钙拮抗剂TMB-8抑制BHQ,NE和KCl引起的培养乳牛基底动脉单个平滑肌细胞内游离钙的升高

用AR CM MIC阳离子测定系统,测量单个细胞内游离钙浓度([Ca²⁺]i),研究8-(N,N-二乙胺)-n-辛基 3,4,5-三甲氧基苯甲酸酯(TMB-8)对培养乳牛基底动脉平滑肌[Ca²⁺]i的作用。在细胞外钙浓度为1.3mmol·L^-1时,TMB-8(30μmol·L^-1)可明显抑制BHQ,NE及KCl引起[Ca²⁺]i的升高。在细胞外钙为零+EGTA 0.1mmol·L^-1时,TMB-8(10,30及100μmol·L^-1)可浓度依赖性地降低静息[Ca²⁺]i,TMB-8(30μmol·L^-1)可几乎完全阻断BHQ及NE引起[Ca²⁺]i的增加。研究表明TMB-8降低培养乳牛基底动脉平滑肌[Ca²⁺]i的机制,主要是抑制肌浆网Ca²⁺的释放,或增加肌浆网对Ca²⁺的摄入,并由此间接地抑制细胞外钙的内流。     

钙拮抗剂TMB-8对培养牛大脑中动脉内皮细胞[Ca2+]i和一氧化氮释放的影响

目的旨在观察ＴＭＢ８对血管内皮细胞［Ｃａ２＋］ｉ水平和ＮＯ释放的影响，探讨扩张脑血管的机制。用ＡＲＣＭＭＩＣ阳离子测定系统，测量单个细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ），用血红蛋白法测量一氧化氮（ＮＯ）的释放。结果表明，在细胞外钙浓度为１３ｍｍｏｌ·Ｌ－１时，ＴＭＢ８１２５及２５０μｍｏｌ·Ｌ－１对静息［Ｃａ２＋］ｉ和甲基血红蛋白ΔＥ无明显影响，而５０及１００μｍｏｌ·Ｌ－１时可升高静息［Ｃａ２＋］ｉ和甲基血红蛋白ΔＥ。表明ＴＭＢ８５０及１００μｍｏｌ·Ｌ－１升高脑血管内皮［Ｃａ２＋］ｉ，激活ＮＯ合酶，促进ＮＯ合成和释放，这可能是其扩张脑血管的重要机制之一。     

钙拮抗剂TMB-8对培养牛大脑中动脉内皮细胞[Ca2+]i和一氧化氮释放的影响

目的旨在观察TMB-8对血管内皮细胞[Ca²⁺]i水平和NO释放的影响,探讨扩张脑血管的机制。用AR-CM-MIC阳离子测定系统,测量单个细胞内游离钙浓度([Ca²⁺]i),用血红蛋白法测量一氧化氮(NO)的释放。结果表明,在细胞外钙浓度为1.3mmol·L^-1时,TMB-8 12.5及25.0μmol·L^-1对静息[Ca²⁺]i和甲基血红蛋白ΔE无明显影响,而50及100μmol·L^-1时可升高静息[Ca²⁺]i和甲基血红蛋白ΔE。表明TMB-850及100μmol·L^-1升高脑血管内皮[Ca²⁺]i,激活NO合酶,促进NO合成和释放,这可能是其扩张脑血管的重要机制之一。     

TMB-8抑制5-HT和KCl引起大鼠脑血流量减少

目的研究TMB-8对5-HT和KCl引起的大鼠脑血流量(CBF)减少的作用。方法用激光多普勒血流仪测量大鼠CBF,在人工脑脊液灌流液中加入TMB-8和工具药进行干预。结果12.5, 25和50 μmol·L^-1 TMB-8对大鼠CBF无明显影响,TMB-8可抑制5-HT引起的大鼠CBF减少。在1 μmol·L^-1 5-HT引起大鼠CBF持续下降的状态下,TMB-8可浓度依赖的增加大鼠CBF。TMB-8也可抑制KCl引起的大鼠CBF减少。在20 mmol·L^-1 KCl引起大鼠CBF持续下降的状态下,TMB-8可浓度依赖的增加大鼠CBF。结论TMB-8可抑制5-HT和KCl引起的大鼠CBF减少,也可浓度依赖的增加被5-HT和KCl所减少的大鼠CBF,改善大鼠缺血区脑血供。     

TMB-8对去甲肾上腺素和BHQ引起新生大鼠单个脑细胞内游离钙增高的影响

应用AR-CM-MIC阳离子测定系统,研究TMB-8对体外新生SD大鼠单个脑细胞内游离钙的抑制作用及其机制。结果表明,在无细胞外钙情况下,静息[Ca²⁺]i为79±13nmol·L^-1。TMB-810,30μmol·L^-1能明显降低静息[Ca²⁺]i。TMB-8100μmol·L^-1对高钾去极化引起的[Ca²⁺]i显著增高无明显影响。在细胞外钙为1.3mmol·L^-1时,去甲肾上腺素诱导的细胞内[Ca²⁺]i升高可部分被TMB-8抑制;TMB-8(30μmol·L^-1)对BHQ引起的[Ca²⁺]i的升高无明显抑制作用。而当细胞外液[Ca²⁺]i为0时,TMB-8几乎完全抑制了去甲肾上腺素和BHQ的作用。提示TMB-8降低脑细胞内游离钙的作用机制是通过促使细胞内钙进入肌浆网以抑制内钙的释放,并通过饱和肌浆网内Ca²⁺间接地阻滞细胞膜钙通道。     

TMB—8抑制组胺,5—羟色胺和谷氨酸引起的培养乳牛基底动脉平滑肌细 …

AIM: To study the effects of 8-(N,N-diethylamino)-n-octyl-3,4,5- trimethoxybenzoate (TMB-8) on intracellular free calcium ([Ca2+]i) in cultured calf basilar artery smooth muscle cells. METHODS: [Ca2+]i was examined by a system of measurement of AR-CM-MIC, using Fura 2-AM as a fluorescent indicator. RESULTS: In the presence of extracellular Ca2+ 1.3 mmol.L-1, histamine (His), serotonin (5-HT), and sodium glutamate (Glu) markedly increased the [Ca2+]i which was attenuated by TMB-8. In Ca2+ free Hanks' solution containing egtazic acid 0.1 mmol.L-1, TMB-8 not only reduced the resting [Ca2+]i, but also inhibited the elevation of [Ca2+]i evoked by His and 5-HT. CONCLUSION: TMB-8 reduced the resting [Ca2+]i and attenuated His-, 5-HT-, and Glu-induced increases of [Ca2+]i in basilar artery smooth muscle cells.     

前胡丙素对Ang II致离体血管平滑肌细胞肥厚及胞内钙、NO含量和信号转导的影响

目的前胡丙素(Pra-C)对血管紧张素II(Ang II)致离体培养大鼠血管平滑肌细胞(SMCs)肥厚模型胞内游离钙浓度、NO含量和信号转导的影响。方法以Ang II刺激SMCs形成肥厚模型,用倒置显微镜测定SMCs面积;用Fura-2/AM测定单细胞内［Ca²⁺］i,Griess法测定NO含量;在PMA和ST(PKC激动剂及抑制剂)、PTX(Gi蛋白敏感毒素)作用下观察Pra-C对KCl和NE所致胞内［Ca²⁺］i浓度变化的影响。结果Pra-C组SMCs细胞面积较肥厚组减小39.01%,并接近正常细胞水平;NO含量明显增加;胞内［Ca²⁺］i对KCl和NE激动的反应明显低于肥厚组。PMA使肥厚SMCs［Ca²⁺］i升高,而ST及PTX则使之降低,Pra-C均使之恢复正常。结论Pra-C抑制Ang II致体外培养细胞SMCs肥厚,改善肥厚细胞因PKC和Gi蛋白的信号转导改变所致的［Ca²⁺］i改变。     

THE EFFECT OF THE CALCIUM ION ANTAGONIST 8-(N,N-DIETHYLAMINO)-OCTYL-3,4,5-TRIMETHOXYBENZOATEON MALIGNANT HYPERPYREXIA-SUSCEPTIBLE PORCINE SKELETAL MUSCLE

In malignant hyperpyrexia susceptible (MHS) porcine skeletal muscle, a low concentration (100 mumol/l) of the calcium ion antagonist 8-(N,N-diethylamino)-octyl-3,4,5-trimethoxybenzoate (TMB-8) inhibited KCl-induced contractures, but potentiated contractures induced by halothane, caffeine and succinylcholine. Higher concentrations of TMB-8 (333 mumol/l to 1 mmol/l) contracted MHS muscle, but had little effect on muscle tension in control preparations. Treatments which inhibit excitation-contraction coupling abolished TMB-8-induced hyper-reactivity in MHS muscle. TMB-8 (50 mumol/l and 1 mmol/l) did not alter 45Ca2+ levels in actively loaded microsomal preparations from MHS swine. These results suggest that in malignant hyperpyrexia the primary abnormality occurs proximal to the release of calcium from the sarcoplasmic reticulum, probably at the level of excitation-contraction coupling.     

1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙胺基)丙烷盐酸盐对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及对PDGF-B,bFGF,c-sis,c-myc的影响

用氚胸腺嘧啶核苷（３ＨＴｄＲ）掺入法，电镜，免疫组化，原位杂交方法，在自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）观察了１（２，６二甲基苯氧基）２（３，４二甲氧基苯乙胺基）丙烷盐酸盐（ＤＤＰＨ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的作用及对生长因子ＰＤＧＦＢ，ｂＦＧＦ及其相关癌基因ｃｓｉｓ与ｃｍｙｃ表达的影响。结果发现：ＤＤＰＨ在降低ＳＨＲ血压同时，能减少肾动脉ＶＳＭＣ的线粒体，粗面内质网和３ＨＴｄＲ掺入量，并能逆转ＶＳＭＣ增殖时ＰＤＧＦＢ，ｂＦＧＦ抗原及ｃｓｉｓ与ｃｍｙｃｍＲＮＡ的表达增强。提示：ＤＤＰＨ能抑制ＳＨＲ的ＶＳＭＣ增殖，与生长因子及癌基因调控的分子生物学机制有关。