流式细胞术检测复宫宁诱导异位子宫内膜细胞凋亡的研究

目的 :从分子水平探讨中药制剂复宫宁治疗子宫内膜异位症的作用机理 ,观察其是否能诱导异位子宫内膜细胞发生凋亡。方法 :用手术移植法复制内异症的大白鼠模型 ,将其分成对照组、复宫宁组、丹那唑组及联合用药共 4组 ,采用灌胃给药 4周后 ,通过流式细胞仪观察异位子宫内膜细胞是否有凋亡出现。结果 :1 肉眼观察 ,用药组的移植物体积明显小于对照组 ,其异位病灶生长受抑制。 2 用药组异位子宫内膜细胞凋亡指数显著高于对照组 (P <0 0 1)。 3 在流式细胞仪直方图上 ,用药组均可见有凋亡峰 (即“亚G1”峰 ) ,且S期细胞明显增多 (P <0 0 1) ,提示细胞周期阻滞于S期而出现凋亡。对照组则没有明显凋亡峰出现。 4 复宫宁组 ,丹那唑组及联合用药组血清E2 水平均显著低于对照组 (P <0 0 5 )。结论 :本研究说明复宫宁能诱导异位子宫内膜细胞凋亡 ,其机制可能是通过降低血清E2 水平 ,致使细胞上bc1 2的表达下降。     

复宫宁治疗大鼠子宫内膜异位症的实验研究

目的:探讨复方复宫宁对子宫内膜异位症大鼠异位内膜的抑制作用。方法:采用放免法检测血清E2水平,采用HE染色和透射电镜技术观察复宫宁对异位内膜细胞形态结构的影响。结果:复宫宁组中,异位内膜体积显著缩小(P<0.01),E2水平明显下降(P<0.05);异位内膜腺上皮层明显变薄,腺体减少;细胞呈矮柱状甚至扁平状排列松散,并见较多凋亡现象和间质纤维化,而在位内膜不受影响。结论:复宫宁对大鼠子宫内膜异位症有明显的抑制作用,其作用机制可能与其调节E2水平、诱导细胞凋亡有关。     

复宫宁颗粒联合米非司酮治疗子宫内膜异位症疗效观察

目的:观察复宫宁颗粒联合米非司酮治疗子宫内膜异位症的效果.方法:98例随机分为对照组和研究组各49例.两组均予以米非司酮治疗,研究组加用复宫宁颗粒治疗.结果:治疗3个月后两组VEGF、CA125水平较均降低(P＜0.05),且研究组较对照组更低(P＜0.05).治疗3个月后两组中医证候评分均降低(P＜0.05),且研究...     

消异方对子宫内膜异位症模型大鼠异位内膜细胞凋亡的影响

目的:通过观察消异方对子宫内膜异位症大鼠异位内膜细胞凋亡倾向的影响,初步探讨消异方治疗子宫内膜异位症的机制。方法:采用自体手术移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,随机分为模型组、米非司酮组、散结镇痛胶囊组、消异方低、中、高剂量组。造模成功各组给药4 W,异位内膜细胞凋亡TUNEL检测、免疫组织化学检测Caspase-3及survivin。结果:消异方各组异位内膜细胞凋亡率均高于模型组,有显著性差异;异位内膜的Caspase-3表达比模型组显著性提高,survivin表达比模型组显著性降低。结论:消异方明显抑制异位内膜生长的作用可能是通过诱导异位内膜细胞凋亡的方式来实现的。     

复宫宁对子宫内膜异位症大鼠异位内膜雌、孕激素受体表达和动情周期的影响

目的 探讨复宫宁治疗子宫内膜异位症(内异症)的作用机理.方法 建立大鼠内异症动物模型,采用免疫组化SP法检测异位内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达和阴道涂片法观察动情周期.结果 复宫宁高、中、低剂量组能显著降低异位内膜ER、PR的表达并显著改善内异症大鼠的动情周期(P<0.05).结论 复宫宁可能通过抑制异位内膜细胞ER、PR的合成而发挥治疗作用,并具有整体调节作用.     

异位康治疗子宫内膜异位症的实验研究

目的;通过动物实验观察证帝异位康之疗效,并探讨其治疗子宫内膜异位症的机理。方法：进行急性毒笥制作子宫内异位症动物模型,设中药组、阳性对照组、空白对照组进行大体及组织学检查,并进行血液流变学检查,结果：中药组的子宫内膜明显萎缩,纤维化,血液的浓、黏、聚状态得到明显改善,优于西药组且无明显毒性。结论：异位康治疗子人异位症疗效较理想。     

子宫内膜异位症用雷公藤多甙治疗

１９８６年－１９９０应用雷公藤多甙治疗子宫内膜异位症患者４０例与接受丹那唑治疗２０例患者作临床疗效分析与对比。Ｔ２组和Ｄａｎ组总疗效相似分别为８７．５％和８４．６％。Ｔ２闭经时间长，且付反应小于Ｄａｎ，更优作为假绝经疗法。初步研究提示Ｔ２作用机理可能是其细胞毒作用的烷化剂对卵巢或／和子宫内膜的抑制。     

姜黄素对体外培养异位内膜细胞生长及凋亡的影响

目的 观察体外培养的异位子宫内膜细胞(异位内膜细胞)加入姜黄素后的生长情况及形态学变化,并检测其凋亡率及caspase-3基因表达,探讨子宫内膜异位症(内异症)的药物治疗.方法 22例内异症患者的异位内膜离体组织分离为单细胞后进行培养,在相同的生长期加入不同剂量(0、10、50μmol/L)的姜黄素后,观察其生长状况;采用TUNEL法检测细胞凋亡率;S-P免疫组化测定异位内膜细胞caspase-3基因的表达.结果 加入姜黄素后,细胞生长速度减慢,其凋亡率较未用药组增加,且呈时间剂量依赖性,caspase-3表达较未用药组增加,具有显著差异.结论 姜黄索能明显抑制异位内膜细胞的体外生长;上调caspase-3基因蛋白的表达、诱导细胞凋亡可能是其作用机制之一.     

异位灵治疗子宫内膜异位症50例分析

子宫内膜异位症多发生于育龄期妇女，主要临床表现为痛经，呈继发性，进行性加重，不孕及月经不调，自拟方异位灵全方组合共奏活血化瘀，软坚散结，消痰除湿，理气止痛之功，药少而精，力专效宏。     

参桃软肝丸含药血清对HepG-2细胞凋亡及细胞周期影响的实验研究

目的：观察参桃软肝丸含药血清对人肝癌细胞HepG-2细胞凋亡及细胞周期的影响,验证参桃软肝丸可能的作用机理。方法：将9只雄性新西兰家兔分为3组,每组3只,实验分空白对照组、实验组和阳性药物对照组,人肝癌细胞株HepG-2细胞接种于RPMI 1640培养液中,细胞培养为3～5d。MTT法观察细胞抑瘤率,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期。结果：参桃软肝丸对人肝癌细胞株HepG2的生长有抑制作用,且随剂量的增加而增强。其中,高浓度组抑瘤率最高可达43.2%。有较好的诱导凋亡作用,凋亡率可达15.6%,且阻滞细胞增殖于G0/G1期。结论：参桃软肝丸对人肝癌细胞HepG-2有较好的抑瘤和诱导细胞凋亡作用,诱导肿瘤细胞凋亡可能是其抗肿瘤作用机制之一。     

加味四逆散含药血清对大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响

目的 观察加味四逆散含药血清对大鼠肝星状细胞-T6 (HSC-T6)增殖与凋亡的影响.方法 以不同浓度的加味四逆散含药血清[(加味四逆散低浓度组(含生药量0.78 g/ml)、加味四逆散中浓度组(含生药量1.56 g/ml)、加味四逆散高浓度组(含生药量3.12 g/ml)]作用于体外培养的HSC-T6细胞,作用时间分别为12、24、48 h后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测各组HSC-T6.采用流式细胞仪和TUNEL法检测对HSC-T6凋亡的影响.结果 ①加味四逆散含药血清作用于大鼠HSC-T6后,细胞增殖受到抑制,呈时间和浓度依赖性,加味四逆散各浓度组与空白对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01);加味四逆散高浓度组[48 h:(0.399±0.041)％]与鳖甲软肝片组[48 h:(0.429±0.037)％]比较差异有统计学意义(P＜0.05).②流式细胞仪分析结果:与空白对照组比较,加味四逆散各浓度组、复方鳖甲软肝片组与HSC作用12、24、48 h后,细胞凋亡增加.与鳖甲软肝片组[12 h:(8.31±0.30)％,24 h:(16.25±0.25)％,48 h:(27.12±0.39)％]比较,加味四逆散中浓度组[12h: (17.83±0.25)％,24 h:(26.06±0.26)％,48h:(39.30±2.25)％]、加味四逆散高浓度组[12h:(27.15±0.29)％,24h:(38.96±0.51)％,48h:(49.34±0.77) ％]细胞凋亡均增加(P＜0.05).③TUNEL检测,与鳖甲软肝片组[(30.0±3.92) ％]比较,加味四逆散各浓度[低浓度组(25.1±1.48)％、中浓度组(39.30±2.25)％、高浓度组(39.30±2.25)％]药物血清作用48 h后,细胞凋亡率均增加(P＜0.01).结论 加味四逆散含药血清可抑制体外HSC-T6的增殖、促讲其凋亡,以高剂量作用48 h最明显.     

六神丸诱导NB4细胞凋亡的实验研究

目的 :观察六神丸诱导 NB4白血病细胞凋亡的作用。方法 :应用 TUNEL法和 Annexin V/ PI双染法检测不同浓度和不同时间段六神丸诱导 NB4细胞的凋亡率。结果 :TU NEL法表明凋亡率与剂量呈正相关性 ,10 0μg/ ml六神丸凋亡率最高。 Annexin V / PI双染法表明 5 0μg/ ml六神丸作用 32 h凋亡率最高。结论 :六神丸可诱导白血病细胞凋亡。     

啤酒花中蛇麻酮诱导细胞凋亡的实验研究

目的观察啤酒花中成分蛇麻酮对肿瘤细胞SGC-7901和HepG-2诱导细胞凋亡的作用,并揭示其作用机制。方法采用MTT法观察蛇麻酮体外抗肿瘤作用,采用流式细胞仪观察蛇麻酮对肿瘤细胞周期及细胞凋亡的影响。结果蛇麻酮对肿瘤细胞SGC-7901及HepG-2均有较好的疗效。蛇麻酮作用于SGC-7901和HepG-2细胞50 h后,肿瘤细胞均有明显凋亡峰出现。结论蛇麻酮可以将肿瘤细胞SGC-7901和HepG-2的细胞周期阻滞在G0/G1和S细胞期,升高细胞凋亡指数。     

长春新碱对人胃癌BGC细胞增殖与凋亡的影响及其机制

目的通过体内外水平研究长春新碱对人胃癌BGC细胞增殖与凋亡的影响及其机制。方法采用MTS法检测人胃癌BGC细胞的增殖情况;采用Hoechst荧光染色法、流式细胞技术检测细胞凋亡和细胞周期的情况;通过Western blotting法检测BGC细胞内增殖、周期和凋亡相关蛋白表达情况;荷瘤裸鼠实验检测长春新碱抑制胃癌生长情况。结果长春新碱明显抑制BGC细胞的生长,其抑制率与药物浓度呈剂量和时间相关性,将细胞周期阻滞于G1期,并促进其凋亡,下调了细胞增殖和周期相关蛋白p-FAK、FAK、E2F1、Cylin E2、Cyclin D2、CDK2、CDK6的表达,并激活了凋亡相关蛋白Caspase-3。荷瘤裸鼠实验显示长春新碱能明显抑制胃癌生长。结论长春新碱通过下调细胞增殖与周期相关蛋白的表达,使细胞周期在G1期阻滞,同时激活Caspase-3诱导细胞的凋亡。     

蛇床子素对卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响

目的:探讨蛇床子素对卵巢癌SKOV3细胞增殖与凋亡的影响以及其潜在的机制。方法:不同浓度蛇床子素作用于卵巢癌SKOV3细胞,采用MTT法检测蛇床子素对细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色和流式细胞术检测蛇床子素对细胞凋亡的影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western Blot检测Bax、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平。结果:蛇床子素明显抑制SKOV3细胞的增殖;蛇床子素干预后,有典型的凋亡小体形成,SKOV3细胞的凋亡率随着药物浓度的增加而增加,80mg/L处理组细胞的凋亡率达到(24.90±5.35)%;qRT-PCR和Western Blot结果显示各浓度蛇床子素对SKOV3细胞促凋亡因子Bax mRNA和蛋白水平表达均有上调作用,而抗凋亡因子Bcl-2mRNA和蛋白表达均下调。结论:蛇床子素能够抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与其下调抗凋亡因子Bcl-2和上调促凋亡因子Bax的表达有关。     

姜黄素诱导结肠癌LoVo细胞凋亡的作用及机制研究

目的: 探讨姜黄素促人结肠癌LoVo细胞凋亡的生物学作用及其调控机制。 方法: 体外培养人结肠癌LoVo细胞,0~20 mg·L^-1不同浓度姜黄素处理后,采用MTT 比色法测定姜黄素对细胞的增殖抑制作用,利用透射电镜观察细胞的超微结构,采用PI单标流式细胞仪测定细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡率; 采用 RT-PCR检测Bax,Bcl-2,Caspase-3,Bcl-xL mRNA表达水平。 结果: MTT检测显示姜黄素能显著抑制人结肠癌LoVo细胞的生长、増殖,呈现浓度和时间效应关系;透射电镜结果显示姜黄素能使LoVo细胞发生形态学改变,呈现典型凋亡细胞特征;流式细胞仪分析显示姜黄素能阻滞细胞周期于S期,诱导细胞发生凋亡。RT-PCR检测显示姜黄素可促进细胞中Bax,Caspase-3 mRNA 表达,抑制Bcl-2,Bcl-xL mRNA 表达。 结论: 姜黄素能显著抑制人结肠癌LoVo细胞的增殖并促进其凋亡,这种生物学效应可能与激活Bax表达、抑制Bcl-2和Bcl-xL表达而活化Caspase-3的信号通路有关。     

复方苦参注射液诱导人肝癌SMMC-7221细胞凋亡的研究

目的 探究复方苦参注射液对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响.方法 无菌培养人肝癌细胞SMMC-7721,采用MTT法检测复方苦参注射液对SMMC7721细胞的影响,复方苦参注射液的浓度分别为3.34、2.38、1.43和0.48 mg/ml;采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法测肝癌细胞凋亡率,复方苦参注射液的浓度分别为0.86、1.72和3.43 mg/ml.结果 复方苦参注射液浓度3.34、2.38、1.43、0.48 mg/ml作用于SMMC-7721 24 h的细胞抑制率分别为51.03％、53.67％、49.83％、0.03％;作用48 h后,上述浓度的细胞抑制率分别为67.14％、65.35％、62.25％、0.05％,作用72 h后,分别为74.16％、68.77％、66.04％、26.02％.结果 复方苦参注射液浓度0.86、1.72和3.43 mg/ml作用于SMMC-7721 24 h的细胞凋亡率分别为(2.86±0.35)％、(15.16±1.15)％、(13.17±0.40)％;作用48 h后,上述浓度的细胞凋亡率分别为(8.57±0.44)％、(28.07±0.76)％、(29.81±8.10)％,均高于空白对照组(1.05±0.09)％(P＜0.05).结论 复方苦参注射液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖具有抑制作用,其作用机制与诱导细胞凋亡有关.