硫酸化甲壳质对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和周期的影响

目的　探讨硫酸化甲壳质对鼻咽癌CNE - 2Z细胞增殖和周期的影响。方法　MTT法检测增值抑制率和IC50 ,流式细胞术分析细胞周期。结果　不同浓度的硫酸化甲壳质分别处理细胞 2 4h、4 8h、72h时 ,抑制率随浓度的增加和时间的延长而增加 ,其IC50 分别为 (0 5 2 9± 0 0 39)、(0 0 4 8± 0 0 2 7)、(0 389± 0 0 2 7)mg/ml,各IC50 间的差异有非常显著性意义 (P <0 0 1)。 0 2mg/ml,0 4mg/ml,0 6mg/ml硫酸化甲壳质分别处理细胞 12h、2 4h、4 8h时 ,G0 /G1期细胞明显下降 ,G2 /M期细胞明显升高 ,随时间的延长变化更明显 (P <0 0 1)。结论　硫酸化甲壳质对CNE - 2Z细胞具有增殖抑制作用 ,并呈剂量和时间依赖性 ;阻滞细胞于G2 /M期 ,也呈时间依赖性 ;一定剂量的硫酸化甲壳质可能通过阻滞CNE - 2Z于G2 /M期而抑制其增殖。     

奥沙利铂对人低分化鼻咽癌细胞系CNE2体外增殖的影响

背景与目的:奥沙利铂是第三代铂类化合物,与顺铂相比其作用机制有一些重要区别,且毒性较低。鼻咽癌以低分化癌为多见,虽放射治疗是基本手段,但对复法或转移鼻咽癌、化疗仍是重要的手段,因此,本实验通过探讨奥沙利铂体外对人低分化鼻咽癌细胞CNE2的影响研究其在鼻咽癌治疗中的可能价值。方法:将浓度分别为0.03、0.16、0.8、4.0、20.0、100μg/m l的奥沙利铂与CNE2细胞作用24、36、48 h,用MTT法计算细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞周期改变和凋亡率,透射电镜观察其形态学变化。结果:奥沙利铂能够抑制CNE2细胞的增殖,并且这种作用呈时间和剂量依赖性。100μg/m l奥沙利铂作用48 h,CNE2细胞生长抑制率达(95.6±0.7)%。流式细胞仪分析显示CNE2细胞呈G2/M期阻滞;奥沙利铂浓度为0、0.03、4.0、100μg/m l时CNE2细胞的凋亡率分别为(0.19±0.17)%、(0.37±0.09)%、(5.50±1.08)%、(9.43±0.09)%。20μg/m l药物作用24 h后电镜观察发现CNE2细胞皱缩,染色质聚集于核膜周围,固缩,碎裂成多块;并有凋亡小体形成。结论:奥沙利铂能够抑制人低分化鼻咽癌细胞系CNE2的增殖,能够诱导CNE2细胞G2/M期阻滞,较高浓度的奥沙利铂才可诱导CNE2细胞凋亡。     

大蒜素协同抗癌药对肿瘤细胞杀伤作用的研究

目的:探讨大蒜素对人胃癌细胞系MGC-803和SGC-7901细胞周期的影响及其与周期特异性药物联合使用,增强抗癌药物对肿瘤细胞的杀伤作用.方法:苔盼蓝拒染法检测细胞增殖抑制率以观察大蒜素对胃癌细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪及瑞士-姬姆萨染色光镜观察检测细胞周期的改变;3μg/ml大蒜素与周期特异性抗癌药物博莱霉素A5和长春新碱联合使用,观察药物细胞毒活性的改变.结果:大蒜素可抑制MGC-803细胞生长,24h IC50为6.4μg/ml,也可抑制SGC-7901细胞的生长,24h IC50为7.3μg/ml;以3μg/ml、6μg/ml、9μg/ml终浓度大蒜素分别作用两种胃癌细胞系24h后,与对照组比较,G0/G1细胞周期百分率明显减少,而G2/M期明显增加(P＜0.01);6μg/ml大蒜素作用培养细胞24h后,与对照组比较细胞分裂指数明显增加.提示两种细胞系经大蒜素处理后,细胞周期阻滞于M期;大蒜素与两种抗癌药物联合使用,作用于MGC-803细胞,BLM A5和VCR的24h IC50值分别由单独应用的1.210μg/ml和0.125μg/ml下降到0.370μg/ml和0.031μg/ml,作用于SGC-7901细胞,BLM A5和VCR的24h IC50值分别由单独应用的1.760μg/ml和0.287μg/ml下降到0.680μg/ml和0.074μg/ml,显示低剂量大蒜素增强了抗癌药物对肿瘤细胞的杀伤作用.结论:大蒜素可使MGC-803及SGC-7901两种细胞周期阻滞于M期;大蒜素与M期特异作用抗癌药物联合使用,具有协同抗肿瘤作用.     

大蒜素与细胞周期特异性化疗药联合应用抗肿瘤的实验研究

目的:探讨大蒜素对人胃癌细胞株BGC-823、SGC7901生长的影响及其与细胞周期特异性化疗药联合应用抗肿瘤作用.方法:M丌法测定细胞增殖抑制率并测定药物半数抑制率(IC50);流式细胞仪检测细胞周期的改变,大蒜素与NVB、5-FU、MMC、PDD四种化疗药联合应用,观察细胞毒活性的改变.结果:大蒜素对BGC-823和SGC-7901两种细胞的生长均有明显的抑制作用,72h IC50分别为:30μg/ml和20μg/ml.以72h IC50浓度大蒜素分别作用于两种胃癌细胞株24h、48h后,流式细胞仪检测与对照组比G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞明显增加,提示两种胃癌细胞株经大蒜素处理后,细胞周期阻滞于G2/M期.大蒜素与四种化疗药联合应用,结果发现作用于BGC823细胞,NVB72h的IC50值由原来单独应用时的9.0μg/ml降至2.25μg/ml.作用于SGC-7901细胞,NVB72h的IC50值由原来单独应用时的43.0μg/ml降至12.5μg/ml,显示大蒜素与作用于G2/M期的细胞周期特异性化疗药NVB联合应用时可增强其对肿瘤细胞的杀伤作用.结论:大蒜素可使BGC-823和SGC-7901两种细胞的增殖受到抑制,细胞周期被阻滞在G2/M期.大蒜素与G2/M期特异性化疗药联合应用,可能具有协同抗肿瘤作用.     

蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对人胃癌细胞周期的影响

背景与目的:蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)已成为一个潜在的有价值的抗肿瘤治疗靶点。本研究旨在探讨PKC抑制剂Staurosporine(ST)对人胃癌细胞株MGC-803和SGC-7901的增殖抑制、凋亡诱导及对其细胞周期的影响。方法:在用台盼蓝拒染法检测细胞增殖抑制率的基础上,通过细胞形态学观察凋亡小体,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期变化。结果:ST抑制MGC-803细胞生长,24h的IC50为54ng/ml,48h的IC50为23ng/ml;ST抑制SGC-7901细胞的生长,24h的IC50为61ng/ml,48h的IC50为37ng/ml。40、60、100ng/mlST分别作用MGC-803细胞24h后,发现G0/G1期细胞分别为(23.6±1.8)%、(11.6±0.7)%、(3.3±0.2)%,而对照组为(54.3±3.1)%;G2/M期细胞分别为(22.6±4.0)%、(35.5±0.4)%、(36.8±5.5)%,而对照组为(13.5±0.2)%。40、60、100ng/mlST分别作用于SGC-7901细胞24h后,G0/G1期细胞分别为(27.1±1.4)%、(17.0±3.4)%,(13.7±0.7)%,而对照组为(52.5±4.4)%;G2/M期细胞分别为(21.9±2.6)%、(39.5±4.9)%、(38.4±3.1)%,而对照组为(13.5±2.2)%。实验组细胞与对照组比较,ST使两种细胞G0/G1期明显减少及G2/M期明显增加(P<0.01)。200ng/mlST作用24h后两种细胞的G1期前均出现明显的凋亡峰,可诱导细胞出现典型凋亡小体。结论:ST显著降     

伊立替康对胃癌高侵袭转移细胞株OCUM-2MD3体外抗肿瘤作用的实验研究

目的探讨伊立替康(CPT-11)对人胃癌高侵袭转移细胞株OCUM-2M D 3的体外增殖作用的影响及其作用机制。方法人胃癌高侵袭转移细胞株OCUM-2M D 3于DM EM培养液中(含10%热灭活胎牛血清),在37℃、5%的CO2、饱和湿度下培养传代。M TT法检测0.97、1.94、3.88、7.75、15.5、31、62、124μg/m l 8个不同浓度伊立替康分别作用24、48、72小时后对细胞增殖的抑制效应并计算抑制率。利用中效原理方程计算各时段药物作用的中效浓度(IC 50)。检测CPT-11对OCUM-2M D 3细胞作用的时间效应和剂量效应。利用流式细胞仪分析伊立替康作用24小时前后细胞周期的分布及凋亡情况。结果CPT-11对胃癌高侵袭转移细胞株OCUM-2M D 3的体外增殖有明显的抑制作用。在相同时间段不同药物浓度CPT-11对OCUM-2M D 3细胞的抑制率差异有显著性(P<0.01)。而在相同药物浓度时,作用不同时间,其抑制率差异也有显著性(P<0.01)。且药物浓度与药物作用时间之间有交互作用(P<0.01)。124μg/m l CPT-11作用72小时后,OCUM-2M D 3细胞生长抑制率可达80.6%。CPT-11作用24、48、72小时的IC 50分别为49.889μg/m l、9.775μg/m l、6.481μg/m l。流式细胞仪分析显示以1/2 IC 5024.945μg/m l CPT-11处理24小时后,对照组细胞周期分布为G0/G1期(39.30±4.81)%,S期(37.40±3.91)%,G2/M期(23.33±8.05)%;用药组为G0/G1期(56.50±7.69)%,S期(43.90±7.69)%,G2/M期消失,细胞周期被阻滞于G0/G1及S期。流式细胞仪检测凋亡率分别为(1.00±0.11)%、(34.29±0.79)%,用药组凋亡率明显升高,差异有显著性(P<0.01),出现明显的凋亡峰。结论伊立替康能够明显抑制人胃癌高侵袭转移细胞株OCUM-2M D 3的体外增殖活性。     

Rh-Apo2L联合长春瑞滨杀伤人肺腺癌A549细胞的作用研究

[目的]探讨重组人凋亡素2配体(Rh-Apo2L)联合长春瑞滨(NVB)对人肺腺癌A549细胞的杀伤作用及机制。[方法]人肺腺癌A549细胞分成4组:对照组、Rh-Apo2L组、NVB组、联合组。用MTT法检测不同浓度Rh-Apo2L和NVB对A549细胞的抑制率,绘制细胞生长曲线,流式细胞仪测定细胞周期分布,RT-PCR方法检测死亡受体DR5基因mRNA的表达。[结果]MTT结果显示不同浓度Rh-Apo2L和NVB对人肺癌A549细胞的体外抑制作用均呈剂量效应关系,Rh-Apo2L处理48h后的IC20为3.48μg/ml、IC50为197.92μg/ml,NVB处理48h后的IC20为0.29μg/ml、IC50为3.44μg/ml。联合组对A549细胞的抑制作用高于单药组(P=0.001)。流式细胞分析显示含NVB药物两组在24hG2/M期比率高于对照组。3个实验组在24h、48h、72h后DR5基因mRNA相对表达量均较对照组多(P<0.05),但各实验组间均无统计学差异(P>0.05)。[结论]Rh-Apo2L与NVB联合应用能协同增强对人肺腺癌细胞株A549的体外抗肿瘤活性,其协同作用机制可能与细胞周期阻滞在G2/M期有关,但与DR5基因mRNA的表达无相关性。     

莪术醇对人宫颈癌CASKI细胞增殖抑制及促凋亡作用的研究

目的:探讨莪术醇对人宫颈癌CASKI细胞体外增殖和凋亡的影响.方法:12.5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml和100μg/ml不同浓度莪术醇作用于人宫颈癌CASKI细胞后,MTT法检测CASKI细胞的增殖抑制率;流式细胞仪分析细胞周期分布及细胞凋亡率变化;电镜观察肿瘤细胞凋亡的形态学特征.结果:12.5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml和100μg/ml的莪术醇对宫颈癌CASKI细胞均有不同程度的增殖抑制作用,在一定范围内,具有浓度-时间依赖性.流式细胞仪分析结果显示:50μg/ml、100μg/ml莪术醇作用于宫颈癌CASKI细胞24h,可阻滞细胞周期于G2/M期,并诱导部分细胞凋亡.电镜下可见凋亡细胞及凋亡小体,且100μg/ml组细胞凋亡改变较50μg/ml组更明显.结论:莪术醇能明显抑制CASKI细胞的体外增殖,且可阻滞CASKI细胞周期于G2/M期并诱导细胞凋亡.     

大蒜素诱导人胃癌细胞M期阻滞的研究

目的探讨大蒜素对人胃癌细胞系MGC803和SGC7901细胞周期的影响及其作用机制。方法以台盼蓝拒染法检测人胃癌细胞系MGC803和SGC7901细胞的增殖抑制率;以透射电镜观察两种胃癌细胞的直接损伤改变;以流式细胞仪及瑞士姬姆萨染色光镜观察两种胃癌细胞周期的改变;以SP免疫组化及RTPCR方法检测两种胃癌细胞的p21WAF1和p16INK4基因及蛋白表达的变化。结果大蒜素可抑制MGC803细胞生长,24h药物半数抑制浓度(IC50)为6.4μg/ml;也可抑制SGC7901细胞的生长,24hIC50为7.3μg/ml。12μg/ml的大蒜素作用两种胃癌细胞24h后,细胞出现急性直接损伤,膜系统改变明显。以3μg/ml、6μg/ml、9μg/ml终浓度大蒜素分别作用于两种胃癌细胞系24h后,与对照组比较,G0和G1期细胞周期百分比(%)明显减少,而G2和M期明显增加(P<0.01);6μg/ml大蒜素作用培养两种胃癌细胞24h后,与对照组比较,细胞分裂指数明显增加,提示两种细胞系经大蒜素处理后,细胞周期阻滞于M期。经大蒜素处理后,MGC803细胞的p21WAF1和p16INK4基因及蛋白表达均明显增加;SGC7901细胞的p21WAF1基因及蛋白表达明显增加。结论大蒜素可使MGC803及SGC7901两种细胞周期阻滞于M期;大蒜素的M期阻滞作用可能与其上调细胞的p21WAF1和p16INK4基因表达有关。     

莪术醇对人宫颈癌CASKI细胞增殖抑制及促凋亡作用的研究

目的：探讨莪术醇对人宫颈癌CASKI细胞体外增殖和凋亡的影响。方法：12．5μg/ml、25μg／ml、50μg／ml和100μg／ml不同浓度莪术醇作用于人宫颈癌CASKI细胞后,MTT法检测CASKI细胞的增殖抑制率;流式细胞仪分析细胞周期分布及细胞凋亡率变化;电镜观察肿瘤细胞凋亡的形态学特征。结果：12．5μg／ml、25μg/ml、50μg／ml和100μg／ml的莪术醇对宫颈癌CASKI细胞均有不同程度的增殖抑制作用,在一定范围内,具有浓度一时间依赖性。流式细胞仪分析结果显示：50μg／ml、100μg／ml莪术醇作用于宫颈癌CASKI细胞24h,可阻滞细胞周期于G2／M期,并诱导部分细胞凋亡。电镜下可见凋亡细胞及凋亡小体,且100μg／ml组细胞凋亡改变较50μg／ml组更明显。结论：莪术醇能明显抑制CASKI细胞的体外增殖,且可阻滞CASKI细胞周期于G2／M期并诱导细胞凋亡。     

Inhibition of Glioma Cell Proliferation by Neural Stem Cell Factor

Summary Neural stem cells (NSC) have unique differentiation-, proliferation-, and motility properties. To investigate whether they secrete factors that interfere with the proliferation of glioma cells, we grew glioma cells in conditioned medium (CM) obtained from cultures of neurospheres including neural stem / progenitor cells (NSPC) isolated from embryonic (E14)- or adult mouse brain or fetal human brain. 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and BrdU-labeling assays showed that CM from NSPC (NSPC/CM) contained factor(s) that inhibited the proliferation of glioma cells by 28–87%. Filter-fractionation of NSPC/CM revealed that the 50,000–100,000 nominal molecular weight limit (NMWL) fraction contained the inhibitory activity. On the basis of these observations we transplanted 203G glioma cells and/or NSPC into the intrathecal space of the cisterna magna of mice to investigate whether NSPC interfere with the proliferation of glioma cells in vivo. Mice transplanted with both 203G and NSPC survived significantly longer than did mice transplanted only with 203G. We concluded that NSPC secrete factor(s) that may control glioma cell proliferation.     

Cell Size Following Irradiation in Relation to Cell Cycle

The cell volume of Ehrlich ascites tumour cells was studied following a radiation dose of 5.0 Gy. The cell volume increased 12 to 30 hours after irradiation by about 20 per cent, was normal at about 50 hours, and increased again at 72 hours. In order to explain these changes the composition of the cells in cell cycle was studied. In addition, the cell volume of irradiated cells from the various parts of the cell cycle, separated by centrifugal elutriation, was measured. The changes in the mean cell volume of unseparated cells could be explained by variations in the cell cycle composition of the cell population. Irradiated cells from the various parts of the cell cycle did not deviate from the volume of non-irradiated cells. The cell volume doubled during the cell cycle. This increase was, however, not linear.     

Clonal T Cell Proliferation in Patients with Pure Red Cell Aplasia

Among the patients with idiopathic pure red cell aplasia (PRCA) who do not meet the diagnostic criteria of chronic lymphocytic leukemia, there are some cases which suggest an association with clonal T lymphocytic proliferation. The morphological characteristics and responses to treatment revealed two distinct groups among the present 13 patients. The lymphocytes in one group were typical granular lymphocytes of T cell phenotype which were treated effectively with cyclophosphamide rather than cyclosporine. The response to therapy in this group occurred after a perceptible reduction in lymphocyte mass, which took at least 8 weekds.

The lymphocytes in the second group consisted mainly of non-granulated lymphocytes or some granulated lymphocytes with fine and indistinct granules and responded well to cyclosporine therapy. A reduction in lymphocytes mass was not a prerequisite for the development of the remission of red cell aplasia in this group, and responses occurred within 4 weeks. Clonal T cell proliferation was detected in some patients, which raised the possibility of idiopathic PRCA being associated with a clonal proliferation of T cells. Distinguishing lymphocytes in patients with PRCA could potentially be used to plan treatment strategy and assess prognosis.     

人干扰素对HL60,K562细胞生长及细胞周期的影响

用人干扰素(α和γ)与HL60、K562细胞共同培养后,对细胞生长有不同程度抑制作用。IFN_r对细胞生长抑制作用强于IFN_r,IFN_r和IFN_r联合应用有协同作用,在K562细胞,细胞在细胞周期中的分布也发生改变,G_0/G_1期细胞比例减少,S期细胞比例增高,在HL60细胞则无明显的细胞周期再分布情况。提示细胞在S期的堆积是细胞生长受抑的原因之一。     

晚期非小细胞肺癌患者外周血DC亚型与 NK细胞的关系

 目的 探讨非小细胞肺癌患者外周血树突状细胞亚群（DC1/DC2）和机体NK细胞含量之间的关系及其临床意义。方法 采用流式细胞术检测40例肺癌患者外周血DC亚群（CD11c+DC/DC1和 CD123+ DC／DC2）、NK细胞含量及血浆IL 12的浓度， 并以10例健康受试者作为对照。结果 肺癌患者外周血CD11c+DC百分率为（0.66±0.24）％，比对照组（1.38±0.18）％明显降低（P<0.01），CD123+ DC百分率（0.28±0.17）％与对照组（0.27±0.11）％相比， 差异无统计学意义（P＞0.05）；肺癌患者与健康人比较，NK细胞含量及IL 12的浓度均降低（P<0.05）。NSCLC 患者NK细胞的含量与CD11c+百分数及血浆IL 12 浓度均呈正相关（P<0.05），与CD123+百分数呈负相关（P<0.01）。DC各亚型百分率同患者的卡氏评分、化疗史有关联（P<0.01），NK细胞的含量与年龄相关（P<0.05）。结论 非小细胞肺癌患者DC1功能低下，IL 12分泌能力障碍，从而影响了NK细胞的活性。DC亚型与NK细胞含量之间以及它们与临床生物学行为之间都有一定关系。     

CD248在肾透明细胞癌中的表达及临床意义CSCD

目的探讨内皮唾酸蛋白(CD248)在肾透明细胞癌(ccRCC)组织中的表达及临床意义。方法收集115例ccRCC组织及对应癌旁组织的石蜡标本,同时收集其中17例ccRCC组织及对应癌旁组织的新鲜标本。qRT-PCR检测17例ccRCC组织及对应癌旁组织中CD248 mRNA的表达;免疫组织化学法检测115例ccRCC患者石蜡标本的CD248蛋白水平,分析CD248表达与ccRCC临床病理指标及预后的相关性。结果ccRCC组织中的CD248阳性表达免疫组织化学反应强度显著强于癌旁组织,差异有统计学意义(P=0.0061),且CD248蛋白阳性信号定位于细胞核及细胞质。CD248 mRNA在癌旁组织中的表达水平明显低于ccRCC组织(P=0.0026)。CD248高表达组组间总生存率明显低于CD248低表达组(44.4 vs.57.2月,P=0.017)。结论CD248的表达可能参与ccRCC的发生发展。与癌旁组织比较,CD248在ccRCC组织中高表达;CD248高表达的ccRCC患者术后生存时间较短。     

细胞分裂与癌发生机制研究进展

基于肿瘤病理及流行病学的长期观察,结合细胞生物学新成就,发现常见肿瘤发生与细胞分裂潜能关系密切。细胞分裂是个体生长发育及组织损伤后再生修复时必不可少的生物学行为,由于细胞分裂潜能是有限的,频繁分裂将使局部细胞的分裂潜能提前耗竭,籍此发生的细胞重新选择为细胞永生化、恶性变创造了条件。