压电石英晶体传感器检测单链DNA的研究

目的：对石英晶体传感器检测单链DNA的可行性进行论证，并对其DNA固定方法进行研究。方法：利用聚乙烯亚胺(PEI)黏附和戊二醛(Glu)交联法，将单链DNA探针固定在基频为10MHz的AT切型石英晶体的镀金表面，制成压电石英晶体DNA传感器，用该DNA传感器进行互补单链DNA定量定性检测，并用1．2mol/L NaOH和1．2mol/L HCl对杂交后的传感器进行了再生。结果:在50-400ng/ml的范围内，响应信号与检测浓度成线性相关，并具有良好的特异性。杂交后的DNA传感器能反复再利用。结论：石英晶体传感器可以用于DNA的杂交检测。     

压电石英晶体微阵列免疫传感器检测IgG的实验研究

目的 构建一种新型压电石英晶体人免疫球蛋白(IgG)的免疫微阵列传感器。方法 抗IgG单克隆抗体采用蛋白A(SPA)法固定在AT切向、基频10MHz的石英晶体微阵列金膜电极表面制成抗体敏感膜，构成压电石英晶体IgG免疫微阵列传感器。结果 构建的IgG压电石英晶体免疫微阵列传感器对IgG的响应特性良好，其检测下线为0．5mIU／ml。结论 研制的压电石英晶体IgG免疫微阵列传感器具有灵敏度高、特异性好、成本低廉、操作简单、快速，能在线实时检测等优点，可用于临床实验诊断。     

压电石英晶体微阵列免疫传感器检测hCG的实验研究

目的　构建一种新型压电石英晶体人绒毛膜促性腺激素 (hCG)免疫微阵列传感器。方法　抗hCG β单克隆抗体采用蛋白A(SPA)法固定在 2× 5的AT切向、基频 1 0MHz的石英晶体微阵列金膜电极表面制成抗体敏感膜 ,构成压电石英晶体hCG免疫微阵列传感器。结果　构建的hCG压电石英晶体微阵列免疫传感器对hCG的响应特性良好 ,其检测线性范围为 2 .5～ 2 50mIU ml,TSH、FSH、LH对hCG的检测基本无干扰 ;60例临床标本检测结果与荧光免疫检测法符合 (P >0 .0 5) ,两种方法的相关系数为 0 .92。结论　研制的压电石英晶体hCG免疫微阵列传感器具有灵敏度高、特异性好、成本低廉、省时、操作简单、不需标记、能在线实时检测等优点 ,对比实验表明其检测结果准确 ,能用于临床实验诊断检测     

纳米金颗粒质量放大压电DNA传感器频移信号的研究

目的探讨纳米金颗粒质量放大压电DNA传感器频移信号的可行性,以进一步提高检测灵敏度。方法将巯基化的单链DNA探针固定于压电DNA传感器石英晶体金膜表面,封闭后加入合成的生物素化的互补靶DNA与之进行杂交反应,最后用5nm粒径的链亲和素标记的胶体金追加标记于杂交后的生物素化的靶DNA上,以增加石英晶振金膜表面的质量负载,从而降低石英晶振的响应频率,进一步放大频移信号。结果检测终浓度为10-8mol/L的阳性靶序列时杂交反应前后频移为(12.7±5.5)Hz,加入终浓度为9%的纳米金颗粒放大后总频移为(126±2.6)Hz,后者显著高于前者(P<0.01)。另外,对不同终浓度的阳性靶序列检测后发现,频移与其终浓度的lg值之间具有显著的线性关系,相关系数为0.974,而且最低检出限达到了10-12mol/L。结论实验结果表明该方法可以显著放大压电DNA传感器的频移信号,从而进一步提高压电DNA传感器检测的灵敏度。     

压电石英晶体传感器液相检测的影响因素

目的　探讨压电石英晶体传感器液相检测的影响因素。方法　采用AT切向镀金膜的石英晶体制成 2× 5型石英晶体微阵列 ,观察晶体振荡频率在不同粘度和密度的甘油PBS( 0 .15mol LpH 7.0 )溶液、不同浓度的NaCl溶液、不同pH的PB溶液( 0 .0 6 7mol L)及不同体积的PBS溶液 ( 0 .15mol LpH 7.0 )中的变化规律以及机械冲击和重新加样对晶体振荡频率的影响。结果　石英晶体振荡频率随溶液粘度和密度、离子浓度、pH的增大而降低。溶液体积、机械冲击和重新加样对晶体频率基本无影响。结论　石英晶体传感器所处溶液体系的性状如粘度、密度、离子浓度、pH等因素对其振荡频率有较大的影响 ,石英晶体传感器用于生物反应检测时应减少和避免上述因素的干扰     

压电石英晶体生物传感器的血浆凝血因子检测系统的效能研究

目的研究用压电石英晶体传感器进行凝血因子检测的系统,介绍血浆凝血因子检测系统的工作原理.方法利用压电石英晶体的逆压电反应,基于模糊和解耦控制技术,采用单片机进行恒温恒湿控制和频率计数,测得血浆凝集时间,来确定凝血因子的活性和含量.结果本检测系统提高了凝血因子检测的方便性、精度和一致性.结论压电石英晶体传感器用于凝血因子检测具有精度高和成本低等优点,有广阔的临床应用和推广前景.     

压电石英晶体甲胎蛋白免疫传感器的实验研究

目的　构建一种新型压电甲胎蛋白 (AFP)免疫传感器。方法　AT切向、基频 10MHz的石英晶体用金属夹具和乳胶套圈固定组成检测池 ,抗人AFP单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电极表面制成抗体敏感膜 ,构成压电AFP免疫传感器。结果　构建的压电AFP免疫传感器对AFP的响应特性良好 ,其线性检测范围为 2 0～ 10 0 0ng ml ,癌胚抗原(CEA)、前列腺特异抗原 (PSA)、人绒毛膜促性腺激素 (hCG)等对AFP的检测基本无干扰 ;传感器可再生后重复使用 5次 ;68例临床标本检测结果与放射免疫检测法符合 ,两种方法的相关系数为 0 92 ,P <0 0 1。结论　研制的压电AFP免疫传感器是一种灵敏度高、特异性好、不需标记、操作简单、省时、能重复使用和实时在线检测AFP的新方法 ,对比实验表明其检测结果准确 ,能用于临床实验诊断 ,具有临床推广价值。     

检测蝮蛇毒的压电免疫传感器阵列的初步构建

目的 初步构建适宜于蝮蛇毒检测的压电免疫传感阵列.方法 制作2×5型压电免疫传感阵列,AT切向、基频10MHz,通过自组装技术将巯基化后的蝮蛇毒抗体固定在石英晶体金膜电极表面,检测不同浓度的标准蝮蛇毒液,时压电晶体频率变化数据进行采集和分析.结果 蝮蛇毒压电免疫传感器阵列上,达到最大频率变化的最小抗体浓度为4μg/mL;蝮蛇毒与抗体反应40分钟后频率达到稳定状态;蝮蛇毒浓度低于0.1μg/mL时,频率变化不明显,蝮蛇毒浓度在0.1～5.0μg/mL范围时,与晶体频率变化间呈线性关系.结论 初步构建的蝮蛇毒压电免疫传感器阵列响应特性良好,具有灵敏度高、操作简单、不需标记等优点,是较有前景的蝮蛇毒检测方法 .     

DNA生物传感器在乙型肝炎基因诊断中的应用

目的：建立石英晶体DNA传感器检测乙肝病毒基因的方法。方法：在石英晶体金表面固定单链DNA，构成压电晶体HBVDNA生物传感 器，与待测样品进行杂交反应。结果：DNA传感器能准确诊断血清中的HBV病毒基因。结论：石英晶体HBV DNA生物传感器操作省时、简单，具有用于临床基因诊断的前景。     

压电免疫传感器阵列检测尖吻蝮蛇毒的初步研究

目的 探讨以压电传感阵列技术榆测尖吻蝮蛇毒的可行性.方法 构建2×5的AT切向、基频10 MHz的石英晶体微阵列,将尖吻蝮蛇毒抗体巯基化,通过自组装技术固定在石英晶体金膜电极表面,检测不同浓度的尖吻蝮蛇毒标准液.结果 尖吻蝮蛇毒压电免疫传感器阵列上,最适抗体固定浓度为3 μg/ml,尖吻蝮蛇毒与相应抗体反应时间为40 min,检测尖吻蝮蛇毒最低浓度为0.1μg/ml,蛇毒浓度在0.1～4.0μg/ml范围时,与晶体频率变化之间呈良好的线性关系.结论 采用压电免疫传感器阵列检测尖吻蝮蛇毒响应特性良好,具有灵敏度高、操作简单、不需标记等优点,是实现快速仪器化检测蛇伤的可能途径.     

纳米微粒增敏的压电化学传感器

以TiO2 纳米微粒膜作为固载 β 环糊精的基体 ,可以实现 β 环糊精在压电石英晶体表面的超容量固载 ,固载容量为 4 μg cm2 。β 环糊精 TiO2 纳米微粒膜修饰的压电传感器对苯、甲苯、硝基苯、氯苯、o 二甲苯、m 二甲苯、p 二甲苯气体检测时响应时间为 1min ,检测浓度下限可低至 4 0ng ml。该方法为提高压电化学传感器的灵敏度和缩短响应时间提供了一种新方法     

压电石英晶体传感器检测血浆纤维蛋白原方法的研究及应用

目的建立一种压电石英晶体传感器检测血浆纤维蛋白原(Fib)的方法.方法采用AT切向、基频10MHz的银膜石英晶体作为压电元件;观察血浆凝集过程中晶体振荡频率的变化,确定血浆凝集反应的起点和终点.结果 (1)检测池加入凝血酶原待频率稳定后,血浆标本加入反应体系后,晶体振荡快速下降,由于反应中形成的纤维蛋白原凝块的质量、体积与晶体接触的面积以及血清产生的量不同,造成频率瞬时的上升、下降,或频率稳定,直至反应结束频率平稳,加样后频率下降的起点为血浆凝集反应的起点,频率上升、下降,稳定的起始点为反应的终点,计算两点的时间即为反应时间,查标准曲线得纤维蛋白原的含量.(2)该方法的检测结果与STAGO磁珠检测法的相关性好(r＝0.957).结论压电石英晶体传感器检测血浆纤维蛋白原是一种实时在线检测的方法,在线观测凝集反应的终点,反应的起点和终点的判别方便、可靠、准确.且操作简单,快速,成本低廉,是一种敏感性高、重复性好的方法,并可用于临床检测.     

压电胰岛素免疫传感器的实验研究

目的 构建一种新型压电胰岛素免疫传感器。方法 AT切向、基频10MHz的石英晶体用金属夹县和乳胶套圈固定形成检测池，抗人胰岛素单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电板表面制成抗体敏感膜，构成压电胰岛素免疫传感器。结果 构建的压电胰岛素免疫传感器对胰岛素的响应特性良好，其线性检测范围为2．5—160．0mIU／L，C肽对胰岛素的检测基本无干扰，但胰岛素原与传感器存在轻微的交叉反应，传感器可再生后重复使用5次；60例临床标本检测结果与放射免疫检测法符合(P＞0．05)，两种方法的相关系数为0．92。结论 研制的压电胰岛素免疫传感器具有灵敏度高、特异性好、不需标记、操作简单、省时、能实时再现检测和重复使用等优点，对比实验表明其检测结果准确，能用于临床实验诊断，具有临床推广价值。     

内毒素定量检测仪的研究

目的 利用压电晶体在液相环境中阻尼效应(非质量效应),研究能定量、高灵敏度、低检测限、快速的内毒素生物传感检测系统.方法 通过对石英晶体传感探头表面的光滑处理和亲水性处理得到性能(消除质量负载影响、提高液固偶合效应)更好的传感器探头,提高测量的稳定性和重复性,降低测量的检测下限.利用CPLD器件和LabView软件将整个测量系统做成一种微型的自动化的内毒素检测系统,实现测量数据的自动采集、分析和结果显示.结果 不同浓度的内毒素与频移最终稳定值存在良好的线性关系.结论 通过建立的频移数据,能够准确、方便地得到内毒素浓度.     

压电石英晶体活化部分凝血酶时间检测传感器的构建及初步应用

目的 建立一种检测血浆活化部分凝血酶时间(APTT)的压电石英晶体传感器。方法 采用AT切向、基频10MHz的银膜石英晶体作为压电元件；观察血浆凝集过程中晶体振荡顿率的变化，确定血浆凝集反应的起点和终点。结果 (1)血浆标本加入反应体系后，晶体振荡频率呈阶梯状快速下降，接着频率瞬时上升，然后再缓慢降低达到平稳，频率阶梯下降的起点为血浆凝集反应的起点，频率从快速上升变为下降的转折点为血浆凝集的终点，计算两点之间的时间即为血浆活化部分凝血酶时间。(2)该方法检测结果与STAGO磁珠检测法的相关性好(γ=0．972)，批内CV=2．54％，批间CV=7．14％。结论 压电石英晶体传感器检测血浆活化部分凝血酶时间，血浆凝集反应起点和终点确定方便、可靠。且操作简单、快速、成本低廉，检测结果准确，是一种敏感性高、重复性好的血浆活化部分凝血酶时间检测新方法，可用于临床常规检测。     

压电石英晶体传感器金膜表面亲和素固定研究

目的 研究压电石英晶体传感器金膜表面亲和素固定的反应趋势及最佳条件。方法 用3,3＇-二巯基丙酸自组装方法将亲和素固定在压电石英晶体传感器金膜表面,比较不同浓度、不同pH值条件下亲和素固定引起的频率变化。结果 经单因素方差分析,磷酸盐缓冲液pH值为6．2时亲和素固定引起的频率变化与pH5．8、6．6时差异无统计学意义（P〉0．05）,但pH值为6．2时频率下降有最大均值．应用pH7．0、7．4溶液进行亲和素固定时频率改变显著减小（P〈0．01）。浓度为0．2mg／ml时亲和素固定已达饱和。结论 选用pH6．2的0．2mg／ml时亲和素进行压电石英晶体传感器金膜修饰。     

压电石英晶体振荡频率检测平台的建立及应用

目的　构建一种 2× 5型压电石英微阵列振荡频率检测平台。方法　利用基频 1 0MHz的 2× 5型石英晶体微阵列作为传感换能器件 ,自行设计自激式振荡频率检测仪、频率分析软件PESA2 .0 ,与计算机连接组成压电石英晶体传感器检测平台 ,并应用于气、液相检测。结果　石英晶体微阵列在气、液相起振能力强 ,并获得稳定振荡 ,气相稳定度可达± 1Hz ,液相≤ 2Hz。消除了温度、电离辐射、机械震动等因素的干扰 ;实现了频率信号检测的自动化、微机化和自能化。结论　该检测平台具有检测频率稳定、自动化和智能化程度较高、能实时检测等优点 ,是一种新型压电晶体振荡频率检测共用平台 ,可广泛用于压电传感器振荡频率的检测     

适配子型压电石英晶体传感器探针固定方法的研究

目的 比较金膜表面两种探针固定法的优劣,选择适配子型压电传感器探针固定的最佳方法.方法 用巯基固定法及生物素-亲和素固定法将针对人IgE的适配子探针固定在压电传感器的金膜表面,对不同浓度IgE引起的频率变化进行检测.结果 与巯基法相比,生物素-亲和素法固定探针压电传感器频率下降更为明显,检出限低,线性范围宽,0.1～2.5 mg/L浓度范围内IgE浓度与频率变化呈明显的线性相关,相关系数0.994 5.结论 在压电基因传感器探针固定中效果良好的巯基法在适配子探针固定中并不适用,生物素-亲和素法在适配子压电传感器探针固定中有明显优势.     

壳聚糖/碳纳米管修饰电极电化学免疫传感器用于甲胎蛋白检测

目的构建壳聚糖/碳纳米管(CNT)修饰电极电化学免疫传感器用于甲胎蛋白(AFP)检测的新技术。方法采用壳聚糖/CNT复合物修饰玻碳电极,通过共价键合方式将AFP抗体固定在修饰电极表面,固定抗体的电极与AFP、辣根过氧化物酶(HRP)标记的AFP抗体反应,构筑夹心型免疫复合结构。HRP催化TMB底物产生电流信号,电流信号大小与AFP浓度成正相关,实现对AFP的高灵敏检测。结果该电化学免疫传感器可以准确检测AFP标准样品,也可用于检测血清中AFP的浓度。结论壳聚糖/CNT修饰电极构建的用于AFP检测的电化学免疫传感器具有较高的灵敏度和准确性。     

核酸外切酶-压电石英DNA传感器检测金黄色葡萄球菌的实验研究

目的 构建一种用于检测金黄色葡萄球菌的核酸外切酶-压电石英DNA传感器新方法,同时对其重要影响因素进行探讨.方法 采用λ核酸外切酶处理金黄色葡萄球菌PCR产物,EB染色、电泳后于紫外灯下进行观察,对杂交温度、杂交时间和杂交响应性能等因素进行实验研究,进一步将构建的核酸外切酶-压电石英DNA传感器法用于金黄色葡萄球菌检测,并对其灵敏度和特异性进行研究.结果 λ核酸外切酶-压电石英DNA传感器法最适杂交温度为35℃,最适杂交时间为60 min,响应性能显著大于普通压电DNA传感器(P＜0.01),可以检测到1.0×104CFU/ml的金黄色葡萄球菌,特异性好.结论 利用核酸外切酶-压电石英DNA传感器检测金黄色葡萄球菌,具有杂交效率高、技术难度低、频率响应性能高等优点,有较好的应用前景.