国产红参与高丽红参中人参皂甙的含量对比研究

木文以人参皂甙Re为标准品,5％(w/v)香草醛冰醋酸——70％(v/v)硫酸水溶液为显色试剂,用比色法对红参中总皂甙的含量进行了测定;以8种人参单体皂甙(Ginsenoside—Ro,Rb_1,Rb_2,Rc,Rd,Re,Rg_1,Rg_2)标准品为对照,用薄层光密度法,对国产红参与高丽红参中主要人参皂甙的含量进行了分析比较。     

人参总皂甙对急性脑缺血的保护作用

静脉注射人参总皂甙(SPG 100mg/kg),三七总皂甙(SPNG100mg/kg)及单体皂甙 Rb_1(25mg/kg)对大鼠不完全性脑缺血损伤有保护作用,能明显减轻急性脑缺血30min 时,脑电图(EEG)的抑制程度,显著降低血浆中丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CPK)的含量,而人参皂甙单体 Rg_1的作用不明显。表明人参皂甙有保护急性脑缺血作用,其主要成分为人参二醇甙(Rb)。     

人参中皂甙成分化学研究的新进展

<正> 人参作为一种名贵中药在我国有悠久的历史。其主要活性成分人参皂甙具有增强机体活动能力和抗疲劳等多种药理作用。日木学者柴田、田中等先后从人参根中分离鉴定了R_0、Rb_1、Rb_2、Rb_3、Rc、Rd、Re、Rf、Rg_1、Rg_2、Rg_3、Rh_1和20—glu-Rf等13种人参皂甙。从人参花及花蕾中分离鉴定了Rb_1、Rb_2、Rc、Rd、Re、Rg1、F3、和M_7cd等8种。从人参芦头中鉴定出Rb_1、Rb_2、Rc、Rd、Re、Rf和Rg_1等7种。从人参叶中鉴定出Rb_1Rb_2、Rc、Rd、Re、Rg_1、F_1、F_2和F_3等9种。从人参果中分离鉴定了Rb_2、Re、Rd、Rc、和Rg_1等5种。本文仅就1982年以来的新进展做一概述。     

新HPLC法分析人参皂甙

人参具有增强人体耐力、抗应激、抗病作用并具兴奋和镇静双重作用,且毒性很低,其生物活性与人参皂甙有关。用于分析人参皂甙的方法很多,如 GC、LC、TLC 和 HPLC,但由于分离度差或保留时间长,不适于日常分析。作者报道的新的反相 HPLC 分析方法,可将人参皂甙 Rb_1、Rb_2、Rc、Rd、Re、Rg_1完全分离,分析时间仅为15min。     

人参治疗肝脏疾病的药理学基础

<正> 近年来,药理学研究证明,人参对肝脏的解毒、排泄及对RNA和蛋白质的合成均有影响。时至今日,人们在研究人参的保肝作用方面积累了大量的资料。现将人参保肝作用的药理学研究综述如下: 一、人参对肝脏代谢的影响 (一)对RNA和蛋白质代谢的影响 1.对肝细胞核DNA和RNA合成的影响:人参皂甙可刺激细胞核RNA合成,化学结构不同的人参皂甙其作用不同。例如,按5 mg/kg剂量给大鼠腹腔注射人参皂甙Rb_1、Rc和Rg4小时后Rb_1组RNA合成速率为对照组的L17.5％,Rc组为对照组的85％,比对照组降低15％;Rg_1组作用不明显。Iijima     

日本常用生药的定量方法：人参

人参为保健强壮药,含有人参皂甙。人参中人参皂甙的HPLC定量法人参总皂甙的定量易受杂质的干扰,不宜于精确定量,目前认为Rg_1与Rb_1为最适合于定量的特定皂甙单体。以这两种皂甙为定量指标,比较气相色谱法,薄层层析法和HPLC法的定量结果,认为HPLC法易操作且分析值精确度高。1 HPLC法讨论1.1 填充剂用同一样品比较了连接十八烷基的ODS柱与连接氨丙基的NH_2柱的分离效果,结果(表1)表明,后者中Rb_1分离不完全,因此采用ODS反相柱。1.2 仪器偏差用同一样品溶液比较了各社分析值,从表2可知,用HPLC法对人参中     

美洲人参的皂甙及其甙元的分析

本文讨论了用气液相层析法可以正确地分析出兔血浆和尿样品中的人参皂甙A_1(三七皂甙F_(11))、A_2(Rg_1)、B_2(Re)、C(Rb_2)和皂甙元及人参萜二醇、人参萜三醇。材料:美洲人参(Panax quinquefoli-um L.,五加科)的茎、叶中提取分离的人参皂甙A_1、A_2、B_2、C和人参黄酮甙;人参皂甙的水解产物经柱层析纯化精制得到的人参萜二醇、人参萜三醇;豆甾醇(内标物)和吡啶,三甲硅烷基TBT。     

高效液相色谱分离和定量测定人参、花旗参以及人参制剂中的人参皂甙

应用高效液相色谱法,μBondapak C_(18)柱(内径3.9毫米,高30厘米)反相系统分析,注入样品量10～20微升,流动相:乙腈-水(30:70),流量:2毫升/分,检测波长:203nm,流出液可用LC-55或LC-75分光光度计在203nm处直接测定其透光率,测定极限为300微克。室温下30分钟内可分离并检出人参皂甙Rb_1、Rb_2、Rc、Rd、Rf和Rg_2,而Re和Rg_1不能分开。用相同的柱,改用乙腈-水(18:82)为流动相,流量4毫升/分,能很好地分离Re和Rg_1。因梯度洗脱测出的各峰保留时间重现性差,而且基线漂移,故不采用梯度洗脱法。各种人参皂甙的定量测定是用外标准方     

人参二醇组皂甙对内毒素休克鼠组织过氧化脂质的影响

为了探讨人参二醇组皂甙对内毒素休克的保护作用,我们用粗制大肠杆菌内毒素注入大鼠腹腔复制实验模型,将66只大鼠随机分成内毒素休克组(ES)与人参二醇组皂甙预治疗组(PT)。结果发现:PT组大鼠16h存活率明显高于ES组(P<0.05),肝、肺、肾组织的过氧化脂质含量则低于ES组,两组差异显著(P<0.05)。说明人参二醇组皂甙可以通过降低组织过氧化脂质的含量稳定细胞膜,对内毒素休克起一定的保护作用。     

国产人参叶化学成分的研究——(二)人参皂甙的分离与鉴定

本文报道自国产人参(Panax Ginseng C.A.Meyer)叶中分离出三种人参皂甙,分别称为Le、Lg_1和Lg_2。经各项理化常数、红外光谱~1H核磁共振谱、质谱及与标准品进行红外光谱、薄层层析和混溶对照测定,分别证明为人参皂甙—Re(Le)、人参皂甙—Rg_1(Lg_1)和人参皂甙—Rh_2(Lg_2)。人参皂甙—Rg_2(Lg_2)为首次自人参叶中分离鉴定     

Anti-lipid peroxilative effect of ginsenoside Rb1 and Rg1.

It has been reported that Ginsenoside can increase body resistance to many harmful factors and protect tissues from damage when an organism is in stress. To understand the mechanism of this action, a study on the antioxidative effect of Ginsenoside Rb1 and Rg1 was carried out. Results showed that Ginsenoside Rb1 and Rg1 could inhibit lipid peroxidation of rat liver and brain microsomes and that Rb1, at the final concentration of 10(-4)-10(-3) mol/L, could scavenge O2-. induced by liver microsome-NADPH-gossypol system. In in vivo experiment, Rb1, at a dose of 50 and 25 mg/kg/day x 3 ip, inhibited MDA formation in liver homogenate of rats by 26.8% (P less than 0.05) and increased the activities of catalase and GSH peroxidase by 47.2% (P less than 0.001) and 96.4% (P less than 0.001), respectively. However, no change in the activity of superoxide dismutase was found in liver cytosol of rats treated with Rb1.

     

Preliminary study on antiamnestic mechanism of ginsenoside Rg1 and Rb1.

The effect of ginsenoside Rg1 and Rb1 on memory in mice and rats were studied using one trial avoidance learning method. The results showed that Rg1 and Rb1 improved acquisition, consolidation and retrieval of memory improved by amnestic agents. For the elucidation of the antiamnestic mechanism of Rg1 and Rb1, HPLC-ECD, isotope labelling technique, radioligand binding assay, RIA and oxygen radical generating systems were employed in experiments. Rg1 and Rb1 were shown to increase protein bisynthesis of brain and ACTH level of plasma and decrease 5-HT level or slow down the 5-HT turnover rate in rats. No specific binding of Rg1 and Rb1 to alpha 1, alpha 2 and beta-adrenoceptors, or to DA, 5-HT, GABA and M-cholinergic receptors was detectable. However, 5 days after ip Rg1 and Rb1, higher Bmas values were obtained for the brain membranes from treated mice than those from control mice. In the mean time, Rg1 and Rb1 did not lower and might even increase the contents of acetylcholine in the brain. Besides, Rb1 could antagonize lipid peroxidation in the brain. Besides, Rb1 could antagonize lipid peroxidation and scavenge oxygen free radicals as well as increase catalase and GSH-PX activities. Clearly, these data may serve as the basis for the elucidation of the antiamnestic mechanism of Rg1 and Rb1.

     

维生素E的抗脂质过氧化作用

本研究观察到:维生素 E 能抑制 H_2O_2引起的大鼠红细胞脂质过氧化和红细胞溶血,也能抑制分别由维生素 C-NADPH 和 Fe~(2+)-半胱氨酸诱发的大鼠肝、脑微粒体的脂质过氧化,可能还有清除过氧化氢、超氧自由基和羟自由基的作用。     

丹参水溶性提取物对大鼠心、肝、脑、睾丸脂质过氧化的抑制作用

丹参提取物具有抗心绞痛等多种作用。作者用硫代巴比妥酸法(TBA)观察丹参水溶性提取物(Water soluble extract of solvia、miltorrhiza,ESM)的抗氧化活性,发现ESM可显著抑制Fe~2+-半胱氨酸引起的大鼠心脏、肝脏、脑、睾丸组织的匀浆、线粒体和微粒体的脂质过氧化。表明ESM具有抗氧化活性。     

金丝桃抗脂质过氧化作用研究

为研究金丝桃的抗脂质过氧化作用,用分光光度法测定了金丝桃提取物对大鼠离体组织匀浆的脂质过氧化及由Fe2+-H2O2体系、Fe2+-VitC体系和Fe2+-Cys体系诱导的脂质过氧化的抑制作用。发现金丝桃提取物对大鼠肝、心、肾组织匀浆脂质过氧化和线粒体诱导的脂质过氧化具有抑制作用并表现出剂量依赖关系,而且提取物F003的抑制作用要强于F004、F005的抑制作用。认为金丝桃具有较好的抗脂质过氧化作用,具有进一步研究与开发价值。     

人参皂苷Rg1和Rb1抗肝纤维化的体视学研究

目的观察三七总甙单体成分人参皂苷Rg1和Rb1对肝纤维化的作用。方法用50%四氯化碳致大鼠肝纤维化模型,共35 d,同时给予三七总皂甙单体成分人参皂苷Rg1或Rb1治疗,于第5周时分离肝组织,电镜观察肝组织病理变化,并应用体视学方法计量各组大鼠肝细胞线粒体的体积密度(Vvm)、面积密度(Svm)、比表面(Qm)和面数密度(Nam)。结果人参皂苷Rg1及三七总甙能减轻肝组织胶原的沉积,改善肝纤维化程度,而人参皂苷Rb1不能改善肝纤维化程度;各组大鼠肝细胞线粒体体视学结果比较组间存在差异。结论人参皂苷Rg1具有三七总甙的抗肝纤维化作用,在一些方面甚至超过三七总甙,故可以认为是较理想的防治肝纤维化的药物。人参皂苷Rb1不具有抗肝纤维化的作用,不是三七总甙抗肝纤维化的有效成分。     

人参皂苷Rb1和Rg1对海马神经元的影响

目的探讨人参皂苷（ginsenoside）Rb1和Rg1（GRb1,GRg1）对海马神经元突起生长及神经保护作用及其机制。方法培养SD新生大鼠海马神经元,分为：正常组、Rb1组、Rg1组、Rb1＋API-2（Akt抑制剂）、Rg1＋API-2、Rb1＋PD98059（MEK抑制剂）和Rg1＋PD98059组,培养1d,用免疫染色观察神经突起的生长。加入Aβ25—35制备海马神经元损伤模型,分为正常组、损伤组（AB组）、Rb1组、Rg1组、Rb1＋API-2、Rg1-I-API-2、Rb1＋PD98059和Rg1＋PD98059,培养48h,用Hoechst33258染色观察活细胞与凋亡细胞。用Elisa观察培养上清液里神经营养因子的浓度（nerve growth factor,NGF;brain—derived neurotrophic factor,BDNF;neurotrophin-3,NT-3）。结果Rb1和Rg1组神经突起生长高于对照组（P〈0．05）;API-2和PD98059显著抑制了Rb1和Rg1诱导的神经突起生长（P〈0．01）,API-2的抑制效果强于PD98059;Rg1＋API-2组BDNF高于对照组和Rg1组（P〈0．05）,其余各组间差异无统计学意义（P〉0．05）;Rg1组NT-3的浓度高于对照组（P〈0．05）;Rb1＋PD98059组的NGF高于Rb1组。Rb1和Rg1组海马神经元的凋亡率显著低于损伤组（P〈0．01）;PD98059和API-2阻断了Rb1和Rg1对神经元的保护作用（P〈0．01）;神经营养因子水平各组间差异无统计学意义。结论Rb1和Rg1促进海马神经元突起生长及抵抗A1325—35损伤,促进神经元的存活。其机制与Akt和ERK1／2的信号通路激活有关,与增加神经营养因子的分泌无关。     

人参皂苷单体Rb1、Re及Rg1对肾上腺素所致小鼠耳廓微循环障碍的改善作用

目的：观察人参皂苷单体Rb₁、Re及Rg₁对肾上腺素所致小鼠耳微 循环障碍的影响。方法：昆明种小鼠40只分为4组（每组10只）,对照组、人参皂苷单体Rb₁组、人参皂苷单体Re组及人参皂苷单体Rg₁组。除对照组外,各组按10 mg•kg^-1•d^-1腹腔注射给药一次,对照组腹腔注射同体积的生理盐水。连续给药4 d,末次给药30 min时将小鼠固定于微循环观测分析系统显微镜下,观测小鼠正常及腹腔注射盐酸肾上腺素(1 mg•kg^-1)10、20和30 min时小鼠耳廓微血管的管径、血流速度及毛细血管交叉网开放数目。结果：与对照组比较,人参皂苷单体Re组及Rg₁组小鼠在腹腔注射盐酸肾上腺素(10、20和30 min)小鼠耳廓微血管管径均明显扩张(P<0.05 或 P<0.01),微血管血流速度均明显加快(P<0.05 或 P<0.01),微血管交叉网开放数目均明显增加(P<0.05);Re组与Rg₁组比较差异无显著性(P>0.05)。人参皂苷Rb₁组对肾上腺素所致微循环障碍无显著影响。结论：人参皂苷单体Re及Rg₁对肾上腺素所致小鼠微循环障碍具有明显的改善作用。     

脂质过氧化反应混合物诱发人羊膜FL系细胞程序外DNA合成

大鼠肝微粒体依赖NADP的脂质过氧化反应混合物(LPRM)可诱发人羊膜FL系细胞程序外DNA合成(UDS)。当一定浓度的LPRM(0.7～2.4mg微粒体蛋白/ml)加入~(14)C—TdR预标记的FL细胞培基时,引起羟基尿素(HU)抗性的程序外~3H—TdR掺入,与对照组相比差异显著(P<0.05),并存在剂量—效应关系。由此可见,脂质过氧化反应混合物中含有诱变物,推测其在癌肿发病中可能有直接作用。     

Anti-Proliferative Effects of Ginsenosides Extracted from Mountain Ginseng on Lung Cancer

Objective

To investigate the effect of three major ginsenosides from mountain ginseng as anticancer substance and explore the underlying mechanism involved in lung cancer.

Methods

The inhibitory proliferation of lung cancer by major five ginsenosides (Rb1, Rb2, Rg1, Rc, and Re) was examined using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide assay. Calculated 50% inhibition (IC₅₀) values of five ginsenosides were determined and compared each other. Apoptosis by the treatment of single ginsenoside was performed by fluorescence-assisted cytometric spectroscopy. The alterations of apoptosis-related proteins were evaluated by Western blot analysis.

Results

The abundance of ginsenosides in butanol extract of mountain ginseng (BX-MG) was revealed in the order of Rb1, Rg1, Re, Rc and Rb2. Among them, Rb1 was the most effective to lung cancer cell, followed by Rb2 and Rg1 on the basis of relative IC₅₀ values of IMR90 versus A549 cell. The alterations of apoptotic proteins were confirmed in lung cancer A549 cells according to the administration of Rb1, Rb2 and Rg1. The expression levels of caspase-3 and caspase-8 were increased upon the treatment of three ginsenosides, however, the levels of caspase-9 and anti-apoptotic protein Bax were not changed.

Conclusion

Major ginsenosides such as Rb1, Rb2 and Rg1 comprising BX-MG induced apoptosis in lung cancer cells via extrinsic apoptotic pathway rather than intrinsic mitochondrial pathway.