± 15)ng L] ;在 1× 10 - 6 ～ 1× 10 - 3mol L浓度的雌二醇作用下 ,M CSF分泌增加 ,其分泌随雌二醇浓度的增加而增加 ,较基础状态分别增加 2 3、4 5、6 9和 7 9倍 ;在≥ 1× 10 - 6 mol L各浓度的雌二醇作用下 ,M CSF分泌与基础状态比较 ,差异均有显著性 (P均 <0 0 5) ;在 1× 10 - 7mol L浓度的雌二醇作用下 ,M CSF分泌与基础状态比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5) ;在 1× 10 - 7～ 1× 10 - 3 mol L浓度的孕酮作用下 ,M CSF分泌与基础状态比较 ,差异均无显著性 (P >0 0 5)。结论　雌二醇能促进颗粒细胞M CSF的分泌 ,孕酮对颗     

人卵母细胞在不同培养液下成熟与凋亡的比较性研究

为了解卵母细胞体外成熟与凋亡过程,进而提高卵母细胞体外成熟率.本文采自手术标本中卵巢及卵巢组织.吸取4～10mm卵泡.获得未成熟卵母细胞.用正交设计.于培养液中加入不同量组合的人绝经期促性腺激素(hMG)、卵泡液、颗粒细胞.在37℃.CO_2 5%培养箱中培养,并应用形态学观察和原位DNA片段末端标记(Tunel)检测卵母细胞的凋亡状况.结果:在本研究体外培养条件下能使未成熟卵母细胞成熟、受精,胚胎发育至早期胚泡(Blastocyst);以含hMG 0.15IU/ml卵泡液40%,颗粒细胞10~2/ml组合的培液培养卵母细胞的成熟率、受精率及印裂率最高,而凋亡率最低(P<0.05,P<0.005).结论:未成熟卵母细胞可在体外成熟、受精,并形成早期胚泡.