成纤维细胞与纤连蛋白粘附及其诱导的酪氨酸磷酸化蛋白在硬皮病原胶原基因表达中的作用

目的研究硬皮病成纤维细胞与纤连蛋白粘附 ,以及粘附诱导的酪氨酸磷酸化蛋白在成纤维细胞表达原胶原mRNA中的作用。方法将硬皮病成纤维细胞置于纤连蛋白包被的培养体系中粘附培养 ,运用RT PCR、免疫印迹法分别检测原胶原mRNA表达的变化及粘附诱导的酪氨酸磷酸化蛋白 ;并观察阻断酪氨酸磷酸化后 ,原胶原mRNA和酪氨酸磷酸化蛋白的变化。结果硬皮病成纤维细胞与纤连蛋白粘附 ,可诱导相对分子质量为98000、65000酪氨酸磷酸化蛋白生成 ,且原胶原 proα1(Ⅰ)mRNA的表达显著增加 ;经酪氨酸激酶抑制剂作用后 ,伴随着相对分子质量为98000、65000酪氨酸磷酸化蛋白的减少 ,原胶原proα1(Ⅰ)mRNA显著降低。结论成纤维细胞与纤连蛋白粘附 ,在硬皮病原胶原表达增加中具有重要作用 ,由粘附诱导的酪氨酸磷酸化是其中的一个重要环节。     

细胞外基质与成纤维细胞的相互作用及其在硬皮病中的意义

细胞外基质与成纤维细胞相互作用的主要表现为:细胞外基质调控成纤维细胞的增殖与分化、对成纤维细胞趋化作用、负反馈抑制成纤维细胞合成胶原。成纤维细胞表面介导细胞外基质-成纤维细胞相互作用的粘附分子主要是整合素β_1、β_3亚族,与多种细胞外基质共同具有的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列特异结合。硬皮病中成纤维细胞表面整合素α_1、α_3链表达较正常成纤维细胞明显增强;β_1整合素在皮损血管周围、淋巴样细胞聚集区及胶原束间明显增多;胶原和前胶原肽对成纤维细胞合成胶原的负反馈抑制在硬皮病时消失。细胞因子、转化生长因子-β、干扰素等对细胞外基质-成纤维细胞相互作用有调节作用。     

细胞外基质与成纤维细胞的相互作用及其在硬皮病中的意义

细胞外基质与成纤维细胞相互作用的主要表现为，细胞外基质调控成纤维细胞的增殖与分化，对成纤维细胞趋化作用，负反馈抑制成纤维合成胶原，成纤维细胞表面介导细胞外基质－成纤维细胞相互作用的粘附分子主要是整合素β１β３亚族，与多种细胞外基质共同具有的精氨酸－基氨酸－天冬氨酸序列特异结合，硬皮病中成纤维细胞表面整合素α１，α３链表达较正常成纤维细胞明显增强β１整合素在皮损血管周围，淋巴样细胞聚集区及胶原束间明     

系统性硬皮病患者成纤维细胞转化生长因子β 1与Ⅰ型胶原mRNA表达的研究

目的探讨系统性硬皮病成纤维细胞自身分泌的转化生长因子(TGF)β1是否影响Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)mRNA表达。方法采用核酸原位杂交和免疫印迹法分别测定培养的硬皮病和正常人成纤维细胞中COL1A1mRNA的表达和TGF-β1蛋白质的含量。结果硬皮病组成纤维细胞COL1A1mRNA(A值x±s为905.09±20.36)表达较对照组354.17±30.89明显增高。硬皮病组和对照组成纤维细胞的COL1A1mRNA表达均存在异质性,硬皮病组COL1A1mRNA高表达的成纤维细胞数x±s为27.33%±4.63%明显高于对照3.67%±1.20%,而对照组低COL1A1mRNA表达的成纤维细胞数62.33%±3.53%明显高于硬皮病组14.33%±4.91%。硬皮病组内各细胞株间,高、中、低胶原表达的细胞数差异无显著性。硬皮病组和对照组成纤维细胞中TGF-β1蛋白质表达差异无显著性。结论硬皮病成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA表达增多,这种表达增多与成纤维细胞自身合成TGF-β1的水平可能无关。     

阿维A对系统性硬皮病成纤维细胞胶原合成及Ⅰ型前胶原mRNA表达的影响

目的:明确阿维A对系统性硬皮病成纤维细胞胶原合成及Ⅰ型前胶原mRNA表达的影响。方法:原代培养系统性硬皮病(SSc)患者皮肤成纤维细胞(FB),使用不同浓度的阿维A(10~(-5)、10~(-6)、10~(-7)、10~(-8)mol/L)作用48 h,用羟脯氨酸法测定胶原的质量浓度,RT-PCR法Ⅰ型前胶原mRNA的表达。结果:阿维A实验组FB胶原合成及I型前胶原mRNA的表达较对照组减少,且均与阿维A呈浓度依赖性关系。结论:阿维A可能通过抑制FBⅠ型前胶原基因的表达减少胶原合成。     

辛伐他汀对体外培养系统性硬皮病患者的成纤维细胞增殖和胶原表达的影响

目的探讨辛伐他汀对系统性硬皮病患者皮肤成纤维细胞增殖、胶原分泌和Ⅰ型前胶原mRNA表达的影响。方法原代培养系统性硬皮病患者皮肤成纤维细胞,检测不同浓度的辛伐他汀作用于体外培养的成纤维细胞48h后细胞的存活力;观察不同浓度的辛伐他汀对细胞胶原分泌和Ⅰ型前胶原mRNA合成的影响。结果1.0×10-7,10-6,10-5和10-4mol/L浓度的辛伐他汀可以抑制患者皮肤成纤维细胞的增殖(P<0.05),并能显著减少成纤维细胞培养液中可溶性胶原的含量,与空白对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05),且抑制作用随着药物浓度的增高而增强,具有明显的浓度依赖性。1.0×10-7～10-4mol/L的辛伐他汀可以显著的减少Ⅰ型前胶原蛋白mRNA的表达(P<0.05)。结论辛伐他汀对系统性硬皮病患者皮肤成纤维细胞的增殖及胶原的分泌均有显著的抑制作用,对细胞Ⅰ型前胶原蛋白mRNA的合成具有抑制作用,其为治疗硬皮病提供了理论基础。     

细胞因子TGFβ1,CTGF和IFN-γ对系统性硬皮病克隆成纤维细胞胶原代谢的影响

目的研究细胞因子(TGFβ1,CTGF和IFN-γ)对系统性硬皮病具有不同胶原合成能力的克隆成纤维细胞胶原代谢的影响。方法采用实时荧光定量RT-PCR法检测细胞因子(TGFβ1,CTGF和IFN-γ)对系统性硬皮病具有不同胶原合成能力的克隆成纤维细胞Ⅰ型前胶原和MMP-1 mRNA水平的影响情况。结果 TGFβ1(5ng/mL)作用48h仅使具有低胶原合成能力的系统性硬皮病克隆成纤维细胞的Ⅰ型前胶原mRNA水平上升(1.20±0.50vs0.04±0.04,P=0.001);CTGF(20ng/mL),IFN-γ(100ng/mL)作用48h使系统性硬皮病克隆成纤维细胞MMP-1 mRNA水平下降(F=6.221,P=0.034;F=53.505,P=0.000),且具有高胶原合成能力的克隆成纤维细胞MMP-1 mRNA水平下降幅度大(F=8.817,P=0.016;F=8.092,P=0.019)。结论系统性硬皮病具有不同胶原合成能力的克隆成纤维细胞Ⅰ型前胶原和MMP-1 mRNA水平对细胞因子的反应存在异质性。     

阿维A对系统性硬皮病成纤维细胞胶原合成及I型前胶原mRNA表达的影响

目的：明确阿维 A 对系统性硬皮病成纤维细胞胶原合成及 I 型前胶原 mRNA 表达的影响。方法：原代培养系统性硬皮病（SSc）患者皮肤成纤维细胞（FB）,使用不同浓度的阿维 A（10-5、10-6、10-7、10-8 mol/ L）作用48 h,用羟脯氨酸法测定胶原的质量浓度,RT-PCR 法 I 型前胶原 mRNA 的表达。结果：阿维 A 实验组 FB 胶原合成及 I 型前胶原 mRNA 的表达较对照组减少,且均与阿维 A 呈浓度依赖性关系。结论：阿维 A 可能通过抑制 FB I 型前胶原基因的表达减少胶原合成。     

UVA-1及UVA照射对局限性硬皮病患者成纤维细胞Ⅰ型胶原和MMP-1表达的影响

目的 探讨UVA-1及UVA照射对局限性硬皮病患者成纤维细胞中Ⅰ型胶原和基质金属蛋白酶1(MMP-1)表达的影响.方法 局限性硬皮病患者(6例)和健康人(4例)皮肤活检标本进行成纤维细胞培养,荧光定量PCR法检测不同强度UVA-1照射前后及相同强度UVA/UVA-1照射后两组皮肤成纤维细胞中COL1A1和MMP-1 mRNA的表达水平.结果 局限性硬皮病组与健康对照组相比,成纤维细胞中COL1A1表达量增加(P＜0.05),MMP-1表达量下降(P＜0.05).UVA-1照射未能明显减少局限性硬皮病患者成纤维细胞中COL1A1表达(P＞0.05),但可使MMP-1 mRNA表达明显增加(P＜0.05).相同剂量UVA对局限性硬皮病患者成纤维细胞中Ⅰ型胶原的抑制作用和MMP-1的刺激作用优于UVA-1.结论 UVA-1照射治疗可以抑制Ⅰ型胶原的表达,刺激MMP-1的表达,且中等剂量UVA-1的疗效优于小剂量,相同照射剂量UVA疗效优于UVA-1.     

成纤维细胞与纤连蛋白粘附及其诱导的酷氨酸磷酸化蛋白在硬皮 …

目的 研究硬皮病成纤维细胞与纤连蛋白粘附,以中附诱导的酷氨酸磷酸化蛋白在成纤维细胞表达原胶原ＭＲＮＡ中的作用。方法 将硬皮病成纤维细胞置于纤连蛋白包被的培养体系中粘附培养运用ＲＴ－ＰＣＲ、免疫印迹法分别检测原胶原ＭＲＮＡ表达的变化及粘附诱导的酷氨酸磷酸化蛋白：并观察阻断酷氨酸磷酸化后,原胶原ＭＲＮＡ和酷氨酸磷酸化蛋白生成。且原胶原ｐｒｏα１（１）ＭＲＮＡ的表达显著增加,经酷氨酸激酶抑制剂作用后,伴     

Clinical evaluation of scleroderma spectrum disorders using a points system

We have established a new diagnostic method using a points system to evaluate patients with early scleroderma and those with scleroderma spectrum disorders (SSD). To examine the clinical usefulness of this method, it was applied to a total of 215 cases including 97 patients with scleroderma, 32 with SSD, 28 with presumed primary Raynaud's phenomenon (RP) and 58 with other connective tissue disorders (CTD). A total score was obtained for each patient as the sum of the following five factors: (1) extent of skin sclerosis (maximum, 10 points); (2) pulmonary changes (maximum, 4 points); (3) antinuclear antibodies (maximum, 5 points); (4) pattern of Raynaud's phenomenon (maximum, 3 points); and (5) nailfold bleeding (maximum, 2 points). Of the 97 scleroderma patients, 86 (89%) had 9 or more points, and of the 32 SSD patients, 28 (88%) had 5 to 8 points. In contrast, all patients with presumed primary RP and 54 of 58 (93%) patients with other CTD had 0 to 4 points. These data suggest that this diagnostic method is very useful not only for clinical evaluation of SSD, but also for the differentiation of scleroderma and SSD from other CTD and primary RP.     

体外培养硬皮病成纤维细胞的超微结构观察

为探讨硬皮病纤维化硬化形成的机制，应用透射电镜对培养的硬皮病皮损和正常皮肤中的成纤维细胞进行了超微结构观察。结果示硬皮病成纤维细胞中有丰富的，高度发达的粗面内质网，且多个区域有高尔基复合体及其形成的分泌泡存在。正常皮肤中的成纤维细胞内粗面内质网少，未见高尔基复合体的分泌泡。提示硬皮病成纤维细胞的蛋白合成及分泌功能活跃，因此胶原合成增高。     

局限性硬皮病发病机制的研究进展

局限性硬皮病是一种以局部皮肤及皮下组织纤维化为特征的疾病.病因不明,发病机制可能涉及小血管的损伤、T细胞的活化以及结缔组织生成增加等多个过程.T细胞活化释放各种细胞因子,趋化因子,主要包括肿瘤坏死因子α、转化生长因子β、可溶性白细胞介素受体2和可溶性白细胞介素受体6等.血管内皮细胞的损伤也可介导纤维化相关的细胞因子释放.局限性硬皮病和系统性硬皮病在发病机制上有一定的区别和联系,概述局限性硬皮病发病机制的最新进展.     

硬皮病患者皮肤中胶原特异性氨基酸的测定分析

应用氨基酸分析仪测定皮肤组织中羟脯氨酸、羟赖氨酸的含量,结果示硬皮病皮肤中两种氨基酸的含量均高于正常人皮肤,具有统计学意义,提示皮损中有大量胶原蛋白沉积。     

系统性硬皮病105例临床分析

对１０５例系统性硬皮病患的一般情况、临床表现了详细分析。男女患者之比为１：４，发病年龄１５岁－７２岁，２１－５０岁患者占大多数，所有患者均有不同程度的皮肤改变，皮受累范围大小不一。９９％，患者嗓手皮肤受累，８１％患者有雷诺现象，６７例患者内脏器官受累。还对其实验室检查，伴发病、病因、诊断和治疗作了分析和讨论。     

Active proliferation of telangiectases in skin of patients with progressive systemic sclerosis (PSS)

Summary The labeling index of endothelial cells as measured by in vitro autoradiography with ³H-thymidine and the electron microscopic structure of microvessels were studied in telangiectases. The telangiectases of eight patients with progressive systemic sclerosis (PSS) were compared with the cherry angiomas of six healthy controls subjects. The ultrastructural features of telangiectases were similar in the two groups and were characteristic of capillaries and postcapillary venules of the dermis, with multilayering of the vascular basement membrane. However, a significant difference existed between these two groups in an autoradiographic study: in PSS telangiectases, the average labeling index was 5.9%, whereas in cherry angiomas it was around 0.8%. Thus, the telangiectases in PSS are structures with accelerated endothelial proliferation, as are the other endothelial cells of microvessels anywhere in dermis in this disease. However, the great heterogeneity of the labeling index (varying from 0.5% to 27%) must be emphasized in telangiectases.     

大疱性硬斑病1例

报告1例少见的大疱性硬 斑病。患者男性,25岁。四肢皮肤明显硬化萎缩,部分关节强直固定。左前臂伸侧大小不等的水疱,尼氏征阴性。无雷诺现象等系统损害。病理检查为典型的真皮均一化胶原纤维变性等硬皮病表现及表皮下水疱。     

局限性硬皮病病情评估和治疗进展

局限性硬皮病是一种以局限性皮肤及皮下组织纤维化为特征的疾病.目前缺乏统一的病情评估标准,有作者提出多种评估方法,如半定量评分及利用计算机进行评分,并研究了激光多普勒血流仪、超声、磁共振在该病评估中的作用.治疗主要集中在免疫调节和抗纤维化方面,近年来评估了多种药物的疗效,如他克莫司、咪喹莫特、甲氨蝶呤和波生坦等,光疗也得到广泛应用.因此,文中总结近年来局限性硬皮病病情评估和治疗方面的研究进展.     

系统性硬皮病患者缺氧与皮肤硬化关系的初探

目的 探讨缺氧对系统性硬皮病 (SSc)患者皮肤硬化的影响。方法 测定 SSc患者血氧分压和皮肤硬度积分,对二者进行直线相关分析,并测定低氧 (2.5％氧浓度 )对体外培养的 SSc患者皮肤成纤维细胞增殖的影响。结果 30例 SSc患者血氧分压为 6.38～ 12.06 kPa,平均 (9.53± 1.93)kPa; 20例正常对照组为 (10.67～ 13.33)kPa,平均为 (12.01± 0.81)kPa。前者比后者显著降低 (t=5.276,P