人类补体C4表型与C4A：C4B比值关系初探

用激光薄层密度扫描仪对171份血清补体 C4的电泳色带进行扫描,并求取其 C4A:C4B 比值(R 值)。结果发现含 C4A·QO 基因者的 R 值范围0.068～0.429,平均0.228,而含 C4B·QO 基因者的 R 值范围2.197～9.334,平均3.973;在所检出的7例具有 C4B·座位重复基因的样本中.其 R 值均很小(0.120～0.625),且其中含有 C4A·QO 者与不含 C4A·QO 者的 R 值有明显差异.结果表明根据 R 值大小来指定C4·QO 基因和重复基因是有一定道理的.在最常见的 C4表型3,3/1,1中,其 R 值呈常态分布,但表型3,3/2,1、3,3/2,2和3,2/1,1的 R 值多大于1.0,而表型4,4/2,2和4,4/2,1的 R 值多小于1.0。两组表型的 R 值之间的两两比较有显著性差异(P<0.01)。     

HBVcccDNA在乙型肝炎患者血清、外周单核细胞及肝组织中的分布

目的 观察乙肝病毒共价闭合环状DNA(HBVcccDNA)在乙肝患者血清、外周单核细胞(PBMC)及肝组织中的分布情况.方法 选取血清HBVDNA＞105拷贝/ml的乙肝患者50例,血清HBVDNA＜105拷贝/ml的乙肝患者30例,脂肪肝患者(非乙型肝炎)20例,同时采用实时荧光定量聚合酶链反应检测患者血清、PBMC及肝组织中HBVcccDNA的存在情况.结果 50份血清HBVDNA＞105拷贝/ml的标本中血清HBVcccDNA检出28例,检出率56%,PBMC HBVcccDNA检出29例,检出率58%,肝组织中HBVcccDNA检出44例,检出率88%,血清、PBMC的检出较肝组织检出差异有统计学意义P＜0.005,血清较PBMC检出差异无统计学意义P＞0.005.30份血清HBVDNA＜105拷贝/ml的标本中血清、PBMC HBVcccDNA检出均为2例,检出率6.67%,肝组织中HBVcccDNA检出6例,检出率20%,血清、PBMC、肝组织三者之间检出差异无统计学意义,P＞0.005.20份脂肪肝患者的血清、PBMC及肝组织中均未检出HBVcccDNA.结论 HBVcccDNA主要存在于乙型肝炎患者的肝脏中,乙肝患者血清及PBMC中也有HBVcccDNA的存在但较肝组织中要少的多.     

北京市2006年新确认HIV-1感染者耐药突变的流行性研究

目的 研究北京市2006年新确认HIV-1感染者毒株的耐药突变本底数据.方法 随机选取北京市2006年新确认HIV-1感染者抗凝全血标本50份,提取血浆病毒RNA,用逆转录聚合酶链反应扩增HIV-1 pol区基因片段,并进行序列测定及耐药基因型分析.结果 成功扩增出34份标本的pol区基因;在1例样本的蛋白酶编码区检测出1个主要耐药突变,7例样本检测出7个次要耐药突变,主要耐药突变为M46L,毒株是CRF01_AE亚型,次要耐药突变有4种,出现的频率分别为A71T(2个)、A71V(3个)、Q58E(1个)、V11IV(1个).在14例样本逆转录酶编码区检测出一种或多种核苷类和(或)非核苷类逆转录酶抑制剂耐药突变,9例标本检出核苷类逆转录酶抑制剂耐药突变,出现频率分别为:V118I(42.9%)、M184V(7.1%)、A62V(7.1%)、K70T(7.1%)、K65R(7.1%)、K219N(7.1%)、T69d(7.1%)、V75LV(7.1%)、K219R(7.1%);10例标本检出核苷类逆转录酶抑制剂耐药突变,出现的频率分别为V1061(35.5%)、Y181C(15.4%)、K103KR(7.7%)、K103R(7.7%)、L100LV(7.7%)、V1081(7.7%)、V179D(7.7%)、V179DV(7.7%).结论 北京市2006年新确认HIV-1感染者毒株中已经存在一定比例耐药突变,有必要定期进行耐药性监测研究.     

河北省人感染汉坦病毒G2片段基因分型及序列特征分析

目的 了解河北省人感染汉坦病毒的基因型和基因亚型.方法 根据76～118株和R22株的C2编码区设计型特异性引物,利用RT-nested PCR技术对采集的HFRS患者中汉坦病毒抗体阳性的血清标本进行检测及基因分型,从中选取部分标本的扩增产物纯化回收后进行核苷酸序列测定,用DNAStar软件包进行基因分析.结果 69份阳性血清标本经RT-nested PCR检测17份阳性,检出率为24.64%,其中≤7 d的标本检出率为34.29%,8～14 d的检出率为19.23%,≥14 d的未能检出.17份阳性标本均为SEO型.对其中9份扩增产物的G2区测序后表明,9份血清标本的同源性为92.0%～100.0%,其中HeB7与其他8份标本的同源性为92.0%～95.0%,属不同亚型,与R22的同源性为97.7%,同属于S1亚型;除HeB7外其余8份标本同源性高达95.7%～100%,同属于S3亚型.9份标本与76～118株的同源性仅为70.3%～72.7%.结论 河北省人感染汉坦病毒以SEO型为主,亚型以S3为主,也存在S1亚型.在一定范围内,同型汉坦病毒基因相对保守,具有区域稳定性特征.     

丙肝病毒单片段抗体检测分析

目的 探讨丙型肝炎病毒感染者抗.HCV各区段抗体的反应性及单片段抗体ELISA测定临床应用的可行性和应用价值.方法 留取经2种第三代丙肝病毒总抗体ELISA检测试剂A、B检测结果为阳性的血清36份、可疑血清2份、阴性血清40份,用丙肝单片段抗体检测试剂C对其进行检测,并以CHIRON公司第三代免疫印迹丙肝抗体确认试剂D检测结果作为对照.结果 78份血清中,抗HCV-C、NS3、NS4、NS5四区单片段抗体阳性检出率分别为44.87%、47.44%、30.77%、28.21%;单片段抗体检测试剂C的阳性率为43.59%,与第三代总抗体检测试剂A、B的阳性率(分别为48.72%和46.15%)无显著差异;试剂A、B检出的阳性血清36份中,根据试剂C的核心区、NS3、NS4及NS5区单片段抗体检测结果综合判断确定阳性结果34份,不确定结果2份,阳性符合率为94.44%;2份可疑血清根据单片段抗体检测结果综合判断均为不确定结果;40份阴性血清中,单片段抗体检测检出阴性结果40份,阴性符合率为100%.试剂C对所有78份血清检测结果为阳性34份,不确定4份,阴性40份;而确认试剂D检测结果为阳性34份,不确定3份,阴性41份.结论 NS3区和c区为抗-HCV ELISA检测中的主要血清学标志;单片段检测试剂C与第三代总抗体检测试剂A、B之间的检出率无显著差异,结果符合良好,且与国际上公认的CHIRON第三代免疫印迹丙肝抗体确认试剂检测结果高度一致.单片段抗体检测在临床判断病情、病毒复制情况及预后方面较总抗体检测能提供更多信息.     

广州市亚运接待宾馆酒店淋浴热水军团菌污染状况分析

目的对广州市亚运接待宾馆酒店淋浴热水的军团菌污染状况进行调查分析,提出相应的对策。方法采集广州市48间亚运接待宾馆酒店淋浴热水108份,按照卫生部《公共场所集中空调通风系统卫生规范》2006年附录A进行军团菌的检测。结果 108份淋浴热水中,10份淋浴热水共检出11株嗜肺军团菌,阳性率为9.3%;其中LP1、LP3、LP6血清型分别占45.5%、18.2%、36.4%;三星级、四星级和五星级宾馆酒店淋浴热水军团菌的阳性率分别为15.2%、11.1%和2.6%。结论广州市亚运接待宾馆酒店的淋浴热水存在嗜肺军团菌的污染,建议定期清洗消毒淋浴设施,并加强对淋浴热水中军团菌的监测,以防范军团菌病的发生。     

新疆地区苯丙氨酸羟化酶基因的突变研究

目的 了解新疆地区苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PAH)基因的突变规律及特点.方法 应用聚合酶链反应一单链构象多态性分析及基因测序列方法 ,检测46例苯丙酮尿症患者PAH基因第3、5、6、7、11和12外显子及其两侧内含子序列.结果 在92个PAH等位基因中共检出20种不同的突变基因,总检出率为73.9%(68/92).其中常见基因突变R243Q、EX6-96A＞G、R111X、Y356X和V399V与我国北方地区基本类似.较常见基因突变F161S、L255S、P281L和R413P与国内其他地区相比差异较大.E280G和A434D为在国际上第2次检出;L255S、P281L、R261Q和165T为在国内第2次检出.新疆少数民族也发现了13种PAH基因突变,均系在本民族中首次报道,其突变基因的类型表现出鲜明的民族特色.结论 从对新疆地区PAH突变基因的研究结果 来看,该地的遗传基因不仅具有独立、保守的特性,而且还存在着相互交叉、相互融合的特征.     

两种巨细胞病毒IgG抗体ELISA诊断试剂性能评价

目的对国内两种巨细胞病毒IgG抗体ELISA诊断试剂进行评价。方法用两种试剂对BBI公司的质控盘QTC711,血清转化盘PTC901,BIOMEX公司血清转化盘SCP—CMV-001（RP-003）、SCP—CMV-002（RP-019）,儿童、孕妇和门诊患者2163份标本进行检测,对不一致的样本用DiasorinELISA试剂盒和Mikrogen重组免疫印迹试剂盒进行复测,比较两种试剂的灵敏度、特异性和对不同人群的检测差异。结果A试剂对3个血清转化盘的检出时间均早于B试剂,平均提前25d,与AbbottImxCMVIgG检测灵敏度一致。两种试剂检测孕妇样本607份,8份不一致,总符合率98．68％;门诊样本512份,7份不一致,总符合率98．63％;儿童样本1044份,74份不一致,总符合率92．91％,两试剂对儿童人群的符合率低于孕妇和门诊人群。两试剂对三个人群检测均为阴性的161份样本,和A试剂检测为阳性B试剂检测为阴性的89份样本,用意大利Diasorin公司CMV—IgGELISA试剂复测,A试剂与Diasorin的阳性符合率为100％,阴性符合率为93．06％,总符合率为95．22％;B试剂与Diasorin的阴性符合率为100％,78份阳性未检出,总符合率为68．92％。选择A试剂与Diasorin结果不一致的样本12份,一致的样本6份,用重组免疫印迹复测,其中14份阳性,4份阴性。结论国内A试剂对血清转化盘的检测窗口期较B试剂显著提前。两试剂对孕妇和门诊人群的符合率高于儿童人群。两试剂不符合的样本用进口试剂盒复测,A试剂与进口试剂盒的符合率高于B试剂,显示了较高的灵敏度。     

慢性乙型肝炎患者血清IL-6水平与多聚人血清白蛋白受体的相关性研究

目的　探讨慢性乙型肝炎患者血清白细胞介素 6 (Interleukin 6 ,IL 6 )与乙型肝炎病毒(HBV)复制的关系及其在肝脏病理损伤中的作用。方法　对 6 6例不同类型的乙型肝炎标志物阳性患者及不同程度的慢性乙型肝炎患者血清IL 6水平进行检测 ,同时检测HBV复制标志物———多聚人血清白蛋白受体 (polymerizedhumanserumalbuminreceptor,PHSA R)。结果　HBV携带组及轻度慢性乙型肝炎组中PHSA R阳性患者血清IL 6水平高于PHSA R阴性患者 (P <0 .0 1) ;38份PHSA R阳性患者PHSA R检测吸光度A值与血清IL 6水平显著相关 ,r =0 .6 94(P <0 .0 1) ;血清IL 6水平按乙型肝炎病情严重程度依次增高。结论　血清IL 6水平与HBV复制及肝脏损伤程度相关 ,血清IL 6水平检测作为指示乙型肝炎患者HBV的复制及辅助病情和疗效的判定 ,可能是一个新的有价值的指标     

三个角膜营养不良家系的TGFBI基因突变

目的 筛查3个角膜营养不良家系患者TGFBI基因突变.方法 采集患者外周静脉血,提取基因组DNA,采用直接测序对TGFBI基因全部17个外显子以及外显子内含子拼接部进行序列分析.结果 3个家系中两个家系表型为格子样角膜营养不良1型(1attice corneal dystrophy type I,LCD I)和格子样角膜营养不良3A型(lattice corneal dystrophy type ⅢA,LCDⅢA),另外1个家系为Avellino角膜营养不良(avellino corneal dystrophy,ACD).在两个LCD家系中分别检出编码子R124C和H626R突变,而在ACD家系中检出R124H突变.结论 TGFBI基因是引起角膜营养不良的致病基因.R124和H626是角膜营养不良的突变热点.     

夫妇血型不合的孕妇产前免疫性抗体检测分析

目的:探讨夫妇血型不合的孕妇免疫性IgG抗体效价异常率及临床意义, 观察凝聚胺法(MPT)检测孕妇血清中IgG抗A(B)及Rh血型抗D抗体的灵敏度和特异性.方法:常规检测夫妇ABO及RhD血型, 对夫妇ABO及Rh血型不合的孕妇血清进行不规则抗体筛选及特异性鉴定;用MPT法检测孕妇血清中IgG抗A(B)及Rh抗D抗体效价.结果:在986例夫妇ABO血型不合的孕妇血清中, MPT法检出IgG抗A(B)效价≥1∶ 64者528例(53.5%), 传统试管法检出512例(51.9%), 两者比较无统计学意义(P＞0.05);在15例RhD阴性孕妇中检出抗D抗体11例(73%).结论:产前对夫妇进行ABO、 RhD血型及IgG抗A(B)和抗D效价检测, 发现异常及时进行治疗, 可减少母婴血型不合新生儿溶血病的发生率;MPT法检测IgG抗A(B)及抗D抗体效价, 操作简便, 结果准确.     

2011-2012年肇庆市禽流感职业暴露人群及外环境病毒分布监测分析

目的了解肇庆市禽类职业暴露人群禽流感病毒感染状况以及外环境禽流感病毒的分布情况。方法采集禽类职业暴露人员血清样本,用红细胞血凝抑制试验（HI）检测H5N1流感抗体;采集外环境样本,用荧光定量PCR法检测禽流感病毒FluA、H5、H7和H9核酸。结果2011-2012年共采集职业暴露人员血清样本400份,检测H5N1抗体均为阴性;共采集外环境有效样本202份,检出FluA阳性25份,阳性率为12．38％,其中AH9亚型阳性14份（56．00％）。AH7亚型阳性1份（4．00％）,A未分型10份（40．00％）,未检出AH5亚型。结论肇庆市职业暴露人群尚未发现感染高致病性禽流感H5N1病毒．夕h环境存在禽流感病毒的污染,H9亚型是主要的病原体。     

新生儿筛查3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症可疑患儿临床及基因突变分析

目的了解新生儿疾病筛查中疑诊为3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症(MCCD)患儿的临床表现;分析3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶(MCC)基因突变类型。方法 2015年8月至2020年3月将在青岛市新生儿疾病筛查中心接受新生儿筛查,并疑诊为MCCD的11例患儿(男9例,女2例)纳入本研究,对所有患儿的生长发育等随访资料进行回顾分析;对部分可疑患儿进行MCC基因突变及尿气相色谱-质谱(GS/MS)检测,通过分析结果,预测青岛地区MCC基因突变谱。结果 (1)11例可疑患儿均无MCCD相关临床表现。11例可疑患儿中1例确诊为MCCD,有3例为母源性MCCD患儿,1例患儿排除MCCD。(2)本次共检出10种基因突变类型,其中MCCC1突变8种,分别为c.639+2TA、c.1225CT/p.R409X、c.945TC/p.Y315Y、c.626GT/p.G209V、c.863AG/p.E288G、c.227_228delTG/p.V76Gfs*4、c.1690delA和c.1075CA。MCCC2突变2种,为c.281+1GA和c.592CT/p.Q198*。经预测,本次检出的三种新突变c.626GT c.1075CA和c.281+1GA可能致病。结论 11例可疑患儿均无MCCD相关临床表现,本研究MCCC1突变多见,c.639+2TA突变可能为热点突变。     

维生素A酸(视黄酸)的致畸作用

视黄酸是一种维生素的代谢产物,具有部份维生素A生理作用的生物活性物质。视黄酸与维生素A不同,在体内半衰期短,正常状态在血清中不能检出。注射给药,血清中的半衰期为16～20小时,投药4～5天后在血清中不能被检出,因此生效快,同时其作用消失也快。适应症:对重症的囊状痤疮,慢性皮炎等,维生素A可能具有使上皮细胞恢复正常     

儿童博卡病毒感染的临床特点

目的了解儿童博卡病毒(Human bocavirus,HBoV)感染的临床特征,探讨博卡病毒感染的疾病相关性。方法收集从2005年10月至2006年2月因急性呼吸道感染住院儿童鼻咽抽吸物(nasopharyngeal aspirates,NPA)148份,并采集了2份博卡病毒呼吸道样本阳性患者的血清。采用聚合酶链式反应(PCR)扩增的方法,对鼻咽抽吸物及血清标本进行了检测,并进行序列测定。结果从148份急性呼吸道鼻咽抽吸物中检出11份博卡病毒感染阳性,阳性检出率为7.4%,所获得的2例博卡感染血清核酸扩增也呈阳性。该11例博卡病毒阳性患者临床主要表现为支气管炎,支气管肺炎或肺炎症状,部分患者伴随有腹泻症状。结论博卡病毒感染患者均有下呼吸道感染表现,博卡病毒可能是引起下呼吸道感染的一个重要病原;博卡病毒血清阳性提示,博卡病毒有可能引起病毒血症;博卡病毒感染除表现下呼吸道症状外,有可能引起肠道等其他相关症状。     

应用实时荧光PCR法快速检测从业体检人群肠道致病菌结果分析

目的分析与评价实时荧光PCR法快速筛查从业人员沙门菌、志贺菌的带菌情况。方法收集从业人员肛拭样本,用实时荧光PCR法进行快速筛查,采用常规细菌培养法作为标准方法进行验证和血清分型,分析其灵敏度及特异性。结果在24598份样品中,实时荧光PCR法检出沙门菌阳性18份,志贺菌阳性11份．阳性率分别为0．732‰和0．447‰。通过细菌培养法验证及分型,14份标本确认为沙门菌阳性,阳性率为0．569‰,分布于A、B、C、D、E、F6个群11个血清型;6份标本确认为志贺菌阳性,阳性率为0．244‰,分布于B、C、D3个群5个血清型。实时荧光PCR法筛查沙门菌、志贺菌的灵敏度均为100．00％。特异性均为99．98％。结论与传统细菌培养法相比．实时荧光PCR法简便、快速,可提高检测的灵敏度和特异性,减少工作量,适用于肠道致病菌的快速筛查。     

人类白细胞抗原-A基因芯片分型研究

目的 探索人类白细胞抗原-A（HLA-A）基因芯片分型，为器官移植临床配型服务。方法 根据中国汉族南方人常见的HLA-A位点基因及其多态性的独特序列，设计并合成48条特异性的寡核苷酸分型探针，将其点在玻片上，制成芯片。基因组DNA通过组间特异性引物扩增，并用荧光素Cy5标记。标记后的产物与结合在芯片上的探针进行杂交，通过荧光扫描仪获得杂交产生的荧光信号值，再经过计算机软件自动分析，确定样品的HLA-A基因亚型。用该方法对120份样本进行HLA-A基因分型。结果 120份待检样本，其中6份因PER无产物，不能分型。1份信号杂乱，不能分型。其余113份样本分型成功。实际检出A抗原特异性结果为A2（含A203）：56；A11（含A1101）：52；A24：33；Al：8；A30（含A3001）：7；A33：21；A26：1；A29：2；A31：3；A68：2；A3：9；A32：1。未检出A＊3002基因型。整个检测耗时约4．5h。芯片检测的重复率为100％。结论 HLA-A基因芯片是一种理想的分型方法，具有特异性高、重复性好、操作简便、所需样本量少、结果判读容易、一次可作多份样本的优点，适合临床器官移植配型应用。     

青海省祁连县牦牛和山羊的莱姆病螺旋体和Q热柯克斯体血清抗体调查

为了解我国青海省祁连县家畜中莱姆病螺旋体及Q热柯克斯体的自然感染及复合感染状况,收集该地牦牛和山羊的血样标本,采用间接免疫荧光法分别检测血清莱姆病螺旋体及Q热柯克斯体抗体.共收集了200份血样,山羊及牦牛各100份,两种家畜均为当地的主要家畜.结果显示,牦牛血清中有11份为莱姆病螺旋体抗体阳性,23份为Q热柯克斯体抗体阳性 山羊血清中有17份为莱姆病螺旋体抗体阳性,27份为Q热柯克斯体抗体阳性 3只山羊和7头牦牛血清为双抗体阳性.结果提示该地区为莱姆病和Q热的自然疫源地,牦牛和山羊可能隐性感染了Q热柯克斯体和（或）莱姆病螺旋体.     

EB病毒胸腺嘧啶激酶抗体在鼻咽癌血清学诊断中的作用

目的 建立EB病毒感染和鼻咽癌血清学检测的敏感,特异和有效的方法.方法 以EB病毒早期蛋白胸腺嘧啶激酶为检测抗原,建立ELISA和免疫纤维膜条方法,检测血清中的特异性的IgG抗体.结果 用ELISA和诊断条同时检测了401份血清,其中鼻咽癌患者血清127份.两种方法检测鼻咽癌患者血清抗体均阳性,274份门诊患者血清中,55份ELISA和诊断条检测抗体均阳性,3份诊断条方法检测阳性的血清,ELISA检测A值接近临界值.对胸腺嘧啶激酶的抗体阳性率明显地高于早期蛋白P54.结论 以胸腺嘧啶激酶为检测抗原,为鼻咽癌血清学诊断和高危人群的筛查提供更有效的手段.     

EB病毒潜伏膜蛋白2A抗原表位的融合表达及其意义

为了探讨含有EB病毒潜伏膜蛋白2A(LMP2A)抗原表位片断表达的融合蛋白在鼻咽癌血清学检测中的应用意义,通过重叠延伸PCR方法,合成了3对相互重叠的寡核苷酸引物,涵盖LMP2A的主要的4个抗原表位,将它们拼接在一起构建一个多肽融合基因,克隆到PGEX-4T-2载体中表达融合蛋白,以GST亲和层析柱法纯化融合蛋白,鉴定后以此为抗原检测鼻咽癌患者的血清。结果表明,获得了含EB病毒LMP2A主要的4个抗原表位的融合蛋白(EC2A),蛋白纯度达90%以上,ELISA结果显示鼻咽癌患者血清的检出率为77.9%,正常人群血清为阴性,与常规的VCA-IgA法进行比较,有9份(13.3%)血清VCA-IgA为阴性而EC2A-IgG检出阳性,为鼻咽癌的临床检测提供了新思路,也为后续的单克隆抗体制备奠定了基础。