妊高征胎盘绒毛eNos及mRNA表达血内皮素-1、硝酸盐、钙镁的关系

目的　探讨内皮素１（ＥＴ１）、一氧化氮（ＮＯ）、钙镁在妊高征发病中的作用。　方法　用硝酸盐还原酶还原法、放射免疫及原子吸收法,分别测定７０ 例妊高征（ 妊高征组） 孕妇和３０ 例正常妊娠（（ 正常组） 孕妇血浆ＮＯ 稳定代谢终产物硝酸盐（ＮＯ－３ ） 、ＥＴ１,钙镁和血红细胞内钙镁的浓度;用免疫组化,还原型辅酶ⅡＮＡＤＰＨ黄递酶组织化学染色及原位杂交法,了解内皮型ＮＯ 合成酶（ｅＮＯＳ） 及其ｍ ＲＮＡ 在胎盘绒毛组织的表达。　结果　（１） 妊高征组血浆ＮＯ－３ 水平明显低于正常组,病情越重其值越低,并与妊高征患者平均动脉压呈负相关;（２） 妊高征组血浆ＥＴ１ 水平明显高于正常组,病情越重其值越高,并与妊高征患者平均动脉压呈正相关;（３）妊高征组血钙降低,血红细胞内钙升高;（４） 胎盘绒毛合体滋养细胞及除毛细血管外的胎儿血管内皮细胞有ｅＮＯＳ及其ｍＲＮＡ 的表达,胎盘绒毛组织只有ｅＮＯＳ表达,ｅＮＯＳ在妊高征胎盘绒毛组织的表达明显低于正常组。　结论　妊高征发病与血管内皮损伤,ＥＴ１ 产生增加,血钙减少,血红细胞内钙含量增加,致ＮＯ 减少有关     

妊高征患者绒毛合体滋养细胞一氧化氮合酶含量及活性 …

目的 搪塞妊高征患者绒毛合体滋养细胞一氧化氮合酶含量与活性的相关性。方法 采用免疫组织化学ＡＢＣ法和酶组织化学法（四唑盐法）,检测３２例妊高征患者（妊高征组）和３２例正常足月妊娠妇女（正常组）绒毛合体滋养一氧化氮合酶（ＮＯＳ）呈及活性的改变。结果 两组绒毛均存在ｅＮＯＳ、ｉＮＯＳ抗原及ＮＯＳ活性的阳性表达,且部位相同。两组绒毛血管内皮细胞中ｅＮＯＳ、ｉＮＯＳ抗原及ＮＯＳ活性的表达强度基本一致;而合     

一氧化氮合成酶mRNA转录强度对妊高征的影响

采用窄线杂交的方法测定妊高征患者及正常晚孕妇女子宫及胎盘组织中ｉＮＯＳ－ｍＲＮＡ的转录强度；并用Ｇｒｅｉｓｓ方法测定子宫及胎盘中ＮＯ－２／ＮＯ－３、ｃＧＭＰ含量。结果：妊高征患者子宫及胎盘组织中ｉＮＯＳ－ｍＲＮＡ的转录强度明显降低（Ｐ＜０．０５）；ＮＯ－２／ＮＯ－３及ｃＧＭＰ含量亦显著下降（Ｐ＜０．０１）；两种组织中ＮＯ－２／ＮＯ－３含量与ｃＧＭＰ含量呈正相关（Ｐ＜０．００１）。结论：内源性舒血管因子ＮＯ合成的减少，可能是妊高征发病过程中的一个重要环节；妊高征时组织中ｉＮＯＳ－ｍＲＮＡ转录水平下调，ｉＮＯＳ生成减少，是ＮＯ合成减少的重要原因之一。     

白细胞介素-6及其mRNA与妊高征发病的关系

目的 探讨白细胞介素－６（ＩＬ－６）及其ｍＲＮＡ与妊高征发病的关系。方法 应用逆转洋－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,检测５７例妊高征患者（妊高征组）及１５例正常妊娠妇女（正常妊娠组）母血白细胞及胎盘ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达,同时采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＡＳＡ）法检测母血及羊水中ＩＬ－６含量。结果（１）妊高征组母血ＩＬ－６及其ｍＲＮＡ含量随病中重呈升高趋势,与正常妊娠组比较,差异有极显著性,胎盘Ｉ     

妊高征胎盘绒毛组织内皮素-1及其mRNA表达和血浆内皮素-1的变化

目的探讨内皮素１（ＥＴ１）在妊高征发病中的作用。方法采用放射免疫法检测７０例妊高征患者（妊高征组）和３０例正常妊娠妇女（正常妊娠组）血浆ＥＴ１水平,用免疫组化及原位杂交方法检测ＥＴ１及ＥＴ１ｍＲＮＡ在妊高征及正常妊娠胎盘绒毛组织的表达。结果（１）妊高征组血浆ＥＴ１水平（７５０８±１６．３５）ｎｇ／Ｌ,明显高于正常妊娠组（４７６２±８６６）ｎｇ／Ｌ,病情越重其值越高,且ＥＴ１水平与妊高征患者平均动脉压呈正相关关系。（２）胎盘绒毛组织合体滋养细胞及胎儿血管内皮细胞有ＥＴ１及ＥＴ１ｍＲＮＡ的表达,且妊高征组胎盘绒毛组织ＥＴ１及ＥＴ１ｍＲＮＡ阳性信号较正常妊娠组增强。结论血管内皮损伤与妊高征的发病有关,胎盘绒毛组织ＥＴ１增高在妊高征的发病中起重要作用。     

妊高征患者白细胞介素6变化的意义

目的探讨妊高征患者白细胞介素６（ＩＬ６）变化的临床意义。方法用夹心酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）检测妊高征患者８２例（妊高征组）及正常妊娠妇女３０例（正常妊娠组）的血、尿中ＩＬ６的含量。结果重度妊高征患者血ＩＬ６含量较轻度妊高征患者和正常孕妇显著升高;妊高征组尿ＩＬ６含量均较正常妊娠组显著升高,且病情越重,升高越显著。妊高征组尿ＩＬ６与血肌酐（Ｓｃｒ）、内生肌酐清除率（Ｃｃｒ）分别成显著的正相关和显著的负相关关系,与尿β２微球蛋白（β２ＭＧ）、Ｎ乙酰βＤ葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）分别成显著正相关。结论检测ＩＬ６有助于了解妊高征患者病情及其肾脏损害情况。     

一氧化氮合成酶mRNA转录强对妊高征的影响

采用窄线杂交的方法测定妊高征患者及正常晚妇女子宫及胎盘组织中ｉＮＯＳ－ｍＲＮＡ的转录强度，并用Ｇｒｅｉｓｓ方法定子宫及胎盘中ＮＯ＾－２／ＮＯ＾－３，ｃＧＭＰ含量。     

内皮型一氧化氮合酶mRNA在人类胎盘中的表达

探讨内皮型一氧化氮合酶ｍＲＮＡ在胎盘,脐带中的表达,及ｅＮＯＳ在胎盘中的定位。方法采用原位聚合酶链反应与原位杂交的方法,以１０例正常足月妊娠的胎盘及挤带中的ｅＮＯＳｍＲＮＡ的表达进行定位研究。结论ｅＮＯＳ主要定位于胎盘合体滋养细胞及干绒毛血管内皮细胞。     

人类胎盘一氧化氮合成酶的组织化学定位

目的：了解一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）在胎盘中的定位及分布，探讨一氧化氮（ＮＯ）在妊娠中的生理病理作用。方法：采用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法，对１６例早孕绒毛、２１例正常足月妊娠胎盘、１５例重度妊高征胎盘、２例ＩＵＧＲ胎盘进行ＮＯＳ的定位研究。结果：早孕、正常足月妊娠者合体滋养细胞内有甲（ｆｏｒｍａｚａｎ）沉着，并多见于细胞基底部，细胞滋养细胞内无甲沉着，末梢绒毛中的少数毛细血管壁有甲沉着。ＩＵＧＲ、重度妊高征合体滋养细胞内亦有甲沉着，但主要位于细胞顶部，量较孕周相近的正常足月妊娠者少，末梢绒毛中的大多数毛细血管壁有甲沉着。结论：早孕、正常足月妊娠、ＩＵＧＲ、重度妊高征时，绒毛及胎盘ＮＯＳ活性部位呈特定的分布。ＩＵＧＲ、重度妊高征胎盘合体滋养细胞ＮＯＳ活性比相近孕周的正常足月妊娠者低，分布有差异。胎盘的ＮＯＳ活性降低与ＩＵＧＲ及妊高征的发病有关     

妊高征患者胎盘中一氧化氮合酶活性的变化及其意义

目的　探讨胎盘中一氧化氮合酶（ＮＯＳ） 活性在妊高征发病中的作用。　方法　采用酶组织化学法（ 四唑盐法） 研究了３２ 例妊高征患者胎盘和３２ 例正常足月孕胎盘中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性的变化情况。　结果　１．在正常足月孕胎盘和妊高征患者胎盘的绒毛血管内皮细胞和绒毛合体滋养细胞的胞浆内均存在ＮＯＳ 活性。２ ．妊高征患者胎盘中ＮＯＳ 活性显著低于正常足月孕者（ Ｐ＜ ０．０５） ,且轻度妊高征患者胎盘中ＮＯＳ活性显著高于中度及重度患者（Ｐ＜ ０．０２５,Ｐ＜ ０．０２５） 。３．妊高征患者血压与ＮＯＳ活性之间存在显著的负相关（ Ｐ＜ ０．０１）。　结论　ＮＯＳ活性降低在妊高征发病中起重要作用     

妊高征患者绒毛合体滋养细胞一氧化氮合酶含量及活性相关性的研究

目的　探讨妊高征患者绒毛合体滋养细胞一氧化氮合酶含量与活性的相关性。方法　采用免疫组织化学ABC法和酶组织化学法 (四唑盐法 ) ,检测 32例妊高征患者 (妊高征组 )和 32例正常足月妊娠妇女 (正常组 )绒毛合体滋养细胞一氧化氮合酶 (NOS)含量及活性的改变。结果　两组绒毛均存在eNOS、iNOS抗原及NOS活性的阳性表达 ,且部位相同。两组绒毛血管内皮细胞中eNOS、iNOS抗原及NOS活性的表达强度基本一致 ;而合体滋养细胞中的表达 ,则妊高征组低于正常组。两组合体滋养细胞中 ,NOS活性表达强度的例数分布与eNOS含量表达强度的例数分布呈正相关 ,而与iNOS含量无相关性。中、重度妊高征患者合体滋养细胞中 ,NOS活性与eNOS含量间也呈正相关。结论　绒毛合体滋养细胞eNOS含量及活性的改变 ,可能在妊高征的发病中起重要作用。     

基因芯片研究妊娠高血压综合征患者胎盘组织基因表达的变化

目的 检测妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织和正常妊娠胎盘组织差异表达基因谱。方法 Trizol法抽提组织总RNA并纯化mRNA；应用cDNA阵列人类全基因表达谱分析芯片检测6例妊高征患者胎盘组织和5例正常妊娠者胎盘组织中差异表达的基因，扫描仪分析结果。结果 所检测的17000个基因中，妊高征患者胎盘组织与正常妊娠者胎盘组织之间存在差异表达基因96个，表达上调基因数为78个，下调基因数为18个。初步分析发现，有85个已知功能基因，其中79个功能分类基因，大致分为癌基因和细胞周期蛋白、细胞骨架和运动蛋白、细胞分裂、离子通道和运输蛋白、细胞凋亡和应激反应蛋白、细胞受体、免疫、细胞信号和传递蛋白、转录和翻译系统、代谢、发育、细胞分化相关基因，另外有6个未分类基因、8个未知基因表达序列标签、3个cDNA片段。结论 妊高征发病的分子机制可能涉及了一些基因表达的变化。     

妊娠高血压综合征患者胎盘还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶基因的表达

目的　研究还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NADH)脱氢酶基因在妊娠高血压综合征 (妊高征 )患者胎盘组织中的表达 ,了解其在妊高征发病中的作用。方法　采用32 P标记的NADH脱氢酶cDNA探针斑点印迹杂交方法 ,对 10例正常妊娠妇女 (对照组 )及 10例中、重度妊高征患者 (妊高征组 )的胎盘组织总RNA进行检测 ,以图像处理系统测量每个杂交点的平均吸光度 (A)值 ,比较两组胎盘组织NADH脱氢酶mRNA水平。结果　妊高征组和对照组胎盘组织NADH脱氢酶平均A值分别为 2 1± 6、5 6± 16;妊高征组胎盘组织NADH脱氢酶mRNA的表达明显高于对照组 ,两组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　妊高征患者胎盘组织NADH脱氢酶基因表达的增加 ,可能在妊高征发病中起一定作用     

肝细胞生长因子与妊娠高血压综合征发病的关系

目的 :探讨肝细胞生长因子 (HGF)与妊娠高血压综合征 (妊高征 )发病的相关性。方法 :采用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT PCR)检测 2 0例重度妊高征患者 (妊高征组 )胎盘组织中HGFmRNA表达水平 ,并以 2 0例健康孕妇 (对照组 )为对照。结果 :妊高征组胎盘组织HGFmRNA表达峰度为 0 .19± 0 .0 7,较对照组 ( 0 .3 3± 0 .0 5 )显著降低 (P <0 .0 5 )。结论 :妊高征患者HGF表达异常发生于转录水平 ,HGF异常表达在妊高征胎盘缺氧中有重要作用     

妊娠高血压综合征患者胎盘表皮生长因子受体的表达

目的 探讨妊娠高血压综合征（妊高征）患者胎盘滋养细胞表皮生长因子受体（EGFR）的表达及意义。方法 采用免疫组织化学法观察30例妊高征患者（妊高征组）胎盘EGFR的表达及其与妊高征病情、胎盘重量及新生儿出生体重的关系,并与34例正常妊娠妇女（正常妊娠组）比较。结果 EGFR阳性颗粒位于合体滋养细胞的胞膜和胞浆内,少数细胞滋养细胞内也见阳性颗粒。与正常妊娠组比较,妊高征组胎盘EGFR表达显著降低（P＜0．05）,轻度、中度、重度妊高征患者胎盘EGFR表达,差异无显著性（P＞0．5）;妊高征组胎盘EGFR表达强度与胎盘重量、新生儿出生体重无显著相关性（P值均＞0．1）。结论 妊高征患者胎盘EGFR表达显著降低,可能与妊高征的发病有关。     

妊高征患者胎盘组织中胎盘异铁蛋白的表达及其与血清VCAM-1的相关性研究

目的 :观察胎盘异铁蛋白 (PLF)在妊娠高血压综合征 (妊高征 )患者胎盘组织中的表达 ,及其与患者血清中血管细胞粘附分子 1(VCAM 1)的相关性。方法 :用免疫组化染色法检测 4 5例妊高征胎盘组织 (妊高征组 )和 15例正常妊娠胎盘组织 (正常组 )中PLF的表达 ,通过高清晰度彩色病理图文分析系统对其定量分析 ;用酶联免疫吸附双抗体夹心法 (ELISA)测定血清VCAM 1含量。结果 :在中、重度妊高征胎盘组织中PLF的表达明显低于轻度妊高征组和正常组 (P <0 .0 1) ;妊高征组血清VCAM 1水平 (1310± 177ng/ml)比正常组 (6 0 9± 72ng/ml)升高显著 (P <0 .0 1) ;胎盘组织中PLF表达水平与血清VCAM 1水平呈负相关 (r=- 0 .5 8,P <0 .0 1)。结论 :妊高征患者胎盘组织中PLF表达水平降低 ,与血清VCAM 1水平呈负相关 ,这可能与妊高征的发病有关     

妊高征患者胎盘血管中PKC-α、NF-κB表达的研究

目的 :探讨蛋白激酶C α(PKC α)、NF κB在妊高征 (PIH)胎盘绒毛血管病变中的作用。方法 :用免疫组化、图像分析等方法测定胎盘绒毛细小血管PKC α及NF κB的表达及对绒毛血管病变进行综合评价 ;用RT PCR测定胎盘组织前胶原Ⅰ、Ⅲ含量。结果 :(1 )PIH胎盘细小血管管壁增厚 ,管壁纤维素样坏死、急性粥样硬化发生率显著高于对照组 (P <0 .0 1 ) ;(2 )PIH胎盘绒毛细小动脉PKC α及NF κB显色强度明显高于对照组 ;(3)PIH胎盘绒毛组织前胶原Ⅰ明显高于对照组 (P <0 .0 1 ) ;(4)胎盘绒毛细小动脉管壁PKC α及NF κB的表达与细小动脉中膜平滑肌细胞核密度 (SMC)及胎盘绒毛组织前胶原Ⅰ的表达均呈正相关 (P <0 .0 5)。结论 :PKC α及NF κB激活及表达增加参与了PIH患者胎盘绒毛细小动脉的病变过程