新型重氮胶乳凝集试验快速检测抗结核杆菌抗体的研究

目的 探索检测抗结核杆菌抗体的简便、快速、敏感的方法,作为结核病实验室诊断的新手段,并考核其应用价值。方法 应用自行制备的新型免疫载体重氮乳胶与纯化的结核菌蛋白衍生物PPD交联,制成免疫重氮乳凝诊断试剂（DLAT）。采用简便的玻片凝集法检测血清标本中的抗结核抗体,肉眼观察结果,3min内出现凝集颗粒者判为阳性。以DLAT与酶联免疫吸附试验（ELISA）平行检测127例结核病患者血清抗结核抗体,同时以PCR检测患者宰标本结核杆菌DNA。结果 DLAT、ELISA和PCR检测阳性率分别为48．8％、50．4％和53．5％,三者之间无显著性差异（P＞0．05）,DLAT与ELISA和PCR的检出总符合率分别为98．4％,92．1％。结论 DLAT检测抗结核抗体具有简便、敏感、快速的特点,可作为结核病感染的血清学过筛方法,尤其适合基层单位开展。     

GeneXpert MTB/RIF与线性探针技术检测骨关节结核及利福平耐药性的价值

目的探讨GeneXpert MTB/RIF(简称"GeneXpert")和线性探针技术检测骨关节结核及利福平耐药性的临床应用价值。方法选取2018年3-12月接受病灶清除手术或穿刺术的疑似骨关节结核患者172例,同时采用GeneXpert、线性探针技术及BACTEC MGIT 960对患者病灶标本进行检测。以临床综合诊断为参照标准,评价GeneXpert、线性探针技术及两种方法联合检测骨关节结核的效能。以BACTEC MGIT 960药物敏感性试验(DST)结果为参照标准,评价GeneXpert、线性探针技术及两种方法联合检测MTB对利福平耐药性的效能。结果 172例疑似骨关节结核患者经临床综合诊断,112例诊断为骨关节结核,60例为非骨关节结核。以临床综合诊断为参照标准,GeneXpert检测骨关节结核的敏感度和特异度分别为82. 14%(92/112)和96. 67%(58/60),与临床诊断结果一致性良好(Kappa=0. 74);线性探针技术检测的敏感度和特异度分别为69. 64%(78/112)和90. 00%(54/60),与临床诊断结果一致性一般(Kappa=0. 54);两种方法联合检验的敏感度和特异度分别为82. 14%(92/112)和90. 00%(54/60),与临床诊断结果一致性良好(Kappa=0. 68)。三种方法诊断骨关节结核的受试者工作特征曲线(简称"ROC曲线")下面积分别为0. 89、0. 80、0. 86,提示诊断价值均较好。以BACTEC MGIT 960DST结果为参照标准,GeneXpert检测MTB对利福平耐药性的敏感度和特异度分别为100. 00%(18/18)和92. 31%(24/26),与BACTEC MGIT 960 DST结果一致性较高(Kappa=0. 91),ROC曲线下面积为0. 96;线性探针技术检测MTB对利福平耐药性的敏感度和特异度分别为100.00%(18/18)和88.46%(23/26),与BACTEC MGIT 960 DST结果一致性较高(Kappa=0. 86),ROC曲线下面积为0. 94;两种方法联合检验结果与线性探针技术检测结果一致。结论 GeneXpert、线性探针技术能够快速、准确的检测骨关节结核及其耐药性,具有较好的临床应用价值。     

γ-干扰素释放试验对结核病患者临床诊断性能评价研究

目的评价采用A.TB试剂[酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)]进行结核杆菌特异性γ-干扰素释放试验(interferon-gamma release assays,IGRAs)对结核病的临床诊断性能及应用价值。方法 108例研究对象中,临床明确诊断结核病60例(结核组),非结核病对照者48例(非结核对照组)。同时采用A.TB试剂(ELISA法)和T-SPOT.TB试剂[酶联免疫斑点试验(enzyme-linked immunosorbent spot,ELISPOT)]进行IGRAs。结果 A.TB试剂(ELISA法)检测的灵敏度为86.67%,特异度为85.42%,受试者工作特征曲线(receiver-operating characteristic curve,ROC曲线)下面积为0.822,95%可信区间(confidence interval,CI)为0.733~0.912。T-SPOT.TB试剂(ELSPOT法)检测灵敏度为91.67%,特异度为87.50%,ROC曲线下面积为0.884,95%CI为0.806~0.962。ROC曲线下面积差异无统计学意义(χ2=0.081,P=0.776)。2种检测方法一致率为87.04%(94/108),Kappa值为0.738。结论 A.TB试剂和T-SPOT.TB试剂检测的整体诊断性能相似,且A.TB试剂检测在操作和检测结果判读方面明显优于T-SPOT.TB试剂。     

Xpert MTB/RIF 检测系统对肺结核临床诊断病例的应用价值

目的 评价Xpert MTB/RIF检测系统对肺结核临床诊断病例的应用价值。方法 对296例肺结核临床诊断病例的同一痰标本分别进行BACTEC MGIT 960液体培养和Xpert MTB/RIF检测,以BACTEC MGIT 960液体培养病原学检测和药敏结果为金标准计算Xpert MTB/RIF检测系统的检验效能指标。结果 Xpert MTB/RIF检测系统与金标准存在的差异具有统计学意义 (P<0.005),其病原学诊断灵敏度为84.9%(118/139),特异度为97.5%(153/157),筛查利福平耐药的灵敏度为85.2%(23/27),特异度为100.0%(91/91),一致性检验发现两种方法在病原学诊断和利福平药敏筛检的kappa值分别为0.829和0.899。结论 Xpert MTB/RIF检测系统用于肺结核临床诊断病例的实验室诊断和利福平耐药的筛检都不同于BACTEC MGIT 960检测系统,Xpert MTB/RIF检测系统借助其较高的灵敏度和特异度、快速和操作方便的优势,值得在中国结核病实验室推广应用。     

结核病诊断T-SPOT.TB、Gene Xpert MTB/RIF技术应用价值研究北大核心CSCD

目的评估结核分枝杆菌及其利福平耐药株实时荧光定量核酸扩增(Gene Xpert MTB/RIF)和结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在结核病诊断中的价值。方法分析2020年1月-2022年3月济宁市公共卫生医疗中心收治的住院及门诊病患者643病例的抗酸染色镜检、960液体培养、Gene Xpert MTB/RIF检测和结核抗体、T-SPOT.TB检测结果,评价Gene XpertMTB/RIF和T-SPOT.TB检测诊断结核病的特点和价值,以临床诊断为金标准,以检测方法的敏感度、特异度及绘制的ROC曲线等作为评价指标。结果抗酸染色、960快速培养和Gene Xpert MTB/RIF检测结核病的敏感度分别为21.57%、39.21%和59.80%,特异度分别为100.00%、97.22%和100.00%。ROC曲线分析显示,抗酸染色、960结核菌培养和Gene XpertMTB/RIF的AUC分别是0.60、0.70和0.80,差异有统计学意义(P<0.05);95%置信区间范围分别为0.50~0.70,0.61~0.78,0.73~0.87。T-SPOT.TB和结核抗体检测的敏感度分别为84.61%和70.19%,特异度分别为95.83%和79.16%。ROC曲线分析结核抗体与TSPOT检测的AUC分别为0.75和0.90,95%,置信区间范围分别为0.64~0.86和0.84~0.97。T-SPOT.TB和Gene Xpert MTB/RIF的阳性率分别为86.47%和36.60%。结论在结核病诊断中,Gene Xpert MTB/RIF和T-SPOT.TB检测结核病的敏感性高于痰涂片和痰培养检查及结核抗体检测,其中T-SPOT.TB检测的阳性率较高。Gene Xpert MTB/RIF和T-SPOT.TB均可应用于肺结核的临床诊断以提高肺结核的诊治效率。     

支气管肺泡灌洗液XpertMTB/RIF检测在HIV感染者肺结核诊断中的应用价值

目的评估支气管肺泡灌洗液(BALF)结核分枝杆菌rpoB基因和突变检测(XpertMTB/RIF),在诊断艾滋病病毒(HIV)感染合并肺结核中的应用价值。方法对499例HIV感染者BALF标本进行XpertMTB/RIF检测,配对标本同时进行结核分枝杆菌快速培养和药敏试验(BACTEC MGIT 960)、抗酸染色涂片法、实时荧光定量法(PCR-荧光法)检测;同时采用结核分枝杆菌抗原特异性γ-干扰素酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测患者对应外周血标本,比较各种检测方法的阳性率、灵敏度和特异性。结果 BACTEC MGIT 960培养、XpertMTB/RIF、抗酸染色涂片法、PCR-荧光法及ELISPOT检测的阳性率分别为20.4%、13.4%、5.0%、6.6%、22.4%,5种检测方法阳性率差异有统计学意义(χ2=101.03,P0.001)。以传统BACTEC MGIT 960培养阳性并经过菌种鉴定为结核分枝杆菌的79例标本为金标准:XpertMTB/RIF、抗酸染色涂片法、PCR-荧光法、ELISPOT的灵敏度依次为:77.2%、26.3%、38.0%、60.3%;特异性依次为:98.8%、99.2%、99.5%、85.1%;阳性预测值依次为:92.4%、87.0%、93.8%、44.4%;阴性预测值依次为:95.7%、87.5%、89.2%、91.5%。对XpertMTB/RIF、抗酸染色涂片法、PCR-荧光法及ELISPOT四种方法与BACTEC MGIT 960培养进行一致性检验发现,XpertMTB/RIF与BACTEC MGIT 960培养具有最强一致性(Kappa值为0.814),PCR-荧光法一般(Kappa=0.493),而抗酸染色涂片法和ELISPOT法最差(Kappa值分别为0.356、0.397)。结论与其他4种常见结核诊断方法相比,支气管肺泡灌洗液XpertMTB/RIF检测技术在HIV感染合并肺结核患者的诊断中具有较高的应用价值,是一种快速省时、敏感性和特异性均高的结核分枝杆菌快速检测方法。     

血浆结核分枝杆菌游离DNA检测对结核病的诊断价值

目的探讨血浆结核分枝杆菌游离DNA(cfDNA)检测对结核病(TB)诊断的临床应用价值。方法选取临床细菌学确诊结核病患者118例作为研究组,另选取同期非结核其他肺部疾病患者61例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)技术检测研究对象血浆中的结核分枝杆菌cfDNA,绘制ROC曲线分析其对结核病的诊断价值。并应用T-SPOT.TB检测、Xpert MTB/RIF (Xpert)检测对入组对象进行验证性诊断,采用配对四格表χ~2检验比较结核分枝杆菌cfDNA检测与T-SPOT.TB、Xpert检测在结核病诊断中的差异。结果结核分枝杆菌cfDNA检测诊断结核病的ROC曲线下面积(AUG)为:0.884,最佳诊断阈值(cut-off值)为38.69。T-SPOT.TB、Xpert、结核分枝杆菌cfDNA检测诊断结核病的灵敏性和特异性分别为:81.36%和40.98%、61.01%和96.72%、79.70%和95.10%。另外,结核分枝杆菌cfDNA检测对肺结核组(PTB)或肺外结核组(EPTB)患者的阳性检出率均高于Xpert检测(P0.05),但与T-SPOT.TB检测相比差异均无统计学意义(P0.05)。结论通过Q-PCR技术可以在结核病患者血浆中检测到结核分枝杆菌cfDNA,能够显著提高结核病的阳性检出率,并且有望成为肺外结核病快速诊断的新靶标。     

结核病诊断T-SPOT.TB、Gene Xpert MTB/RIF技术应用价值研究

目的 评估结核分枝杆菌及其利福平耐药株实时荧光定量核酸扩增(Gene Xpert MTB/RIF)和结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在结核病诊断中的价值。方法 分析2020年1月-2022年3月济宁市公共卫生医疗中心收治的住院及门诊病患者643病例的抗酸染色镜检、960液体培养、Gene Xpert MTB/RIF检测和结核抗体、T-SPOT.TB检测结果,评价Gene XpertMTB/RIF和T-SPOT.TB检测诊断结核病的特点和价值,以临床诊断为金标准,以检测方法的敏感度、特异度及绘制的ROC曲线等作为评价指标。结果 抗酸染色、960快速培养和Gene Xpert MTB/RIF检测结核病的敏感度分别为21.57%、39.21%和59.80%,特异度分别为100.00%、97.22%和100.00%。ROC曲线分析显示,抗酸染色、960结核菌培养和Gene XpertMTB/RIF的AUC分别是0.60、0.70和0.80,差异有统计学意义(P<0.05);95%置信区间范围分别为0.50～0.70,0.61～0.78,0.73～0.87。T-SPOT.TB和...     

三种结核病实验室检测方法对结核病的临床诊断价值的评价

目的 为评价聚合酶链反应（PCR）、快速培养法（Bactec-460）及酶联免疫吸附试验（ELISA）对结核病的诊断价值。方法 选取123例确诊的结核病患者和41例非结核病患者为研究对象,用PCR、Bactec-460培养法及ELISA三种方法检测,将检测结果用判别分析法和受试者工作特征（ROC）曲线分析法进行分析,以上述三种检测方法为指标,观察进入判别模型的情况进行真实性评价;通过受试者工作特征曲线（ROC）下面积的大小,来比较三个指标对结核病的判别能力。结果 PCR,Bactec-460和ELISA均进入了判别模型,即均有诊断价值;应用ROC曲线分析法时,各指标在曲线下的面积分别为0.9997,0.9998和0.9516。结论 PCR,Bactec-460快速培养法和ELISA诊断结核病均有较高的可靠性;PCR判别能力最强,即为最有价值的指标,而ELISA检测结果对结核病的判别效果相对较弱。     

检测外周血特异性结核分枝杆菌抗体对活动性结核病的诊断价值研究

目的研究外周血浆细胞分泌特异性结核分枝杆菌抗体对活动性结核病的诊断价值。方法纳入2013年4月至7月期间深圳市第三人民医院肺科门诊活动性结核病患者;健康对照组人员来自体检科门诊志愿者,分为3个组：活动性结核病组（104例）、结核分枝杆菌（Mtb）潜伏感染组（26例）和健康对照组（33名）。分离其外周血单个核细胞（PBMCs）。体外培养4d后收集培养上清液,用ELISA法和蛋白免疫印迹法,ELISA和蛋白免疫印迹法检测外周血浆细胞分泌的特异性结核分枝杆菌抗体;检测各组收集的PBMCs培养上清液中的特异性结核分枝杆菌抗体,比较各组间的差异。所有数据均使用GraphPadPrism5．0进行统计学分析,用受试者工作特征（ROC）曲线评价ELISA法检测的诊断价值,得出敏感度、特异度;多组间的比较采用Kruskal—Wallis检验;两组间比较采用Dunnmultiplecomparison检验;蛋白免疫印迹法用四格表的卡方检验;以P〈0．05为差异有统计学意义。结果ELISA法检测活动性结核病组特异性结核分枝杆菌抗体的A450nm值（0．593±0．206）高于Mtb潜伏感染组（0．342±0．152）和健康对照组（0．246±0．121）,差异有统计学意义（H=77．27,P〈0．001）。特异性结核分枝杆菌抗体区分活动性结核病患者和Mtb潜伏感染者、健康对照者曲线下面积（AUC）分别为0．857、0．944,当诊断界限值为0．42时,其区分活动性结核病和Mtb潜伏感染的敏感度为77．9％（81／104）,特异度为80．8％（21／26）;区分活动性结核病和健康人的敏感度为77．9％（81／104）,特异度为93．9％（31／33）。蛋白免疫印迹法检测活动性结核病和健康人的敏感度、特异度和准确性分别为79．2％（61／77）、100．0％（11／11）、81．8％（72／88）（x2=24．8,P〈0．001）。结论ELISA法和蛋白免疫印迹法检测外周血浆细胞分泌特异性结核分枝杆菌抗体诊断活动性结核病特异度高,可以作为临床结核病实验诊断的辅助方法。     

TaqMan聚合酶链反应技术检测结核分支杆菌DNA及其临？…

目的 探讨ＴａｑＭａｎ聚合酶链反应（ＴａｑＭａｎ－ＰＣＲ）技术在肺结构诊断中的价值。方法 对１６８例活动性肺结核、５７例肺癌患者的痰和外周血及３４－例健康对照外周血,同时应用ＴａｑＭａｎ－ＰＣＲ、ＰＣＲ检测,并与痰涂片法、ＢＡＣＴＥＣ法及改良罗氏培养法结果进行比较。结果 ＴａｑＭａｎ－ＰＣＲ检测痰和外周血总的阳性率分别为５３．０％和６１．３％,显著高于ＰＣＲ、痰涂片法、ＢＡＴＣＴＥＣ法及改良罗氏培     

TaqMan-PCR技术诊断结核病的临床应用研究

目的　探讨TaqMan-聚合酶链反应 (TaqMan-PCR)技术在结核病快速诊断中的临床价值。方法 对 155例活动性肺结核患者的痰和外周血、130例结核性胸膜炎患者的胸腔积液和外周血以及 61例结核性脑膜炎患者的脑脊液和外周血应用TaqMan -PCR检测结核分支杆菌DNA ,痰、胸腔积液和脑脊液进行抗酸染色涂片检查 ,另外 ,痰标本还进行了BACTEC和改良罗氏培养；同期以52例肺癌患者的痰和外周血、50例恶性胸腔积液患者的胸腔积液以及 33例健康人的外周血作为对照进行TaqMan-PCR检测。 结果 155例活动性肺结核患者的痰和外周血、130例结核性胸膜炎患者的胸腔积液和外周血以及 61例结核性脑膜炎患者的脑脊液和外周血TaqMan-PCR的阳性率分别为 49.0%和 51.6%、45.4%和 38.5%以及 50.8%和 42.6% ,痰、胸腔积液和脑脊液TaqMan-PCR的阳性率显著高于抗酸染色涂片以及BACTEC和罗氏培养 (P＜0.05)。TaqMan-PCR检测痰、胸腔积液和外周血的特异性分别为 96.2%、98%和 96.5%。结论 TaqMan-PCR具有较高的敏感性和特异性 ,对结核病的快速诊断具有一定的价值。     

γ干扰素诱导蛋白10和巨噬细胞炎症蛋白1α在判断肺结核活动性中的临床意义

目的 探讨趋化因子γ干扰素诱导蛋白10(IP-10)和巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)在判断肺结核活动性中的临床意义.方法 回颐性分析活动性和非活动性肺结核患者各60例及40例正常健康人外周血清中IP-10和MIP-1α的水平.根据活动性及非活动性肺结核组IP-10和MIP-1α的检测值制作受试者工作特征(ROC)...     

肺结核患者痰和血浆IFN-γ含量检测的临床意义探讨

目的探讨肺结核患者痰和血浆中γ-干扰素（interferon-gamma,IFN-γ）水平在结核病诊断、鉴别诊断中的意义。方法用酶联免疫吸附剂测定法（ELISA）分别检测44例活动性肺结核患者（PTB）、36例正常对照者、18例肺癌患者痰和血浆中IFN-γ含量。结果结核分枝杆菌潜伏感染者（LTBI）痰和血浆IFN-γ含量与健康人相接近（P〉0.05）;肺结核患者血浆IFN-γ含量显著高于正常对照及肺癌患者（P值均〈0.05）,肺结核患者痰中IFN-γ含量显著低于正常对照及肺癌患者（P值均〈0.01）;肺结核患者痰IFN-γ含量低于血浆IFN-γ含量;痰及血浆中IFN-γ的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.90和0.91,当痰中IFN-γ诊断临界值为21.40 pg/ml时,敏感度85.71%、特异性82.35%;当血浆IFN-γ诊断临界值为27.91 pg/ml时,敏感度71.43%、特异性94.12%。结论痰和/或血浆中IFN-γ可以作为肺结核诊断（尤其是菌阴肺结核）、鉴别诊断的重要辅助指标之一。     

噬菌体裂解法与BACTEC-460法在结核分支杆菌快速检测中的比较

目的：比较噬菌体裂解法与BACTEC－460法在结核分支杆菌快速检测及鉴定中的价值。方法：应用噬菌体裂解法和BACTEC－460法分别检测30株结构分支杆菌临床分离株、10株非结核分支杆菌和7株非分支杆菌，以及60份临床确诊的肺结核患者的痰标本，结果：所有结核分支杆菌临床分离株噬菌体裂解试验均为阳性，而非结核分支杆菌和非分支杆菌均为阴性。41份BACTEC－460培养阳性和19份BACTEC－460培养阴性的痰标本中，噬菌体裂试验分别有34份（82．9％）和5份（26．3％）阳性。结论：噬菌体裂解法可以简便，快速地检测结核分支杆菌，并且具有较高的敏感性的特异性。     

血清EGFR、Lrg1水平是肺结核患者发生支气管狭窄的独立危险因素

目的：检测肺结核患者血清表皮生长因子受体（EGFR）、富亮氨酸α2糖蛋白1（Lrg1）表达水平，探讨其与患者支气管狭窄的关系。方法：收集180例肺结核患者的临床资料，根据患者是否发生支气管狭窄将其分为单纯肺结核组（97例）和支气管狭窄组（83例）。采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测患者血清EGFR、Lrg1水平；一氧化氮（FeNO）测定仪检测受试者呼出气FeNO水平；肺功能仪检测第1秒用力呼气量（FEV-1）、用力肺活量（FVC）、最大呼气峰流速（PEF）水平；Pearson法分析支气管狭窄肺结核患者血清EGFR、Lrg1水平与肺功能指标相关性；受试者工作特征（ROC）曲线分析血清EGFR、Lrg1水平对肺结核患者支气管狭窄的诊断价值。结果：支气管狭窄组血清EGFR、Lrg1、FeNO水平高于单纯肺结核组，FEV-1、FVC、PEF水平低于单纯肺结核组（P均＜0.05）；支气管狭窄肺结核患者血清EGFR与Lrg1、FeNO水平呈正相关（r=0.661、r=0.521，P均＜0.05），与FEV-1、FVC、PEF呈负相关（r=-0.492、-0.483、-0.457, P均＜0.05）；Lrg1与FeNO呈正相关（r=0.536, P＜0.05），与FEV-1、FVC、PEF呈负相关（r=-0.487、-0.454、-0.479, P均＜0.05）；血清EGFR、Lrg1水平诊断肺结核患者支气管狭窄的曲线下面积（AUC）分别为0.794、0.842，特异性分别为85.6%、83.5%，敏感度分别为66.3%、73.5%；两者联合诊断的AUC为0.896，特异性为94.8%，敏感度为74.7%；血清EGFR、Lrg1水平是肺结核患者发生支气管狭窄的独立危险因素（P均＜0.05）。结论：血清EGFR、Lrg1水平与肺结核患者发生支气管狭窄有一定的相关性，在肺结核并支气管狭窄的筛查中可能具有一定评估价值。     

血清γ-干扰素诱导蛋白10对活动性肺结核的诊断价值

目的探讨血清γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)在儿童青少年活动性肺结核诊断中的应用价值。方法选取住院确诊肺结核儿童青少年92例为肺结核组,同期体检无结核感染者107例为对照组,两组均检测γ-干扰素诱导蛋白-10(IP-10);其中肺结核43例和无结核感染者50例行结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT)检测,其敏感性和特异性与IP-10比较。结果肺结核组IP-10浓度高于对照组,绘制ROC曲线下面积为0.921,取血IP-10诊断活动性肺结核临界浓度值为155.82 pg/mL,其敏感性(75.5%)低于血T-SPOT(90.7%),但特异性(95.9%)明显高于血T-SPOT(84%),差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论IP-10在儿童青少年肺结核患者中明显升高,特异性强,可作为辅助临床早期、快速诊断活动性肺结核的检测指标。