Krüppel 样因子4 在神经母细胞瘤中的表达及其与细胞 增殖和侵袭的关系

目的观察Krüppel样因子4(KLF4)在神经母细胞瘤中的表达及其对神经母细胞瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法RT-PCR和免疫组织化学法检测神经母细胞瘤组织及癌旁组织中KLF4的表达。采用电穿孔转染法将KLF4 siRNA转入神经母细胞瘤SK-N-MC细胞中,MTT检测KLF4对神经母细胞瘤SK-N-MC细胞增殖的影响,Boyden小室检测KLF4对神经母细胞瘤SK-N-MC细胞侵袭的影响。结果与癌旁组织相比,神经母细胞瘤组织中KLF4表达水平显著降低,并随病理分期的升高而降低(P<0.05)。转染KLF4 siRNA可显著下调神经母细胞瘤SK-N-MC细胞中KLF4的表达,而KLF4表达下调可显著促进SK-N-MC细胞的增殖和迁移(P<0.01)。结论KLF4可抑制神经母细胞瘤细胞的增殖和侵袭,KLF4低表达可能与神经母细胞瘤的发生和发展密切相关。     

转录调控因子八聚体4与消化系统肿瘤的研究进展

恶性肿瘤的发生是多种内外因素相互作用的共同结果,其不仅涉及基因遗传因素,而且还与人们的生活习惯、生存环境及饮食方式等有关。尽管目前对恶性肿瘤采用了综合治疗的方式,在一定程度缓解了病情的发展,但是,从长远来看,患者长期生存率及预后仍然不理想,不是出现癌细胞的转移就是表现为对化疗药物的不敏感或抵抗,资料显示,这可能与肿瘤干细胞的存在有关[1]。肿瘤干细胞是指肿瘤中具有自我更新能力并能产生异质性肿瘤细胞     

卵巢肿瘤干细胞中趋化因子的表达与细胞侵袭转移能力的关系

目的探讨卵巢肿瘤干细胞中趋化因子的表达与细胞侵袭转移能力的关系,为卵巢肿瘤的治疗提供新的研究思路和药物作用靶点。方法采用流式细胞术与RT-PCR方法检测卵巢肿瘤干细胞系CAOV-3中CXCR4的表达,通过体外微孔隔离室（Transwell）检测CXCR4对CAOV-3细胞侵袭转移能力的影响。结果 CXCR4在CAOV-3中细胞呈阳性表达,CXCL12可促进CAOV-3细胞的迁移,CXCR4的封闭能抑制CXCL12对CAOV-3迁移的促进作用。结论 CXCL12-CXCR4相互作用可促进卵巢肿瘤干细胞侵袭转移,在卵巢肿瘤的生长和侵袭转移过程中起着重要作用。     

CXCR4在神经母细胞瘤细胞SK-N-SH上的表达及其对化疗敏感性研究

目的：探讨CXCR4在神经母细胞瘤细胞SK-N-SH表面的表达及其对化疗药物环磷酰胺（CTX）、吡柔比星（THP）的敏感性。方法：体外培养SK-N-SH神经母细胞瘤细胞,流式细胞仪测定CXCR4在其表面的表达。通过CH50试验明确化疗药物CTX、THP对SK-N-SH细胞的效应剂量。最后通过Real-time PCR及流式细胞术在基因及蛋白水平检测化疗药物对SK-N-SH细胞中CXCR4表达的变化。结果：FACS检测结果表明CXCR4分子在SK-N-SH肿瘤细胞中高表达,但化疗药物不能降低其在蛋白水平的表达。Real-time PCR结果显示化疗药物也不影响CXCR4在mRNA水平的表达。结论：与我们前期报道化疗药物能影响神经母细胞瘤细胞LA-N-5上CXCR4的表达不同,CTX、THP不能显著降低转移相关趋化因子受体CXCR4在神经母细胞瘤细胞SK-N-SH表面的表达,提示神经母细胞瘤来源不同,其对化疗药物的敏感性不同。     

肌动蛋白解聚因子与细胞伪足及肿瘤侵袭转移的关系

恶性肿瘤的特征之一就是侵袭转移。肿瘤侵袭转移是一个多因素、多基因共同参与的复杂过程。很多研究证实,在肿瘤细胞侵袭转移的早期都会形成各种伪足（如丝状伪足、片状伪足、侵袭性伪足、足体等）,其中侵袭性伪足备受关注。伪足的形成依赖于肌动蛋白聚合与解聚．而肌动蛋白聚合与解聚受肌动蛋白解聚因子（actindepolymerizingfactor,ADF）／cofilin的精细调控。     

T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1在子宫颈癌组织中表达及意义

目的 探讨T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)在子宫颈癌组织中表达及意义.方法 留取子宫颈癌组织84例,宫颈上皮内瘤变(CIN)组织56例,留取子宫良性病变患者正常宫颈组织43例,利用实时荧光定量PCR技术检测不同组织中Ti-am1基因表达,利用免疫组织化学法检测不同组织中Tiam1蛋白表达.结果 子宫颈癌组织中Tiam1 mRNA相对表达量和蛋白阳性表达率[(2.05±0.17)％和82.1％]均高于CIN组织[(1.74±0.24)％和46.4％]和正常宫颈组织[(1.27±0.16)％和14.0％],且CIN组织高于正常宫颈组织(P<0.001),CINⅠ组织中Tiam1 mRNA相对表达量(1.54±0.19)显著低于CINⅡ～Ⅲ组织(1.81±0.23),差异有统计学意义(t=22.186,P=0.016),即子宫颈癌组织>CINⅡ～Ⅲ组织>CINⅠ组织>正常宫颈组织;子宫颈癌组织中Tiam1 mRNA相对表达量和蛋白阳性表达率均与临床分期、病理分级、浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析结果显示,高表达组患者生存时间44.13个月,低表达组患者生存时间61.00个月,Tiam1蛋白阳性表达患者生存时间34.67个月,阴性表达患者生存时间63.76个月,Log-Rank检验显示均差异有统计学意义(均P<0.05);Cox比例风险回归模型分析结果显示,临床分期、淋巴结转移和Tiam1表达是患者预后的影响因素(均P<0.05).结论 Tiam1基因和蛋白在子宫颈癌组织中呈高表达,且与患者预后密切相关,有望成为预测患者预后的有效分子指标.     

无POU域八聚体结合蛋白基因的克隆及其在Hepa 1-6细胞内的表达

目的 构建小鼠无POU域八聚体结合蛋白(non-POU-domain-containing,octamer binding protein,NonO)真核表达载体并在小鼠Hepa 1-6肝癌细胞内表达,观察NonO胞内表达、定位及脂多糖(LPS)对其定位的影响.方法 提取小鼠肝组织总RNA,RT-PCR扩增小鼠NonO基因的蛋白编码序列.采用基因重组技术将其亚克隆至pcDNA3-HA真核表达载体中,将该载体瞬时转染Hepa 1-6细胞,通过细胞免疫荧光方法观察NonO的胞内表达及LPS对其定位的影响.结果 酶切和DNA测序证明所构建质粒正确;细胞免疫荧光可见NonO在Hepa 1-6细胞内表达、分布于细胞核,LPS刺激后NonO分布无明显变化.结论 成功构建NonO真核表达载体,为研究NonO在基因表达调控中作用及其生物功能提供了重要载体.进一步证实NonO为定位于细胞核的核蛋白.     

转录因子Oct-4和端粒酶在人胚胎生殖细胞的表达

目的 体外培养人胚胎生殖细胞(EGC),通过检测培养的细胞中转录因子Oct-4、端粒酶的表达,鉴定EGC.方法 取5～10周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜,进行组织块体外培养,采用免疫细胞化学检测Oct-4、端粒酶表达.结果 组织块体外培养得到的细胞,经免疫细胞化学法显示的单个细胞或细胞集落,均阳性表达转录因子Oct-4、端粒酶.结论 组织块体外培养所获得细胞来源于原始生殖细胞(PGCs),为未分化的EGC.     

胃癌中Kriilppel样核转录因子-4的表达与核转录因子特异性蛋白-1和Notch跨膜受体-1表达的关系及意义

目的研究胃癌组织中Kr／ilppel样核转录因子-4（KLF4）和核转录因子特异性蛋白-1（Spl）、Notch跨膜受体-1（Notchl）的表达,探讨KLF4和Spl、Notchl在胃癌组织中表达的相关关系及三者与胃癌临床病理的关系。方法采用免疫组织化学染色法,分别对76例胃癌手术标本及30名同期收集的正常胃组织标本中Spl、Notchl和KLF4进行蛋白检测,分析三者的表达水平与临床病理的关系及KLF4的表达与Spl、Notchl表达的关系。结果正常胃组织标本中可见KLF4蛋白强阳性表达率为77％,在胃癌组织中表达较弱或表达缺失;Spl在胃癌组织中阳性表达率为63％,正常组13％;Notchl在胃癌组织中阳性表达为66％,明显高于正常胃组织的23％,且三者表达与胃癌分化程度、胃癌分期及淋巴结转移密切相关（P＜0．05）。KLF4和Notchl在胃癌中表达呈负相关（r=-0．629,P〈0．05）,KLF4和Spl在胃癌组织中表达呈负相关（r=-0．566,P〈0．05）。结论KLF4和Spl、Notchl在胃癌组织中表达失衡可能对胃癌的发生发展起重要作用,三者可能成为胃癌预后的判断指标及潜在的治疗靶点．     

骨桥蛋白表达与肝癌侵袭转移关系的研究

目的 探讨骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)表达与肝癌侵袭转移的关系,证实OPN的表达上调与肝癌细胞株的转移潜能呈正相关,为今后OPN靶向的小干扰RNA与阳离子脂质体结合构筑"基因导弹"对肝癌侵袭转移指标的影响做好进一步研究准备.方法应用PCR产物半定量分析方法检测经过培养的正常人肝细胞(L02)及不同转移潜能...     

DLL4在结直肠癌中的表达及其与浸润转移的关系

目的检测结直肠癌组织中DLL4的表达,并探讨其与结直肠癌发生及浸润转移的关系。方法应用免疫组化EnVision法检测70例结直肠癌组织及其相应的40例癌旁非典型增生组织和20例正常结直肠黏膜组织中DLL4的表达。结果结直肠癌组织中DLL4的阳性表达率高于癌旁非典型增生组织和正常结直肠黏膜组织（P〈0.05）;淋巴结转移组结直肠癌组织中DLL4的阳性表达率高于无淋巴结转移组（P〈0.05）;浸润至浆膜外结直肠癌组织中DLL4的阳性表达率高于浸润至浅肌层及深肌层者（P〈0.05）。结论 DLL4过度表达可能参与结直肠癌的发生及浸润转移过程。     

子宫内膜癌组织中COX-2的表达与细胞增殖的关系

目的探讨子宫内膜癌组织中COX-2表达的上调与肿瘤细胞增殖的关系。方法分析60例子宫内膜癌患者,应用蛋白印迹法分别测定子宫内膜癌组织中COX-2、VEGF的蛋白表达水平,应用流式细胞技术分析肿瘤细胞凋亡、增殖情况。其中无肌层浸润组中30例子宫内膜癌病例均为早期无肌层侵袭和淋巴转移者;肌层浸润组中30例子宫内膜癌病例均有深肌层侵袭和(或)伴有淋巴转移者。对照组入选病例均无子宫内膜病变。结果①研究组1和2中COX-2、VEGF蛋白表达水平均高于对照组,且有统计学意义(P<0.05);②研究组1和2之间COX-2、VEGF的蛋白表达水平,且有显著统计学意义(P<0.05);③研究组1和2中肿瘤组织PI指数均高于对照组,且有统计学意义。结论子宫内膜癌组织中COX-2的上调促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,促进新生血管和淋巴管生成,从而影响子宫内膜癌肌层浸润和淋巴转移。     

microRNA-515-5p调控c-MYC-p53信号轴对神经母细胞瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响

[摘要]目的：探讨microRNA-515-5p（miR-515-5p）对神经母细胞瘤（NB）SK-N-BE（2）和SK-N-AS细胞增殖、侵袭、迁移的影响及分子机制。方法：采用生物信息学技术结合多种软件预测方法,检测miR-515-5p在NB细胞中的表达。在NB细胞中瞬时转染miR-515-5p mimics,应用CCK8法和克隆形成实验、Transwell侵袭小室实验和体外划痕实验检测miR-515-5p对NB细胞转染后的增殖、侵袭和迁移的影响。采用Western免疫印迹（WesternBlot）检测miR-515-5p对c-MYC-p53信号轴的调控机制。结果：与对照组比较,转染miR-515-5p mimics的细胞集落平均形成率降低,细胞活性下降,且细胞侵袭和迁移能力降低（P<0.05）。WesternBlot检测结果显示miR-515-5p抑制c-MYC蛋白表达,但可促进P-p53活化（P<0.05）,对p53的表达无影响。结论：miR-515-5p通过调控c-MYC-p53信号轴抑制NB细胞的增殖、侵袭和迁移能力,可能作为NB分子治疗的潜在靶点。     

VEGF-C及其受体Flt-4在人宫颈癌组织中的表达及与淋巴结转移的关系

目的 探讨血管内皮生长因子C(VEGF-C)及其受体Flt-4在人宫颈癌组织中的表达及其与淋巴结转移等临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化S-P法检测60例宫颈癌原发灶组织、10例癌旁组织、8例伴有宫颈癌转移的淋巴结组织中VEGF-C、Flt-4的表达,并将结果与宫颈癌的临床病理特征进行分析.结果 VEGF-C和Flt-4在转移的淋巴结癌细胞中、宫颈癌和癌旁组织中的表达各组间差异有显著性意义(均P＜0.01);宫颈癌中Flt-4阳性微脉管数在淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组,差异有非常显著性意义(P＜0.01).结论 在宫颈癌组织中VEGF-C水平上调,是由宫颈癌细胞分泌,并通过自分泌方式作用于细胞膜上的Flt-4受体,与宫颈癌的发生有一定关系;VEGF-C与宫颈癌中淋巴管的生成及淋巴结转移密切相关.     

干细胞标记物OCT4在膀胱癌中的表达及其临床意义

目的：探讨干细胞关键转录因子OCT4在膀胱癌患者组织中的表达与临床病理因素及预后的相关性。方法选取河北大学附属医院病理科收集的73例经泌尿外科手术切除的膀胱癌组织(膀胱癌组)及30例癌旁组织(癌旁组)作为标本进行免疫组化染色观察,对比两种OCT4蛋白的表达程度,并分析其与患者的临床病理特征及远期预后的关系。结果膀胱癌组织中OCT4蛋白的阳性表达率(71.23%)显著高于癌旁组织(10.00%)(P<0．05);膀胱癌组织中OCT4蛋白的阳性表达与膀胱癌分化程度、发生血管淋巴结转移、浸润深度有关(P<0．05),与年龄、性别、病理分期无关(P>0．05);膀胱癌组织中OCT4蛋白的阳性表达3年生存率显著低于阴性表达(P<0．05),3年生存中位时间显著短于阴性表达(P<0．05)。结论 OCT4表达与膀胱癌转移有关,对远期预后具有不良影响。     

环状RNA circNHSL1在小儿神经母细胞瘤中的表达及化疗耐受中的作用

目的：探讨环状RNA circNHSL1在小儿神经母细胞瘤中的表达及化疗耐受中的作用。方法：收集2016-2019年于我院就诊并接受手术联合阿霉素和顺铂化疗的神经母细胞瘤患儿60例,其中化疗敏感患儿35例,化疗耐受患儿25例。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）检测circNHSL1在神经母细胞瘤和化疗耐受患儿中的表达差异。构建人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的阿霉素耐药株,检测阿霉素耐药细胞的circNHSL1表达量。通过沉默circNHSL1,采用细胞计数试剂盒（CCK-8）和流式细胞仪观察细胞增殖和凋亡情况。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和蛋白免疫印记法检测可能的转化生长因子-β（TGF-β）/Smad信号通路改变,并给予人重组TGF-β1进行回复实验,观察其在circNHSL1沉默细胞中的作用。结果：环状RNA circNHSL1在神经母细胞瘤中的表达高于正常组织（P<0.01）,在化疗耐受患儿和耐药细胞株中的表达高于化疗敏感患儿（P<0.05）。在化疗耐受的细胞中,沉默circNHSL1细胞增殖活性降低,而凋亡率升高（P<0.01）,TGFβ1分泌水平和表达量及其下游p-Smad2、p-Smad3表达量均降低（P<0.01）。再次给予人重组TGF-β1处理circNHSL1沉默的耐药细胞后,细胞增殖活性升高,而凋亡率降低,恢复耐药特性。结论：环状RNA circNHSL1在小儿神经母细胞瘤和化疗耐受组织中存在高表达现象,可通过激活TGF-β/Smad信号通路参与化疗耐受作用。     

鼻咽癌中肿瘤转移相关基因Ezrin的表达及临床意义

目的:研究肿瘤转移相关基因Ezrin在鼻咽癌组织中的表达并探讨其临床意义.方法:取38例鼻咽癌患者癌组织及20例鼻咽黏膜慢性炎症患者的鼻咽组织行免疫组织化学二步法检测Ezrin蛋白的表达,比较它们的表达结果;并分析鼻咽癌组织Ezrin的表达与患者的临床资料,如性别、年龄、分期、复发、淋巴结转移等的关系.结果:鼻咽癌组织和癌旁黏膜的Ezrin蛋白表达与鼻咽黏膜慢性炎组织相比差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),但鼻咽癌组织和其癌旁黏膜Ezrin表达差异无统计学意义(P＞0.05);speanTIan等级相关分析显示,癌组织中Ezrin蛋白表达率随着患者年龄增大而增加(P＜0.05),而与患者性别、临床分期、复发、淋巴结转移无显著相关(均P＞0.05);线性回归分析显示,Ezrin对患者的生存时间有显著影响(P＝0.01).结论:Ezrin对鼻咽癌患者的预后有判断价值.     

P-选择素在支气管肺癌中的表达及其与肿瘤转移关系的研究

目的研究P-选择素在支气管肺癌中的表达及其与肿瘤转移的关系。方法本文用免疫组化技术对20例癌旁肺组织、76例肺癌组织中P-选择素进行了检测。结果（1）P-选择素与肺癌组织学类型无关。（2）P-选择素在癌旁组织中不表达。（3）P-选择素与肺癌组织学分级无关。（4）P-选择素在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期肺癌中阳性表达率分别为23.81%（5/21）、35.29%（6/17）、71.43%（15/21）、82.35%（14/17）,其中Ⅰ、Ⅱ期表达率显著低于Ⅲ、Ⅳ期（P〈0.05）。（5）在肺癌淋巴结转移组和无转移组P-选择素表达率分别为62.00%（31/50）、34.62%（9/26）,两组之间有显著性差异（P〈0.05）。（6）P-选择素在肿瘤间质血管内皮的阳性表达主要位于微动脉、微静脉、小动脉和小静脉,毛细血管未见其表达。结论P-选择素高表达提示高浸润转移风险。