上皮性卵巢癌组织中RASSF1A和BRCA1及p16基因异常甲基化检测及其临床意义的研究

目的：探讨RASSF1A、BRCA1和p16基因异常甲基化在上皮性卵巢癌发生及发展中的作用。方法：采用甲基化特异性PCR法检测63例上皮性卵巢癌组织和相应的41例盆腹腔转移灶及10例癌旁卵巢组织中RASSF1A、BRCA1和p16基因启动子区甲基化状态。结果：上皮性卵巢癌组织原发灶及转移灶中RASSF1A、BRCA1和p16基因启动子区甲基化发生率分别为49．2％、25．4％、20．6％及58．5％、26．8％、22．0％,均显著高于正常卵巢组织中的发生率,P值均〈0．05。RASSF1A基因启动子区异常甲基化的发生率在临床Ⅰ、Ⅱ期显著低于Ⅲ、Ⅳ期,Х^2=13．018,P〈0．0001;在高、中分化癌的发生率均显著低于低分化癌,Х^2=8．481,P=0．004;Х^2=8．195,P=0．004。结论：RASSF1A、BRCA1和p16基因异常甲基化与上皮性卵巢癌的发生及发展相关,RASSF1A基因异常甲基化与上皮性卵巢癌临床分期及分化程度相关。     

上皮性卵巢肿瘤RASSF1A基因甲基化与蛋白表达的关系及意义

目的：检测上皮性卵巢肿瘤中RASSF1A基因启动子CpG岛的甲基化状态,并探讨基因异常甲基化与蛋白表达的关系及其意义。方法：运用甲基化特异性PCR（MSP）方法对62例上皮性卵巢癌、21例交界性囊腺瘤及30例良性囊腺瘤的RASSF1A基因启动子甲基化状态进行检测,免疫组化S-P法检测上述标本中RASSF1A蛋白表达,并结合肿瘤生物学行为进行分析。结果：上皮性卵巢癌组织、卵巢交界性囊腺瘤组织中RASSF1A基因启动子区甲基化率（58.06%、42.85%）显著高于卵巢良性囊腺瘤组织（13.33%）,差异有统计学意义（P〈0.05）。RASSF1A基因启动子区甲基化与上皮性卵巢癌的细胞分化程度和临床分期密切相关（P〈0.05）而与组织类型和患者年龄及绝经与否无相关性（P〉0.05）;RASSF1A基因甲基化与其蛋白表达下降一致。结论：卵巢癌组织中存在RASSF1A基因启动子CpG岛的异常甲基化,可能和该蛋白表达缺失的主要原因,是导致该基因失活的重要机制之一。     

上皮性卵巢肿瘤RASSF1A基因甲基化与蛋白表达的关系及意义

目的:检测上皮性卵巢肿瘤中RASSF1A基因启动子CpG岛的甲基化状态,并探讨基因异常甲基化与蛋白表达的关系及其意义。方法:运用甲基化特异性PCR(MSP)方法对62例上皮性卵巢癌、21例交界性囊腺瘤及30例良性囊腺瘤的RASSF1A基因启动子甲基化状态进行检测,免疫组化S-P法检测上述标本中RASSF1A蛋白表达,并结合肿瘤生物学行为进行分析。结果:上皮性卵巢癌组织、卵巢交界性囊腺瘤组织中RASSF1A基因启动子区甲基化率(58.06%、42.85%)显著高于卵巢良性囊腺瘤组织(13.33%),差异有统计学意义(P<0.05)。RASSF1A基因启动子区甲基化与上皮性卵巢癌的细胞分化程度和临床分期密切相关(P<0.05)而与组织类型和患者年龄及绝经与否无相关性(P>0.05);RASSF1A基因甲基化与其蛋白表达下降一致。结论:卵巢癌组织中存在RASSF1A基因启动子CpG岛的异常甲基化,可能和该蛋白表达缺失的主要原因,是导致该基因失活的重要机制之一。     

卵巢癌中 ECRG4基因启动子甲基化的研究

目的：探讨人食管癌相关基因4（esophageal cancer related gene 4,ECRG4）基因启动子区域在卵巢癌组织中的甲基化状态及临床意义。方法：应用甲基化特异性 PCR 检测 ECRG4基因启动子在50例卵巢癌组织和10例正常卵巢组织中的甲基化状态并结合临床病理资料进行分析。结果：在卵巢癌组织中 ECRG4甲基化阳性率为36%（18/50）,正常卵巢组织未出现 ECRG4甲基化。ECRG4甲基化与肿瘤淋巴结转移及 Ki -67表达密切相关（P <0.05）。结论：ECRG4甲基化可能是参与卵巢癌发展的重要分子事件。     

卵巢上皮性癌TGFBI基因启动子甲基化与CyclinD1蛋白表达的关系

研究TGFBI基因启动子甲基化与CyclinD1蛋白表达在卵巢上皮性癌组织中关系,探讨TGFBI基因启动子甲基化在卵巢上皮性癌形成过程中的影响及意义。方法：用甲基化PCR的方法对20例正常卵巢上皮性组织（A组）,20例良性卵巢上皮性肿瘤组织（B组）,30例卵巢上皮性癌组织（C组）中TGFBI基因启动子甲基化进行检测,用免疫组化SP方法检测上述标本中CyclinD1蛋白的表达的情况。结果：1）C组TGFBI基因启动子甲基化频率高于B组及A组（P<0.05）;2）CyclinD1蛋白在卵巢上皮组织中的表达为：C组>B组>A组,各组之间差异均有统计学意义（P<0.016 7）;3）卵巢上皮性癌组织中CyclinD1蛋白表达增高与TGFBI基因启动子发生甲基化有关（r=0.505,P<0.05）。结论：TGFBI基因DNA启动子发生甲基化可能上调CyclinD1蛋白的表达,刺激细胞异常增殖。该机制可能参与卵巢上皮性癌的发生发展。     

DNA甲基化和E-cadherin基因甲基化与胃癌关系研究进展

目的：总结DNA甲基化和E-cadherin基因甲基化与胃癌关系的研究现状。方法：应用PubMed及万方数据知识服务平台检索系统,以“胃癌、DNA甲基化、Eu钙黏蛋白基因和CpG岛”等为关键词,检索1979-01-2013-05的相关文献,共检索到英文文献2093篇,中文文献672篇。纳入标准：1）关键词包括胃癌及DNA甲基化;2）文中包括E-钙黏蛋白基因启动子区CpG岛甲基化。剔除标准：1）非E-钙黏蛋白基因启动子区CpG岛的甲基化;2）关键词有E-钙黏蛋白但文中无甲基化描述。符合纳入标准的中文文献56篇,英文文献43篇,根据剔除标准剔除中文文献46篇,英文文献23篇,最后纳入分析30篇文献。结果：DNA甲基化在基因表达、调控过程中发挥重要作用,其功能紊乱在恶性肿瘤形成过程中具有重要作用,与胃癌的发生密切相关。E-cadherin基因能抑制肿瘤细胞的浸润和转移,E-cadherin基因启动子区CpG岛甲基化是胃肠道肿瘤E-cadherin基因失活的主要原因,可引起E-cadherin表达下降或缺失,与胃癌的发生、浸润、转移和预后密切相关。结论：DNA甲基化和E-cadherin基因甲基化与胃癌的形成、浸润和转移等关系密切,但其要成为胃癌防治的靶点仍需进一步研究。     

OPCML基因甲基化发生率与上皮性卵巢癌发生发展的关系

卵巢癌的主要生物学特征为浸润和种植转移，最先累及盆腹腔，出现转移病灶。研究发现卵巢癌的发生和发展与表型遗传密切相关，最常见的是基因异常甲基化。甲基化调控基因表达的过程是可逆的，所以通过改变DNA甲基化状态上调肿瘤抑制基因（TSG）表达有可能成为肿瘤基因治疗的候选靶点。OPCML（opioid—binding protein／cell adhesion molecule—like）是一个鸦片受体类的细胞黏附因子，基因定位于人染色体11q25。     

钙粘附素及连环素表达与乳腺癌转移及预后的关系

目的:了解乳腺癌E-钙粘附素、连环素-α,-β的表达改变与转移及预后的关系。方法:采用免疫组织化学染色、病理组织学,对105例乳腺癌患者术后定期随访,统计学分析。结果:105例乳腺癌三种粘附分子组化染色减弱和消失频率为E-钙粘附素56%,连环素-α64%,连环素-β43%,与正常及非典型增生组差别明显,P值均小于0.001。单因素分析未能找到E-钙粘附素与转移及预后的联系,但证明连环素-α和-β表达下降分别与癌分化程度及与转移、预后相关,P<0.05和P<0.01。三种粘附分子中E-钙粘附素与连环素-α的表达有平行关系,双阳性组的转移率明显低于一种蛋白表达下降组,P<0.05。COX多因素分析三种粘附蛋白表达均未能成为独立影响乳腺癌预后的因素。结论:E-钙粘附素、连环素-α,-β表达的免疫组化反应在乳腺癌呈下降的总趋势,E-钙粘附素与连环素-α的表达有平行关系,双阳性者转移率明显低。在三者之中连环素-β表达下降与癌转移及病程进展有明显相关性,预后相对差。在考虑用细胞间粘附体系为判断乳腺癌预后指标时必须对该三种分子作综合检测。     

雌激素受体a基因启动子甲基化在卵巢上皮癌中表达的意义

目的探讨卵巢上皮癌ERa启动子甲基化与其临床病理特征的关系。方法选取10例正常卵巢组织、20例卵巢良性肿瘤组织以及64例卵巢上皮癌组织,应用甲基化特异性PCR（Methylation Specific PCR,MSP）及测序法,分别检测ERa基因启动子区CpG岛的甲基化状态。结果 64例卵巢癌组织中,ERa基因启动子甲基化率为53.13%,20例卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织中ERa甲基化率分别为10.00%和0。卵巢癌组ERa启动子甲基化率较良性组和正常组均显著增高（P〈0.05）。ERa启动子甲基化与卵巢癌病理分期和病理分级呈显著负相关性。结论卵巢癌组织中ERa基因表达沉默与其启动子CpG岛甲基化密切相关,后者有可能成为卵巢癌预后不良的分子检测指标。     

卵巢上皮性恶性肿瘤组织RASSF1A基因启动子区甲基化的研究

目的 探讨RASSF1A基因启动子区异常甲基化与卵巢上皮性恶性肿瘤发生、发展的关系。方法 应用甲基化特异性PCR方法,检测80例卵巢上皮性恶性肿瘤组织RASSF1A基因启动子区异常甲基化。结果 80例卵巢上皮性恶性肿瘤组织中,RASSF1A基因启动子区甲基化的发生率为52．5％,而相应痛旁正常组织中,RASSF1A基因启动子区均未发生甲基化（P〈0．05）。浆液性癌、黏液性癌和内膜样癌中,RASSF1A基因启动子区甲基化的发生率分别为54．2％、52．4％和45．5％,差异尤统计学意义。临床Ⅰ期、Ⅱ期卵巢上皮性恶性肿瘤RASSF1A基因启动子区甲基化的发生率分别为21．4％和16．7％,明显低于临床Ⅲ期（66．7％）和Ⅳ期（77．8％）。高分化组和中分化组RASSFlA基因启动子区甲基化的发牛率分别为34．5％和35．0％,均低于低分化组（80．6％）。结论 卵巢上皮性恶性肿瘤组织中存在RASSF1A基因启动子区的异常甲基化,甲基化与卵巢上皮性恶性肿瘤的临床分期和组织学分级有关。     

LYVE-1和CD31在卵巢上皮性肿瘤的表达及临床意义

目的 检测淋巴管内皮细胞特异性标志物LYVE-1和内皮细胞标记物CD31在卵巢上皮性肿瘤中的表达情况,探讨其与肿瘤转移的关系.方法 采用EnVision免疫组织化学二步法,分别检测卵巢上皮性癌30例,交界性卵巢肿瘤8例和良性卵巢囊腺瘤15例中的LYVE-1和CD31的表达,计数LYVE-1的阳性淋巴管数即MLC和CD31的微脉管密度即MVD.结果 卵巢上皮性癌LYVE-1和CD31的表达即MLC和MVD显著高于卵巢交界性肿瘤和良性肿瘤(P＜0.01).卵巢上皮性癌中组织学分级G3患者的MLC和MVD显著高于G1-G2(MLC,P＜0.05;MVD,P＜0.01);临床分期Ⅲ-Ⅳ期患者的MLC和MVD显著高于Ⅰ-Ⅱ期(P＜0.01);有淋巴结转移的MLC和MVD显著高于无淋巴结转移者(P＜0.01);卵巢上皮性癌MLC和MVD在不同的组织学类型中无显著性差异(P＞0.05).结论 LYVE-1和CD31在卵巢上皮性癌中的表达水平说明肿瘤组织中存在新生淋巴管和血管,它们在肿瘤转移过程中起重要作用.MLC和MVD可作为肿瘤转移的生物学指标,并且对卵巢上皮性肿瘤临床预后的评估有重要的指导意义.     

肺癌E-cadherin基因启动子CpG岛甲基化与蛋白表达的关系及其意义

背景与目的：目前认为CpG岛甲基化导致转录抑制是恶性肿瘤发生的重要机制之一.E-cadherin能抑制肿瘤细胞的浸润和转移,被公认为是浸润、转移抑制基因.本研究检测肺癌组织中E-cadherin基因启动子CpG岛甲基化的状况,并探讨基因异常甲基化与蛋白表达的关系及其意义.方法：采用甲基化特异性PCR技术,检测22例肺癌组织,相应的癌旁组织和9例正常肺组织中E-cadherin基因启动子CpG岛甲基化的状况.采用免疫组化S-P法相应检测了E-cadherin蛋白的表达.结果：肺癌中E-cadherin基因启动子CpG岛完全甲基化率为13.6%（3/22）,部分甲基化率为27.3%（6/22）,总甲基化率为40.9%（9/22）,显著高于相应癌旁组织中该基因的甲基化率9.1%（2/22） （P＜0.05）.9例正常肺组织中未检测到此基因的甲基化（0/9）.22例癌组织中E-cadherin蛋白表达减弱或缺失率59.1%（13/22）,显著高于相应癌旁组织蛋白表达减弱缺失率27.3%（6/22）.肺癌组织中发生甲基化者蛋白表达率及强度明显低于未甲基化者.结论：肺癌组织中存在E-cadherin基因启动子CpG岛的异常甲基化,E-cadherin基因启动子CpG岛的异常甲基化可能是E-cadherin蛋白表达下调的主要原因.     

Snail与E-cadherin在上皮性肿瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨Snail与E-cadherin蛋白表达在上皮性肿瘤中的临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法,研究150例人肝癌、乳腺癌、宫颈癌、子宫内膜癌与卵巢癌临床标本及30例相应正常组织中Snail与E-cadherin蛋白的表达及定位。结果:在上述5种组织中,Snail主要表达于癌组织细胞核、细胞质,相应正常组织往往缺如,且在肝癌、乳腺癌中Snail表达与肿瘤转移有一定的相关性,并与E-cadherin表达呈负相关。E-cadherin定位于细胞膜,在肝、乳腺的正常组织中E-cadherin强表,相应癌组织中其表达往往下降或缺如;而在宫颈癌、内膜癌与卵巢癌中,E-cadherin表达与癌变无明显相关性。结论:Snail、E-cadherin的表达在肝癌、乳腺癌中具有重要意义,Snail有可能作为肝癌、乳腺癌肿瘤转移的生物学标志。     

NGAL在卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义

目的探讨中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（NGAL）在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测NGAL在60例卵巢癌、30例卵巢交界性肿瘤、10例卵巢良性肿瘤和10例正常卵巢组织中的表达,分析其与病变类型的关系及其在卵巢癌组的表达率与临床病理特征的联系。结果 NGAL在卵巢癌和卵巢交界性肿瘤中的阳性表达率分别为81.7%、60.0%,明显高于卵巢良性肿瘤（20.0%）和正常卵巢组织（10.0%）（P〈0.05）。NGAL表达与卵巢癌的病理分级、病理分期和淋巴结转移有关（P〈0.05）。结论 NGAL蛋白促进肿瘤的形成、浸润与转移。NGAL可能是卵巢癌早期诊断和预后的潜在生物学参考指标。     

肺癌中E钙粘蛋白的表达与微血管密度的关系及意义

目的　探讨肺癌中E钙粘蛋白的表达和微血管密度的关系及意义。方法　用SP免疫组化技术检测E钙粘蛋白和Ⅷ因子在 10 4例肺癌组织中的表达 ,利用图像分析系统计算微血管密度。结果　E钙粘蛋白与肺癌分级有密切关系 ,随分化程度的降低 ,E钙粘蛋白的阳性率明显下降 (P <0 .0 5 ) ,而且呈现异常表达。E钙粘蛋白表达还与肺癌组织微血管密度呈显著负相关 (P =0 .0 47)。结论　E钙粘蛋白表达的降低和微血管密度的增加可能在促进肺癌的浸润转移中起重要作用。     

原发性上皮性卵巢癌组织中c-erbB2基因扩增及其临床意义

目的检测原发性上皮性卵巢癌组织中ｃｅｒｂＢ２基因扩增,以探讨其在卵巢癌临床诊治中的价值。方法采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹技术,结合特异性ｃｅｒｂＢ２探针,对１０８例原发性上皮性卵巢癌及３４例良性、７例交界性卵巢肿瘤手术切除组织做ＤＮＡ扩增。结果原发性上皮性卵巢癌ｃｅｒｂＢ２基因扩增频率为３２．４％（３５／１０８）,而良性、交界性卵巢肿瘤均未出现扩增（Ｐ＜０．００１）,且ｃｅｒｂＢ２基因的扩增和上皮性卵巢癌的ＦＩＧＯ分期（Ｐ＝０．０２５）、肿瘤细胞分化程度（Ｐ＝０．０１１）及初次手术后残存肿瘤的大小（Ｐ＜０．００１）呈正相关。经对８４例ＩＩ～ＩＶ期原发性上皮性卵巢癌进行预后分析,结果表明,ｃｅｒｂＢ２基因扩增为影响预后的独立因素,ｃｅｒｂＢ２基因扩增阴性者３年生存率为５７．７％,而阳性者为２８．４％,两者差异具有显著性（Ｐ＝０．０１６）。结论ｃｅｒｂＢ２基因扩增可能和原发性上皮性卵巢癌的发生有关,ｃｅｒｂＢ２基因扩增阳性患者恶性程度高,手术成功率低,预后明显差于阴性患者。检测癌组织中ｃｅｒｂＢ２基因的扩增,将有助于对卵巢癌患者的病情监测和预后判断。     

基质金属蛋白酶-7和E-钙黏附素在胃癌组织中的表达及其相关性

目的探讨基质金属蛋白酶．7（MMP．7）、E-钙黏附素（E—CD）在胃癌组织中的表达及其与胃癌侵袭、转移的相关性。方法采用原位杂交法,检测78例胃癌组织中MMP-7mRNA和E—CDmRNA的表达,观察二者与浸润深度和淋巴结转移之间的关系。结果胃癌组织中MMP-7mRNA和E-CDmRNA的阳性表达与浸润深度和淋巴结转移有关。MMP-7mRNA阳性表达的胃癌组织中E—CDmRNA的阳性表达率[9．09％（6／66）[低于MMP-7mRNA阴性表达的胃癌组织中E—CDmRNA的阳性表达率[66．70％（8／12）1,二者呈负相关（r=-0．269,P〈0．05）。结论MMP-7mRNA和E—CDmRNA的表达与胃癌的浸润、转移密切相关,且二者的表达呈负相关。检测MMP-7mRNA和E—CDmRNA在胃癌患者胃镜活检组织中的表达有助于预后判断。     

乳腺癌中Bub1蛋白的表达及临床意义

目的：观察乳腺癌组织中Bubl表达概况,探讨Bubl蛋白在乳腺癌中表达水平及意义。方法：用免疫组化方法检测50例乳腺癌中Bubl蛋白的表达。结果：正常乳腺组织Bubl蛋白阳性表达率为84%,癌组织中阳性表达率为46%,两者差异有显著性(P＜0.05)。Bubl表达与癌组织分化、腑窝淋巴结转移、复发和转移有关(P＜0.05)。结论：Bubl蛋白表达异常是乳腺癌产生的机制之一,与乳腺癌的发生发展有关。     

粘附分子E-cadherin在乳腺肿瘤中的异常表达及其意义

E—cadherin是介导上皮细胞间粘附的一种粘附分子,其功能异常与肿瘤的浸润和转移密切相关。乳腺肿瘤中,E—cadherin表达缺失或下降,在肿瘤的浸润转移过程中起着非常重要的作用。基因突变、基因启动子区甲基化或转录抑制等是E—cadherin表达异常的原因。     

卵巢上皮性癌组织中结肠癌转移相关基因1的表达及其临床意义

目的:探讨卵巢上皮性癌组织中结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1)的表达及其临床意义。方法:应用RT-PCR和免疫组织化学法检测卵巢上皮性癌组织、卵巢上皮性良性肿瘤组织及正常卵巢组织中MACC1 mRNA及蛋白的表达,分析MACC1蛋白的表达与卵巢上皮性癌患者临床病理特征之间的关系。结果:卵巢上皮性癌组织中MACC1 mRNA和蛋白的表达水平均明显高于卵巢上皮性良性肿瘤组织和正常卵巢组织(P<0.05)。卵巢上皮性良性肿瘤组织与正常卵巢组织之间MACC1 mRNA和蛋白的表达水平无明显差异(P>0.05)。MACC1蛋白的阳性表达率与卵巢上皮性癌患者的临床分期、组织分化程度和淋巴结转移等因素相关(P<0.05)。结论:MACC1蛋白表达与卵巢上皮性癌患者的临床分期、组织分化程度和淋巴结转移相关。MACC1可能参与了卵巢上皮性癌的发生和发展。