复方紫草油无菌检查方法的建立

目的 建立复方紫草油的无菌检查方法.方法 采用离心-薄膜过滤法,以聚山梨酯80为乳化剂,0.1％聚山梨酯80-氯化钠-蛋白胨溶液为缓冲液,以金黄色葡萄球菌等6种标准试验菌验证复方紫草油无菌检查方法的准确性.并采用经过验证的方法及条件对复方紫草油进行无菌检查.结果 验证试验中,样品管和阳性对照管的各试验菌均生长良好,阴性对照管5d内均无菌生长;无菌检查实验中,供试品观察14d,无菌生长.结论 该法准确可靠,可作为复方紫草油无菌检查的方法,并为非水溶性制剂的无菌检查提供依据.     

不同来源聚山梨酯80对多西他赛注射液质量的影响

以《中国药典》(2010年版)为质量标准,对10种不同来源的聚山梨酯80的质量进行比较,并评价聚山梨酯80对多西他赛注射液质量的影响。以真空溶剂蒸发法制备多西他赛注射液,以含量、单个有关物质及总杂质为指标,运用期望值分析法研究多西他赛注射液的综合质量。结果显示不同来源聚山梨酯80的质量存在差异,多西他赛注射液的稳定性受聚山梨酯80的影响较大,其中聚山梨酯80的过氧化值与多西他赛含量呈负相关。因此,应严格控制聚山梨酯80的过氧化值,以保证多西他赛注射液的产品质量。     

聚山梨酯80辅助酶法制备柚皮素的研究

目的 研究在柚皮苷酶解液中加入聚山梨酯80后辅助酶解制备柚皮素。方法 将聚山梨酯80加入柚皮苷酶解液中,以转化率为指标,通过单因素考察聚山梨酯80的质量浓度、pH值、温度、酶与底物的质量比、底物质量浓度及反应时间对转化率的影响,并通过正交试验优化其制备工艺;采用¹H-NMR、¹³C-NMR鉴定水解产物。结果 柚皮苷在最佳酶解条件下（聚山梨酯80质量浓度5 g/L、pH 4.0、温度37 ℃、酶与底物的质量比0.6、底物质量浓度30 mg/mL和反应时间12 h）的转化率为（97.4±1.2）%,远大于未加聚山梨酯80时柚皮苷的转化效率（56.7±1.4）%;反应产物相对分子质量为272.25,核磁共振谱证实产物为柚皮素。结论 在柚皮苷酶解液中加入聚山梨酯80后酶解制备柚皮素,可以缩短反应时间、提高底物质量浓度、减少酶用量,从而显著提高转化效率。该工艺简单稳定,适合工业化生产。     

吡咯类抗真菌药物制剂微生物限度检查方法的研究

目的：研究建立吡咯类抗真菌药物制剂的微生物限度检查方法。方法：通过预试验摸索，拟以含有组氨酸、卵磷脂和聚山梨酯80的混合溶液作为稀释剂及冲洗液，采用离心沉淀集菌法与薄膜过滤法联用的方法进行此类药物的微生物限度检查并进行方法学验证。结果：按《中国药典》2005年版附录要求对拟定方法进行验证，结果验证菌株的回收率均大于70％，控制菌检查阳性菌也生长良好。结论：以含有组氨酸、卵磷脂和聚山梨酯80的混合溶液作为稀释剂及冲洗液，采用离心沉淀集菌法与薄膜过滤法联用进行吡咯类抗真菌药物制剂的微生物限度检查，方法是可行的。     

聚山梨酯80致多西紫杉醇注射液异常现象的初步分析

目的:确定引起多西紫杉醇注射液异常现象的原因,并给予建议.方法:综合分析原辅料、生产工艺、储藏等因素,找出主要影响因素,并通过实验明确关键指标以及其限度.结果:与聚山梨酯80质量及凝点密切相关的脂肪酸是油酸和棕榈油酸,油酸含量越高、棕榈油酸含量越低,聚山梨酯80的质量越好,凝点越低.结论:多西紫杉醇注射液异常现象为辅料聚山梨酯80质量所致,关键指标为聚山梨酯80的脂肪酸组成及凝点,建议限度分别为油酸含量＞80%,棕榈油酸含量＜0.1%,凝点＜-5℃.     

聚山梨酯80刺激肥大细胞RBL-2H3脱颗粒作用的评价

目的：研究不同类别及厂家的聚山梨酯80直接刺激肥大细胞RBL-2H3脱颗粒的作用,为建立完善的注射用辅料引发类过敏反应的筛选评价体系提供依据。方法：以不同剂量的聚山梨酯80处理RBL-2H3细胞,测定β-氨基己糖苷酶释放量,并通过MTT法进一步研究有脱颗粒作用的受试物对RBL-2H3细胞的毒性作用。结果：8种聚山梨酯80样品具有不同程度的直接刺激RBL-2H3细胞脱颗粒的作用,且呈浓度依赖性,其中上海试剂采购供应站提供的受试物作用极强,威尔制药口服级受试物作用较强,威尔制药A、威尔制药B、威尔制药注射级、威尔制药4个受试物作用相近,2个进口品种的作用略弱。在产生直接刺激RBL-2H3细胞脱颗粒作用的浓度下,上海试剂采购供应站的聚山梨酯80有明显的细胞毒性,并呈浓度依赖性。结论：聚山梨酯80能够直接刺激RBL-2H3细胞脱颗粒,其作用强度不同反映了产品的质量差异;上海试剂采购供应站提供的聚山梨酯80直接刺激RBL-2H3细胞脱颗粒的作用可能由其细胞毒性引起。     

UV法测定奥美沙坦酯氨氯地平片含量均匀度

目的 建立测定奥美沙坦酯氨氯地平片含量均匀度的方法.方法 采用UV法,奥美沙坦酯的测定波长采用285 nm,苯磺酸氨氯地平测定波长采用360 nm.奥美沙坦酯的检测质量浓度为80μg/mL,氨氯地平的检测质量浓度为20μg/mL.以对照品比较法计算奥美沙坦酯氨氯地平片中奥美沙坦酯和氨氯地平的含量均匀度.结果 奥美沙坦酯和氨氯地平对照品溶液质量浓度分别在48.23～128.61μg/mL和12.17～32.46μg/mL范围内与吸光度呈良好线性关系;奥美沙坦酯与氨氯地平的平均回收率分别为99.26％、100.13％,RSD分别为0.33％、0.49％;样品溶液8 h内稳定;测定的3批奥美沙坦酯氨氯地平片中奥美沙坦酯与氨氯地平含量均匀度均在合格范围内,A+2.2S≤15.0.结论 采用UV法测定奥美沙坦酯氨氯地平片中奥美沙坦酯和氨氯地平的含量均匀度准确、快速、经济.     

气相色谱法测定甲磺酸达比加群酯中的甲磺酸乙酯

目的研究和改进甲磺酸盐的检测方法。方法采用AT-1000色谱柱,以酸改性聚乙二醇为固定相,采用程序升温,氮气为载气,取对照品溶液及供试品溶液顶空进样,测定甲磺酸达比加群酯中的甲磺酸乙酯。按峰面积与浓度进行线性回归。结果甲磺酸乙酯在1-9 ppm浓度范围内进样与峰面积呈良好的线性关系,甲磺酸乙酯的检测限为0.25 ng/ml,相当于0.005 ppm的杂质可检出。结论本检测方法专属性好,灵敏度高可有效的提高药品质量,保证用药安全。     

苍艾挥发油经豚鼠外耳道给药的安全性评价

目的 考察苍艾挥发油经外耳道给药的急性毒性、皮肤过敏性及外耳道皮肤刺激性反应，以评价该挥发油水溶剂的临床前安全性。方法 ①外耳道急性毒性实验：分别采用豚鼠完整皮肤和破损皮肤模型，按苍艾挥发油水溶剂15%浓度给药，1 d内4次耳道内给药后连续观察7 d；②皮肤过敏性实验：分别采用豚鼠完整皮肤和破损皮肤模型，连续7 d涂抹不同浓度(1%、5%、15%)苍艾挥发油水溶剂，以聚山梨酯80水溶液作为阴性对照，进行过敏性考察；③外耳道皮肤刺激性试验：分别采用豚鼠完整皮肤和破损皮肤模型，连续7 d将不同浓度(1%、5%、15%)苍艾挥发油水溶液浸湿的棉球，以聚山梨酯80作为阴性对照，分别放置耳道内，6 h后取出，连续给药7 d，进行外耳道皮肤刺激性考察。结果 ①外耳道急性毒性实验中，所有豚鼠外耳道及鼓膜、体质量无明显变化，未见明显全身毒性反应；②苍艾挥发油水溶剂及聚山梨酯80在所有豚鼠中未出现红斑、水肿等情况，评价为无致敏性；③外耳道皮肤完整组和破损组，均未出现红斑、水肿以及鼓膜变化反应，评价为无刺激性。结论 15%以内的苍艾挥发油对豚鼠外耳道及鼓膜安全无刺激性、无致敏性，是一种安全性较高的外用中成药，可用于临床上外耳道治疗的局部应用。     

不同配方稀释剂与冲洗液消除吡咯类抗真菌药物的抑菌效果比较

目的:比较不同配方稀释剂与冲洗液消除吡咯类抗真菌药物的抑菌性效果.方法:通过研究以含有组氨酸、卵磷脂和聚山梨酯80的混合溶液进行稀释和冲洗,比较不同配方稀释剂与冲洗液消除吡咯类抗真菌药物的抑菌性效果的效果.结果:相关菌株的回收率>70%,控制菌检查发现阳性菌也生长良好.结论:使用无菌组组氨酸-卵磷脂(进口)-聚山梨酯80作为相关稀释剂及冲洗液,此方法可行.     

基于基因毒性和对单抗聚集影响的聚山梨酯中醛限度的控制

通过建立HPLC柱前衍生化法对不同厂家的聚山梨酯80和聚山梨酯20中甲醛、乙醛进行检测分析,并在不同条件下监测甲醛和乙醛对阿达木单抗聚集的影响,分别从基因毒性杂质控制和对单抗制剂稳定性影响两方面综合考量,初步得出二者的控制限度.HPLC柱前衍生化法采用2,4-二硝基苯肼(2,4-DNPH)作为衍生化试剂,以乙腈和水为流...     

醇类物质及部分非离子表面活性剂对Trinder反应的影响

目的: 观察醇类物质及部分非离子表面活性剂对Trinder反应的影响。方法: 以醇类物质及非离子表面活性剂溶液为样本,进行Trinder反应实验。肉眼观察颜色变化,用全自动生化分析仪记录光密度值。同时观察非离子表面活性剂对尿酸检测的影响。结果： 以乙醇、乙二醇、异丙醇、Triton X-100、Triton X-405、Tween20和NP40为样本的Trinder实验均产生紫红色颜色反应。这些物质水溶液的光密度值均随浓度增加而增加,非离子表面活性剂的光密度水平与表面活性剂羟值有密切联系。含有0.1% TritonX-100、TritonX-405、Tween20和NP40的血清样本的尿酸水平明显高于三蒸水对照（P<0.01）。结论： 醇类物质及部分非离子表面活性剂对Trinder反应有干扰。     

枸杞对大鼠肾草酸钙结石生成的干预效果及其机制

目的 研究枸杞对大鼠肾草酸钙结石生成的干预效果及可能机制。方法 Wistar大鼠根据诱石方式（吸烟或饮用乙二醇或两者联合）、枸杞浸泡剂干预与否以及干预浓度（10%或25%）进行分组,设立空白对照组,每组10只。分组处理40 d后,收集24 h尿液并采集肾组织样本。检测尿液中钙、草酸及枸橼酸浓度;观察各组大鼠肾小管草酸钙结晶沉积情况并进行等级评分;检测肾组织脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量及总超氧化物歧化酶（T SOD）活性;TUNEL染色观察肾小管细胞凋亡并计算凋亡指数。结果 吸烟联合乙二醇诱石组尿钙浓度明显高于空白对照组（P<0.01）;单纯饮用乙二醇和吸烟联合乙二醇诱石组大鼠肾小管草酸钙结晶评分、肾组织MDA含量及肾小管上皮细胞凋亡指数均高于空白对照组,而尿液中枸橼酸浓度和肾组织T-SOD活性均低于空白对照组。10%和25%枸杞浸泡剂干预可显著降低吸烟联合乙二醇诱石组大鼠尿钙浓度（P<0.01）;同时使单纯饮用乙二醇和吸烟联合乙二醇诱石组大鼠肾小管草酸钙结晶评分、肾组织MDA含量及肾小管上皮细胞凋亡指数下降,而尿液中枸橼酸浓度和肾组织T-SOD活性升高。枸杞浸泡剂两种浓度间未见明显量效关系。结论 枸杞能有效抑制吸烟和（或）乙二醇诱导的大鼠肾草酸钙结石的生成,其机制可能与降低肾组织内自由基水平,抑制肾小管上皮细胞凋亡,以及减少尿液中促石成分而增加抑石成分有关。     

枸杞对大鼠肾草酸钙结石生成的干预效果及其机制

目的 研究枸杞对大鼠肾草酸钙结石生成的干预效果及可能机制.方法 Wistar大鼠根据诱石方式(吸烟或饮用乙二醇或两者联合)、枸杞浸泡剂干预与否以及干预浓度(10%或25%)进行分组,设立空白对照组,每组10只.分组处理40 d后,收集24 h尿液并采集肾组织样本.检测尿液中钙、草酸及枸橼酸浓度;观察各组大鼠肾小管草酸钙结晶沉积情况并进行等级评分;检测肾组织脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性;TUNEL染色观察肾小管细胞凋亡并计算凋亡指数.结果 吸烟联合乙二醇诱石组尿钙浓度明显高于空白对照组(P<0.01);单纯饮用乙二醇和吸烟联合乙二醇诱石组大鼠肾小管草酸钙结晶评分、肾组织MDA含量及肾小管上皮细胞凋亡指数均高于空白对照组,而尿液中枸橼酸浓度和肾组织T-SOD活性均低于空白对照组.10%和25%枸杞浸泡剂干预可显著降低吸烟联合乙二醇诱石组大鼠尿钙浓度(P<0.01);同时使单纯饮用乙二醇和吸烟联合乙二醇诱石组大鼠肾小管草酸钙结晶评分、肾组织MDA含量及肾小管上皮细胞凋亡指数下降,而尿液中枸橼酸浓度和肾组织T-SOD活性升高.枸杞浸泡剂两种浓度间未见明显量效关系.结论 枸杞能有效抑制吸烟和(或)乙二醇诱导的大鼠肾草酸钙结石的生成,其机制可能与降低肾组织内自由基水平,抑制肾小管上皮细胞凋亡,以及减少尿液中促石成分而增加抑石成分有关.     

葡萄球菌血浆凝固酶试验方法的探讨

目的 解决葡萄球菌凝固酶试验假阳性的问题，提高其检测的敏感性和特异性。方法 以试管法为金标准，对玻片法进行不同血浆稀释度试验和方法的评价。结果 检测８５株葡萄球菌凝固酶。其中检出金黄色葡萄球菌１９株，溶血葡萄球菌４０株，表皮葡萄球菌１４株，其它葡萄球菌１２株，对于玻片法不同的血浆稀释度，检出的诊断敏感性和特异性各有不同。结论 玻片法血浆浓度是否合适直接影响血浆凝固酶试验的诊断效率。通过ＲＯＳＥ曲线     

基于Westgard西格玛规则的临床生化项目性能改进方法研究

目的:应用Westgard西格玛规则优化实验室室内质控策略,依据QGI分析生化项目性能不佳原因,提出改进方向以提高临床生化检测项目的性能。方法:收集本实验室室间质量评价报告及室内质控数据,估算偏倚（Bias）、变异系数（CV）,计算每个项目西格玛度量值（σ）及质量目标指数(QGI),结合Westgard西格玛规则,确定合理的个性化质控策略。对于性能欠佳的项目,依据QGI明确项目性能不佳的原因,确定改进方向。结果:低浓度水平项目中谷草转氨酶（AST）、肌酸激酶（CK）、α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）、总胆固醇（CHOL）、淀粉酶（Amy）（σ≥6）可达世界一流,乳酸脱氢酶（LDH）、甘油三酯（TG）、钠（Na）、氯（Cl）、血糖（GLU）、尿酸（UA）、镁（Mg）（4≤σ<6）可以达标,尿素（Urea）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、γ-谷氨酰基转移酶（GGT）、碱性磷酸酶（ALP）（σ﹤3）需查找原因立即纠正;高浓度水平项目中肌酐（Cr）、尿酸（UA）、谷丙转氨酶（ALT）、AST、CK、LDH、HBDH、磷（P）、CHOL、TG、Mg、Amy（σ≥6）可达世界一流,钾（K）、ALP、GLU（4≤σ<6）可以达标,TP、ALB、GGT（σ﹤3）需立即纠正。QGI分析显示3个项目需提高准确度,7个项目需提高精密度,2个项目准确度和精密度均需提高。改进后,6个项目提高至性能状态良好的水平,检测项目的σ值显著提高,差异具有统计学意义（t=5.42,P﹤0.05）。结论:联合应用Westgard西格玛规则及QGI分析,可有效提高临床生化检测项目的性能,指导检验质量持续改进。     

HPLC法测定氨茶碱氯化钠注射液中无水茶碱的含量

目的采用HPLC法测定氨茶碱氯化钠注射液中无水茶碱的含量。方法 Waters C18,流动相:乙腈-体积分数为0.1%磷酸水溶液(20∶80),流速为1.0mL/min,检测波长275nm。结果线性范围5.1～40.9mg/L,r=0.999 9,平均回收率99.06%(n=6),RSD=0.28%(n=6)。结论本法操作简便、方法准确、重现性好,可用于氨茶碱氯化钠注射液的质量控制。     

应用六西格玛质量标准评价电化学发光系统性能和设计质量控制方案

目的应用六西格玛(6σ)质量管理方法对Roche Cobas E601电化学发光免疫分析系统检测项目的性能进行量化,并设计各项目的质量控制方案,指导质量持续改进。方法根据σ=[允许总误差(TEa)-偏倚(Bias)]/变异系数(CV),计算14个检测项目的σ水平,评价各项目的分析性能。其中TEa以卫生部临床检验中心(NCCL)室间质量评价的评价标准,Bias以本室参加NCCL室间质量评价的平均偏倚计算所得,本室室内质量控制日间不精密度(CV%)反映不精密度。根据Westgard等对σ值的说明,制定个体化的室内质量控制方案;同时计算各项目的质量目标指数(QGI),对于性能未达到6σ的项目,查找导致性能不佳的主要原因,并确立性能改进的方案。结果 14个检测项目的总性能σ水平为3.80⁹.19,平均σ=6.20,σ≥6、5、4、3的分别占42.9%、21.4%、28.6%、7.1%;分析性能未达到6σ的项目中,75%需要优先改进精密度。结论 6σ质量标准能对电化学发光免疫分析系统的性能作出全面的评价,对设计个体化的质量控制方案和指导质量持续改进具有重要意义。