第三代新维甲类化合物R9158对人急性早幼粒白血病NB4细胞的分化诱导作用

为了研究本所合成的第三代新维甲类化合物３’，５’，二叔丁基－４’－甲氧基－４－羧基查尔酮酸对ＮＢ４细胞的分化诱导作用。方法从形态，功能及染色体核型等方面观察Ｒ９１５８对ＮＢ４细胞的影响。结论Ｒ９１５８对ＮＢ４细胞具有显著的分化诱导作用。     

第三代新维甲类化合物R9158对人急性早幼粒白血病NB_4细胞的分化诱导作用

目的　 为了研究本所合成的第三代新维甲类化合物 3′,5′,二叔丁基 - 4′-甲氧基 - 4 -羧基查尔酮酸 ( R91 5 8)对 NB4细胞的分化诱导作用。方法　 从形态、功能及染色体核型等方面观察 R91 5 8对 NB4细胞的影响。结果　 发现 R91 5 8与全反式维甲酸( RA)相似 ,可明显抑制 NB4细胞的生长及克隆形成 ,且在相同浓度下 R91 5 8的作用强于 RA。用 1 0 - 6mol/ L R91 5 8处理 NB4细胞 ,发现随作用时间的延长 NBT还原能力也明显增强 ,处理 6 d时 NBT阳性率为 97.5 %。用 R91 5 8与 RA处理 NB4细胞 ,NBT还原的 ED50 分别为 3.9× 1 0 - 9及 2 .8× 1 0 - 9mol/ L。形态学检查表明 ,用 1 0 - 6mol/ LR91 5 8及 RA诱导 2 d,可使细胞缩小 ;处理 6 d,细胞向成熟方向分化 ,但大多数细胞处于中幼及晚幼粒细胞阶段。染色体核型分析表明 ,NB4细胞具有亚四倍体型染色体核型 ,用 R91 5 8处理可使其非整倍体染色体数目下降。从对照的 80 .85± 7.5降至72 .96± 6 .9( P<0 .0 1 )。G带显示 ,用 1 0 - 6mol/ L R91 5 8及 RA处理 NB4细胞 6 d,其典型的 t( 1 5 ;1 7)易位未见消失。结论　 R91 5 8对 NB4细胞具有显著的分化诱导作用。     

维甲类化合物Ro13—7410对白血病细胞端粒酶活性的抑制

为深入探讨第三代维甲类化合物Ｒｏ１３－７４１０诱导白血病细胞凋亡和分化的机制。本文采用ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ和ＰＣＲ－ＰＡＧＥ两种方法观察了ｏ１３－７４１０对ＨＬ－６０细胞端粒酶活性的影响。实验结果显示在Ｒｏ１３－７４１０诱导ＨＬ－６０细胞亡和分化的过程中端粒酶活性逐渐下降，结论：Ｒｏ１３－７４１０能明显抑制ＨＬ－６０细胞端粒酶活性，且可能与白血病细胞的增殖抑制和诱导凋亡及分化作用有关。     

双向电泳分析比较维甲酸诱导HL60细胞分化的蛋白表达差异

目的：以维甲酸诱导急性早幼粒白血病细胞HL60分化为模型，用双向电泳技术分析比较维甲酸诱导HL60细胞分化的蛋白表达差异。方法：用细胞生物学的方法分析分化细胞形态上的差异，NBT实验检测细胞NBT阳性率。用双向电泳技术分析分化肿瘤细胞蛋白表达差异。结果：分化后细胞形态发生明显变化，细胞表面出现突起，细胞核变小。分化后细胞NBT阳性率达90％以上，而未分化细胞NBT阳性率低于5％。双向电泳技术分析发现有7个蛋白点只未分化细胞检测到表达，而分化细胞未检测到；有14个蛋白点只在分化细胞检测到。结论：双向电泳技术可直接反映细胞蛋白表达变化。     

维甲类化合物R8605的抗化学致癌和抗促癌作用

本实验根据癌发生的多阶段理论,利用化学性诱发的小鼠二阶段皮肤乳头瘤模型。研究了维甲类化合物R8605的抗化学致癌和抗促癌作用。结果表明,R8605(50mg/kg和25mg/kg,口服)能明显抑制由二甲基苯蒽(DMBA)和巴豆油诱发的小鼠皮肤乳头瘤生成,并表现出较强的抗促癌作用;另外,R8605还能明显抑制巴豆油对小鼠皮肤表皮鸟氨酸脱羧酶(ODC)活性的诱导。R8605较大剂量(100mg/kg,口服)时,也能抑制巴豆油诱发的小鼠耳部肿胀。R8605的抗促癌作用可能与其抑制ODC活性及抗炎作用有一定的关系。     

抗8-AG和HGPRT缺失的人早幼粒白血病细胞突变株(HL-60-AR)的体外诱导分化潜能

具有抗8-AG和HGPRT~-遗传标记的HL-60-AR细胞与维生素A酸或二甲基亚砜一起保温后,细胞对NBT还原反应能力增强;细胞膜表面出现C_2补体受体;细胞形态按粒系白细胞途径向较成熟的方向发育。同时,细胞并合~3H-TdR的速率降低;细胞几乎全部丧失在软琼脂中形成集落的能力。HL-60-AR细胞对次黄嘌呤的诱导分化反应不敏感。     

维甲类化合物对小鼠肿瘤免疫反应的影响

本文报道维甲酸和维胺酯对诱导同基因小鼠杀伤性T细胞的产生和淋巴细胞增殖反应的作用。结果表明,连续5d给维甲酸和维胺酯,细胞毒T细胞的杀伤效应加强,后者的作用更为明显,亦可加强淋巴细胞的增殖反应。细胞重组试验发现,维胺酯作用于淋巴细胞和辅佐细胞,但以前者为主。     

维甲酸对急性早幼粒细胞白血病白血病细胞诱导分化作用的研究

应用全反式维A酸(RA)治疗急性早幼粒细胞白血病12例,在用RA前及治疗达骨髓缓解时,分别采骨髓对白血病细胞进行功能测定、扫描及透射电镜观察、集落培养实验分析。结果表明,在骨髓缓解时,白血病细胞的超微结构及主要功能均达正常中性粒细胞的成熟状态,白血病细胞明显减少,证实了RA体内诱导分化作用。     

槲皮素对人白血病HL—60细胞DNA和细胞周期的影响

以人白血病HL－60细胞为实验对象，利用3H-脱氧胸苷（3H－TdR）掺入实验，JAM实验法及流式细胞仪观察槲皮素对HL－60细胞DNA和细胞周期的影响。结果显示，槲皮素15μmol／L～120μmol／L可显著抑制HL－60细胞的DNA合成及诱发DNA链断裂；槲皮素主要是阻滞G1期向S期移行，使G1期细胞蓄积，S期细胞减少。槲皮素的作用呈明显的剂量依赖关系。     

急性早幼粒白血病HL-60细胞动物模型的建立与鉴定

目的　建立人急性早幼粒白血病HL - 60细胞系重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠移植瘤模型,探讨HL - 60细胞系在SCID小鼠体内的生物学行为。方法　分别在SCID小鼠腹腔或静脉注入5×1 0 6个白血病细胞,应用病理组织学、染色体核型分析等方法监测SCID小鼠外周血、肝、脾、骨髓中的白血病细胞。结果　腹腔或静脉注射均可在SCID小鼠体内形成白血病移植瘤。腹腔注射瘤块生长快,生存周期比静脉注射短。结论　SCID小鼠中白血病增殖和浸润程度反映了白血病细胞基本生物学特征,提示HL - 60 SCID小鼠模型为良好的肿瘤体内研究模型。     

超氧阴离子参与白藜芦醇诱导的人急性早幼粒白血病HL-60细胞凋亡

目的：研究超氧阴离子（O2^-·）、H2O2、线粒体膜电位（砌口）在白藜芦醇（nSV）诱导人急性早幼粒白血病HL-60细胞凋亡中的作用。方法：以碰’V（10．0、50．0、100．0μmol／L）分别作用HL-606、12、24h后，用流式细胞术检测细胞内O2^-、H2伤及MMP水平；四氮唑蓝凝胶法检测RSV作用HL-6024h后超氧化物歧化酶（SOD）的活性；MTt法检测SOD和RSV共同作用HL-60后的细胞生存率；锥虫蓝细胞计数法检测N-乙酰-L-半胱氨酸（NAc）和RSV共同作用HL-50后的细胞生存率。结果：RSV可使HL-50内O2^-·水平升高，H2-2水平、MMP降低，SOD活性无明显变化；SOD和NAC对RSV诱导的HL．60凋亡作用无明显影响。结论：RSV诱导HL-60凋亡机制是RSV引起细胞内O2^-·水平升高，MMP降低，从而启动caspases凋亡途径诱发细胞凋亡。     

天花粉蛋白体外诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的:本研究探讨天花蛋白(Trichosanthin,TCS)对HL-60细胞凋亡的影响。方法:采用MTT比色法测定细胞的增殖抑制率;光学显微镜、DNA凝胶电泳、流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:TCS抑制HL-60细胞的增殖,促进其凋亡,随作用时间的延长、TCS浓度的增加,增殖抑制及促凋亡作用更加明显。结论:TCS对HL-60细胞有时间和剂量依赖性的细胞凋亡诱导效应。     

蒙古黄芪凝集素诱导HL-60细胞凋亡作用研究

目的:探讨蒙古黄芪凝集素(AMML)诱导HL-60细胞凋亡的作用和机制。方法:MTT法检测AMML对HL-60细胞的增殖抑制作用。显微镜下检测细胞凋亡形态的变化,应用流式细胞仪Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡,同时分析细胞周期。免疫细胞化学法检测Bcl-2、Caspase-3的表达。结果:MTT法显示AMML对HL-60细胞的生长具有明显的抑制作用。荧光显微镜下,细胞呈凋亡形态学变化,流式细胞仪检测结果为细胞凋亡率明显增高,出现G0/G1期阻滞。Bcl-2表达降低,Caspase-3表达增高。结论:AMML明显抑制HL-60细胞的生长,诱导细胞凋亡。可应用于抗肿瘤药物的开发。     

DMSO诱导下蛋白激酶C与HL—60细胞分化的关系

HL-60细胞在DMSO诱导下沿粒细胞方向分化,120h NBT~ 细胞达84％。细胞经诱导24h蛋白激酶C活性增加,72h为未诱导细胞的2.7倍。酶活性的增加,主要是由于细胞浆部分而不是细胞膜部分可溶性酶活性改变的结果。分化诱导剂DMSO本身不能直接激活蛋白激酶C,提示DMSO对酶活性的影响是间接的。     

七种癌基因在HL-60-AR细胞中的表达及药物诱导分化后的变化

用Northern杂交和斑点杂交方法分别探测HL-60-AR细胞中七种癌基因的表达及其在诱导分化后的变化。结果表明,在HL-60-AR细胞中c-myc基因高度活跃表达,H-ras基因次之,fos、sis、abl和erb-B基因表达微弱,而K-ras基因表达极微弱或检测不出。当HL-60-AR细胞被药物诱导成熟分化后,c-myc基因表达大为下降,H-ras、fos、sis、abl和erb-B基因表达亦相应降低,而K-ras的表达则无变化。对诱导分化前后c-myc基因拷贝数的比较分析表明,c-myc基因表达下降可能主要发生在基因的转录或/和转录后调节水平。     

小檗碱对HL-60细胞的诱导分化及增殖抑制作用

目的 研究盐酸小檗碱对人早幼粒白血病HL-60细胞增殖与分化的影响。方法 应用锥虫蓝排染法、生长曲线测定法、克隆形成实验检测药物对HL-60细胞生长的影响；细胞分化根据细胞形态、硝基四氮唑蓝(NBT)还原能力、细胞表面标记的改变来判断；细胞周期变化用流式细胞仪测定。结果 HL-60细胞经小檗碱处理后生长明显受抑，IC50为5．29(24h)，2．65(48h)，0．74(72h)mg／L。选择1，2，4，8mg／L小檗碱作用于HL-60细胞，动态观察发现HL-60细胞向成熟细胞分化：细胞核变小，核浆比减少；NBT还原能力显著增强；CD11b表达升高，4mg／L组CD11b阳性率高达85．1％。细胞周期分析发现，小檗碱处理后细胞阻滞于G0／G1期，S期细胞明显减少。结论 盐酸小檗碱可抑制HL-60细胞的增殖，并诱导HL-60细胞向成熟细胞分化。