复方贞术调脂胶囊干预糖尿病肾病的网络药理学分析及实验验证研究＊

目的 通过网络药理学分析及实验验证初步探讨复方贞术调脂胶囊（Fufang Zhenzhu Tiaozhi Capsule， FTZ）干预糖尿病肾病（Diabetic Kidney Disease， DKD）的作用机制。方法 首先采用中药系统药理数据库和分析平台（TCMSP）、GeneCards、Comparative Toxicogenomics Database、STRING 11.0和DAVID 6.8数据库，综合分析FTZ在DKD中的潜在作用靶点；其次采用链脲佐菌素合并高脂饮食诱导的DKD模型小鼠为载体，通过检测空腹血糖、尿蛋白、肌酐、肾脏病理及潜在靶点的蛋白表达，初步验证FTZ改善DKD的作用机制。结果 生物信息学初步筛选出FTZ干预DKD的潜在靶点为STAT3、PI3K及AKT等。动物实验进一步发现FTZ能有效降低DKD小鼠空腹血糖（P<0.05）、尿蛋白（P<0.01）、肌酐（P<0.01），缓解肾脏病理损伤，下调肾脏组织中PI3K、p-AKT和STAT3的表达（P<0.05）。结论 FTZ改善DKD的机制可能与抑制PI3K/AKT及STAT3信号通路相关。本研究初步探讨了FTZ干预DKD的作用机制，为其临床防治DKD提供了实验基础和科学依据。     

基于UPLC-Q-TOF-MS结合网络药理学与实验验证探讨四君子汤治疗阿尔茨海默病的作用机制

采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)联用技术分析灌胃给药后四君子汤提取液在大鼠体内的入血成分,并结合网络药理学、分子对接和实验验证研究四君子汤治疗阿尔茨海默病的作用机制。根据一级质谱和二级质谱信息,结合文献和数据库数据,对四君子汤入血成分进行指认。基于这些成分结合PharmMapper、OMIM、DisGeNET、GeneCards和TTD数据库筛选四君子汤入血成分治疗阿尔茨海默病的潜在作用靶点,经网络药理学预测运用STRING数据库构建蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction, PPI)网络;通过DAVID数据库实现京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)信号通路和基因本体论(Gene Ontology, GO)功能富集分析;Cytoscape 3.9.0软件进行可视化分析,最后使用AutoDock Vina和PyMOL软件对相关入血成分与核心靶点进行分子对接。最后依据KEGG通路分析结果,选择PI3K/Akt信号通路进行动物实验验证。结果显示,...     

龙眼叶治疗2型糖尿病的网络药理学研究及实验验证

目的 基于网络药理学和分子对接的方法探讨龙眼叶治疗2型糖尿病（T2DM）的作用机制,并通过体外实验进行初步验证。方法 采用中药系统药理学分析平台（TCMSP）并结合化源网数据库和相关药理活性文献筛选出龙眼叶的活性成分;通过Swiss TargetPrediction网站在线分析筛选活性成分的靶点。利用OMIM、GeneCards、DrugBank三个数据库获取T2DM的相关靶点,进而利用韦恩（VENNY）2.1筛选出活性成分与T2DM的交集靶点;然后将其导入STRING数据库以进行蛋白质互作网络（PPI）网络构建;采用Cytoscape v3.8.0软件构建“中药-化学成分-关键靶基因-疾病”网络图;通过DAVID数据库对交集靶点进行GO注释和KEGG通路富集分析,GraphPad Prism 8.3软件将其可视化;运用SYBYL-X 2.0和Discovery Studio 4.5 软件对龙眼叶排名靠前的活性成分和关键靶点进行分子对接,验证其生物活性。验证实验以人肝癌细胞（HepG2）作为研究对象,高糖诱导胰岛素抵抗HepG2细胞模型,CCK8法检测细胞增殖抑制率,蛋白印迹（Western blot）检测磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K-AKT）信号通路相关蛋白的表达情况。结果 共筛选出龙眼叶有16个活性成分,活性成分和疾病的交集靶点共96个,网络拓扑分析筛选出关键靶点16个。生物学过程包括凋亡过程的负调控、细胞质膜、酶结合等。龙眼叶在改善T2DM主要作用于HIF-1信号通路、胰岛素抵抗信号通路、PI3K-AKT信号通路等。分子对接显示山柰酚和EGFR、槲皮素和PTGS2、木犀草素和PIK3R1有比较强的结合活性。细胞实验结果表明龙眼叶提取物可以上调IR模型HepG2细胞AKT-1、p-AKT-1、p-PI3Kp85蛋白表达。结论 龙眼叶抗T2DM的作用机制可能与PI3K-AKT、HIF-1、胰岛素抵抗等信号通路有关。     

基于网络药理学与动物实验验证探究防己茯苓汤治疗心肌纤维化作用机制

目的 基于网络药理学方法探讨防己茯苓汤治疗心肌纤维化（MF）的潜在靶点和作用机制,并进行动物实验验证。方法 通过TCMSP数据库检索并筛选防己茯苓汤药物活性成分,获取相应靶点,通过GeneCards、OMIM和DisGeNET数据库检索MF疾病靶点,二者取交集,获得防己茯苓汤治疗MF的潜在作用靶点,通过STRING数据库结合Cytoscape3.7.2软件构建蛋白相互作用网络,筛选核心靶点,使用DAVID数据库对核心靶点进行GO和KEGG通路富集分析。小鼠皮下注射异丙肾上腺素构建MF模型,予防己茯苓汤干预14 d,组织病理学方法观察心肌损伤和胶原沉积,ELISA检测血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）及肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β、IL-6、IL-10含量,RT-qPCR和免疫组化染色检测心肌组织PI3K/Akt/p65通路mRNA和蛋白表达,透射电镜观察心肌组织超微结构变化。结果 共筛选出防己茯苓汤活性成分127个及其治疗MF靶点200个,Kanzonol F、甘草宁O、光甘草定等为主要活性成分,PIK3CA、AKT1、EP300等为核心靶点,与MF密切相关的富集...     

基于网络药理学探究温补固肾方治疗糖尿病肾病的作用机制及实验验证

目的：基于网络药理学探讨温补固肾方（WBGSF）治疗糖尿病肾病（DN）的作用机制。方法：利用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）筛选WBGSF有效活性成分及潜在靶点,在Gene Card、OMIM和TTD数据库中寻找DN相关靶点基因,选取WBGSF靶点基因与DN相关靶点基因的共同靶点。通过Cytoscape3.5. 0软件构建“WBGSF活性成分-潜在靶点-DN”网络图。运用STRING数据库构建蛋白质互作（PPI）网络图。对潜在靶点基因进行基因本体（GO）富集分析和京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路分析。SD大鼠随机分为对照组（Control）、糖尿病肾病组（DN）和WBGSF低、中、高剂量组。采用链脲佐菌素腹腔注射构建DN模型大鼠。模型构建成功后WBGSF各剂量组大鼠分别给予0.92、1.84、3.68 g/kg WBGSF灌胃,每日1次,连续给药12周;Control组和DN组大鼠采用生理盐水灌胃,每日1次,连续给药12周。12周后检测各组大鼠血糖、尿素氮、肌酐、24 h尿蛋白和肾脏组织病理学变化、肾组织AGEs和RAGE含量以及RAGE蛋白表达。结果：数据库筛选得...     

基于网络药理学及药理实验验证探讨仙鹤草抗肝纤维化的作用机制

目的：探究仙鹤草抗肝纤维化的作用机制。方法：根据多种规则筛选仙鹤草化学成分,预测获得靶基因,与肝纤维化发病机制相关的靶点进行比对获得仙鹤草抗肝纤维化的可能作用靶点。通过生物学信息注释库DAVID对关联靶点进行基因本体（GO）富集分析和京都基因和基因组百科全书（KEGG）富集分析,采用Cytoscape构建仙鹤草化合物-靶点-信号通路相互作用网络图。进一步采用实验验证仙鹤草对大鼠肝星状细胞-T6（HSC-T6）肝纤维化指标α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、胶原1型α1（COL1A1）及蛋白激酶B（AKT）蛋白磷酸化的影响。结果：关键靶点主要为AKT1、STAT3、Caspase-3、Jun、ESR1等,主要参与调控肿瘤信号通路、PI3K/AKT信号通路、肿瘤蛋白聚糖、胰岛素抵抗和FoxO信号通路等。仙鹤草提取物可抑制HSC-T6中α-SMA、COL1A1蛋白的表达,升高AKT的磷酸化水平,验证了网络药理学分析的部分预测结果。结论：仙鹤草可通过作用于PI3K/AKT信号通路等发挥抗肝纤维化作用。     

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨中医药治疗糖尿病肾病的研究进展

糖尿病肾病(DN)作为糖尿病(DM)最为危重的普遍并发症之一,现已逐渐成为终末期肾病(ESRD)的主要原因。DN发生发展的发病机制是复杂多样的,可能与遗传、自噬、氧化应激、炎症反应等诸多因素有关。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB,又称Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路作为细胞内一条至关重要的通路,与DN的发病机制密切相关。基于当下中医药治疗DN的研究现状,笔者结合近几年来国内外的相关研究综述了PI3K/Akt/mTOR信号通路在DN中的作用机制及通过使用中医药抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路起到激活自噬、减少炎症反应及减弱氧化应激等作用,为中医药治疗DN的进一步研究提供新思路和新靶点。     

基于网络药理学的真武汤治疗糖尿病肾病的潜在机制探索

目的:运用网络药理学及生物信息学方法对真武汤治疗糖尿病肾病(DN)的潜在作用靶点进行研究,探索真武汤多成分-多靶点-多途径-多通路治疗DN的作用机制。方法:从中药系统药理学数据库(TCMSP)中筛选出真武汤中药物的活性成分,通过STITCH数据库预测作用靶点;同时应用GeneCards、OMIM、DisGeNET数据库筛选DN疾病相关靶点,并对潜在作用靶点进行映射。利用STRING数据库进行蛋白互作网络分析,使用Cytoscape构建蛋白相互作用网络,采用DAVID数据库进行GO分析和KEGG信号通路富集分析。结果:筛选出真武汤中活性成分59个,预测潜在靶点95个;其中与DN疾病相关靶点54个;信号通路66条。结论:真武汤治疗DN具有多成分、多靶点、多途径、多通路的作用特点;其潜在作用机制极大可能是通过调控DN疾病发生及发展中的肿瘤坏死因子信号通路、结节样受体信号通路、NF-κB信号通路等过程对其进行干预及治疗。     

基于网络药理学探讨肝豆扶木汤治疗肝豆状核变性肝纤维化的作用机制及实验验证

目的?基于网络药理学方法研究肝豆扶木汤（GDFMD）治疗肝豆状核变性肝纤维化（LF）的作用机制。方法?基于TCMSP数据库及Uniprot数据库筛选出GDFMD有效成分及靶点基因。通过GeneCards数据库及OMIM数据库筛选出LF的疾病靶点基因，并用Cytoscape软件构建“活性-成分-靶点”相互作用网络图。将有效成分靶标与疾病靶点上传到STRING数据库，构建蛋白互作网络图（PPI），使用R语言进行核心基因的筛选并对关键靶点进行基因本体（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。基于网络分析结果，选择PI3K/Akt信号通路进行动物实验验证。将20只肝豆状核变性LF模型TX小鼠随机分为模型组、GDFMD组，10只相同遗传背景的野生型小鼠作为对照组。GDFMD组按6.96 g生药/kg进行灌胃，模型组和对照组给予等容积生理盐水，每天1次，连续灌胃4周。观察肝脏组织病理学改变。采用ELISA法检测血清肝纤四项[透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原蛋白（PC-Ⅲ）、Ⅳ型胶原蛋白（C-Ⅳ）]、羟脯氨酸（Hyp）含量，采用qRT-PCR法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、1型胶原蛋白（Col-1）、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和B淋巴细胞瘤-2 （Bcl-2）mRNA的表达，采用Western Blot法检测肝组织α-SMA、Col-1、PI3K、Akt、Bax、Bcl-2蛋白表达。并通过TUNEL法检测肝细胞凋亡水平。结果? （1）预测得到GDFMD治疗肝豆状核变性LF的有效成分55个及共作有效靶点95个。有效成分中度值较高的为槲皮素（quercetin），β-谷甾醇（beta-sitosterol）及山柰酚（kaempferol），作用靶点中度值较高的为丝裂原激活蛋白激酶8（MAPK8），表皮生长因子受体（EGFR）与白介素6（IL-6）。PPI网络中核心基因为MAPK8及EGFR等； GO富集分析显示会影响基因的转录、核受体活性等；KEGG通路富集分析显示磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路、凋亡信号通路、低氧诱导因子-1信号通路为显著富集的通路。（2）动物实验表明，GDFMD组能改善肝豆状核变性肝损伤尤其是肝纤维化。与模型组比较，GDFMD组血清HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ、Hyp含量降低（P<0.05，P<0.01），α-SMA、Col-1 mRNA及蛋白表达降低（P<0.05，P<0.01）；PI3K、Akt mRNA及蛋白表达升高（P<0.01，P<0.05）；肝组织凋亡细胞数目降低（P<0.05），Bax mRNA和蛋白表达降低（P<0.05），Bcl-2 mRNA和蛋白表达升高（P<0.05）。结论?通过网络药理学的方法预测GDFMD防治肝纤维化的关键作用靶点及相关通路，其不仅具有抗肝纤维化的作用，尚有抗凋亡、抗炎、调节脂代谢等生物学功能。     

基于网络药理学和细胞实验探讨桂枝茯苓丸对卵巢癌的作用

目的 通过网络药理学和体外实验探索桂枝茯苓丸作用于卵巢癌的分子机制。方法 从公共数据库中获取桂枝茯苓丸的活性成分以及桂枝茯苓丸和卵巢癌的潜在靶点,然后构建蛋白-蛋白质相互作用(PPI)网络、活性成分-靶点网络及疾病-药物-活性成分-靶点网络,并通过DAVID数据库进行GO和KEGG富集分析,利用AutodockTools软件对核心活性成分和核心靶点进行分子对接。基于网络药理学结果,选择不同浓度桂枝茯苓丸含药血清干预SKOV3细胞,以流式细胞术检测细胞凋亡水平,通过蛋白免疫印迹法对PI3K/Akt通路及凋亡相关蛋白进行验证。结果 筛选得到桂枝茯苓丸476个与活性成分关联的靶点,117个与卵巢癌相关基因,其中有20个共同靶点,这些靶标与细胞凋亡、细胞增殖和分化、蛋白质密切相关,并可能通过癌症中的蛋白聚糖、癌症中的碳代谢、粘着斑、PI3K/Akt信号通路、ErbB信号通路等25个相关途径发挥作用。体外细胞实验证实,桂枝茯苓丸能以浓度和时间依赖性地抑制SKOV3细胞增殖,可以抑制PI3K/Akt通路从而促进SKOV3细胞凋亡。结论 桂枝茯苓丸可通过多成分、多靶点、多通路治疗卵巢癌,初步验证桂枝...     

基于网络药理学和细胞生物学研究黄芪治疗糖尿病肾病的作用机制

目的 运用网络药理学和细胞生物学验证探讨黄芪治疗糖尿病肾病的分子作用机制.方法 通过中药系统药理学数据库(TCMSP)筛选出黄芪有效成分;利用Drugbank数据库、GeneCards和OMIM数据库筛选黄芪有效成分和糖尿病肾病的相关靶点;应用String数据库绘制PPI网络;通过Cytoscape软件绘制黄芪-成分-...     

基于网络药理学探讨芪术颗粒治疗糖尿病肾病的作用机制

目的:运用网络药理学的方法,探索芪术颗粒治疗糖尿病肾病的作用机制。方法:采用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP),中医百科全书数据库(ETCM),以口服生物利用度和类药性为限定条件筛选出芪术颗粒中各药的化学成分及其蛋白靶点,并通过UniProt数据库将蛋白靶点规范为相应的基因名称;通过在线《人类孟德尔遗传》数据库(OMIM),疾病-基因数据库(DisGeNET),治疗靶标数据库(TTD),ETCM数据库检索糖尿病肾病的相关基因;两者取交集之后,通过蛋白质相互作用数据库(STRING)构建蛋白互作网络,使用Cytoscape分析网络的核心靶点,使用KOBAS 3.0数据库对相关靶点进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:从芪术颗粒中共得到化学成分93个,涉及到254个靶点,与糖尿病肾病相关的基因607个,取交集后确定了76个芪术颗粒治疗糖尿病肾病的靶标,包括蛋白激酶B1(Akt1),血管内皮生长因子α(VEGFA),白细胞介素(IL)-6,肿瘤坏死因子(TNF),丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1),基质金属蛋白酶(MMP)-9等核心靶点,经过GO分析和KEGG分析,芪术颗粒可以影响细胞对氮化合物的反应、调节活性氧代谢过程等生物过程,调控糖尿病并发症中的晚期糖基化终产物(AGE)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)信号通路,流体剪切应力和动脉粥样硬化,IL-17信号通路,缺氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路,TNF信号通路等通路。结论:芪术颗粒对糖尿病肾病的治疗作用可能是影响Akt1,VEGFA,IL-6,TNF,MAPK1,MMP-9等靶点,调控糖尿病并发症中的AGE/RAGE信号通路、流体剪切应力和动脉粥样硬化,IL-17信号通路,HIF-1信号通路,TNF信号通路等通路发挥的,可以为进一步的基础实验研究提供理论参考。     

基于网络药理学探讨雷公藤多苷片治疗支气管哮喘的作用机制

目的 基于网络药理学探讨雷公藤多苷片治疗支气管哮喘的作用机制。方法 通过文献检索雷公藤多苷片的主要化学成分,采用TCMSP、SwissTargetPrediction数据库查找其对应靶点,在OMIM、DrugBank、GeneCards、TTD数据库中得到哮喘相关靶点,预测雷公藤多苷片作用于哮喘的潜在靶点,构建蛋白互作网络及“化合物-靶点”网络,对核心靶点进行GO和KEGG分析,最后对预测靶标与其对应的成分进行分子对接验证。结果 获得雷公藤多苷片主要化学成分22种,对应靶点691个,筛选出与哮喘相关靶点379个,包括PIK3CA、APP、FPR2、CASR等9个关键靶点。KEGG分析得到与哮喘相关性较大的通路有6条,包括PI3K/Akt、MAKP、Ras、cAMP、Calcium和Chemokine信号通路。结论 雷公藤多苷片可能通过PIK3CA、APP、FPR2等关键靶点干预PI3K/Akt、MAKP等信号通路对哮喘气道炎症反应和气道重塑等过程产生影响。     

基于网络药理学探讨五苓散治疗糖尿病肾病的作用机制

目的：根据网络药理学方法对五苓散治疗糖尿病肾病(DKD)的作用机制进行研究探讨。方法：利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)对五苓散中有效成分进行筛选及靶点预测,检索GeneCards、CTD数据库筛选DKD疾病靶点,利用韦恩图在线平台筛选五苓散治疗DKD交集靶点,借助网络拓扑分析插件CytoNCA筛选五苓散治疗DKD核心靶点,使用Cytoscape 3.7.1建立化合物-疾病-靶点调控网络,基于DAVID数据库对核心靶点进行GO功能富集和KEGG通路富集分析。结果：基于TCMSP得到五苓散的27个有效成分和62个潜在靶点,筛选获得与DKD疾病发生、发展相关的靶点21 153个,借助网络拓扑分析插件CytoNCA筛选五苓散治疗DKD核心靶点16个,GO功能富集分析得到条目99个,其中生物过程条目64个、分子功能条目24个、细胞组成条目11个,主要包括过脂质反应、G蛋白偶联受体信号途径、肾上腺素能受体活性、四吡咯结合、胞膜小凹等功能途径;KEGG通路富集分析得出条目61个,主要包括NF-κB信号通路、细胞凋亡、TNF信号通路、雌激素信号途径、IL-17信号通路等通路途径。结论：基于网络药理学初步探讨并验证了五苓散治疗DKD多成分、多靶点、多通路的整体调节作用特点,预测了五苓散治疗DKD的潜在作用机制,以期为其活性成分研究与实验研究提供科学依据。     

基于网络药理学和体内实验验证霍山石斛治疗胃溃疡的作用机制

目的 通过网络药理学方法及体内实验研究探讨霍山石斛治疗胃溃疡（GU）的作用机制。方法 从中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）数据库及文献中收集建立霍山石斛的成分库,寻找其主要活性化合物,并通过TCMSP等数据库预测作用靶点。从GeneCards、在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）、DisGeNET等数据库中筛选GU相关基因,将成分靶点与疾病基因交集后构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络,并进行基因本体（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。根据预测结果采用苏木素-伊红（HE）染色法、免疫组化、酶联免疫吸附测定法（ELISA）、蛋白免疫印迹法（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）等实验验证霍山石斛对乙酸诱导GU大鼠模型的影响。结果 筛选出霍山石斛63种有效成分,得到霍山石斛治疗GU的靶基因37个,PPI分析得到多个霍山石斛治疗GU的可能核心靶点,并通过作用于磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）、缺氧诱导因子-1（HIF-1）、肿瘤坏死因子（TNF）、核转录因子-κB（NF-κB）等信号通路和各种生物过程影响GU的发展。体内实验结果显示,霍山石斛可显著降低模型大鼠血清中白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-6（IL-6）及TNF-α等炎性因子的水平（P<0.05,P<0.01）,增加溃疡边缘的胃血流量（GBF）,增加溃疡边缘表皮生长因子（EGF）,表皮生长因子受体（EGFR）的表达（P<0.01）,显著下调GU大鼠胃组织中PI3K,Akt蛋白和mRNA的表达,上调人第10号染色体缺失的磷酸酶（PTEN）蛋白和mRNA的表达（P<0.01）。结论 网络药理学分析及动物实验结果提示,霍山石斛可以通过调节EGFR/PI3K/Akt信号通路抑制组织炎症,增加溃疡边缘的胃微循环血流,促进细胞增殖和受损胃黏膜的修复。     

基于网络药理学及实验验证探讨薰衣草对皮肤光损伤的防护作用机制

目的 运用网络药理学和分子对接技术预测薰衣草防护皮肤光损伤的活性成分及作用机制,并通过动物实验进一步验证可能的信号通路。方法 通过SwissTargetPrediction,PharmMapper数据库和查阅文献获取薰衣草的活性成分及潜在作用靶点;通过GeneCards、在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）、DrugBank和DisGeNET数据库获取皮肤光损伤相关靶点;筛选获得两者的共同靶标后,采用STRING分析靶点蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络,利用Cytoscape 3.8.2软件中“CytoNCA”插件对该PPI网络做拓扑分析和核心靶点筛选,使用DAVID数据库对交集靶点进行基因本体（GO）功能注释和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析,选取薰衣草中的活性成分和信号通路上的蛋白通过AutoDock vina 1.1.2软件进行分子对接验证;最后通过UVB辐照小鼠背部裸露皮肤建立光损伤模型,肉眼观察小鼠的皮肤状态,采用苏木素-伊红（HE）和苦味酸-酸性品红法（VG）染色观察小鼠皮肤组织病理学改变,采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠皮肤组织中蛋白的表达水平,进一步验证关键的信号通路。结果 该研究共筛选出薰衣草活性成分6个,潜在靶点526个,预测疾病相关靶点2 688个,药物-疾病交集靶点258个,PPI网络筛选出核心靶点16个,KEGG通路分析筛选了113条相关信号通路,其中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）通路、核转录因子-κB（NF-κB）信号通路可能在薰衣草防护皮肤光损伤中起关键作用,分子对接结果显示,活性成分和信号通路上的蛋白对接良好。动物实验结果表明,薰衣草总黄酮能够明显改善小鼠皮肤外观状态和组织病理学,并显著降低磷酸化（p）-PI3K、p-Akt、B细胞淋巴瘤（Bcl）-2蛋白的相对表达水平（P<0.05、P<0.01）,明显升高Bcl-2相关X蛋白（Bax）的相对表达量（P<0.05）。结论 该结果表明,薰衣草抗皮肤光损伤具有多成分、多靶点、多通路协同作用的特点,为后续深入研究薰衣草抗皮肤光损伤的复杂机制提供依据。     

川芎-丹参配伍治疗脊髓损伤的网络药理学研究与验证

目的：基于网络药理学,预测川芎-丹参配伍治疗脊髓损伤的作用机制。方法：利用网络药理学工具,获得川芎-丹参治疗脊髓损伤的有效成分、核心靶点及信号通路。采用改良Allen重物打击法构建脊髓损伤模型,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各组大鼠活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）水平;采用蛋白质印迹法检测各组大鼠脊髓组织中磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、p-PI3K、蛋白激酶B（AKT）、p-AKT蛋白表达。结果：化合物-靶点网络包含154个化合物和484个相应靶点;基因本体（GO）功能富集分析得447个条目;京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析得到126条信号通路。动物实验结果表明,与假手术组比较,模型组ROS、MDA水平显著增高（P<0.01）;p-PI3K、p-AKT蛋白表达显著下降（P<0.01）;与模型组比较,中药高剂量组ROS、MDA水平显著下降（P<0.01）;p-PI3K、p-AKT蛋白表达显著增高（P<0.01）。结论：川芎-丹参联合治疗脊髓损伤具有多成分、多靶点、多通路的优势,其作用机制可能与调控PI3K/AKT信号通路有关。     

PI3K/Akt信号通路在糖尿病肾病中的作用及中药干预的研究进展

糖尿病肾病是一类由糖尿病引起的慢性肾脏疾病,临床上主要以持续白蛋白尿和(或)肾小球滤过率进行性下降为特征,是糖尿病患者致残和致死的重要原因之一.磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidyl inositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)信号通路是人体内参与...     

基于网络药理学探讨化瘀软肝胶囊对肝纤维化大鼠的肝脏保护作用

目的 基于网络药理学与实验动物模型验证探讨化瘀软肝胶囊对肝纤维化大鼠的肝脏保护作用。方法 通过网络药理学预测化瘀软肝胶囊治疗肝纤维化的作用靶点与信号途径。采用复合因素诱导8周建立肝纤维化大鼠模型,模型复制成功后随机分为模型组、秋水仙碱组(0.2 mg/kg)及化瘀软肝胶囊低、中、高剂量组(0.031 5、0.063 0、0.094 5 g/mL),另设空白组,药物干预6周后处死,HE染色与天狼猩红染色观察肝组织形态学变化及胶原纤维沉积状况,Western blot法检测肝组织PI3K/Akt/mTOR信号通路关键分子及LC3-B、Beclin-1蛋白表达,免疫荧光染色法检测肝组织α-SMA蛋白表达。结果 共筛选出化瘀软肝胶囊活性成分128种;预测药物与疾病共有靶点367个;蛋白相互作用PPI网络筛选出23个核心节点;富集分析结果表明,化瘀软肝胶囊主要通过调控PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等途径发挥抗肝纤维化作用。动物实验验证结果表明,与空白组比较,模型组大鼠肝组织纤维桥接形成,且伴有明显的纤维化现象,LC3-B、Beclin-1、α-SMA蛋白表达升高(P<0.01)...     

基于网络药理学和实验验证探讨补肾活血汤治疗中枢性老年性聋的机制

目的 结合网络药理学与实验研究探究补肾活血汤（Bushen Huoxue Decoction,BSHXD）治疗中枢性老年性聋的潜在分子机制。方法 通过TCMSP、ETCM、BATMAN-TCM数据库检索和筛选BSHXD的活性成分及作用靶点;通过Genecards、DisGeNET数据库检索老年性聋相关靶点;通过在线工具Venny 2.1获得BSHXD与老年性聋的共同靶点;通过Cytoscape软件构建BSHXD治疗中枢性老年性聋的“药物-成分-靶点-疾病”网络;使用DAVID数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析;STRING数据库进行蛋白互作分析。采用自然衰老的C57BL/6J小鼠构建中枢性老年性聋的动物模型,以BSHXD进行灌胃干预。HE染色观察各组听皮层的病理改变;免疫印迹法检测听皮层组织PI3K、AKT、mTOR、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、Bax和Caspase-3的蛋白表达;免疫荧光染色观察听皮层Caspase-3的表达;TUNEL染色观察听皮层细胞的凋亡。结果 通过网络药理学预测得BSHXD活性成分219种,BSHXD与老年性聋共同靶点1 118个。GO与K...