RNA——一个复杂的生物学功能体系

在生物信息流动过程中,RNA起着很重要的作用。由于RNA在这个过程中具有不同的功能,人们将其分为信使核糖核酸(mRNA)、转移核糖核酸(tRNA)和核糖体核糖核酸(rRNA)。它们作为连接DNA与蛋白质的桥梁,使DNA所携带的遗传信息准确地表现为生物学活性物质,表达出特定的生物学功能。近年来,RNA的研究冲破了人们关于RNA的原有的概念,发现RNA的功能远不止这些,它还涉足于以前被认为是蛋白质所“垄断”的领域,如发现RNA具有酶活性,参与基因表达调控     

使用聚合酶链反应检测HCV—RNA

对122例非甲非乙肝病人采用PCR技术进行了HCV—RNA的检测，并同时采用ELISA法桂测了HCVM作为对比，结果：其中HCV—RNA的阳性率为95.1％(116例),HCVM阳性率为79．5％(97例)．结果表明：PCR技术用于检测HCV—RNA方法简便、可靠、敏感性高．     

CRISPR-Cas9——RNA介导的基因组编辑技术研究进展

成簇规律间隔短回文重复RNA-CRISPR相关蛋白质9系统(clustered regularly interspersed short palindromic repeat RNA/CRISPR-associated 9,CRISPR-Cas9)来源于Ⅱ型CRISPR-Cas系统,在自然条件下为细菌抵抗噬菌体侵袭的获得性免疫防御系统.改造后的CRISPR-Cas9系统可作为基因组编辑的有效工具,是最具前景的新一代基因修饰策略.CRISPR-Cas9系统不仅能对基因组进行单个位点的特异性识别,还可同时对基因组的多个位点进行修饰,实现对基因组的编辑如基因敲除、基因敲入的功能.目前,CRISPR-Cas9技术已在斑马鱼、哺乳动物细胞和小鼠动物模型中,通过可编程RNA实现了基因的精确修饰.可以预见,CRISPR-Cas9技术将在基础医学和临床医学领域发挥重要的作用.     

NP—40—β—巯基乙醇—RNA酶A法制备DNA供PCR检测使用

我们建立了一个新的制备细胞ＤＮＡ的快速方法，即“ＮＰ－４０，β－巯基乙醇，ＲＮＡ酶Ａ”法，所得的ＤＮＡ制备质量很好，能满足ＰＣＲ和分子杂交的需要，并可节省实验时间和使用的酶，值得向同道介绍。     

一种生物素标记探针DNA—RNA原位杂交方法

一种生物素标记探针ＤＮＡ—ＲＮＡ原位杂交方法王建明，李凌，沈贵华，崔惠云，李申德我们采用国产生物素光标记试剂盒标记探针，用于细胞涂片，冰冻切片及石蜡切片的原位杂交，检测细胞中目的基因的转录产生水平。一、材料和方法１．标本：人大肠肿瘤手术标本，冰冻切片...     

514例HCV RNA FQ—PCR定量检测分析

目的 为了解6年来丙型肝炎病毒载量的流行病学特点。方法 荧光定量PCR对2002年3月14日-2007年6月6日HCVRNA进行定量检测。结果 6年间，男性148例（阳性75例），女性99例（阳性56例）（P=0．989，x^2=0．0002）；男性平均年龄为45．21±15．37，女性平均年龄为39．96±9．77岁（P=0．165，t=1．399）；病毒载量男性4．18±1．16，女性4．12±1．17（P=0．748，t=0．323）。任两年间HCVRNA载量均无统计学改变（P〉0．05）。结论 6年间丙型肝炎感染率男性显著高于女性；男性和女性阳性患者在年龄上无统计学差异；男性和女性及每年间HCVRNA载量均无统计学差异。     

鹅流感病毒2／96—H5N1亚型毒株RNA1—3及RNA5节段核？…

目的 明确广东鹅流感病毒２／９６－Ｈ５Ｎ１亚型毒株ＲＮＡ１－３和ＲＮＡ５节段核芏酸全序列及其所编码蛋白的氨基酸序列,以及这些基因节段与香港禽流感病毒１５６／９７－Ｈ５Ｎ１亚型毒株相应节段间的关系。方法 病毒粒ＲＮＡ经逆转录合成ｃＤＮＡ,经聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增,产物纯化,采用双脱氧链末端终止法进行核苷酸序列测定。结果 广东鹅流感病毒２／９６－Ｈ５Ｎ１亚型毒株ＲＮＡ１－３和ＲＮＡ５节段长度分别为     

RNA催化剂在RNA加工过程中的作用

近年来,RNA催化剂的研究进展十分迅速,其成就激动人心。1981年,Cech等人首先发现四膜虫rRNA前体具有自我催化能力。并命名为Ribozyme,意指具有催化能力的RNA。随后,许多学者竟相开展了RNA催化剂的研究。1983年,Altman和Pace两个小     

RNA干扰沉默IGF—IR基因治疗卵巢癌的实验研究

目的研究RNA干扰技术沉默IGF—IR在卵巢癌靶向治疗中的意义。方法以IGF—IR为目的基因，设计合成siRNA重组质粒；利用Real—timePCR和Westernblot方法，分别从mRNA水平及蛋白水平检测IGF—IR的表达；通过MTF实验检测细胞增殖情况。结果本实验成功构建了三个表达载体pSihIGF—IR-1、pSihIGF—IR-2和pSihIGF—IR-3，转染卵巢癌OVCAR3细胞，48h后，IGF—IR的mRNA及蛋白水平均明显降低，并且显著抑制了OVCAR3细胞的体外增殖。结论应用RNA干扰技术，能够高效、特异的沉默IGF—IR基因的表达，抑制肿瘤生长。针对卵巢癌IGF—IR的RNAi技术，可能为卵巢癌的临床治疗开拓-条新的途径。     

RNA干扰

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是几近年发现的基因表达调节新机制，双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）以调节子的身份降解目的mRNA，从而调节目的基因的表达。这一发现使人们重新认识了RNA在基因信息流控制过程中的重要性。RNAi的发生机制除了研究最多的转录后基因沉默外，还发现与翻译水平调节和基因组甲基化等事件有关。RNAi被应用于生命科学的很多方面：在基因功能研究中它已成为倍受青睐的基因敲下的工具，而且它正促使新一轮基因组范围内基因功能研究运动的蓬勃开展；在癌症、病毒疾病以及代谢失调症等重大疾病的治疗方面，RNAi正显示出巨大的临床应用潜力，犹如给医药界带来了新鲜空气一样令人振奋。     

RNA干涉

RNAi(RNA interference)即 RNA干涉 ,是最初在线虫 Caenorhabditis elegans中发现的在双链 RNA(ds RNA)的介导下特异性降解相应序列的 m RNA的现象 ,属于转录后基因沉默 (PTGS)机制 ,广泛存在于从真菌到植物 ,从果蝇等无脊椎动物到鼠等哺乳动物的多种生物中。RNAi是自然存在的生物抵抗病毒入侵、抑制转座子活动的一种防御性机制 ,对于生物体的基因调控和生长发育可能也有着重要的作用。由于其存在的广泛性以及抑制基因表达的特异性和高效性 ,RNAi已经在短短的几年时间里成为功能基因组研究中的有力工具     

构建鼠IL—6反义RNA的逆转录病毒重组体

用限制性内切酶消化，提取鼠白细胞介素６ｃＤＮＡ全基因，并克隆至逆转录病毒穿梭质粒ｐＺＩＰ－ｎｅｏＳＶ（ｘ）ＢａｍＨＩ位点，经斑点杂交，限制性内切酶消化，电泳鉴定，证实成功地构建了表达鼠ＩＬ－６反义ＲＮＡ的逆转录病毒重组体，从而为研究白细胞介素６基因转移与治疗提代了物质基础。     

人原癌基因c—fos反义RNA制备及初步应用

采用逆转录 DNA 聚合酶链反应方法合成了人原癌基因 c—fos 特定 cDNA 片段.然后,将该片段与 PGEM3Zf( )质粒重组,构建成为可体外转录 c—fos 反义 RNA 重组质粒.选用 T7RNA 聚合酶系统合成了 c—fos 反义 RNA。且本文对反义 RNA 的应用亦进行了初步探讨.     

RNA干涉

RNAi(RNA interference)即RNA干涉，是最初在线虫Caenorhabditis elegans中发现的在双链RNA(dsRNA)的介导下特异性降解相应序列的mRNA的现象，属于转录后基因沉默(PTGS)机制，广泛存在于从真菌到植物，从果蝇等无脊椎动物到鼠等哺乳动物的多种生物中。RNAi是自然存在的生物抵抗病毒入侵、抑制转座子活动的一种防御性机制，对于生物体的基因调控和生长发育可能也有着重要的作用。由于其存在的广泛性以及抑制基因表达的特异性和高效性，RNAi已经在短短的几年时间里成为功能基因组研究中的有力工具。     

RNA研究进展

近10年来,人们对RNA领域有了更多更新的研究发现,RNA早已不再局限于编译蛋白质,它还影响着生物体的基因表达、细胞周期及个体发育过程。小干扰RNA(smallinterfering RNA,siRNA)和非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)对生物体的生命活动有着重要的调控作用。siRNA引起RNA干扰(RNA interference,RNAi),ncRNA在包括转录调节、染色体复制、RNA剪切及加工、维护mRNA稳定和     

暂时神经联系的计算机模拟：一个反映DNA—RNA—Pr系统作…

本文介绍了一个能反映ＤＮＡ－ＲＮＡ－Ｐｒ系统作用的暂时神经联系的模型以及为配合模拟而进行的两项记忆行为的观察，利用该模型进行了视听记忆功能和经典条件反射的模拟。结果表明：基于神经生物学的模型有益于表达和进一步探讨记忆、条件反射等脑的高级功能的机制。利用该模型，提出了海马参与触发有关ＤＮＡ－ＲＮＡ－Ｐｒ系统来维持长期记忆的必要组构的假说。