热休克预处理对家兔肝缺血-再灌注损伤的影响

目的 :探讨热休克预处理对肝缺血 再灌注损伤的影响。方法 :随机将家兔分为对照组和热休克预处理组 ,复制肝脏缺血 再灌注模型 ,分别于缺血前、缺血 45min、再灌注 45min三次取血 ,赖氏法检测血清谷丙转氨酶 (ALT)活性。结果 :热休克预处理组缺血前的ALT活性稍高于对照组 ,但是缺血后及再灌注后显著低于对照组。结论 :热休克预处理对肝细胞有轻微的损伤作用 ,但是对缺血后和再灌注后损伤均有显著的保护作用。     

热休克预处理对大鼠缺血再灌注心肌保护作用机制的探讨

目的:观察心肌缺血再灌注时P-选择素（Ps）表达情况；探讨热休克蛋白(HSP)对缺血再灌注心肌Ps及细胞凋亡表达的影响。 方法:成年雌性Wistar（n=40）大鼠随机分为3组。热休克组全麻后高热处理造成热休克动物模型，对照组及假手术组仅予全麻处理。24 h后热休克组及对照组结扎左冠状动脉前降支(LAD)1 h，再灌注2 h造成心肌缺血再灌注动物模型。假手术组只于LAD处穿线而不结扎。术毕测心梗范围、HSP70、Bax、Bcl-2、Ps、凋亡细胞及血清CK-MB。 结果:热休克组HSP70表达高于对照组及假手术组(P<0.05)，后两组无明显差别(P>0.05)；热休克组心梗范围小于对照组(P<0.05)，CK-MB值低于对照组(P<0.01)，凋亡细胞、Bax及Ps表达低于对照组(P<0.05)，两组Bcl-2表达无显著差别(P>0.05)；假手术组无Ps表达。 结论:HSP70可抑制缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡，抑制Bax表达致Bax/Bcl-2比值下降为其机制之一；Ps参与心肌缺血再灌注损伤；HSP70可能有抑制心肌Ps表达的作用，这或许是热休克预处理对大鼠缺血再灌注心肌的另一保护机制。     

局部缺血“预处理”诱导家兔相邻非缺血心肌热休克蛋白70基 …

目的：研究兔心局局部缺血“预处理”后，局部缺血和相邻非血心肌热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）ｍＲＮＡ的水平变化。方法：提取心肌组织总ＲＮＡ，用ＨＳＰ７０探针进行斑点杂交。结果：缺血预处理组的缺血区和非缺血区ＨＳＰ７０ ｍＲＮＡ表达水平均显著高于对照组相应部位（Ｐ〈０．０５），而每组内的缺血区及非缺血区间无显著差异（Ｐ〉０．０５），结论：局部缺血“预处理”后，缺血和非缺血区两处心肌的内反应呈“一致性”；     

肌肽对大鼠缺血-再灌注损伤后热休克蛋白70及炎性因子表达水平的影响

目的通过失血性休克大鼠血液回输后造成的缺血-再灌注损伤(IRI)模型,研究肌肽对IRI后丙二醛(malondialdehyde,MDA)浓度、热休克蛋白70(HSP70)及炎性因子表达水平的影响。方法27只Wistar大鼠随机分成3组制作IRI模型,大鼠失血至40mmHg→维持20min→放置1h→全血回输→维持3h→处死。大鼠处死后取血浆检测MDA浓度,取肝、脑、肺、心、肾、脾组织制作石蜡切片,通过免疫组化染色比较肝、脑、肺、心、肾、脾组织切片HSP70阳性细胞数;取肝组织提取RNA比较肝组织HSP70及炎性因子mRNA表达量。结果与再灌损伤组相比,肌肽治疗组肝、脑、肺、心、肾、脾组织切片HSP70阳性细胞数及HSPa5、HSPalamRNA表达量明显升高;MDA浓度及IL-6、TNF-α、NF-κB1、SCYA2、SCYA3mRNA表达量明显降低。结论肌肽可以抑制IRI后MDA的生成、从mRNA水平促进HSP70的表达、抑制炎性因子mRNA的表达。     

热休克蛋白70对离体心脏心肌间质的保护作用

目的探讨热休克蛋白70（HSP70）对大鼠离体心脏心肌间质的影响。方法Wistar大鼠16只，分为2组：对照组（C，n=8），腹腔注射生理盐水0．4ml，24h后取离体心脏灌注HTK心脏保护液，4℃保存3h后建立Langendorff灌注模型，灌注KH液2h；实验组（E，n=8），腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素，24h后取离体心脏，方法同对照组。以心肌细胞中HSP70含量、血流动力学指标、心肌组织羟脯氨酸（HP）、内皮索（ET）含量和心肌超微结构等作为观察指标。结果HSP70含量E组与C组比较明显增高；E组心功能恢复方面优于C组（P〈0．05），HP含量优于C组（P〈0．01），ET含量低于C组（P〈0．01），心肌超微结构损伤较C组明显减轻。结论HSP 70对供心心肌间质具有保护作用。     

局部缺血"预处理"诱导家兔相邻非缺血心肌热休克蛋白70基因表达

目的：研究兔心局部缺血“预处理”后,局部缺血和相邻非缺血心肌热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）ｍＲＮＡ的水平变化。方法：提取心肌组织总ＲＮＡ,用ＨＳＰ７０探针进行斑点杂交。结果：缺血预处理组的缺血区和非缺血区ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ表达水平均显著高于对照组相应部位（Ｐ＜００５）,而每组内的缺血区及非缺血区间无显著差异（Ｐ＞００５）。结论：局部缺血“预处理”后,缺血和非缺血区两处心肌的内反应呈“一致性”;缺血预处理对心肌的保护作用可能与ＨＳＰ７０的合成增多有关。     

热休克反应对缺血-再灌心肌保护作用的机制探讨

目的：探讨热休克反应对大鼠缺血-再灌心肌保护作用的可能机制。方法：SD大鼠,随机分为对照组及热休克组,动物经热休克处理恢复2或24h后复制缺血再灌模型并进行各项检测。结果：①热休克处理后心肌组织内SOD活性显著高于对照组,MDA含量则显著低于对照组。②热休克组心肌组织内乳酸及ATP含量均显著高于对照组,糖原含量则显著低于对照组。③热休克反应能诱导HSP70i的转录。结论：热休克反应对缺血-再灌心肌的保护作用与心肌能量代谢的改善、抗氧化能力的增强以及HSP70i的转录合成增强有关。     

热休克蛋白70对未成熟心肌细胞功能的影响

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)对未成熟心肌细胞功能的影响。方法健康新生长耳大白兔随机分为2组。对照组(C):腹腔注射生理盐水0.4ml,注射后24h取离体心脏,常规建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注15min转为工作心15min后停灌45min,恢复灌注15min改为工作心30min。实验组(E):腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素,24h后取离体心脏,方法同对照组。测定心肌细胞中HSP70含量及相关生化指标并作统计学处理比较。结果HSP70含量E组明显高于C组;E组ATP含量、SOD活性方面均优于C组(P<0.01),MDA含量、CK、LDH漏出率方面均低于C组(P<0.01),心肌线粒体Ca2+-ATPase活性、[ATP]m均优于C组(P<0.01),心肌细胞内Ca2+含量、心肌线粒体Ca2+含量低于C组(P<0.01)。结论HSP70对缺血再灌注未成熟心肌细胞功能具有明显的保护作用。     

去甲肾上腺素预处理对大鼠缺血再灌注心肌的延迟性保护作用

目的观察去甲肾上腺素预处理后热休克蛋白(HSP70)在心肌细胞的表达以研究去甲肾上腺素预处理对大鼠离体缺血再灌注损伤心肌的延迟性保护作用.方法24只Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组(n=8)及实验组(E112h及E24h组),实验组按腹腔注射去甲肾上腺素到建立Langendorff灌注模型的时间分为E12h及E24h组,每组各8只.分别检测LDH及CK的漏出量、心肌ATP含量及心功能指标(LVSP及±dp/dt max),用Westem Blot法测量心肌组织中HSP70的含量.结果E12h组HSP70表达较对照组增高,E24hHSP70表达最高.E24h组LDH与CK含量较其它两组低,而ATP较其它两组高(P＜0.01),心功能改善.E12h与对照组相应各指标(LDH、CK、ATP、LVSP及±dp/dt max)间差异无显著性.结论去甲肾上腺素预处理24h后HSP70高表达对大鼠离体缺血再灌注心肌有延迟性保护作用.     

热休克蛋白与心肌保护

热休克蛋白是一种在正常细胞中普遍表达的蛋白质,可在机体应激的情况下表达增加,通过分子伴侣作用对其他蛋白质的折叠、降解起重要作用。同时,还具有抗氧化、抗细胞凋亡及协同免疫的作用。高温、缺血缺氧预适应均能诱导机体HSP表达增加,产生心脏保护作用。     

大鼠局灶性脑缺血-再灌注时ε型蛋白激酶与热休克蛋白70表达变化及相关性

目的探讨大鼠脑缺血—再灌注时ε型蛋白激酶C（PKCε）与热休克蛋白70（HSP70）表达间关系。方法60只大鼠，随机分成缺血-再灌注组及假手术组，根据再灌注时间的不同，分别分为再灌注1、6、12、24、48、72h亚组，应用蛋白印迹法观察缺血皮层、基底节区各时间点胞浆内PKCε及HSP70及胞膜PKCε的表达。结果脑缺血后再灌注1h胞浆内PKCε含量开始下降，至再灌注24h达最低点，持续至再灌注72h。而膜内PKCε变化趋势与此相反，含量逐渐上升，于再灌注24h达到最高。再灌注1hHSP70有少量表达，再灌注6h即增高，至再灌注48h达最高，再灌注72h稍有减弱。假手术组各时间点均低含量表达。脑缺血-再灌注时HSP70与胞膜PKCε表达呈正相关，但无差异性，（r=0．55，P〉0．05）；HSPT0与胞浆内PKCε表达间呈显著负相关（r=-0．672，P〈0．05）。结论脑缺血再灌注时缺血皮层、基底节区PKCε发生了膜转位激活现象，同时有HSP70的表达，两者间呈一定的相关性。     

热休克蛋白70对HBV复制的影响

目的:探讨过表达热休克蛋白70(HSP70)对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法:运用RTq PCR检测HBV复制对HSP70表达的影响及过表达HSP70对HBV 3.5 kb m RNA的影响;运用Western blot法验证HSP70过表达效果及过表达HSP70对HBV核心蛋白的影响;RT-q PCR和Southern blot法分析过表达HSP70对HBV复制中间体的影响;运用双萤光素酶报告系统检测过表达HSP70对HBV启动子活性的影响。结果:HBV复制显著抑制HSP70的m RNA水平。过表达HSP70抑制HBV复制中间体、3.5 kb m RNA以及核心蛋白的表达,同时抑制HBV核心启动子的活性。结论:HBV复制抑制HSP70的表达。过表达HSP70抑制HBV的复制。本研究结果表明,HSP70通过抑制核心启动子的活性抑制HBV的复制。     

缺血再灌注损伤对心肌表达外源性基因能力的影响

目的：探讨缺血再灌注损伤和抗缺血再灌注损伤对心肌表达外源性基因能力的影响,为应用基因防治心肌病变提供新的理论依据。方法：Wistar大鼠随机分为3组：假手术对照组、缺血再灌注组和L-精氨酸+缺血再灌注组。缺血再灌注组中暂时结扎前降支1 h,L-精氨酸+缺血再灌注组则静脉应用精氨酸的同时,结扎前降支1 h。将浸泡过β-半乳糖苷酶基因重组体pN2-LacZ或尿激酶原前体基因重组体pN2-Pro-UK的2种医用尼龙缝线,缝合于各组大鼠左室前壁心肌中。分别于缝合术后 2、7、14和60 d检测心肌中β-半乳糖苷酶和纤溶酶活性。结果：缺血再灌注组术后 2d和 7d外源性基因表达量明显低于对照组,但术后14 d和60 d表达量却高于对照组。L-精氨酸+缺血再灌注组术后2 d和7 d外源性基因表达量与对照组无明显差别,但术后14 d和60 d表达量却高于对照组。结论：缺血再灌注损伤降低了心肌早期表达外源性基因的能力,但却增强心肌后期表达外源性基因的能力。抗缺血再灌注损伤能维持心肌缺血后早期表达外源性基因的能力.     

蛋白激酶C抑制剂对去甲肾上腺素促进大鼠巨噬细胞I_a抗原表达的影响

我室以前的工作证明，在去甲肾上腺素（ＮＥ）促进大鼠巨噬细胞（ＭΦ）Ｉａ抗原表达的效应中，细胞内的第二信使物质三磷酸肌醇（ＩＰ－３）和Ｃａ￣２＋起着必不可少的作用。然而，另一第二信使物质甘油二酯（ＤＧ）的作用如何，尚待阐明。为此，我们用４α－佛　波醇－１２，１３－二癸酸盐（４α－ｐｈｏｒｂｏｌ－１２，１３－ｄｉｄｅｃａｎｏａｔｅ，４α－ＰＤＤ）抑制ＭΦ内的蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ，ＰＫＣ）以阻断ＤＧ的作用，结果使ＮＥ促进ＭΦＩａ抗原表达的效应显著减弱（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０１），说明在ＮＥ促进ＭΦＩａ抗原表达的效应中，ＩＰ－３、Ｃａ￣２＋和ＤＧ都起重要的作用。     

鼠肝癌细胞的热休克蛋白诱导及其抗瘤机理研究

摸索鼠肝癌Ｈ２２细胞膜热休克蛋白７０最适的话导条件，并明确其体内外的抗瘤机理。方法用免疫荧光及ＦＣＭ光检测热休克Ｈ２２细胞膜ＨＳＰ７０蛋白的动态表达。并用ＭＭＣ灭活，热休克后的Ｈ２２细胞作抗原进行体内肿瘤免疫保护试验及体外肿瘤杀伤试验。     

银杏叶制剂对脑缺血再灌注后热休克蛋白、c-fos表达的影响

目的： 研究银杏叶制剂对大鼠脑缺血再灌注后热休克蛋白（HSP）、c-fos表达的影响，探讨其神经保护机制。 方法： 采用改良Longa法复制大鼠局灶脑缺血再灌注模型。56只实验大鼠随机分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组及银杏叶制剂预处理组。银杏组大鼠在实验前灌服银杏制剂2 mL，1日3次，连用5 d。应用HSP70及c-fos免疫组化染色、c-fos mRNA原位杂交、原位细胞凋亡及HE染色等方法观察缺血再灌注不同时点（1 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d）两者的变化，并对其阳性结果进行半定量分析。 结果： 银杏制剂预处理组各时段神经细胞缺血程度明显轻于未处理组、TUNEL阳性细胞数明显少于未处理组，HSP70及c-fos表达的阳性细胞数则明显多于未处理组（P<0.01）。脑缺血再灌注组1 h 时c-fos即有表达，6 h达高峰，后逐渐下降。再灌注6 h组HSP70在缺血侧皮质及基底节开始表达，24 h达高峰。再灌注6 h细胞凋亡最显著。 结论： 银杏制剂可能通过诱导HSP70及c-fos的表达，发挥其神经保护作用。     

烫伤早期大鼠肾脏HSP70表达的研究

目的探索大鼠烫伤早期肾脏内HSP70的表达规律及临床意义。方法将30只健康Wistar大鼠分为6组：烫伤后2h，8h，24h，3d，7d和正常对照组。各组大鼠取肾脏标本，用HE染色观察组织结构变化，免疫组化染色结合图像分析测定肾组织内HSP70的表达的阳性细胞计数。结果烫伤后各组HSP70在肾脏的表达的阳性细胞计数内较正常组高，差异均有统计学意义（P〈0．05）；大鼠烫伤后3d内HSP70在肾组织的表达主要定位在细胞核，到第7天核，浆表达基本一致；烫伤后HSP70的表达以肾髓质表达最高。结论大鼠烫伤早期HSP70被诱导表达对组织器官有明显的保护作用；大鼠烫伤后肾脏髓质部分较皮质部分更易损伤。     

缺血预处理对糖尿病大鼠缺血/再灌注损伤性心肌超微结构的影响

目的:研究缺血预处理对糖尿病大鼠缺血再灌注损伤性心肌超微结构的影响。方法:建立糖尿病大鼠、缺血再灌注和缺血预处理模型,随机分成6组,即非糖尿病和糖尿病的假手术组、缺血再灌注组、缺血预处理组,观察心肌酶和心肌超微结构变化。结果:非糖尿病的缺血预处理组心肌酶CK、CK-MB、LDH较缺血再灌注组明显降低,心肌超微结构损伤减轻;糖尿病缺血预处理组与缺血再灌注组相比心肌酶无降低,心肌超微结构损伤进一步加重。结论:缺血预处理对非糖尿病大鼠心肌具有保护作用,而对糖尿病大鼠心肌不具有同样的保护作用。