鉴定IgE BF/sCD23的IgE介导的间接Western印迹技术的建立

基于 Western 印迹技术的基本原理,利用 IgE 结合因子/可溶性 CD23(IgEBF/sCD23)能够和 IgEFC 端特异性结合的特点,在系统研究了包括:IgE 浓度,反应时间及转移条件等数种因素后,首创了 IgE 介导的间接 Western 印迹技术.用于对 SDS—PAGE 电泳分离后样品中 IgEBF/sCD23特异性片段进行鉴定.实践证明:该法具有重复性高,操作简便及节约资金等优点.运用该技术,我们确定了 RPMI8866细胞上清中具有 IgEBF 活性的五种不同分子量的多肽.此方法的建立对开展 IgEBF/sCD23的研究以及其它特异性分子的鉴定都具有参考价值.     

sCD23刺激效应T细胞蛋白磷酸化现象以及其亚群的影响

在ｓＣＤ２３促Ｔ细胞增殖的最佳条件下，体外渗透化的活化Ｔ细胞经亲和纯ｓＣＤ２３的刺激后，比阴性对照多出６条发生磷酸化的蛋白带，分子量分别为〉１００ｋＤ，１００ｋＤ，８８ｋＤ，８４ｋＤ，７６ｋＤ和５２ｋＤ。用ＦＡＣＳ分析ｓＣＤ２３效应靶细胞中效应亚群的特征，结果显示，亲和层析纯ｓＣＤ２３可促使预活化Ｔ细胞中ＣＤ４＾＋ＣＤ８＾＋与ＣＤ４＾－ＣＤ８＾－亚群的比值由阴性对照的１．０８增高到１．５５。按细胞     

FcεRⅡ／CD23在支气管哮喘发病中作用的研究

本文以急性发作期病人和缓解期病人及正常人各２０例为研究对象，探讨ＩＬ－４－ＦｃεＲⅡ／ＣＤ２３－ＩｇＥ在支气管哮喘中的调节作用。结果表明，急性发作期病人的ＩＬ－４分泌细胞、ＦｃεＲⅡ／ＣＤ２３阳性淋巴细胞和血清总ＩｇＥ水平均明显高于缓解期病人和正常对照组。在急性发作时，ＩＬ－４和ＣＤ２３之间存在着正相关。进一步表明病人体内ＩＬ－４水平升高可以诱导淋巴细胞表面ＦｃεＲⅡ／ＣＤ２３分子表达的增强，并在ＩｇＥ抗体形成中起着重要作用。     

人类辅助生殖技术对基因印迹的影响

基因印迹是指亲本来源不同的一对等位基因表达不同的遗传现象。动物实验显示外源激素超促排卵、配子和早期胚胎体外操作和培养可导致配子和胚胎的基因印迹异常。人类辅助生殖技术（Assisted Reproductive Technology, ART）涉及以上相似的过程，初步研究表明一些ART技术操作很可能导致基因印迹异常。目前ART技术的低胚胎种植率、高临床流产率、增高的先天性畸形（特别是印迹异常疾病）等问题是否与ART各项技术操作导致的基因印迹异常有关需要进一步研究。其研究结果有可能用来改善ART技术的临床结果。     

nm23／NDPK及P53蛋白表达与大肠癌浸润,转移及预后的关系

ｎｍ２３／ＮＤＰＫ及Ｐ５３蛋白表达与大肠癌浸润、转移及预后的关系彭敦发林鸿民一、材料与方法１．材料：８９例大肠癌标本取自皖南医学院附属医院１９９０～１９９２年手术切除根治标本，经１０％福马林固定，石蜡包埋切片，片厚４μｍ。兔抗人ｎｍ２３／ＮＤＰＫ多克...     

lgf2／H19印迹基因在辅助生殖技术（ART）早期胚胎中的作用

辅助生殖技术（ART）目前成为了人们解决不孕不育的主要方式,但是通过ART出生的后代发生基因印迹改变导致表观遗传学疾病的报道出现,使得辅助生殖技术的安全性受到了人们的关注。早期胚胎发育受印迹基因的调控,而Igf2／H19基因是最早被发现的内源性印迹基因,正确的印迹对哺乳动物的胎儿和胎盘正常发育至关重要。Igf2／H19基因编码重要的印迹基因,控制正常的早期胚胎发育。Igf2／H19基因与ART早期胚胎的关系尚不十分明确,有待进一步的深入研究和探讨。     

用Southern印迹技术检测9种恶性淋巴瘤P细胞系lgCλ基因的重排

成熟B细胞具有Ig重链和轻链的基因重排，而大多数非B细胞来源的造血细胞仍维持在胚系结构．这种Ig基因重排可作为一个敏感的特异指标，即使小于5％克隆性细胞群，也可证明其克隆性．淋巴瘤为恶性克隆起源的血液病，Ig基因的重排测定可以帮助其分型和预示早期复发．本文用Southern印迹技术分析人9种恶性淋巴瘤细胞系，并于正常胚系DNA比较．这9种恶性淋巴瘤细胞系由美国国立癌症研究所提供．均为B细胞恶性淋巴瘤．实验结果表明，正常胚系DNA lgCλ基因表现为14Kb，8Kb，5Kb片断．SU—DHL-2细胞系表现为重排，比正常胚系细胞多出一个4Kb片断．NU—DHL—1细胞系亦为重排，分别为13．5Kb，7Kb，4．9Kb和3Kb．Raji细胞系亦有3Kb重排．SB细胞系表现为13．5Kb，7Kb，4．7kb重排。Daudi细胞系亦是如此．8392细胞系缺失5Kb片断．仅SU—DHL-4，SU—DHL-5．PA-3细胞系维持胚系结构．每种细胞系个体的特异性重排是其恶性克隆起源的基因标志．这对于了解B淋巴细胞肿瘤生成，发展．演变的机制有重要意义．B淋巴细胞起源的恶性肿瘤中。Cλ基因的重排为20％～75％，而T淋巴细胞起源的恶性肿瘤中，C2基因的重排为0％．在髓系起源的细胞中亦无Cλ基因的重排，因此Cλ基因的重排可鉴别T，B细胞的起源和淋，粒细胞的起源．因为每种恶性克隆均有自己的Cλ基因的重排方式．这种个体的特异性对于其本身和子细胞均是一种基因标志，利用它可以研究基因分型，克隆演化．判断治疗效果，监视复发与检测小残留疾病．尤其在这些细胞克隆缺乏明确的表型抗原时．与原代细胞比较，细胞系稳定性好，重复性高，可靠性强，尤其在发病机理，药物敏感性，耐药机理的研究中显示越来越重要的作用．     

用Southern印迹技术检测9种恶性淋巴瘤细胞系IgCλ基因的重排(英文)

成熟B细胞具有Ig重链和轻链的基因重排,而大多数非B细胞来源的造血细胞仍维持在胚系结构.这种Ig基因重排可作为一个敏感的特异指标,即使小于5%克隆性细胞群,也可证明其克隆性.淋巴瘤为恶性克隆起源的血液病,Ig基因的重排测定可以帮助其分型和预示早期复发.本文用Southern印迹技术分析人9 种恶性淋巴瘤细胞系,并于正常胚系DNA比较.这9种恶性淋巴瘤细胞系由美国国立癌症研究所提供,均为B细胞恶性淋巴瘤.实验结果表明,正常胚系DNA lgCλ基因表现为14Kb,8Kb,5Kb片断,SU-DHL-2细胞系表现为重排,比正常胚系细胞多出一个 4Kb片断,NU—DHL—1细胞系亦为重排,分别为13.5Kb,7Kb,4.9Kb和3Kb.Raji细胞系亦有3Kb重排,SB细胞系表现为13,5Kb,7Kb,4.7kb重排,Daudi细胞系亦是如此.8392细胞系缺失5Kb片断,仅SU-DHL-4,SU-DHL-5,PA-3细胞系维持胚系结构.每种细胞系个体的特异性重排是其恶性克隆起源的基因标志,这对于了解B淋巴细胞肿瘤生成,发展,演变的机制有重要意义.B 淋巴细胞起源的恶性肿瘤中,Cλ基因的重 排为20%～75%,而T淋巴细胞起源的恶性肿瘤中,Cλ基因的重排为0%.在髓系起源的细胞中亦无Cλ基因的重排,因此Cλ基因的重排可鉴别T,B细胞的起源和淋,粒细胞的起源.因为每种恶性克隆均有自己的Cλ基因的重排方式,这种个     

ATPase 抑制因子1是与HCMV pUL23蛋白相作用的宿主蛋白分子-酵母双杂交技术筛选与鉴定

目的： 利用酵母双杂交技术筛选与人巨细胞病毒相互作用的宿主蛋白分子,为探讨人巨细胞病毒pUL23蛋白在HCMV生活周期中的作用机制提供依据。方法: 利用GAL4酵母双杂交系统筛选人胚肾cDNA文库,以获得与人巨细胞病毒pUL23蛋白相互作用的宿主蛋白分子,再通过回交试验和体外GST-pulldown试验验证两者之间的相互作用。结果: 酵母双杂交筛选得到宿主蛋白分子ATPase inhibitory factor 1（ATIF1）,回交试验和体外GST-pulldown试验再次确认ATIF1能够与人巨细胞病毒pUL23蛋白相互作用。结论: pUL23确实能够与ATIF1相互作用,它们之间的相互作用可能为研究pUL23在病毒生活周期发挥的功能提供依据。